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基因工程和細(xì)胞工程一、單選題1.植物組織培養(yǎng)的原理是()A.植物細(xì)胞的全能性B.植物細(xì)胞高度分化的能力C.植物細(xì)胞的完整性D.植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原能力【答案】A【解析】植物的組織培養(yǎng)是利用植物細(xì)胞具有全能性原理,使植物組織在培養(yǎng)基的條件下,通過(guò)細(xì)胞的脫分化作用和分化作用,快速發(fā)育成一株完整的植物的高新技術(shù)手段.故選:A?!究键c(diǎn)定位】植物組織培養(yǎng)。2.下列對(duì)植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的描述,正確的是 () A.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,誘導(dǎo)融合的方法也完全相同 B.兩者都要利用細(xì)胞膜的流動(dòng)性,都會(huì)形成雜種細(xì)胞 C.利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù),為生產(chǎn)試管嬰兒開(kāi)辟了新途徑 D.目前科學(xué)家終于實(shí)現(xiàn)了番茄和馬鈴薯兩個(gè)物種間的體細(xì)胞雜交,得到了同時(shí)具有兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)的植物,并使它們的性狀全部得以體現(xiàn)[【答案】B【解析】3.將耐高溫淀粉酶(Amy)基因a與載體結(jié)合后導(dǎo)入馬鈴薯植株中,經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Amy在成熟塊莖細(xì)胞中存在。下列敘述不正確的是A.獲取基因a的限制酶的作用部位是圖中的①B.連接基因a與載體的DNA連接酶的作用部位是圖中的②C.基因a進(jìn)入馬鈴薯細(xì)胞后,經(jīng)復(fù)制可傳給子代細(xì)胞D.通過(guò)該技術(shù)人類實(shí)現(xiàn)了定向改造馬鈴薯的遺傳性狀【答案】B【解析】獲取基因a的限制酶其作用部位是圖中的①磷酸二酯鍵,A正確;連接基因a與運(yùn)載體的DNA連接酶其作用部位是圖中的①磷酸二酯鍵,B錯(cuò)誤;基因a進(jìn)入馬鈴薯細(xì)胞后,可隨馬鈴薯DNA分子的復(fù)制而復(fù)制,傳給子代細(xì)胞,C正確;題中采用的是基因工程技術(shù),基因工程能按照人們的意愿定向改造生物的性狀,D正確。4.下列關(guān)于生物工程的敘述,正確的是A.在花藥離體培養(yǎng)形成愈傷組織的的過(guò)程中,有可能發(fā)生基因的突變和基因重組B.目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的常用方法是顯微注射法C.植物的單倍體育種和雜交育種都必須利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)D.蛋白質(zhì)工程也需要構(gòu)建含控制預(yù)期蛋白質(zhì)合成的基因表達(dá)載體【答案】D【解析】試題分析:基因重組只發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程中,愈傷組織的形成過(guò)程只有有絲分裂,A錯(cuò)誤;目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,B錯(cuò)誤;植物的單倍體育種必須利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),雜交育種不需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),C錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)工程包含基因工程技術(shù),也需要構(gòu)建含控制預(yù)期蛋白質(zhì)合成的基因表達(dá)載體,D正確??键c(diǎn):本題考查生物工程的相關(guān)知識(shí),意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力。5.下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述正確的是A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是細(xì)胞的全能性B.原代培養(yǎng)過(guò)程中小部分細(xì)胞會(huì)發(fā)生細(xì)胞核型改變而獲得不死性C.傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胃蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞D.培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞表面相互接觸時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增值【答案】D【解析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是細(xì)胞增殖,A錯(cuò)誤;傳代培養(yǎng)過(guò)程中小部分細(xì)胞會(huì)發(fā)生細(xì)胞核型改變而獲得不死性,B錯(cuò)誤;傳代培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,C錯(cuò)誤;培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞表面相互接觸時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增值,D正確。6.以下有關(guān)基因工程的敘述,正確的是()A.基因工程是細(xì)胞水平上的生物工程B.基因工程的產(chǎn)物對(duì)人類都是有益的C.基因工程育種的優(yōu)點(diǎn)之一是目的性強(qiáng)D.基因工程產(chǎn)生的變異屬于人工誘變【答案】C【解析】通俗地說(shuō),基因工程就是按照人們的意愿,把一種生物的某種基因提取出來(lái),加以修飾改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞里,定向改造生物的遺傳性狀,因此基因工程是分子水平上的生物工程,A項(xiàng)錯(cuò)誤;基因工程是按照人們的意愿進(jìn)行基因重組,其產(chǎn)物包括生物和生物制品,并不都是對(duì)人類有益的,B項(xiàng)錯(cuò)誤;基因工程是按照人們的意愿進(jìn)行基因重組,因此其育種的優(yōu)點(diǎn)之一是目的性強(qiáng),C項(xiàng)正確;基因工程產(chǎn)生的變異屬于基因重組,D項(xiàng)錯(cuò)誤。7.下列對(duì)“克隆”廣義概念認(rèn)識(shí)的敘述,不正確的是A.克隆就是通過(guò)有性生殖的方式產(chǎn)生后代B.由單個(gè)細(xì)菌長(zhǎng)成一個(gè)菌落,屬于細(xì)胞水平克隆C.胰島素基因利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增,屬于分子水平克隆D.