滅菌方法與無(wú)菌操作課件

制藥衛(wèi)生第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作D值：在一定滅菌溫度下被滅菌物品中微生物數(shù)減少90%所需時(shí)間。Z值：在一定溫度下對(duì)特定的微生物滅菌時(shí)，降低一個(gè)lgD所需升高的溫度數(shù)，單位為℃。第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作一、F與F0值在滅菌中的意義與應(yīng)用F值：是為了比較不同滅菌溫度的滅菌效果而設(shè)計(jì)的一個(gè)指標(biāo)。在一定滅菌溫度T，給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果，與設(shè)計(jì)的參比溫度To給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間，單位為min。F0值：是將被滅菌物品在滅菌過(guò)程中不同的受熱溫度與時(shí)間折算到與熱壓121℃滅菌時(shí)熱效力相當(dāng)?shù)臏缇鷷r(shí)間。第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作一、F與F0值在滅菌中的意義與應(yīng)用蒸氣滅菌物理滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法紫外線(xiàn)滅菌法輻射滅菌法微波滅菌法濾過(guò)滅菌法化學(xué)滅菌法氣體滅菌法浸泡與外表消毒法化學(xué)藥劑滅菌法無(wú)菌操作法

無(wú)菌檢查法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作滅菌方法紅外接種環(huán)滅菌二、物理滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作干熱空氣穿透力弱，溫度不易均勻，而且滅菌溫度較高，故不適宜用于大局部藥品及橡膠、塑料制品的滅菌?！惨弧掣蔁釡缇?.干熱空氣滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作〔二〕濕熱滅菌法二、物理滅菌法利用飽和水蒸氣或沸水進(jìn)行滅菌的方法。分類(lèi)熱壓滅菌、流通蒸汽滅菌、煮沸滅菌和低溫間歇滅菌等。特點(diǎn)

⑴濕熱蒸氣比熱大，穿透力強(qiáng)；⑵細(xì)菌在濕熱條件下菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固；⑶水蒸氣與物品接觸而凝結(jié)成水，放出汽化熱，提高溫度，加速細(xì)菌死亡。1.熱壓滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作在高壓滅菌器內(nèi)，利用高壓水蒸氣殺滅微生物的方法，稱(chēng)為熱壓滅菌法。

