分析化學(xué)6.4-分光光度測(cè)量方法課件

第六章

紫外-可見(jiàn)分光光度法6.4.1普通分光光度法6.4.2示差分光光度法6.4.3雙波長(zhǎng)分光光度法6.4.4導(dǎo)數(shù)分光光度法第四節(jié)

分光光度測(cè)定方法6.4.1

普通分光光度法1.單組分的測(cè)定

通常采用A-C

標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測(cè)定。2.多組分的同時(shí)測(cè)定

⑴若各組分的吸收曲線互不重疊，則可在各自最大吸收波長(zhǎng)處分別進(jìn)行測(cè)定。這本質(zhì)上與單組分測(cè)定沒(méi)有區(qū)別。

⑵若各組分的吸收曲線互有重疊，則可根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。Aλ1=εaλ1bca＋εbλ1bcb

Aλ2=εaλ2bca＋εbλ2bcb

6.4.2

示差分光光度法（示差法）

普通分光光度法一般只適于測(cè)定微量組分，當(dāng)待測(cè)組分含量較高時(shí)，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍低于待測(cè)溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。設(shè)：待測(cè)溶液濃度為cx，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為cs(cs<cx)。則：

Ax=εb

cx

As=εbcsΔＡ＝Ａx－Ａs=εb(cx－cs）=εbΔc

測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差ΔＡ。

示差分光光度法（示差法）

ΔA＝Ax－As=εb(cx－cs）=εbΔc

測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差ΔA

。示差法測(cè)得的吸光度與Δc呈直線關(guān)系。由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的Δc值，則待測(cè)溶液濃度cx

：

cx=cs+Δc

示差法標(biāo)尺擴(kuò)展原理：普通法：cs的T=10%；cx的T=5%示差法：cs做參比，調(diào)T=100%則：cx的T=50%；標(biāo)尺擴(kuò)展10倍6.4.3

雙波長(zhǎng)分光光度法不需空白溶液作參比；但需要兩個(gè)單色器獲得兩束單色光(λ1和λ2)；以參比波長(zhǎng)λ1處的吸光度Aλ1作為參比，來(lái)消除干擾。在分析渾濁或背景吸收較大的復(fù)雜試樣時(shí)顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、測(cè)量精密度等方面都比單波長(zhǎng)法有所提高。

ΔA

＝Aλ2－Aλ1＝(ελ2－ελ1)bc兩波長(zhǎng)處測(cè)得的吸光度差值ΔA與待測(cè)組分濃度成正比。ελ1和ελ2分別表示待測(cè)組分在λ1和λ2處的摩爾吸光系數(shù)。關(guān)鍵問(wèn)題:測(cè)量波長(zhǎng)λ2和參比波長(zhǎng)λ1的選擇與組合以兩組分x和y的雙波長(zhǎng)法測(cè)定為例：設(shè)：x為待測(cè)組分，y為干擾組分，二者的吸光度差分別為:

ΔAx和ΔAy，則該體系的總吸光度差ΔAx+y為：

ΔAx+y=ΔAx+ΔA

y如何選擇波長(zhǎng)λ1、λ2有一定的要求。選擇波長(zhǎng)組合λ1、λ2的基本要求是：

⑴選定的波長(zhǎng)λ1和λ2處干擾組分應(yīng)具有相同吸光度，即：

ΔAy=ΔAyλ2－ΔAyλ1=0故：

ΔAx+y=ΔAx=(εxλ2－εxλ1)bcx此時(shí)：測(cè)得的吸光度差ΔA只與待測(cè)組分x的濃度呈線性關(guān)系，而與干擾組分y無(wú)關(guān)。若x為干擾組分，則也可用同樣的方法測(cè)定y組分。

