課時(shí)跟蹤檢測（四十） 基因工程

PAGE第8頁共8頁課時(shí)跟蹤檢測（四十）基因工程一、立足主干知識(shí)，注重基礎(chǔ)性和綜合性1．蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程，有廣闊的發(fā)展前景。關(guān)于蛋白質(zhì)工程的敘述正確的是()A．由于需要對(duì)蛋白質(zhì)直接改造，因此操作更難B．由于蛋白質(zhì)不能遺傳，因此蛋白質(zhì)工程的產(chǎn)物不能大量生產(chǎn)C．蛋白質(zhì)工程也需要設(shè)計(jì)出相應(yīng)的基因D．蛋白質(zhì)工程發(fā)展得已經(jīng)非常成熟，在各個(gè)領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用解析：選C蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程，是在分子水平上對(duì)基因分子直接進(jìn)行操作，使其遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，可以遺傳給下一代，A、B錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)工程對(duì)基因分子直接進(jìn)行操作，需要推測出應(yīng)有的氨基酸序列，設(shè)計(jì)出相應(yīng)的基因，C正確；蛋白質(zhì)工程的發(fā)展并不成熟，仍需一段時(shí)間提升，其目前并不能在各個(gè)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用，D錯(cuò)誤。2．若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，需要通過質(zhì)粒載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，其原因不包括()A．目的基因無法插入受體細(xì)胞DNAB．目的基因無法復(fù)制C．目的基因無轉(zhuǎn)錄所需的啟動(dòng)部位D．目的基因與受體細(xì)胞遺傳信息傳遞方式不同解析：選D不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，原因是目的基因無復(fù)制原點(diǎn)，無表達(dá)所需的啟動(dòng)子。3．為了增加牡丹花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C(圖1)，擬將其與質(zhì)粒(圖2)重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟环氖?)A．用限制性內(nèi)切核酸酶EcoRⅠ和DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒B．用含C基因的農(nóng)桿菌侵染牡丹愈傷組織，將C基因?qū)爰?xì)胞C．在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞D．用分子雜交方法檢測C基因是否整合到菊花染色體上解析：選C目的基因C和質(zhì)粒都有可被EcoRⅠ切割的酶切位點(diǎn)，另外需要DNA連接酶將切好的目的基因和質(zhì)粒連接起來；愈傷組織細(xì)胞的全能性較高，是理想的植物受體細(xì)胞，將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞的方法通常為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；質(zhì)粒中含有潮霉素抗性基因，因此選擇培養(yǎng)基中應(yīng)該加入潮霉素；使用分子雜交方法可檢測目的基因是否整合到受體染色體上。4．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)分別如下：—C↓AATTG—和—G↓AATTC—如圖表示某一目的基因片段與質(zhì)粒拼接形成重組質(zhì)粒的過程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．用限制酶EcoRⅠ切割目的基因，同時(shí)用限制酶MunⅠ切割質(zhì)粒B．兩種限制酶切割后形成的黏性末端的堿基可以互補(bǔ)配對(duì)C．限制酶能使特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開D．將重組質(zhì)粒同時(shí)用2種限制酶切割則會(huì)形成2種DNA片段解析：選D由圖可知，目的基因兩側(cè)都是限制酶EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，因此應(yīng)選用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子；質(zhì)粒中含有限制酶MunⅠ和EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，但EcoRⅠ的切割位點(diǎn)位于標(biāo)記基因中，用其切割會(huì)破壞標(biāo)記基因，因此為保證重組質(zhì)粒表達(dá)載體的準(zhǔn)確構(gòu)建，應(yīng)選用限制酶MunⅠ切割質(zhì)粒。