3版儀器分析第4節(jié)-影響分離的因素與操作條件選擇課件

*第十章

液相色譜分析法一、影響分離的因素factorsinfluencedseparation二、分離類型的選擇choiceofseparationtypes三、液相色譜的應用applicationofHPLC四、液相制備色譜preparativeliquidchromatography第四節(jié)

影響分離的因素與操作條件的選擇highperformanceliquidchromatograph

factorsinfluencedseparationandchoiceofoperationcondition*一、影響分離的因素

factorsinfluencedseparation1.影響分離的因素與提高柱效的途徑

在高效液相色譜中,液體的擴散系數(shù)僅為氣體的萬分之一，則速率方程中的分子擴散項B/U較小，可以忽略不計，即：

H=A+Cu故液相色譜H-u曲線與氣相色譜的形狀不同，如圖所示。*液體的黏度比氣體大一百倍，密度為氣體的一千倍，故降低傳質(zhì)阻力是提高柱效主要途徑。由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。液相色譜中，不可能通過增加柱溫來改善傳質(zhì)。恒溫改變淋洗液組成、極性是改善分離的最直接的因素。*2.流速流速大于0.5cm/s時,H～u曲線是一段斜率不大的直線。降低流速，柱效提高不是很大。但在實際操作中，流量仍是一個調(diào)整分離度和出峰時間的重要可選擇參數(shù)。

3.固定相及分離柱

氣相色譜中的固定液原則上都可以用于液相色譜，其選用原則與氣相色譜一樣。但在高效液相色譜中，分離柱的制備是一項技術要求非常高的工作，一般很少自行制備。*二、分離類型選擇

choiceofseparationtypes*三、HPLC的應用

applicationofHPLC

1.環(huán)境中有機氯農(nóng)藥殘留量分析

固定相：薄殼型硅膠(37～50m)流動相：正己烷流速：1.5mL/min色譜柱：50cm2.5mm(內(nèi)徑)檢測器：差示折光檢測器

可對水果、蔬菜中的農(nóng)藥殘留量進行分析。*2.稠環(huán)芳烴的分析

稠環(huán)芳烴多為致癌物質(zhì)。

固定相：十八烷基硅烷化鍵合相流動相：20%甲醇-水～100%甲醇線性梯度淋洗，2%/min

流速：1mL/min

柱溫：50oC柱壓：70104Pa

檢測器：紫外檢測器*四、制備型液相色譜

preparativeliquidchromatography

獲得高純物質(zhì)（色譜純）的有效方法。半制備柱（內(nèi)徑8mm，長度15～30cm），一次制備量０.1～１mg；1.色譜柱的柱容量（柱負荷）對分析柱：不影響柱效時的最大進樣量；

對制備柱：不影響收集物純度時的最大進樣量；

超載：進樣量超過柱容量。柱效迅速下降，峰變寬。

超載可提高制備效率，以柱效下降一半或容量因子k降低10%為宜。*2.液相制備色譜的方法收集組分時，通常有以下情況：

（1）可獲得良好分離，主峰使用制備柱，超載提高效率；（2）兩主成分之間的小組分；超載，分離切分使待分離組分成為主成分（富集）后，再次分離制備。

*3.制備型液相色譜

制備型液相色譜：結(jié)構(gòu)與分析型一樣，但泵流量大、進樣量大、采用制備柱；柱后餾分收集器。

制備柱：內(nèi)徑20～50mm，柱長50cm。*請選擇內(nèi)容第一節(jié)高效液相色譜的特點與儀器featureandinstrumentofHPLC第二節(jié)基本原理與主要分離類型basicprincipleandmainseparatingtypes第三節(jié)固定相與流動相stationaryphaseandmobilephase第四節(jié)影響分離的因素與操作條件選擇factorsinfluencedseparationandchoiceofoperationcondition第五節(jié)離子色譜法ionchromatograph第六節(jié)超臨界流體色譜supercriticalfluidchromatograph結(jié)束賣油翁下課了，回顧學習一個小故事吧！學習目標1、復述故事，深入理解文章內(nèi)容，初步把握人物形象。2、學會利用文中關鍵詞句分析人物形象。3、體會文章所揭示的深刻道理。故事發(fā)生的時間、地點、人物、事件的起因、經(jīng)過和結(jié)果要復述清楚?？磮D復述課文內(nèi)容自學指導(一)1、作者運用哪幾種方法去刻畫人物的形象？從文中找出具體句子進行分析。并說說你是如何看待這兩個人物的。2、從這個故事中你懂得了什么道理？自學指導(二)陳堯咨（善射）賣油翁（善酌）動作神態(tài)語言睨之無他，但手熟爾以我酌油知之我亦無他，惟手熟爾汝亦知射乎吾射不亦精乎爾安敢輕吾射釋擔而立但微頷之取置覆酌瀝性格:自矜（驕傲）謙虛對比道理:熟能生巧,即使有什么長處也不必驕傲自滿。忿然笑而遣之笑而遣之1、聯(lián)系生活、學習，說說熟能生巧的事例。

2、你認為一個人應該如何看待自己的長處？又如何看待他人的長處？課外延伸人外有人，天外有天。取人之長，補己之短。自滿人十事九空，虛心人萬事可成。謙受益，滿招損。三人行，必有我?guī)熝?。擇其善者而從之，其不善者而改之。驕傲自滿是我們的一座可怕的陷阱；而且，這個陷阱是我們自己親手挖掘的。

——

老舍

尺有所短；寸有所長。物有所不足；智有所不明。

——

屈原

1、正視自己的長處，揚長避短，2、正視自己的缺點