病原微生物菌（毒）種分離和鑒定方法 鼻病毒

1病原微生物菌（毒）種分離和鑒定方法鼻病毒4縮略語(yǔ)DMEM：改良的eagle培養(yǎng)基(Dulbecco'sModifiedEaNCR：非編碼區(qū)(NoncodingRegion)PCR:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReactioPS：青鏈霉素混合液100×(Penicillin-StreptomycinSolution)Q-PCR：熒光定量PCR(QuantitativeFluorescencTCID50：半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量(50%組織細(xì)胞感染量)(Fifty-percentTissueCultureInfectiveDose)2i)水平電泳儀：包括電源、電泳槽、膠槽和梳子；j)凝膠成像系統(tǒng)；r)無菌離心管：1.5mL、15mL和50mL；d)5×TBE電泳緩沖液：Tris堿i)DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)（DNA3臨床樣本為呼吸道感染者的鼻咽拭子、支氣管肺泡灌洗液、48.1.2對(duì)測(cè)得的病毒基因序列進(jìn)行序列比對(duì)，判斷病毒的種和基因型。9分離和鑒定程序5RV_5NCR_FNCRRV_5NCR_RRV_5NCR62000g離心10min，離心后的上清液分裝Reed-Muench計(jì)算公式TCID50＝高于50%7GGGACCAACTACTTTGGGTHRV-CFACTACTTTGGGTGTCCGTGTTHRV-CR備小RNA病毒的形態(tài)學(xué)特征，無包膜、呈球形、直徑約為30分別以50%~70%~90%~100%~100%將樣本轉(zhuǎn)移至包埋管，放入聚合儀內(nèi)，按照聚合后的樹脂塊用刀片進(jìn)行修塊，暴露出細(xì)胞并811.4病毒的分離、培養(yǎng)、傳代、滴度測(cè)定和鑒定等9觸傳播，最常見的是“手-鼻-手”途徑。潛伏期一般為占普通感冒的一半，超過80%的感染發(fā)生在春季和秋季。在嬰兒中可以檢測(cè)到對(duì)多種鼻病毒的基因型反應(yīng)，在兒童和青少年時(shí)期，基因型的數(shù)量增加?；蛐吞禺愋钥贵w的流行在青年人中達(dá)到高峰(平均均可殺滅病毒。病毒在56℃水浴加熱16分鐘后失活，pH=6或pH=3環(huán)境快速完全失活。病毒在不銹[1]GB/T37864—2019生物樣本庫(kù)質(zhì)量和[2]WS315—2010人間傳染的病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)設(shè)置技術(shù)規(guī)范[5]病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例（中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院令第4[9]人間傳染的病原微生物名錄（中華人民共和國(guó)衛(wèi)科Paranhos-BaccalàG,ShenK,JinQ,WangJ.HumanrhinovirusCinfectionsmirrorrhinovirusAinchildrenwithcommunity-acquiredpneumonia.JCllowerrespiratorytractinfection.EmergInfectDis.2008Oct;14(10[15]RenL,XiangZ,GuoL