圖中兩種限制酶切割后形成的黏性末端的堿基可以互補(bǔ)配對(duì)。限制酶的作用是使DNA分子中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。將重組質(zhì)粒同時(shí)用2種限制酶切割，則會(huì)形成3種DNA片段。5．下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是()A．雞的紅細(xì)胞和菜花均可作為提取DNA的材料，但處理方法有所不同B．在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾收集濾液C．將NaCl溶液濃度調(diào)至2mol/L，用單層濾紙過濾獲取析出物D．利用某些蛋白質(zhì)在酒精中的溶解度大于DNA在酒精中的溶解度的原理，可以提純DNA解析：選C雞的紅細(xì)胞和菜花均可作為提取DNA的材料，處理方法有所不同，動(dòng)物細(xì)胞只要加蒸餾水使細(xì)胞吸水破裂，植物細(xì)胞需要加洗滌劑和食鹽研磨；在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾收集濾液；將NaCl溶液濃度調(diào)至2mol/L，用多層紗布過濾獲取濾液；利用某些蛋白質(zhì)在酒精中的溶解度大于DNA在酒精中的溶解度的原理，可以提純DNA。6．如圖為科學(xué)家利用耐鹽堿植物中的耐鹽基因培育耐鹽水稻新品系的過程。下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是()A．階段Ⅰ、Ⅱ應(yīng)用的技術(shù)分別是重組DNA技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)B．對(duì)耐鹽基因表達(dá)產(chǎn)物的檢測可采用抗原抗體雜交技術(shù)C．可用抗生素抗性基因作為探針來檢測受體細(xì)胞中是否進(jìn)入了目的基因D．可用分子雜交技術(shù)檢測受體細(xì)胞中的耐鹽基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA解析：選C階段Ⅰ將目的基因?qū)胨炯?xì)胞需要采用重組DNA技術(shù)，階段Ⅱ?qū)⑺炯?xì)胞培養(yǎng)成完整植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，A正確；耐鹽基因表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，可用抗原抗體雜交技術(shù)檢測，B正確；可以用含有耐鹽基因的DNA探針檢測細(xì)胞中是否插入了目的基因，而不是用抗生素抗性基因作為探針來檢測，C錯(cuò)誤；可用分子雜交技術(shù)檢測受體細(xì)胞中的耐鹽基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，D正確。7．(2021年1月新高考8省聯(lián)考·遼寧卷，改編)菊花是一種雙子葉植物，易感桃蚜。桃蚜不但直接影響植物生長，還是多種植物病毒的傳播媒介。雪花蓮凝集素基因GNA的表達(dá)產(chǎn)物能有效抑制桃蚜生長。某科研團(tuán)隊(duì)運(yùn)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得了轉(zhuǎn)GNA基因菊花。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．受體細(xì)胞可以選擇菊花葉片細(xì)胞或桃蚜細(xì)胞B．將目的基因GNA插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上構(gòu)建表達(dá)載體C．菊花外植體產(chǎn)生的酚類化合物能吸引農(nóng)桿菌移向受體細(xì)胞D．應(yīng)用抗蟲接種實(shí)驗(yàn)，檢測轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)桃蚜的抗性及抗性的程度解析：選A分析題意可知，科學(xué)家將目的基因?qū)肓司栈?xì)胞，故受體細(xì)胞可以選擇菊花葉片細(xì)胞，但不能選擇桃蚜細(xì)胞，A錯(cuò)誤；基因工程中構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)，由于T-DNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)，所以可以將目的基因GNA插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，B正確；菊花外植體產(chǎn)生的酚類化合物能吸引農(nóng)桿菌移向受體細(xì)胞，有利于目的基因成功導(dǎo)入，C正確；已知雪花蓮凝集素基因GNA的表達(dá)產(chǎn)物能有效抑制桃蚜生長，故應(yīng)用抗蟲接種實(shí)驗(yàn)，檢測轉(zhuǎn)GNA基因菊花對(duì)桃蚜的抗性及抗性的程度，D正確。8．下面是蛋白質(zhì)工程的基本途徑，據(jù)圖分析下列敘述錯(cuò)誤的是()A．a(chǎn)過程所需原料是核糖核苷酸，過程b所需原料是氨基酸B．參與c過程的細(xì)胞器有核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體等C．d過程的主要依據(jù)是每種氨基酸都有其對(duì)應(yīng)的密碼子D．