利用植物體的細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得新植株,屬于個(gè)體水平克隆【答案】A【解析】克隆屬于無(wú)性生殖,A錯(cuò)誤。由單個(gè)細(xì)菌長(zhǎng)成一個(gè)菌落,是一個(gè)細(xì)胞群屬于細(xì)胞水平克隆,B正確。胰島素基因利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增,是在DNA分子水平進(jìn)行克隆,C正確。利用植物體的細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)得到新植株,是在個(gè)體水平進(jìn)行克隆,D正確。8.下列有關(guān)原生質(zhì)體的敘述中,不正確的是()A.組成原生質(zhì)體的主要生命物質(zhì)是蛋白質(zhì)和核酸B.原生質(zhì)體包括細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的原生質(zhì)C.被去掉細(xì)胞壁的植物細(xì)胞是原生質(zhì)體D.原生質(zhì)體可用于植物體細(xì)胞雜交【答案】B【解析】試題分析:原生質(zhì)體是指被去掉細(xì)胞壁的植物細(xì)胞,是植物細(xì)胞內(nèi)的生命結(jié)構(gòu)。去細(xì)胞壁的方法是酶解法,即在溫和的條件下用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法:物理法:離心、振動(dòng)、電激;化學(xué)法:聚乙二醇(PEG);原生質(zhì)體能融合的原因:細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。細(xì)胞膜、液泡膜及兩者之間的原生質(zhì)是指原生質(zhì)層,不是原生質(zhì)體。故B不正確??键c(diǎn):植物細(xì)胞工程點(diǎn)評(píng):本題較簡(jiǎn)單,要求學(xué)生識(shí)記植物細(xì)胞工程和原生質(zhì)體的相關(guān)知識(shí)。9.下面是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖,其中①過(guò)程注射的物質(zhì)和a細(xì)胞的名稱分別是()A.抗體、T淋巴細(xì)胞B.抗原、T淋巴細(xì)胞C.抗體、B淋巴細(xì)胞D.抗原、B淋巴細(xì)胞【答案】D【解析】試題分析:制備單克隆抗體的細(xì)胞來(lái)源是已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞;圖中①過(guò)程表示給小鼠注射抗原,使得小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng),形成能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞。因此,D項(xiàng)正確,A、B、C項(xiàng)錯(cuò)誤??键c(diǎn):本題考查單克隆抗體制備過(guò)程的相關(guān)知識(shí),意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。10.關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)相關(guān)知識(shí)的敘述,其中正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)過(guò)程均需使用胰蛋白酶處理B.試管苗、試管牛和克隆羊都屬于無(wú)性生殖且能保持母本性狀C.用DNA連接酶將一個(gè)目的基因和質(zhì)粒連接形成重組DNA分子【答案】C【解析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需使用胰蛋白酶處理形成單個(gè)細(xì)胞,植物組織培養(yǎng)不需使用胰蛋白酶處理,A錯(cuò)誤;試管牛是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后,再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù),屬于有性生殖的產(chǎn)物,B錯(cuò)誤;將一個(gè)目的基因和質(zhì)粒連接形成重組DNA分子需使用DNA連接酶,C正確;將玉米花粉和水稻花粉進(jìn)行細(xì)胞雜交,獲得的植株為二倍體,但由于不存在同源染色體,所以不可育,D錯(cuò)誤.【考點(diǎn)定位】基因工程的原理及技術(shù);植物體細(xì)胞雜交的應(yīng)用;動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程【名師點(diǎn)睛】植物組織培養(yǎng)不用胰蛋白酶處理;試管牛是有性生殖;DNA連接酶將一個(gè)目的基因和質(zhì)粒連接形成重組DNA分子;將玉米花粉和水稻花粉進(jìn)行細(xì)胞雜交,獲得的植株為二倍體,但不育。11.一只羊的卵細(xì)胞核被另一只羊的體細(xì)胞核所置換,這個(gè)細(xì)胞發(fā)育成早期胚胎后,移入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育,結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔,這種技術(shù)有多種用途,但不能()A.有選擇性地繁殖某一性別的家畜B.繁殖家畜中的優(yōu)良個(gè)體C.用于保護(hù)瀕危物種D.改良動(dòng)物的遺傳特性【答案】D【解析】克隆動(dòng)物的性別由供體細(xì)胞決定,則可用于有選擇性的繁殖某一性別的家畜,A正確;利用體細(xì)胞克隆技術(shù)可以加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育,B正確;用于保護(hù)瀕危物種,增加動(dòng)物的存活數(shù)量,C正確;克隆技術(shù)屬于無(wú)性繁殖,不能改良動(dòng)物的遺傳特性,D錯(cuò)誤。12.愈傷組織是一類 ()A.高度渡泡化呈無(wú)定形的具有分裂能力的薄壁細(xì)胞B.排列緊密呈正方形的一群薄壁細(xì)胞C.具有特定的結(jié)構(gòu)和功能的植物組織D.經(jīng)細(xì)胞再分化過(guò)程產(chǎn)生的具有分裂能力的薄壁細(xì)胞【答案】A【解析】愈傷組織是植物組織器官在離體情況下經(jīng)脫分化而形成的一小團(tuán)沒(méi)分化高度液泡化無(wú)定型的薄壁細(xì)胞,所以A選項(xiàng)正確。13.科學(xué)家將含有人的胰島素基因的DNA片段注入牛的受精卵中,該受精卵發(fā)育的牛能分泌人的胰島素。下列對(duì)這一過(guò)程的敘述,錯(cuò)誤的是()A.如果用逆轉(zhuǎn)錄法人工合成人的胰島素基因,應(yīng)從人的胰島細(xì)胞中獲得相應(yīng)的RNAB.人的胰島素基因可以在牛的細(xì)胞內(nèi)復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯C.該牛稱為“克隆牛”,其細(xì)胞內(nèi)會(huì)發(fā)生RNA的復(fù)制D.