可采用作圖法選擇符合上述兩個(gè)條件的波長(zhǎng)組合。

⑵在選定的兩個(gè)波長(zhǎng)λ1和λ2處待測(cè)組分的吸光度應(yīng)具有足夠大的差值。6.4.4

導(dǎo)數(shù)分光光度法

導(dǎo)數(shù)分光光度法在多組分同時(shí)測(cè)定、渾濁樣品分析、消除背景干擾、加強(qiáng)光譜的精細(xì)結(jié)構(gòu)以及復(fù)雜光譜的辨析等方面，顯示了很大的優(yōu)越性。

利用吸光度(或透光度)對(duì)波長(zhǎng)的導(dǎo)數(shù)曲線來(lái)進(jìn)行分析：

Ｉ＝Ｉ0e-εbc假定入射光強(qiáng)度Ｉ0在整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)保持恒定：

dI

0/dλ＝0則：dI/dλ＝-Ｉ0

bce-εbcdε/dλ＝-Ｉ0

bcdε/dλ

導(dǎo)數(shù)分光光度法

dI/dλ＝－Ｉ0

bcdε/dλ

一階導(dǎo)數(shù)信號(hào)與試樣濃度呈線性關(guān)系；測(cè)定靈敏度依賴于摩爾吸光系數(shù)對(duì)波長(zhǎng)的變化率dε/dλ。吸收曲線的拐點(diǎn)處dε/dλ最大，故其靈敏度最高(見(jiàn)圖）。同理可以導(dǎo)出其二階和三階導(dǎo)數(shù)光譜（略）

請(qǐng)選擇內(nèi)容：結(jié)束6.1基本原理

6.2紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)

6.3顯色與測(cè)量條件的選擇

6.4分光光度測(cè)定方法

6.5紫外-可見(jiàn)分光光度法的應(yīng)用

賣(mài)油翁下課了，回顧學(xué)習(xí)一個(gè)小故事吧！學(xué)習(xí)目標(biāo)1、復(fù)述故事，深入理解文章內(nèi)容，初步把握人物形象。2、學(xué)會(huì)利用文中關(guān)鍵詞句分析人物形象。3、體會(huì)文章所揭示的深刻道理。故事發(fā)生的時(shí)間、地點(diǎn)、人物、事件的起因、經(jīng)過(guò)和結(jié)果要復(fù)述清楚?？磮D復(fù)述課文內(nèi)容自學(xué)指導(dǎo)(一)1、作者運(yùn)用哪幾種方法去刻畫(huà)人物的形象？從文中找出具體句子進(jìn)行分析。并說(shuō)說(shuō)你是如何看待這兩個(gè)人物的。2、從這個(gè)故事中你懂得了什么道理？自學(xué)指導(dǎo)(二)陳堯咨（善射）賣(mài)油翁（善酌）動(dòng)作神態(tài)語(yǔ)言睨之無(wú)他，但手熟爾以我酌油知之我亦無(wú)他，惟手熟爾汝亦知射乎吾射不亦精乎爾安敢輕吾射釋擔(dān)而立但微頷之取置覆酌瀝性格:自矜（驕傲）謙虛對(duì)比道理:熟能生巧,即使有什么長(zhǎng)處也不必驕傲自滿。忿然笑而遣之笑而遣之1、聯(lián)系生活、學(xué)習(xí)，說(shuō)說(shuō)熟能生巧的事例。

2、你認(rèn)為一個(gè)人應(yīng)該如何看待自己的長(zhǎng)處？又如何看待他人的長(zhǎng)處？課外延伸人外有人，天外有天。取人之長(zhǎng)，補(bǔ)己之短。自滿人十事九空，虛心人萬(wàn)事可成。謙受益，滿招損。三人行，必有我?guī)熝?。擇其善者而從之，其不善者而改之。驕傲自滿是我們的一座可怕的陷阱；而且，這個(gè)陷阱是我們自己親手挖掘的。

——

老舍

尺有所短；寸有所長(zhǎng)。物有所不足；智有所不明。

——

屈原

1、正視自己的長(zhǎng)處，揚(yáng)長(zhǎng)避短