本法是公認(rèn)的最可靠的濕熱滅菌方法，經(jīng)熱壓滅菌處理，能殺滅被滅菌物品中的細(xì)菌增殖體和芽胞，故凡能耐熱壓滅菌的藥物制劑，均可采用。臥式熱壓滅菌柜1.熱壓滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作熱壓滅菌所需的溫度、壓力與時(shí)間溫度（℃）表壓力（kPa）時(shí)間（min）11668.640121.598.030126.5137.215第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作臥式熱壓滅菌柜示意圖第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作熱壓滅菌器操作注意問(wèn)題：〔1〕使用前應(yīng)認(rèn)真檢查滅菌器的主要部件是否正常完好?！?〕滅菌時(shí)，必須首先將滅菌器內(nèi)的冷空氣排出?！?〕滅菌時(shí)間必須從全部待滅菌物品到達(dá)預(yù)定的溫度時(shí)算起，并維持規(guī)定的時(shí)間。1.熱壓滅菌法滅菌柜第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作熱壓滅菌器操作注意問(wèn)題：〔4〕滅菌完畢后停止加熱，待壓力表逐漸下降至零，才能放出鍋內(nèi)蒸氣，鍋內(nèi)外壓力相等后，開(kāi)啟滅菌器，待被滅菌物品溫度下降至約80℃時(shí)，才可以把滅菌器的門(mén)全部翻開(kāi)，這樣可有效防止內(nèi)外壓相差太大或冷空氣突然進(jìn)入而造成鍋內(nèi)玻璃瓶炸裂、藥液沖出鍋外的事故發(fā)生。1.熱壓滅菌法熱壓滅菌法：影響滅菌的因素：〔1〕不同細(xì)菌的不同發(fā)育時(shí)期與數(shù)量，繁殖期對(duì)熱的抵抗力大于衰老期，細(xì)菌芽孢的耐熱性更強(qiáng)。細(xì)菌越少滅菌時(shí)間越短。〔2〕藥物性質(zhì)與滅菌時(shí)間，到達(dá)有效滅菌的前提下可適中選擇滅菌時(shí)間和溫度。熱壓滅菌法：影響滅菌的因素：〔3〕蒸氣的性質(zhì)：蒸氣有飽和蒸氣，濕飽和蒸氣和過(guò)飽和蒸氣。飽和蒸氣含熱量高，熱的穿透力較大，滅菌效力高，濕飽和蒸氣有水分，穿透力差，滅菌效力低。過(guò)熱蒸氣溫度高于飽和蒸氣，但穿透力差，滅菌效力低?！?〕介質(zhì)的性質(zhì)，制劑中含有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，增強(qiáng)細(xì)菌的抗熱性，細(xì)菌也受pH值的影響，中性環(huán)境中的耐熱性最好，堿性次之，酸性不利于細(xì)菌的發(fā)育。欣弗事件欣弗事件案例同時(shí)，黑龍江省哈醫(yī)大二院收治9例因使用“欣弗〞而產(chǎn)生不良反響的患者。他們的年齡在20歲至75歲之間，均是在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院或在藥店中購(gòu)置“欣弗〞后在診所靜脈點(diǎn)滴的。結(jié)束后，這9名患者均出現(xiàn)寒顫、發(fā)冷、發(fā)熱等病癥，其中5例伴有頑固性低血壓性休克，4例出現(xiàn)意識(shí)障礙。2006年7月27日，青海省藥監(jiān)局最先向國(guó)家藥監(jiān)局報(bào)告，在青海省西寧市局部患者使用了“安徽華源〞生產(chǎn)的“欣弗〞注射液后，先后出現(xiàn)胸悶、心悸、腎區(qū)疼痛、腹痛、過(guò)敏性休克、肝腎功能損害等嚴(yán)重不良反響。隨后，廣西、浙江、山東等地也相繼出現(xiàn)了相同藥物所引發(fā)的嚴(yán)重不良反響病例。女童父親撫著女兒的遺照悲慟不已欣弗事件哈爾濱因靜點(diǎn)欣弗致死女童生前照片圖片湖南教師因注射欣弗導(dǎo)致死亡，親屬悲痛欲絕西安一患者注射欣弗后病危孩子盼望媽媽快快醒來(lái)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局會(huì)同安徽省食品藥品監(jiān)督管理局對(duì)安徽華源生物藥業(yè)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢查。經(jīng)查，該公司2006年6月至7月生產(chǎn)的克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液未按批準(zhǔn)的工藝參數(shù)滅菌，降低滅菌溫度，縮短滅菌時(shí)間，增加滅菌柜裝載量，影響了滅菌效果。經(jīng)中國(guó)藥品生物制品檢定所對(duì)相關(guān)樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果說(shuō)明，無(wú)菌檢查和熱原檢查均不符合規(guī)定。欣弗事件案例安徽華源生物藥業(yè)違反規(guī)定生產(chǎn)，是導(dǎo)致這起不良事件的主要原因。欣弗事件調(diào)查藥品監(jiān)管部門(mén)根據(jù)?中華人民共和國(guó)藥品管理法?有關(guān)規(guī)定，對(duì)安徽華源生產(chǎn)的“欣弗〞藥品按劣藥論處。并作出如下處理決定：安徽華源生物藥業(yè)因生產(chǎn)劣藥被收回大容量注射劑生產(chǎn)資格和“欣弗〞藥品批準(zhǔn)文號(hào)，企業(yè)負(fù)責(zé)人被撤職。由安徽省食品藥品監(jiān)督管理局沒(méi)收該企業(yè)違法所得，并處２倍罰款；安徽省食品藥品監(jiān)督管理局監(jiān)督該企業(yè)停產(chǎn)整頓，回收該企業(yè)的大容量注射劑；由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局撤銷(xiāo)該企業(yè)的“欣弗藥品的批準(zhǔn)文號(hào)，委托安徽省食品藥品監(jiān)督管理局收回批件；對(duì)安徽華源召回的“欣弗〞藥品，由安徽省藥監(jiān)部門(mén)依法監(jiān)督銷(xiāo)毀。處理欣弗事件采訪2.流通蒸氣滅菌法與煮沸滅菌法3.低溫間歇滅菌法4.影響濕熱滅菌的因素第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作微生物的種類(lèi)和數(shù)量藥物與介質(zhì)的性質(zhì)蒸氣的性質(zhì)滅菌時(shí)間濕熱滅菌飽和蒸氣濕飽和蒸氣過(guò)熱蒸氣不飽和蒸氣在常壓下使用100℃流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法。滅菌時(shí)間30-60min不能保證殺滅所有的芽孢，非可靠滅菌方法。待滅菌物品放在沸水中解熱滅菌法。第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作〔三〕紫外線(xiàn)滅菌法紫外線(xiàn)的穿透能力弱，但能穿透清潔的空氣和純潔的水，因而廣泛用于空氣滅菌與外表滅菌。滅菌波長(zhǎng)：220~290nm滅菌力最強(qiáng)：254~257nm適宜溫度：10℃~55℃相對(duì)濕度：45%~60%滅菌時(shí)間：0.5~1h二、物理滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作（四）微波滅菌法微波通常是指頻率在300MHz到300kMHz之間的電磁波。二、物理滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作〔五〕輻射滅菌法輻射滅菌又稱(chēng)電離輻射滅菌，是利用γ-射線(xiàn)或β-射線(xiàn)進(jìn)行照射，穿透物品殺滅微生物而到達(dá)滅菌目的的方法。60C0γ-射線(xiàn)是高能射線(xiàn)，穿透力強(qiáng)，不僅絕大數(shù)生物體對(duì)射線(xiàn)敏感，而且適用于較厚樣品，特別是已包裝密封物品的滅菌，滅菌效果可靠，并可有效地防止“二次污染〞。二、物理滅菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作〔五〕輻射滅菌法二、物理滅菌法輻射滅菌法的特點(diǎn)不升高滅菌產(chǎn)品的溫度，穿透性強(qiáng)，適合于維生素、抗生素、激素、醫(yī)療器械、高分子材料等的滅菌。輻射滅菌法的缺點(diǎn)設(shè)備費(fèi)用高，有些藥物滅菌后療效可能降低，對(duì)液體藥劑的穩(wěn)定性也有影響，同時(shí)還要注意平安防護(hù)問(wèn)題。輻射滅菌法的原理射線(xiàn)可直接破壞細(xì)菌