該過(guò)程定向地改造了生物的遺傳性狀【答案】C【解析】試題分析:逆轉(zhuǎn)錄法需要模板,而人體中胰島B細(xì)胞中會(huì)含有轉(zhuǎn)錄出的RNA,A正確;人的胰島素基因?qū)氲脚5募?xì)胞中可以發(fā)生復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯,但不會(huì)發(fā)生逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制,B正確;此牛為基因工程的產(chǎn)物,是由受精卵發(fā)育而成的,屬于有性生殖,而非“克隆?!?,C錯(cuò)誤;該過(guò)程能使牛分泌出人的胰島素,即定向地改變了牛的遺傳性狀,D正確??键c(diǎn):基因工程的應(yīng)用14.在下列選項(xiàng)中,不需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是()A.利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗,獲得多倍體植株B.利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株C.利用基因工程培養(yǎng)抗棉鈴蟲(chóng)的棉花植株D.利用細(xì)胞工程培養(yǎng)“番茄一馬鈴薯”雜種植株【答案】A【解析】試題分析:秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗獲得多倍體植株,這屬于多倍體育種,沒(méi)有采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),A項(xiàng)正確;利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株,需借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)才能實(shí)現(xiàn),B項(xiàng)錯(cuò)誤;利用基因工程培育抗棉鈴蟲(chóng)的棉花植株的過(guò)程中,需借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)、才能將成功導(dǎo)入基因表達(dá)載體的棉花細(xì)胞培育成抗棉鈴蟲(chóng)的棉花植株,C項(xiàng)錯(cuò)誤;細(xì)胞工程培育“番茄—馬鈴薯”雜種植株的過(guò)程中,需借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)將“番茄—馬鈴薯”雜種細(xì)胞培育成“番茄—馬鈴薯”雜種植株,D項(xiàng)錯(cuò)誤。考點(diǎn):本題考查植物細(xì)胞工程及其應(yīng)用、多倍體育種的相關(guān)知識(shí),意在考查學(xué)生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。15.蛋白質(zhì)工程與基因工程相比,其突出特點(diǎn)是()A.基因工程生產(chǎn)的天然蛋白質(zhì)完全符合人類生產(chǎn)和生活的需要B.蛋白質(zhì)工程能對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì)C.蛋白質(zhì)工程可以不通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯來(lái)實(shí)現(xiàn)D.蛋白質(zhì)工程是通過(guò)直接的蛋白質(zhì)修飾或蛋白質(zhì)合成來(lái)完成的【答案】B【解析】基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已經(jīng)存在的天然蛋白質(zhì),它們的結(jié)構(gòu)和功能符合特定物種生存的需要,但不一定完全符合人類生產(chǎn)和生活的需要,A項(xiàng)錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活需求,B項(xiàng)正確;蛋白質(zhì)工程中也存在轉(zhuǎn)錄和翻譯,C項(xiàng)錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)工程是通過(guò)直接對(duì)基因的修飾或基因合成,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,D項(xiàng)錯(cuò)誤。16.下圖為玉米植物(2n=20)組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示,下列有關(guān)說(shuō)法不正確的是()A.①→②的培養(yǎng)基中需要加入一定配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,還要加入瓊脂和蔗糖等B.②的分化程度比①低,全能性比①高C.若①是花藥,則④是單倍體植株,將④的種子用一定濃度的秋水仙素處理可獲得純合子D.若將②在搖床上進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)可以獲得細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大的胚性細(xì)胞【答案】C【解析】試題分析:植物組織培養(yǎng)過(guò)程中不管是脫分化還是再分化階段,都要加入適宜比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素,同時(shí)需要加入蔗糖作為碳源,加入瓊脂作為凝固劑,A正確。經(jīng)過(guò)外植體①脫分化變?yōu)橛鷤M織②,就是讓分化狀態(tài)的植物細(xì)胞變?yōu)槲捶只募?xì)胞,使其全能性變高,B正確。單倍體植株高度不育,所以一般不能結(jié)出種子,只能對(duì)其幼苗進(jìn)行處理,C錯(cuò)誤。由于愈傷組織細(xì)胞細(xì)胞壁薄,分裂能力強(qiáng),代謝旺盛,所以將②在搖床上進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)可以獲得細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大的胚性細(xì)胞,D正確。考點(diǎn):本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí),意在考查學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)要點(diǎn)的理解能力以及把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。17.(2011?盧灣區(qū)二模)在植物細(xì)胞工程中,當(dāng)原生質(zhì)體融合成一個(gè)細(xì)胞后,需要誘導(dǎo)產(chǎn)生出細(xì)胞壁,參與這一過(guò)程的細(xì)胞器是()A.葉綠體、高爾基體B.線粒體、高爾基體C.葉綠體、線粒體D.線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)【答案】B【解析】試題分析:植物原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁,而植物細(xì)胞壁形成與高爾基體有關(guān),合成大分子物質(zhì)需消耗細(xì)胞內(nèi)能量,能量主要由線粒體通過(guò)有氧呼吸產(chǎn)生.故選:B.