通過蛋白質(zhì)工程可以獲得人類需要的蛋白質(zhì)解析：選Ba過程為轉(zhuǎn)錄，是合成mRNA的過程，所需的原料是核糖核苷酸，b過程為翻譯，所需的原料為氨基酸，A正確；c過程為多肽的加工與折疊，參與c過程的細(xì)胞器有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體等，核糖體是合成多肽的場所，B錯(cuò)誤；d過程為DNA合成，主要依據(jù)是每種氨基酸都有其對(duì)應(yīng)的密碼子，C正確；通過蛋白質(zhì)工程可以獲得人類需要的蛋白質(zhì)，D正確。9.免疫缺陷病患者因缺失ada基因而患該病，實(shí)驗(yàn)人員利用基因療法將人正常的ada基因轉(zhuǎn)入該病患者的T細(xì)胞中，可改善患者的免疫功能，具體過程如圖所示。下列說法正確的是()A．a(chǎn)da基因是從人體細(xì)胞中直接分離出來的B．各種遺傳病都可以通過基因治療治愈C．基因治療的實(shí)質(zhì)是對(duì)有缺陷的細(xì)胞進(jìn)行基因修復(fù)D．病毒的作用是作為攜帶ada基因的載體解析：選D圖中所示獲取ada基因的方法是從基因文庫中獲取目的基因，A錯(cuò)誤；基因治療只能治療因基因異常導(dǎo)致的疾病，如白化病、紅綠色盲等，而不能治愈各種遺傳病，B錯(cuò)誤；基因治療是指把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細(xì)胞中，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的，而不是對(duì)有遺傳缺陷細(xì)胞進(jìn)行基因修復(fù)，C錯(cuò)誤；病毒的作用是作為攜帶ada基因的載體，D正確。10．Bar基因存在于青麻、黑麥草等生物體內(nèi)，其編碼的酶可使除草劑草丁膦失去毒害作用。培育轉(zhuǎn)Bar基因大豆，對(duì)于控制豆田雜草有重要意義。為了把Bar基因?qū)氪蠖辜?xì)胞，需將Bar基因插入pUcl8質(zhì)粒中構(gòu)建中間表達(dá)載體，然后與Ti質(zhì)粒重組為重組表達(dá)載體系統(tǒng)。如圖為pUcl8質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖，回答下列問題：(1)不能利用黑麥草與大豆進(jìn)行有性雜交的方法讓大豆獲得Bar基因，原因是________________________________________________________________________。(2)構(gòu)建中間表達(dá)載體時(shí)，為了便于篩選出含有Bar基因的重組質(zhì)粒，需將Bar基因插入到pUcl8質(zhì)粒的________中形成重組質(zhì)粒并導(dǎo)入大腸桿菌，然后在添加________________的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌，菌落呈白色的即為含中間表達(dá)載體的大腸桿菌。(3)中間表達(dá)載體需插入到Ti質(zhì)粒的________中才能將Bar基因整合到植物細(xì)胞的染色體DNA上，原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)可通過____________法直接將重組表達(dá)載體導(dǎo)入大豆細(xì)胞的原生質(zhì)體。導(dǎo)入Bar基因的原生質(zhì)體需________________，經(jīng)脫分化形成____________，再進(jìn)一步分化才能獲得轉(zhuǎn)Bar基因大豆植株。解析：(1)由于黑麥草與大豆之間存在生殖隔離，因此不能利用黑麥草與大豆進(jìn)行有性雜交的方法讓大豆獲得Bar基因。(2)根據(jù)圖中信息可知，lacZ基因編碼β-半乳糖苷酶，β-半乳糖苷酶可以將培養(yǎng)基中的X-gal水解，使菌落呈藍(lán)色，否則菌落呈白色。因此，構(gòu)建中間表達(dá)載體時(shí)，為了便于篩選出含有Bar基因的重組質(zhì)粒，需將Bar基因插入到pUcl8質(zhì)粒的lacZ中形成重組質(zhì)粒并導(dǎo)入大腸桿菌，然后在添加氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌，菌落呈白色的即為含中間表達(dá)載體的大腸桿菌。(3)Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。(4)可通過顯微注射法直接將重組表達(dá)載體導(dǎo)入大豆細(xì)胞的原生質(zhì)體。導(dǎo)入Bar基因的原生質(zhì)體需再生出細(xì)胞壁，經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再進(jìn)一步分化才能獲得轉(zhuǎn)Bar基因大豆植株。答案：(1)黑麥草與大豆之間存在生殖隔離(2)lacZ氨芐青霉素和X-gal(3)T-DNAT-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上(4)顯微注射再生出細(xì)胞壁愈傷組織二、強(qiáng)化遷移能力，突出創(chuàng)新性和應(yīng)用性11．