甘肅省蘭州市2024屆生物高二第二學(xué)期期末預(yù)測(cè)試題含解析

甘肅省蘭州市2024屆生物高二第二學(xué)期期末預(yù)測(cè)試題注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效；在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．將酵母菌研磨、離心后，把得到的上清液(含細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)）、沉淀物（含細(xì)胞器）和未離心的勻漿，分別加入甲、乙、丙三只試管中，連續(xù)進(jìn)行兩次實(shí)驗(yàn):①分別向各試管中滴加等量的葡萄糖；②分別向各試管中滴加等量的丙酮酸，在適宜溫度下，就能否生成C02而言，下列說(shuō)法正確的是A．甲試管兩次都能產(chǎn)生B．乙試管兩次都不能產(chǎn)生C．丙試管兩次都能產(chǎn)生D．甲、乙、丙至少各有一次能產(chǎn)生2．甲、乙分別為物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的坐標(biāo)圖和模式圖，下列相關(guān)說(shuō)法正確的是：（）A．甲、乙所代表的物質(zhì)運(yùn)輸方式?jīng)]有共同點(diǎn)B．圖乙的物質(zhì)運(yùn)輸過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性C．圖乙所示的細(xì)胞可能是紅細(xì)胞D．嬰幼兒腸道吸收乳汁中的免疫球蛋白的過(guò)程可用圖乙中的跨膜運(yùn)輸方式表示3．圖示某物種遷入新環(huán)境后，種群增長(zhǎng)速率隨時(shí)間的變化關(guān)系，在t1時(shí)經(jīng)調(diào)查該種群數(shù)量為N，下列有關(guān)敘述正確的是A．在t2時(shí)種群個(gè)體的數(shù)量與在t0時(shí)種群個(gè)體的數(shù)量相等B．在t0～t2時(shí)間內(nèi)，種群數(shù)量呈“S”型增長(zhǎng)C．該種群在此環(huán)境中的環(huán)境容納量約為ND．在t1～t2時(shí)，該種群數(shù)量呈下降趨勢(shì)4．載脂蛋白A-1（apoA-1）是一種血漿蛋白，主要在肝臟合成，基本功能是運(yùn)載脂類物質(zhì)，其含量下降會(huì)導(dǎo)致膽固醇在血管中堆積，形成動(dòng)脈粥樣硬化，下列有關(guān)敘述不正確的是A．脂質(zhì)可以參與構(gòu)成細(xì)胞膜 B．a(chǎn)poA-1比多肽的空間結(jié)構(gòu)更復(fù)雜C．動(dòng)脈管壁細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境是組織液 D．a(chǎn)poA-1可通過(guò)囊泡在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸5．下列有關(guān)細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．真核生物、原核生物都可利用氨基酸形成多肽并產(chǎn)生水B．酵母菌、乳酸菌都能通過(guò)有氧呼吸在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體中產(chǎn)生ATPC．葉綠體、線粒體都可合成DNA、RNA、ATP等有機(jī)物D．噬菌體和大腸桿菌結(jié)構(gòu)上的根本區(qū)別是有無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)6．下列生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作，能夠順利達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖茿．在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋的大腸桿菌培養(yǎng)液獲得單菌落B．在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無(wú)菌空氣制作果酒C．土壤浸出液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上篩選分解尿素的細(xì)菌D．在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）請(qǐng)根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：（1）制作高粱酒要用到的微生物是________。（2）果酒的制作：①傳統(tǒng)發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理，雜菌卻不能正常生長(zhǎng)。這是由于果酒發(fā)酵的________________等條件抑制了雜菌的生長(zhǎng)。②溫度較高時(shí)，果酒發(fā)酵時(shí)間可縮短。其原因是______________。③喝剩的葡萄酒放置一段時(shí)間后會(huì)變酸。其原因是________________。