考點(diǎn):植物體細(xì)胞雜交的應(yīng)用;細(xì)胞器中其他器官的主要功能.18.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用的敘述,正確的是()A.離體的植物組織、器官必需經(jīng)過(guò)滅菌才能接種到組織培養(yǎng)基中B.生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素的協(xié)同調(diào)節(jié)作用在組織培養(yǎng)中非常重要C.以植物芽尖為材料通過(guò)組織培養(yǎng)可以獲得植物新品種D.以人工膜包裹植物愈傷組織和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可制得人工種子【答案】B【解析】試題分析:植物組織培養(yǎng):1、過(guò)程:離體的植物組織,器官或細(xì)胞(外植體)愈傷組織胚狀體→植株(新植體).決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例,特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要.2、原理:植物細(xì)胞的全能性.3、應(yīng)用:植物繁殖的新途徑(快速繁殖優(yōu)良品種、作物脫毒、人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種和突變體的利用)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn).解:A、離體的植物組織、器官必需經(jīng)過(guò)消毒才能接種到組織培養(yǎng)基中,A錯(cuò)誤;B、決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例,尤其是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同調(diào)節(jié)作用在組織培養(yǎng)中非常重要,B正確;C、植株組織培養(yǎng)屬于無(wú)性生殖,能保持親本的特征,不能獲得植物新品種,C錯(cuò)誤;D、以人工膜包裹植物胚狀體和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可制得人工種子,D錯(cuò)誤.故選:B.考點(diǎn):植物培養(yǎng)的條件及過(guò)程.19.利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示,下列敘述不正確的是A.過(guò)程①是在小菜蛾細(xì)胞的細(xì)胞核中進(jìn)行B.過(guò)程②獲取的CarE基因中不含有啟動(dòng)子C.過(guò)程③進(jìn)行前需要用Ca2+處理大腸桿菌D.過(guò)程④后只有部分工程菌含有CarE基因【答案】A【解析】根據(jù)題意和圖示分析可知:圖中過(guò)程①表示通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法合成相應(yīng)的DNA;過(guò)程②表示利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增;過(guò)程③表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;過(guò)程④表示通過(guò)篩選獲得工程菌。過(guò)程①表示通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因,該過(guò)程是在體外進(jìn)行的,不是在小菜蛾細(xì)胞的細(xì)胞核中進(jìn)行的,A錯(cuò)誤;目的基因是通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄法獲得的,該方法獲得的目的基因不含啟動(dòng)子,因此過(guò)程②獲取的CarE基因中不含有啟動(dòng)子,B正確;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時(shí)采用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法,感受態(tài)細(xì)胞可用Ca2+溶液處理得到,C正確;過(guò)程④獲得的工程菌需要進(jìn)行鑒定,在沒(méi)有鑒定前只有部分含有CarE基因,D正確。20.基因工程在操作過(guò)程中需要限制酶、DNA連接酶、載體三種工具。以下有關(guān)基本工具的敘述,正確的是A.所有限制酶的識(shí)別序列均由6個(gè)核苷酸組成B.所有DNA連接酶均能連接黏性末端和平末端C.真正被用作載體的質(zhì)粒都是天然質(zhì)粒D.原核生物內(nèi)的限制酶可切割入侵的DNA分子而保護(hù)自身【答案】D【解析】A、多數(shù)限制酶識(shí)別的核苷酸序列是由6個(gè)核苷酸組成,但不是所有限制酶的識(shí)別序列都是由6個(gè)核苷酸組成的,A錯(cuò)誤;B、DNA連接酶分為E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶,前者只能連接黏性末端,后者主要連接平末端,B錯(cuò)誤;C、真正被用作載體的質(zhì)粒都是被改造過(guò)的質(zhì)粒,C錯(cuò)誤;D、原核生物內(nèi)的限制酶可切割入侵的DNA分子而保護(hù)自身,一般不切割自身的DNA分子,D正確??键c(diǎn):基因工程的工具的相關(guān)知識(shí)二、非選擇題21.如圖是畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法,請(qǐng)分析回答:(1)方法I和方法Ⅱ均用到的主要生物技術(shù)有和______。(2)用激素處理的目的是使B牛______,從B牛體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到_____________(時(shí)期)才能與精子結(jié)合。(3)A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過(guò)相應(yīng)的生理變化后,才能與B牛的卵細(xì)胞結(jié)合,完成受精作用,這個(gè)過(guò)程叫做__________。卵子受精的標(biāo)志是在卵黃膜和透明帶的間隙能夠觀察到__________。(4)生產(chǎn)上常用________期的胚胎進(jìn)行胚胎移植。若希望同時(shí)獲得多個(gè)性狀相同的家畜個(gè)體,可以使用______________技術(shù)?!敬鸢浮浚?)胚胎移植早期胚胎培養(yǎng)(2)超數(shù)排卵M2中期(3)精子獲能兩個(gè)極體(4)桑椹胚或囊胚胚胎分割【解析】分析題圖,圖示是畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法:方法Ⅰ是采用體外受精技術(shù)獲得試管牛E的過(guò)程,方法Ⅱ是采用核移植技術(shù)獲得克隆牛F的過(guò)程。