如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物，生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程示意圖，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性內(nèi)切核酸酶。下列說法錯(cuò)誤的是()A．圖示對(duì)質(zhì)粒和目的基因切割用到了兩種限制酶B．卡那霉素抗性基因的存在有利于將含有抗原基因的細(xì)胞篩選出來C．表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)需要用到限制酶SmaⅠD．除圖示組成外，表達(dá)載體中還應(yīng)該含有啟動(dòng)子和終止子等結(jié)構(gòu)解析：選C為防止酶切后單個(gè)含目的基因的DNA片段自身連接成環(huán)狀，圖示對(duì)質(zhì)粒和目的基因切割用到了兩種限制酶，A正確；卡那霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，主要作用是篩選含有目的基因的受體細(xì)胞，B正確；限制酶SmaⅠ的識(shí)別序列位于目的基因上，因此表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)不能用限制酶SmaⅠ，應(yīng)用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ，C錯(cuò)誤；基因表達(dá)載體一般包括目的基因(抗原基因)、標(biāo)記基因(卡那霉素抗性基因)、啟動(dòng)子和終止子等，D正確。12．從某高等動(dòng)物漿細(xì)胞(L)中提取全部的mRNA，并以此為模板合成相應(yīng)的DNA單鏈(L-cDNA)，提取來自同一個(gè)體的胰島B細(xì)胞(P)的全部mRNA(P-mRNA)。下列敘述正確的是()A．P-mRNA與L-cDNA進(jìn)行分子雜交，均能發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)B．限制酶能特異性識(shí)別并切割L-cDNA，破壞磷酸二酯鍵C．能與L-cDNA互補(bǔ)的P-mRNA中含有編碼呼吸酶的mRNAD．漿細(xì)胞不能分泌胰島素是因?yàn)槿狈幋a胰島素的相關(guān)基因解析：選C由于基因選擇性表達(dá)不同，胰島B細(xì)胞中提取的P-mRNA與L-cDNA不能全部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，A錯(cuò)誤；L-cDNA為單鏈，而限制酶切割的是雙鏈DNA，因此限制酶不能特異性識(shí)別并切割L-cDNA，B錯(cuò)誤；漿細(xì)胞和胰島B細(xì)胞中控制呼吸酶合成的基因都表達(dá)，故能與L-cDNA互補(bǔ)的P-mRNA中含有編碼呼吸酶的mRNA，C正確；漿細(xì)胞不能合成胰島素，是因?yàn)榭刂埔葝u素合成的相關(guān)基因在漿細(xì)胞中不表達(dá)，D錯(cuò)誤。13．已知鐮狀細(xì)胞貧血是一種單基因遺傳病，患者的血紅蛋白分子β肽鏈第6位氨基酸谷氨酸被纈氨酸代替，導(dǎo)致功能異常；而人類是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接種乙肝疫苗是預(yù)防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后經(jīng)歷了血源性疫苗和基因工程疫苗階段?；卮鹣铝袉栴}：(1)將正常的血紅蛋白基因?qū)牖颊叩墓撬柙煅杉?xì)胞中，可以合成正常的血紅蛋白達(dá)到治療的目的。此操作________(填“屬于”或“不屬于”)蛋白質(zhì)工程，理由是該操作________________________________。(2)用基因工程方法制備血紅蛋白時(shí)，可先提取早期紅細(xì)胞中的______，以其作為模板，在____酶的作用下反(逆)轉(zhuǎn)錄合成cDNA。cDNA與載體需在限制酶和__________酶的作用下，構(gòu)建基因表達(dá)載體，導(dǎo)入受體菌后進(jìn)行表達(dá)。(3)如圖為“乙肝基因工程疫苗”的生產(chǎn)和使用過程，質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色，若無該基因，菌落則成白色。圖中過程①有兩種限制酶選擇方案，它們分別是____________________或______________________。(4)獲取目的基因的方法除了圖中用酶切的方法從細(xì)胞中分離以外，還可以通過______________________________來獲得。據(jù)圖可知，該目的基因的具體功能是_________________________________。(5)為了篩選含目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌，可在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中加入___________________，培養(yǎng)一段時(shí)間挑選出________色的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)獲得大量目的菌。