④葡萄酒變酸的反應(yīng)式可表示為_(kāi)___________。8．（10分）基因工程中，GUS基因編碼的酶可將無(wú)色底物生成藍(lán)色產(chǎn)物，GFP基因會(huì)產(chǎn)生綠色熒光蛋白，這兩種基因都可作為標(biāo)記基因來(lái)研究發(fā)育生物學(xué)的問(wèn)題。利用雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)和Cre/loxP重組酶系統(tǒng)技術(shù)可更好地實(shí)現(xiàn)該研究。請(qǐng)據(jù)圖作答：（1）生長(zhǎng)在太平洋西北部的一種海蜇能發(fā)出綠色熒光，原因是________________________。（2）圖1為雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖。該系統(tǒng)能夠特異性識(shí)別DNA序列并切割特定位點(diǎn)，行使這些功能的分子結(jié)構(gòu)分別是___________、___________。（3）圖中向?qū)NA與DNA結(jié)合的原理是___________。將刪除區(qū)切割后，轉(zhuǎn)入基因與原DNA片段可通過(guò)形成_______拼接起來(lái)，形成新的DNA序列。（4）雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)可直接在靶細(xì)胞內(nèi)起作用，與傳統(tǒng)的基因工程相比，該操作無(wú)需___________（填寫工具）。與質(zhì)粒載體導(dǎo)入外源基因比，雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)編輯的基因可以不含___________。（5）圖2為Cre/loxP重組酶系統(tǒng)作用示意圖。利用雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)可精準(zhǔn)地將loxP序列、GUS基因及GFP基因連接，接上35S啟動(dòng)子之后可在組織中檢測(cè)出藍(lán)色區(qū)而無(wú)綠色熒光區(qū)，這是由于_________而無(wú)法表達(dá)。Cre基因是重組酶基因，經(jīng)38℃熱處理后可被激活表達(dá)，在此前提下組織中可檢測(cè)出綠色熒光區(qū)。9．（10分）回答基因工程中的有關(guān)問(wèn)題：Ⅰ.限制酶是基因工程中的重要工具酶，下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖甲、圖乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）一個(gè)圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割后，會(huì)增加___________個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。（2）與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止________________________________。Ⅱ.原核生物(如大腸桿菌)是基因工程中較理想的受體細(xì)胞，它們具有一些其他生物沒(méi)有的特點(diǎn)：①繁殖快，②多為單細(xì)胞，③_______________等優(yōu)點(diǎn)。大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用__________處理細(xì)胞，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，然后完成轉(zhuǎn)化。Ⅲ.植物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最常用的方法是__________，且一般將目的基因插入Ti質(zhì)粒的________中形成重組Ti質(zhì)粒，這樣可將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體上，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)：這樣得到的轉(zhuǎn)基因植株，其目的基因的傳遞符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律，則該轉(zhuǎn)基因植株一般為雜合子。若要避免基因污染，一般需將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的________DNA中。10．（10分）前年冬季，我國(guó)北方再次爆發(fā)流感。專家指出，接種流感病毒疫苗仍是預(yù)防的有效措施。流感病毒為RNA病毒，M基因編碼流感病毒表面抗原（M蛋白）。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）由病毒的RNA通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得的病毒DNA，若要通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增M基因，關(guān)鍵是設(shè)計(jì)M基因?qū)?yīng)的________。