(1)方法I和方法Ⅱ均用到的主要生物技術(shù)有早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植;(2)用促性腺激素處理的目的是使B牛超數(shù)排卵,從B牛體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞不能直接與精子結(jié)合,需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期(M2中期)才能與精子結(jié)合;(3)A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過(guò)相應(yīng)的生理變化后,才能與B牛的卵細(xì)胞結(jié)合,完成受精作用,這個(gè)過(guò)程叫做精子獲能。精子必須獲能才能與培養(yǎng)成熟的卵細(xì)胞結(jié)合,受精作用完成的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙能夠觀察到兩個(gè)極體;(4)生產(chǎn)上常用桑椹胚或囊胚期的胚胎進(jìn)行胚胎移植。來(lái)自同一個(gè)胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì),因此要想同時(shí)獲得多個(gè)性狀相同的家畜個(gè)體,可以使用胚胎分割技術(shù)?!久麕燑c(diǎn)睛】本題結(jié)合試管牛和克隆牛產(chǎn)生過(guò)程圖,考查動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)、體外受精技術(shù),要求考生識(shí)記動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的概念及操作過(guò)程,明確核移植形成的克隆動(dòng)物屬于無(wú)性生殖產(chǎn)物;而體外受精過(guò)程形成的試管動(dòng)物是由精子和卵細(xì)胞受精形成的受精卵發(fā)育形成的,故屬于有性生殖產(chǎn)物,二者都用到的主要技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù),胚胎移植是獲得試管牛和克隆牛的最后一道工序。22.人們?cè)噲D利用基因工程技術(shù)將牽?;ǖ乃{(lán)色基因?qū)氚酌倒逯?,以培育轉(zhuǎn)基因的藍(lán)色玫瑰花。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)將牽牛花的藍(lán)色基因?qū)氚酌倒寮?xì)胞之前需要先構(gòu)建基因表達(dá)載體,這一過(guò)程所需要的工具酶是_______?;虮磉_(dá)載體中除含有藍(lán)色基因外,還應(yīng)含有_________、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)。在體外,可通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增藍(lán)色基因,為了保證PCR反應(yīng)的進(jìn)行,反應(yīng)體系需要加入_____________酶、模板DNA、dCTP,dATP、dGTP、dTTP,以及____________等。(2)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入白玫瑰細(xì)胞內(nèi)常用的方法是____________,而檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入白玫瑰染色體DNA上,常用____________技術(shù)。(3)將導(dǎo)入了藍(lán)色基因的白玫瑰細(xì)胞培養(yǎng)成個(gè)體,需采用________技術(shù),該技術(shù)利用的原理是_________?!敬鸢浮肯拗?性核酸內(nèi)切)酶和DNA連接酶啟動(dòng)子熱穩(wěn)定DNA聚合(或Tap)引物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法DNA分子雜交植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性【解析】試題分析:基因工程是選修三內(nèi)容考查的必考項(xiàng)目之一,學(xué)生應(yīng)對(duì)基因工程的工具、過(guò)程等進(jìn)行認(rèn)真理解和掌握,并結(jié)合試題認(rèn)清題中的目的基因、標(biāo)記基因分別是什么。(1)基因工程中構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程所需要的工具酶是限制酶和DNA連接酶?;虮磉_(dá)載體中除含有藍(lán)色基因(目的基因)外,還應(yīng)含有啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)。PCR反應(yīng)體系需要加入熱穩(wěn)定DNA聚合(Tap)酶、模板DNA、dCTP,dATP、dGTP、dTTP,以及引物等。(2)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞內(nèi)常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,而檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入白玫瑰染色體DNA上,常用DNA分子雜交技術(shù)。(3)將導(dǎo)入了藍(lán)色基因的白玫瑰細(xì)胞培養(yǎng)成個(gè)體,需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),該技術(shù)利用的原理是植物細(xì)胞的全能性?!军c(diǎn)睛】規(guī)避與基因工程操作有關(guān)的7個(gè)失分點(diǎn)(1)目的基因的插入位點(diǎn)不是隨意的:基因表達(dá)需要啟動(dòng)子與終止子的調(diào)控,所以目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子與終止子之間的部位。(2)基因工程操作過(guò)程中只有第三步(將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞)沒(méi)有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象。(3)原核生物作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn):繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。(4)轉(zhuǎn)化的實(shí)質(zhì)是目的基因整合到受體細(xì)胞染色體基因組中。(5)一般情況下,用同一種限制酶切割質(zhì)粒和含有目的基因的片段,但有時(shí)可用兩種限制酶分別切割質(zhì)粒和目的基因,這樣可避免質(zhì)粒和質(zhì)粒之間、目的基因和目的基因之間的連接。(6)不熟悉標(biāo)記基因的種類和作用:標(biāo)記基因的作用——篩選、檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,常見(jiàn)的有抗生素抗性基因、發(fā)光基因(表達(dá)產(chǎn)物為帶顏色的物質(zhì))等。(7)還應(yīng)注意的問(wèn)題有:①基因表達(dá)載體中,啟動(dòng)子(DNA片段)≠起始密碼子(RNA);終止子(DNA片段)≠終止密碼子(RNA)。②基因表達(dá)載體的構(gòu)建是最核心、最關(guān)鍵的一步,在體外進(jìn)行。23.