初二生物實(shí)驗(yàn)：克隆小白鼠教案

第頁(yè)共頁(yè)初二生物實(shí)驗(yàn)：克隆小白鼠教案。克隆小白鼠教案實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^(guò)克隆技術(shù)制備小白鼠胚胎，為研究小白鼠遺傳學(xué)、生態(tài)學(xué)和行為學(xué)等方面提供基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)，并且為醫(yī)學(xué)上的瘤細(xì)胞擴(kuò)增、動(dòng)物試驗(yàn)等方面提供便利。實(shí)驗(yàn)原理從個(gè)體（供體）的某種組織中，提取細(xì)胞核并移植到另一體（受體）卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，利用化學(xué)和物理手段刺激卵母細(xì)胞進(jìn)入有一定程度的減數(shù)分裂，使其胚胎形成囊胚，然后將囊胚移植到母體子宮中發(fā)育，最后得到一只與供體基因完全相同的小白鼠。實(shí)驗(yàn)材料供體細(xì)胞選取身體健康的小白鼠，從其乳小腿肌肉中切出組織樣本，去除細(xì)胞外殼，提取細(xì)胞核。受體卵母細(xì)胞選取身體健康、月經(jīng)周期適當(dāng)?shù)哪甘?，注射一定劑量的CGS（促排卵素）和LH（黃體生成素），使其排卵并采集受精卵。胚胎移植設(shè)備：導(dǎo)管、顯微操作平臺(tái)、細(xì)胞培養(yǎng)試劑等。實(shí)驗(yàn)步驟細(xì)胞懸液處理將供體細(xì)胞樣本經(jīng)消毒處理（超聲波處理+恒溫器培養(yǎng)）后，加入去離子水和DMSO（細(xì)胞保護(hù)劑），冷藏24小時(shí)，形成細(xì)胞懸液。卵母細(xì)胞處理取出母鼠卵巢并注射CGS和LH，使其排卵。采集20-30個(gè)成熟的卵母細(xì)胞，放入含有合適營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和Hyaluronidase酶的57℃的哺乳動(dòng)物細(xì)胞懸液中，去除卵母細(xì)胞周圍的卵丘細(xì)胞，并保持細(xì)胞懸液體系pH和溫度的恒定。核移植將供體細(xì)胞懸液放入移植底物中，取出一兩個(gè)合適的細(xì)胞核，用玻璃針插入光學(xué)顯微鏡下觀察到的卵母細(xì)胞卵裂期和漸近分期的細(xì)胞核周圍質(zhì)囊中。將細(xì)胞核周圍所有質(zhì)必要地傷害后，用細(xì)的玻璃針將其完全移入另一位卵母細(xì)胞中，并確定有無(wú)移位偏差。若有偏差，則需在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間和位置輕微調(diào)整。發(fā)育潛力測(cè)試維持有一定周期后，在一定溫度和濕度下進(jìn)行克隆體系的發(fā)育潛力測(cè)試。若細(xì)胞核與受體卵母細(xì)胞完全融合，且形成正常膜囊胚，則將囊胚移植入小白鼠母體中發(fā)育。移植選擇孕鼠，并注射降低子宮牽引力的抗生素，投入囊胚，使其盡可能地為孕鼠子宮所接受，并監(jiān)測(cè)孕期與小白鼠自然交配情況。若出現(xiàn)異常（如胚胎發(fā)育不良），切除。實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)材料的選擇應(yīng)遵循良好的道德倫理和生態(tài)環(huán)境原則，并嚴(yán)格杜絕任何形式的食品添加劑或荷爾蒙。實(shí)驗(yàn)設(shè)備及操作必須遵照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，更換材料時(shí)必須進(jìn)行初級(jí)消毒，特別是操作整個(gè)細(xì)胞移植過(guò)程時(shí)。移植前必須確保細(xì)胞核與不同受體卵母細(xì)胞之間的染色體傳遞表現(xiàn)正確，并且角落和離心重心之間的空間，且主軸長(zhǎng)度與囊胚發(fā)育相關(guān)，確定移植位置和移植時(shí)間。移植時(shí)須輕微調(diào)整囊胚的位置，避免插入和剪切，以免影響下一階段發(fā)育或造成囊胚變形。為確保孕鼠保持最佳的健康狀況，在移植之前必須進(jìn)行抗生素主體的預(yù)防和異常檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過(guò)克隆技術(shù)，我們成功地制備了多只與供體基因完全相同的小白鼠，并使其健康地發(fā)育。這些小白鼠成為了研究小白鼠遺傳學(xué)、生態(tài)學(xué)和行為學(xué)等方面的理想實(shí)驗(yàn)對(duì)象，為這些領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究工作提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。結(jié)論克隆技術(shù)是一項(xiàng)具有重大科學(xué)意義和社會(huì)推動(dòng)作用的技術(shù)，在醫(yī)學(xué)、生態(tài)學(xué)、遺傳學(xué)、環(huán)境保護(hù)等方面都具有廣泛應(yīng)用前景。本實(shí)驗(yàn)成功地制備出了與供體基因完全相同的小白鼠，這為研究小白鼠遺傳學(xué)、生態(tài)學(xué)和行為學(xué)等方