（2）構(gòu)建M基因表達(dá)載體所用的工具酶是________。（3）為保證M基因的表達(dá)，重組載體上應(yīng)含有特定的________（選填“復(fù)制原點(diǎn)”“啟動(dòng)子”或“標(biāo)記基因”），以便于被受體細(xì)胞的RNA聚合酶所識(shí)別，催化轉(zhuǎn)錄過(guò)程。（4）若要將M基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，以大量生產(chǎn)疫苗，通常先用鈣離子處理大腸桿菌。其目的是________。（5）新型疫苗——“DNA疫苗”是將含M基因的重組表達(dá)載體直接導(dǎo)入人體內(nèi)，在人體細(xì)胞內(nèi)通過(guò)M基因的表達(dá)產(chǎn)生M蛋白，刺激機(jī)體通過(guò)免疫過(guò)程，產(chǎn)生________，提高機(jī)體的免疫能力。11．（15分）豌豆是自花傳粉、閉花受粉植物，其植株的抗病性和莖的高度是獨(dú)立遺傳的性狀。抗病和感病由基因R和r控制，抗病為顯性；高莖和矮莖由基因D、d控制，高莖為顯性?，F(xiàn)有感病矮莖和抗病高莖兩品種的純合子，欲培育純合的抗病矮莖品種。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）若采用誘變育種，在用物理方法如γ射線處理時(shí)需要處理大量種子，其原因是基因突變具有______________、_____________等特點(diǎn)。（2）若采用雜交育種，可通過(guò)將上述兩個(gè)親本雜交，在F2中保留____________個(gè)體，再經(jīng)____________________________________等手段篩選，最后得到穩(wěn)定遺傳的抗病矮莖品種。上述兩個(gè)親本雜交所得的F1在自然狀態(tài)下繁殖，則理論上，F(xiàn)2的表現(xiàn)型及比例為_(kāi)___________________________。（3）若采用單倍體育種，該過(guò)程所用的原理是________________________。在育種過(guò)程中可利用_________________進(jìn)行離體培養(yǎng)獲得單倍體幼苗，再利用______________________________獲得二倍體純合植株，其中有大約_______（幾分之幾）為抗病矮莖可選作品種。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、C【解題分析】根據(jù)題意可知，甲試管中只含有細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，若在甲試管中滴加葡萄糖，則葡萄糖首先完成細(xì)胞呼吸第一階段，分解成丙酮酸，若有氧存在，則發(fā)酵作用受抑，丙酮酸在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中無(wú)法按無(wú)氧呼吸的過(guò)程轉(zhuǎn)化為乙醇和二氧化碳；若無(wú)氧氣存在，則丙酮酸可繼續(xù)進(jìn)行無(wú)氧呼吸第二階段，產(chǎn)生C02，故A項(xiàng)錯(cuò)誤；乙試管中只含有細(xì)胞器（線粒體），若在乙試管中滴加葡萄糖，由于葡萄糖不能進(jìn)入線粒體完成反應(yīng)，所以不能產(chǎn)生C02；若在乙試管中滴加丙酮酸，則在有氧存在時(shí)，丙酮酸可進(jìn)入線粒體徹底氧化分解為二氧化碳和水，故B項(xiàng)錯(cuò)誤；丙中含有未離心的酵母菌勻漿，既有細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)又有線粒體。若在丙試管中滴加葡萄糖，若在無(wú)氧條件下，葡萄糖可在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中通過(guò)無(wú)氧呼吸生成C02；若在有氧條件下，葡萄糖可先在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中分解成丙酮酸，丙酮酸再進(jìn)入線粒體徹底氧化分解為二氧化碳和水。若在丙試管中滴加丙酮酸，則在無(wú)氧條件下，丙酮酸可在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中通過(guò)無(wú)氧呼吸生成C02；在有氧條件下，丙酮酸則進(jìn)入線粒體徹底氧化分解為二氧化碳和水。因此，C項(xiàng)正確；根據(jù)前面分析可知，D項(xiàng)錯(cuò)誤?！绢}目點(diǎn)撥】解答本題的關(guān)鍵是理解并識(shí)記細(xì)胞呼吸的場(chǎng)所、條件，并靈活運(yùn)用。2、C【解題分析】