研究表明,植物細(xì)胞中的原花青素有較強(qiáng)的抗癌作用。為研究原花青素對(duì)人類肝癌細(xì)胞的作用,將人肝癌細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液,分別加入不同濃度的原花青素溶液。48小時(shí)后,檢測(cè)處于細(xì)胞周期不同時(shí)期的細(xì)胞數(shù)量,如下表:(1)細(xì)胞培養(yǎng)液中應(yīng)含有5%的CO2,目的是_____。細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)達(dá)到70%時(shí),要用____處理后分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng),這是為了避免_____。(2)表中數(shù)據(jù)顯示,隨著加入原花青素濃度的增加,G1期細(xì)胞的比例逐漸增加,S期明顯減少。表明原花青素能____。(3)原花青素的抗癌作用還表現(xiàn)在能清除生物體內(nèi)的亞硝酸鹽。亞硝酸鹽在鹽酸酸化條件下,與0.4%對(duì)氨基苯磺酸溶液和0.2%的N-l-萘基乙二胺鹽酸鹽溶液反應(yīng)形成_____色染料。(4)致癌因子會(huì)損傷細(xì)胞中的DNA分子,使____發(fā)生突變,導(dǎo)致細(xì)胞癌變。(5)某人肝癌細(xì)胞分裂后期含有___條X染色體。此時(shí)細(xì)胞中有___個(gè)染色體組?!敬鸢浮浚?)維持培養(yǎng)液的pH胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)接觸抑制(2)抑制肝癌細(xì)胞的增殖,使其停留在G1期(DNA復(fù)制前期)(3)玫瑰紅(4)原癌基因和抑癌基因(5)2或者44【解析】試題分析:動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中,為了維持培養(yǎng)液的PH值,應(yīng)加入含有5%的CO2,細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)達(dá)到70%時(shí),要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái),進(jìn)行分瓶傳代培養(yǎng),這是因?yàn)榧?xì)胞間接觸會(huì)抑制細(xì)胞的生長(zhǎng),這是接觸抑制;從表中數(shù)據(jù)可看出,隨著原花青素濃度的增加,G1期細(xì)胞比例逐漸增加,可以推出原花青素能夠抑制肝癌細(xì)胞的增殖,使其停留在G1期;亞硝酸鹽就形成玫瑰紅色;致癌因子損傷細(xì)胞中的DNA分子,使其細(xì)胞原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變,導(dǎo)致細(xì)胞癌變;人的細(xì)胞分裂后期,隨著著絲點(diǎn)的分裂,姐妹染色單體分開(kāi),這時(shí)會(huì)形成2條或4條X染色體,此時(shí)細(xì)胞中有4個(gè)染色體組??键c(diǎn):本題綜合考查細(xì)胞工程、染色反應(yīng)、細(xì)胞的癌變,有絲分裂等的相關(guān)知識(shí),屬理解層次,意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力;能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn),通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理,做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。24.下圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)若A、B是植物細(xì)胞,在細(xì)胞融合前可用纖維素酶除去細(xì)胞壁得到;D雜種細(xì)胞能培育成雜種植株,說(shuō)明植物細(xì)胞具有。(2)不同種植物之間由于存在而不能進(jìn)行有性雜交,但植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的成功為培育種間或?qū)匍g雜種植株提供了新的思路。(3)動(dòng)物細(xì)胞工程的重要目的之一是制備單克隆抗體。若A細(xì)胞為瘤細(xì)胞、B細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞,則促融后能形成種融合細(xì)胞(只考慮細(xì)胞兩兩融合),還應(yīng)從中篩選出既能又能產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)從血清提取的抗體相比,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是(2分)。(4)制備單克隆抗體的過(guò)程中涉及到的細(xì)胞工程技術(shù)有(2分)。【答案】(1)原生質(zhì)體全能性(2)生殖隔離(3)3特定(異)抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高(4)動(dòng)物細(xì)胞融合(雜交)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)【解析】試題分析:若A、B是植物細(xì)胞,在細(xì)胞融合前可用纖維素酶除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體,再誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合;將D雜種細(xì)胞培育成雜種植株,需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),其原理是植物細(xì)胞具有全能性。不同種植物之間由于存在生殖隔離而不能進(jìn)行有性雜交,但植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的成功為培育種間或?qū)匍g雜種植株提供了新的思路。動(dòng)物細(xì)胞工程的重要目的之一是制備單克隆抗體。若A細(xì)胞為瘤細(xì)胞、B細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞,若只考慮細(xì)胞兩兩融合,則促融后能形成3種融合細(xì)胞(瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞),所以需從中篩選出既能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特定(異)抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)從血清提取的抗體相比,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高。制備單克隆抗體的過(guò)程中涉及到動(dòng)物細(xì)胞融合(雜交)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)??键c(diǎn):本題考查細(xì)胞融合和應(yīng)用。點(diǎn)評(píng):本題意在考查考生的識(shí)記能力和理解能力,屬于容易題。25.