(6)用基因工程疫苗接種比血源性疫苗更安全，試從疫苗的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)解釋原因：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)蛋白質(zhì)工程通過基因修飾或基因合成，實(shí)現(xiàn)對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新蛋白質(zhì)，由于該操作中沒有對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或基因進(jìn)行修飾，因此不屬于蛋白質(zhì)工程。(2)因?yàn)檠t蛋白基因只在早期紅細(xì)胞中表達(dá)，所以可從其中提取mRNA，以mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下反(逆)轉(zhuǎn)錄合成cDNA。構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制酶和DNA連接酶協(xié)助。(3)根據(jù)圖解可知，含有目的基因的外源DNA和載體上都有限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ和EcoRV的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，用EcoRV切割會(huì)破壞目的基因，因此圖中過程①有兩種限制酶選擇方案，它們分別是只用BamHⅠ或同時(shí)用EcoRⅠ和BamHⅠ。(4)獲取目的基因的方法有：從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。根據(jù)圖中④目的基因最終產(chǎn)生乙肝病毒外殼進(jìn)行接種，說明該目的基因具體功能是指導(dǎo)合成乙肝病毒蛋白。(5)用限制酶BamHⅠ切割時(shí)破壞了lacZ基因，但沒有破壞青霉素抗性基因，因此為了篩選含目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌，可在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中加入青霉素和X-gal，根據(jù)題干信息“質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色，若無該基因，菌落則成白色”可知，培養(yǎng)一段時(shí)間挑選出白色的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)獲得大量目的菌。(6)用基因工程疫苗接種比血源性疫苗更安全，原因是血源性疫苗需滅活，滅活不成功則會(huì)導(dǎo)致接種者患乙肝，而基因工程不需要。答案：(1)不屬于沒有對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造(或沒有對(duì)基因進(jìn)行修飾)(2)mRNA(或RNA)逆轉(zhuǎn)錄DNA連接(3)只用BamHⅠ或同時(shí)用EcoRⅠ和BamHⅠ(4)人工合成(或PCR技術(shù)擴(kuò)增)指導(dǎo)乙肝病毒蛋白質(zhì)外殼的合成(5)青霉素和X-gal白(6)血源性疫苗需滅活，滅活不成功，則會(huì)導(dǎo)致接種者患乙肝，而基因工程不需要(或基因工程疫苗不會(huì)出現(xiàn)病毒增殖和感染)14．甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì)。為了改善黃瓜的品質(zhì)，科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種甜蛋白基因成功導(dǎo)入黃瓜細(xì)胞，得到了轉(zhuǎn)基因植株?；卮鹣铝袉栴}：(1)通常，基因工程操作主要有4個(gè)步驟，即目的基因獲取、重組表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。因此，基因工程的含義可概括為________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)若在轉(zhuǎn)基因黃瓜中檢測到這種甜蛋白，則表明該重組質(zhì)粒中____________已轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中且能夠表達(dá)；用該轉(zhuǎn)基因黃瓜的某一植株與一株非轉(zhuǎn)基因植株雜交，發(fā)現(xiàn)子代中含甜蛋白個(gè)體數(shù)與不含甜蛋白個(gè)體數(shù)之比為1∶1，則說明甜蛋白基因已經(jīng)整合到________________(填“核基因組”“線粒體基因組”或“葉綠體基因組”)中。(3)用農(nóng)桿菌感染時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選用黃瓜________(填“受傷的”或“完好的”)葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是_______________________________。(4)基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是______。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是___________