1、甲圖：主動(dòng)運(yùn)輸是物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的主要方式，該過(guò)程需要載體和能量，逆濃度梯度進(jìn)行（虛線表示細(xì)胞外的濃度但是該物質(zhì)超過(guò)細(xì)胞外的濃度，還可以繼續(xù)運(yùn)輸，說(shuō)明可以逆濃度運(yùn)輸），在能量充足、載體沒(méi)有達(dá)到飽和之前，運(yùn)輸速度隨離子濃度的升高而加快，當(dāng)載體飽和或能量不足時(shí)，主動(dòng)運(yùn)輸就會(huì)減弱，表現(xiàn)為甲圖曲線。2、乙圖：乙圖中物質(zhì)的運(yùn)輸時(shí)從高濃度向低濃度進(jìn)行運(yùn)輸，需要載體蛋白的協(xié)助，屬于協(xié)助擴(kuò)散?！绢}目詳解】A、甲、乙代表的物質(zhì)運(yùn)輸方式分別是主動(dòng)運(yùn)輸和協(xié)助擴(kuò)散，二者的共同點(diǎn)是都需要載體蛋白的協(xié)助，A錯(cuò)誤；B、圖乙所示為協(xié)助擴(kuò)散的運(yùn)輸方式，細(xì)胞膜的形態(tài)沒(méi)有發(fā)生變化，不能體現(xiàn)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)——流動(dòng)性，B錯(cuò)誤；C、葡萄糖進(jìn)入紅細(xì)胞的方式是協(xié)助擴(kuò)散，符合圖乙所示的從高濃度一側(cè)向低濃度一側(cè)運(yùn)輸、需要載體蛋白協(xié)助的特點(diǎn)，C正確；D、嬰幼兒腸道吸收乳汁中的免疫球蛋白的方式是胞吞，與圖乙不符，D錯(cuò)誤。故選C。【題目點(diǎn)撥】本題考查物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問(wèn)題的能力，解題的關(guān)鍵是理解三種運(yùn)輸方式的區(qū)別。3、B【解題分析】試題分析：由題可知，0～t1種群增長(zhǎng)速率不斷增大，到t1時(shí)刻種群增長(zhǎng)速率最大，此時(shí)種群數(shù)量為K/2，t1～t2種群增長(zhǎng)速率不斷減少，到t2時(shí)種群增長(zhǎng)率為0，此時(shí)種群數(shù)量依然增長(zhǎng)，到t2時(shí)種群數(shù)量達(dá)到最大，即K值。故A錯(cuò)誤；B正確；D錯(cuò)誤；由于在t1時(shí)經(jīng)調(diào)查該種群數(shù)量為N，因此環(huán)境負(fù)荷量（K值）約為2N；C錯(cuò)誤；考點(diǎn)：本題考查的是“S”型曲線種群增長(zhǎng)速率的變化情況；點(diǎn)評(píng)：對(duì)于此類試題，學(xué)生應(yīng)理解“S”型曲線的種群增長(zhǎng)速率。4、C【解題分析】

脂質(zhì)包括脂肪、磷脂和固醇類。內(nèi)環(huán)境主要的組成成分是血漿、組織液和淋巴?！绢}目詳解】A、脂質(zhì)可以參與構(gòu)成細(xì)胞膜，如磷脂雙分子層構(gòu)成細(xì)胞膜的基本支架，A正確；B、apoA-1是蛋白質(zhì)，具有一定的空間結(jié)構(gòu)，比多肽的空間結(jié)構(gòu)更復(fù)雜，B正確；C、動(dòng)脈管壁細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境是組織液和血漿，C錯(cuò)誤；D、apoA-1屬于分泌蛋白，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和細(xì)胞膜之間運(yùn)輸時(shí)，會(huì)形成囊泡，D正確。故選C。5、B【解題分析】

1、原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的區(qū)別舉例差異性統(tǒng)一性原核細(xì)胞細(xì)菌、藍(lán)藻、放線菌無(wú)成形的細(xì)胞核只有核糖體一種細(xì)胞器1.都有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和核物質(zhì)2.都有核糖體真核細(xì)胞草履蟲、酵母菌、植物、動(dòng)物有成形的細(xì)胞核（有核膜）有多種細(xì)胞器2、病毒不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由蛋白質(zhì)外殼和核酸組成。【題目詳解】真核生物、原核生物都含有核糖體，都可利用氨基酸脫水縮合形成多肽并產(chǎn)生水，A正確；酵母菌是真菌，其通過(guò)有氧呼吸在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體中產(chǎn)生ATP。乳酸菌是原核生物，沒(méi)有線粒體，在質(zhì)膜上進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生ATP，B錯(cuò)誤；葉綠體、線粒體都是半自主細(xì)胞器，都含有少量的DNA、RNA和核糖體，可進(jìn)行DNA的復(fù)制和遺傳信息的轉(zhuǎn)錄、翻譯，因此有DNA和RNA合成。有氧呼吸第二、三階段在線粒體中進(jìn)行，有ATP合成。光合反應(yīng)在葉綠體中進(jìn)行，光反應(yīng)會(huì)合成ATP。因此，葉綠體、線粒體都可合成DNA、RNA、ATP等有機(jī)物，C正確；噬菌體是病毒，由蛋白質(zhì)外殼和DNA組成。大腸桿菌是細(xì)菌，屬于原核生物，具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。因此，二者在結(jié)構(gòu)上的根本區(qū)別是有無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，D正確。