(9分,除標(biāo)注外每空1分)科學(xué)家對(duì)鼠雜交瘤抗體進(jìn)行改造,生產(chǎn)出效果更好的鼠—人嵌合抗體,用于癌癥治療。下圖表示形成鼠—人嵌合抗體的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)漿細(xì)胞,主要原因是________________________。(2)在單克隆抗體制備過(guò)程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有________、________的特性。(3)單克隆抗體制備過(guò)程運(yùn)用了________和________的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等,與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是,還含有________。(5)在動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中,需要將所選取的組織細(xì)胞離散開(kāi),以利于細(xì)胞融合,可用________處理離體組織細(xì)胞使之分散開(kāi)。(6)單克隆抗體與普通血清抗體相比較,具有________的特點(diǎn)。(2分)【答案】(9分,除標(biāo)注外每空1分)(1)漿細(xì)胞不能無(wú)限增殖(2)在體外大量繁殖產(chǎn)生特異性抗體(3)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(4)動(dòng)物血清(5)胰蛋白酶或膠原蛋白酶(6)特異性強(qiáng)、靈敏度高【解析】試題分析:(1)生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)漿細(xì)胞,因?yàn)闈{細(xì)胞不能增殖。(2)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)條件下可大量繁殖并且可產(chǎn)生特異性抗體。(3)單克隆抗體制備過(guò)程運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等細(xì)胞工程技術(shù)手段。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方:葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等,另外還要加入動(dòng)物血清。(5)使動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞要用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶。(6)單克隆抗體與普通血清抗體相比較,具有)特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)??键c(diǎn):本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí),意在考查知識(shí)的識(shí)記能力及理解應(yīng)用能力。26.酵母菌的維生素、蛋白質(zhì)含量高,可用于生產(chǎn)食品和藥品等??茖W(xué)家將大麥細(xì)胞中的LTP1基因植入啤酒酵母菌中,獲得的啤酒酵母菌可產(chǎn)生LTP1蛋白,并釀出泡沫豐富的啤酒?;镜牟僮鬟^(guò)程如圖:(1)該技術(shù)定向改變了酵母菌的性狀,其遺傳學(xué)原理是_____。該技術(shù)又稱為_(kāi)____或_____。(2)本操作中為了將LTP1基因?qū)虢湍妇?xì)胞內(nèi),所用的運(yùn)載體是________。(3)要使運(yùn)載體與LTP1基因連接,首先應(yīng)使用________進(jìn)行切割。(4)切割完成后,利用________將運(yùn)載體與LTP1基因連接?!敬鸢浮炕蛑亟M基因拼接DNA重組技術(shù)質(zhì)粒限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶【解析】試題分析:分析題圖,圖示表示將使啤酒產(chǎn)生豐富泡沫的LTPl基因植入啤酒酵母菌中,使其產(chǎn)生LTPl蛋白,釀出泡沫豐富的啤酒的過(guò)程。圖中A為獲取目的基因的過(guò)程;B為質(zhì)粒;C為基因表達(dá)載體(重組質(zhì)粒)。(1)圖示技術(shù)稱為轉(zhuǎn)基因技術(shù)、DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù),它實(shí)現(xiàn)了不同物種之間的基因重組,能定向地改造某種生物的性狀。(2)圖示中的運(yùn)載體為質(zhì)粒。(3)要使目的基因與運(yùn)載體連接,需用同一種限制酶切割運(yùn)載體和含目的基因的DNA分子,使它們具有相同的黏性末端。(4)當(dāng)用限制酶切割以后,可采用DNA連接酶將運(yùn)載體與目的基因連接,連接后得到的DNA分子稱為重組DNA分子?!军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的四個(gè)步驟,確定圖中a、b、c代表的物質(zhì)或者步驟名稱。27.下圖表示由甲、乙兩種植物逐步培育出戊植株的過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)通過(guò)I過(guò)程培育出丙種植物的方法有以下兩種:方法一:將甲、乙兩種植物雜交得到基因型為_(kāi)________的植株,并在_________期用____________(化學(xué)物質(zhì))處理,從而獲得基因型為bbDD的丙種植物。方法二:先取甲、乙兩種植物的_____________,利用________________處理,獲得具有活力的_______________;然后用___________________方法誘導(dǎo)融合、篩選出基因型為_(kāi)________________的雜種細(xì)胞;接下來(lái)將該雜種細(xì)胞通過(guò)______________技術(shù)培育出基因型為bbDD的丙種植物。此種育種方法的優(yōu)點(diǎn)是____________。(2)由丙種植物經(jīng)II過(guò)程培育成丁植株,發(fā)生的變異屬于_________________;將丁植株經(jīng)III培育成戊植株的過(guò)程,在育種上稱為_(kāi)______________________。(3)通過(guò)圖中所示育種過(guò)程,____(填能或否)增加物種的多樣性?!敬鸢浮縝D幼苗秋水仙素體細(xì)胞纖維素酶和果膠酶原生質(zhì)體植物組織培養(yǎng)克服了不同生物遠(yuǎn)緣雜交(不親和)的障礙染色體結(jié)構(gòu)的變異(染色體易位)誘變育種能【解析】試題分析:根據(jù)題意和圖示分析可知,方法一中甲植株和乙植物兩種植物雜交得到基因型為bD得到的植株Ⅰ為異源單倍體植株bD,植株Ⅰ的幼苗經(jīng)秋水仙素處理得到的植物是純合二倍體bbDD的丙種植物,該過(guò)程屬于單倍體育種;方法二中采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù),屬于細(xì)胞工程育種,所以依據(jù)細(xì)胞工程育種的操作及意義做題即可。