故選B?！绢}目點(diǎn)撥】識(shí)記病毒、真核生物和原核生物等生物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，結(jié)合題意進(jìn)行分析判斷各個(gè)選項(xiàng)。6、A【解題分析】在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋后的菌液能夠得到單個(gè)菌落，A正確；在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無(wú)菌空氣，有利于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，不利于制作果酒，B錯(cuò)誤；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基不能篩選出分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上篩選尿素分解菌，C錯(cuò)誤；在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，土樣中的微生物全部被殺死，不能用于制取土壤稀釋液，D錯(cuò)誤。二、綜合題：本大題共4小題7、酵母菌無(wú)氧、pH為酸性溫度較高時(shí)發(fā)酵酶活性增強(qiáng)、發(fā)酵速度更快酒精轉(zhuǎn)變成了醋酸【解題分析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型．果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：；（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：。2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型，果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿??！绢}目詳解】（1）酒精的制作需要用到的微生物是酵母菌。（2）①在果酒發(fā)酵的過(guò)程中，由于是在無(wú)氧、pH為酸性的條件下，酵母菌發(fā)酵最適宜，而抑制了其他微生物的生長(zhǎng)。②溫度較高時(shí)果酒發(fā)酵時(shí)間可縮短，原因是溫度較高時(shí)發(fā)酵酶活性增強(qiáng)、發(fā)酵速度更快。③喝剩的葡萄酒放置一段時(shí)間后變酸的原因是酒精轉(zhuǎn)變成了醋酸。④葡萄酒變酸是由于生成了醋酸，其反應(yīng)式：?！绢}目點(diǎn)撥】本題考查果酒和果醋制作的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記參與果酒和果醋制作的微生物的種類及作用，掌握果酒和果醋制作的原理，能對(duì)兩者進(jìn)行比較，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。8、海蜇的DNA分子上含有綠色熒光蛋白基因向?qū)NACas9蛋白堿基互補(bǔ)配對(duì)磷酸二酯鍵載體（運(yùn)載體）啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因GFP基因自身無(wú)啟動(dòng)子【解題分析】

生物的性狀受基因控制，海蜇能發(fā)出綠色熒光是由于海蜇的DNA分子上含有綠色熒光蛋白基因，基因能通過(guò)控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)直接控制生物性狀；圖1為雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用示意圖，由圖可知，向?qū)NA中有一段識(shí)別序列，具有識(shí)別功能，可以與特定的DNA序列發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，Cas9蛋白則可切割所識(shí)別的特定DNA序列；導(dǎo)入的基因和原DNA片段之間需要重新形成磷酸二酯鍵才能連接在一起，形成新的DNA分子，該過(guò)程類似于基因工程操作中的構(gòu)建基因表達(dá)載體步驟，據(jù)此作答?！绢}目詳解】（1）由于海蜇的DNA分子上含有綠色熒光蛋白基因，因此海蜇能發(fā)出綠色熒光。（2）據(jù)圖1所示，向?qū)NA可以識(shí)別特定的DNA序列，Cas9蛋白可切割所識(shí)別的特定DNA序列。（3）向?qū)NA與DNA根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合；轉(zhuǎn)入的基因與原DNA片段之間要形成新的磷酸二酯鍵才能連接起來(lái)。（4）雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)可直接在靶細(xì)胞內(nèi)起作用，因此無(wú)需運(yùn)載體。構(gòu)建的基因表達(dá)載體必須含啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等結(jié)構(gòu)，而雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)編輯的基因可不含有這些結(jié)構(gòu)。