(1)方法一:甲植株和乙植物兩種植物雜交得到基因型為bD得到的植株Ⅰ為異源單倍體植株bD,植株Ⅰ的幼苗經(jīng)秋水仙素處理得到的植物是純合二倍體bbDD的丙植物,該過(guò)程屬于單倍體育種;方法二:采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù),屬于細(xì)胞工程育種,其操作是:先取甲、乙兩種植物的體細(xì)胞,利用纖維素酶和果膠酶處理,獲得具有活力的原生質(zhì)體;然后用物理和化學(xué)方法誘導(dǎo)融合、篩選出基因型為bbDD的雜種細(xì)胞;接下來(lái)將該雜種細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出基因型為bbDD的丙種植物.此種育種方法的優(yōu)點(diǎn)是克服了不同生物遠(yuǎn)緣雜交(不親和)的障礙。(2)由丙種植物經(jīng)Ⅱ過(guò)程培育成丁植株,基因bb和DD由位于兩條染色體變?yōu)槲挥谕粭l染色體狀態(tài),所以發(fā)生的變異屬于染色體變異(或染色體易位)。將丁植株經(jīng)Ⅲ培育成戊植株的過(guò)程,是將基因型在bbDD植株變?yōu)榛蛐虰bDD個(gè)體,發(fā)生了基因突變,所以育種上稱為誘變育種。(3)由圖中所示育種過(guò)程及以上分析可知,通過(guò)圖中所示育種過(guò)程能增加物種的多樣性?!军c(diǎn)睛】本題結(jié)合兩種二倍體植物細(xì)胞融合并培育新植株的過(guò)程圖解,考查植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)過(guò)程,要求考生識(shí)記植物體細(xì)胞雜交和植物組織培養(yǎng)的原理、具體過(guò)程及應(yīng)用,能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱,再結(jié)合題干信息做出準(zhǔn)確的判斷。28.質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體,質(zhì)粒上有標(biāo)記基因,如圖所示,通過(guò)標(biāo)記基因可推知外源基因插入的位置,插入位置不同,細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況也不同。如圖表示外源基因的插入位置(插入點(diǎn)有a、b、c)。Ⅰ.(1)質(zhì)粒的基本組成單位是________。
(2)將細(xì)菌放在含有四環(huán)素、氨芐青霉素中培養(yǎng),屬于基因工程操作中的________步驟。(3)在插入外源基因過(guò)程中用到的工具酶有_________。
Ⅱ.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)探究外源基因插入的位置。(1)步驟:①將導(dǎo)入外源基因的細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)菌。②分組:將細(xì)菌平均分成兩組并標(biāo)號(hào)為1、2。③培養(yǎng):______________________________________________________________。④觀察并記錄結(jié)果。(2)預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論:①若1組、2組均能正常生長(zhǎng),則外源基因插入點(diǎn)是______;②若1組能正常生長(zhǎng),2組不能生長(zhǎng),則外源基因插入點(diǎn)是____;③若1組不能生長(zhǎng),2組能生長(zhǎng),則外源基因插入點(diǎn)是_____?!敬鸢浮棵撗鹾塑账崮康幕虻臋z測(cè)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶將第1組細(xì)菌放入含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),將第2組細(xì)菌放入含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)acb(若第1組與第2組培養(yǎng)基加的抗生素顛倒,結(jié)果②為b,③為c)【解析】試題分析:本題主要考查基因工程的步驟及運(yùn)載體的特點(diǎn)和使用。分析圖示及結(jié)合題意可知:本實(shí)驗(yàn)中的特點(diǎn)是若目的基因插入b或c處時(shí)就會(huì)破壞運(yùn)載體上原有的標(biāo)記基因,使細(xì)菌不再具有相應(yīng)的抗性性狀,所以應(yīng)放在含有不同抗生素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),觀察結(jié)果得出相應(yīng)結(jié)論。
Ⅰ、(1)質(zhì)粒是雙鏈環(huán)狀DNA分子,其基本組成單位是脫氧核苷酸。(2)將細(xì)菌放在含有四環(huán)素、氨芐青霉素中培養(yǎng),屬于目的基因的檢測(cè)。(3)在插入外源基因過(guò)程中,首先要用同種限制酶切割運(yùn)載體和含有目的基因的外源DNA分子,其次需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA分子。Ⅱ、(1)b是抗氨芐青霉素基因,如果外源基因插入到b中,會(huì)破壞此基因結(jié)構(gòu),使細(xì)菌在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng);c是抗四環(huán)素基因,如果外源基因插入到c中,會(huì)破壞此基因結(jié)構(gòu),使細(xì)菌在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)。因此培養(yǎng)時(shí),應(yīng)該將第1組細(xì)菌放入含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),將第2組細(xì)菌放入含四環(huán)素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。(2)若1組、2組均能正常生長(zhǎng),則外源基因插入點(diǎn)是a;若1組能正常生長(zhǎng),2組不能生長(zhǎng),則外源基因插入點(diǎn)是c;若1組不能生長(zhǎng),2組能生長(zhǎng),則外源基因插入點(diǎn)是b。考點(diǎn):基因工程的原理及技術(shù)29.(12分)下圖為用小鼠(2n=40)制備單克隆抗體過(guò)程圖,圖中的“+”表示含有、“一”表示沒(méi)有,lg表示抗體,回答下列問(wèn)題。(1)要得到lg+的脾細(xì)胞,對(duì)小鼠進(jìn)行的處理是。(2)細(xì)胞DNA合成一般有兩條途徑。主途徑是由糖和氨基酸合成核苷酸,進(jìn)而合成DNA,葉酸作為重要的輔酶參與這一合成過(guò)程。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)的催化作用合成DNA。HAT培養(yǎng)基中有三種關(guān)鍵成分:次黃嘌呤(H)、氨甲蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)。氨甲蝶呤是葉酸的拈抗劑。①在HAT培養(yǎng)基中能將瘤細(xì)胞淘汰的物質(zhì)是。②在HAT培養(yǎng)
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