（5）GUS基因編碼的酶可將無(wú)色底物生成藍(lán)色產(chǎn)物，GFP基因會(huì)產(chǎn)生綠色熒光蛋白，在組織中檢測(cè)出藍(lán)色區(qū)而無(wú)綠色熒光區(qū)，說(shuō)明GUS基因正常表達(dá)而GFP基因不能正常表達(dá)，根據(jù)“Cre基因是重組酶基因，經(jīng)38℃熱處理后可被激活表達(dá)，在此前提下組織中可檢測(cè)出綠色熒光區(qū)”提示，可見(jiàn)GFP基因的正常表達(dá)需以Cre基因被激活表達(dá)為前提，即GFP基因自身無(wú)啟動(dòng)子，無(wú)法啟動(dòng)自身的表達(dá)?！绢}目點(diǎn)撥】本題以雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)和Cre/loxP重組酶系統(tǒng)技術(shù)的原理和應(yīng)用為背景，意在考查學(xué)生正確理解題圖，能夠根據(jù)題干信息和題圖信息判斷雙CRISPR/Cas9系統(tǒng)和Cre/loxP重組酶系統(tǒng)技術(shù)的生物學(xué)原理的能力，本題注重考查學(xué)生的基礎(chǔ)知識(shí)、基本技能以及在具體情境下分析和解決問(wèn)題的能力。9、2質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化遺傳物質(zhì)相對(duì)較少Ca2+農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法T-DNA細(xì)胞質(zhì)（線粒體、葉綠體）【解題分析】

基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。(1)限制酶是一類酶，而不是一種酶。(2)限制酶的成分為蛋白質(zhì)，其作用的發(fā)揮需要適宜的理化條件，高溫、強(qiáng)酸或強(qiáng)堿均易使之變性失活。(3)在切割目的基因和載體時(shí)要求用同一種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端。(4)獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切兩次，共產(chǎn)生4個(gè)黏性末端或平末端。(5)不同DNA分子用同一種限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端都相同，同一個(gè)DNA分子用不同的限制酶切割，產(chǎn)生的黏性末端一般不相同。(6)限制酶切割位點(diǎn)應(yīng)位于標(biāo)記基因之外，不能破壞標(biāo)記基因，以便于進(jìn)行檢測(cè)。(7)基因工程中的載體與細(xì)胞膜上物質(zhì)運(yùn)輸?shù)妮d體不同?；蚬こ讨械妮d體是DNA分子，能將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞內(nèi)；膜載體是蛋白質(zhì)，與細(xì)胞膜的通透性有關(guān)。(8)基因工程中有3種工具，但工具酶只有2種?！绢}目詳解】I（1）圖中質(zhì)粒有一個(gè)SmaⅠ切割位點(diǎn)，切割前因?yàn)槭黔h(huán)狀沒(méi)有游離的磷酸基團(tuán)，切割后成為鏈狀DNA，有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。（2）兩種限制酶切，因?yàn)閴A基互補(bǔ)配對(duì)原則可以防止單酶切后的質(zhì)粒和目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化現(xiàn)象。II原核生物遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，大腸桿菌首先要用鈣離子處理使其成為感受態(tài)細(xì)胞。III植物導(dǎo)入方法最常用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，主要是Ti質(zhì)粒中的T-DNA中形成重組質(zhì)?？梢哉系街参锸荏w細(xì)胞的染色體上，如果要避免基因污染應(yīng)將其導(dǎo)入到細(xì)胞質(zhì)基因中，可將基因?qū)氲郊?xì)胞質(zhì)DNA中，因?yàn)榧?xì)胞質(zhì)基因不會(huì)隨花粉進(jìn)行傳播。【題目點(diǎn)撥】注意：獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切兩次，共產(chǎn)生4個(gè)黏性末端或平末端。10、引物限制酶和DNA連接酶啟動(dòng)子使大腸桿菌處于能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)（感受態(tài)）抗體和記憶細(xì)胞【解題分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）PCR最關(guān)鍵的是需要設(shè)計(jì)M基因?qū)?yīng)的引物。（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體所用的工具酶是限制酶和DNA