DNA，導(dǎo)致微生物死亡。第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作三、濾過(guò)除菌法濾過(guò)除菌法，利用物理阻流的作用，主要用于不耐熱的低黏度藥物溶度和相關(guān)氣體物質(zhì)的潔凈除菌處理?！惨弧澄⒖妆∧V器是目前應(yīng)用最廣泛的濾過(guò)除菌器，一般應(yīng)選用0.22μm以下孔徑的濾膜作濾材。第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作三、濾過(guò)除菌法垂熔玻璃濾器的濾板孔徑有多種規(guī)格，上海玻璃廠的6號(hào)(孔徑2μm以下)、長(zhǎng)春玻璃總廠的G6號(hào)(孔徑1.5μm以下)和天津?yàn)V器廠的IG6號(hào)(孔徑2μm以下)三種規(guī)格濾板制成的垂熔玻璃濾器可以作為濾過(guò)除菌器使用?！捕炒谷鄄ＡV器第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作直徑μm長(zhǎng)度μm直徑μm長(zhǎng)度μm大腸桿菌0.4~0.71.0~3.0普通變形桿菌0.5~1.01.0~3.0枯草桿菌0.5~0.81.6~4.0枯草桿菌芽孢0.5~1.00.9~1.6綠膿桿菌0.3~1.01.0~2.0痢疾桿菌0.5~1.02.0~3.0肺炎桿菌0.5~1.651.0~2.0金葡菌0.8~1.0繁殖期微生物大小約為1μm，芽孢大小約0.5μm或者更小。三、濾過(guò)除菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作〔三〕砂濾棒應(yīng)用濾過(guò)除菌法的本卷須知①藥液均應(yīng)經(jīng)過(guò)預(yù)濾處理，一般先用粗濾裝置濾除較大顆粒的雜質(zhì)，再用砂濾棒或G5、G4號(hào)垂熔玻璃濾器濾除微細(xì)沉淀物或較大桿菌、酵母菌，最后再用微孔薄膜濾器或G6號(hào)垂熔玻璃濾器濾過(guò)，并收集濾液及時(shí)分裝。②必須無(wú)菌操作，必要時(shí)在濾液中還須添加適當(dāng)?shù)姆栏瘎?。三、濾過(guò)除菌法第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作〔三〕砂濾棒應(yīng)用濾過(guò)除菌法的本卷須知③對(duì)新使用或已屢次重復(fù)使用的濾器，須檢查濾過(guò)除菌的效果，必要時(shí)可測(cè)定濾器的孔徑或采樣作細(xì)菌學(xué)檢查。三、濾過(guò)除菌法四、化學(xué)滅菌法①使病原體蛋白質(zhì)變性，發(fā)生沉淀；②與細(xì)菌的酶系統(tǒng)結(jié)合，影響其代謝功能；③降低細(xì)菌的外表張力，增加菌體胞漿膜的通透性，使細(xì)胞破裂或溶解?；瘜W(xué)藥品殺菌或抑菌的機(jī)制第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作化學(xué)滅菌法是使用化學(xué)藥品殺滅微生物，到達(dá)滅菌目的的方法?；瘜W(xué)滅菌法一般包括氣體滅菌法和浸泡與外表消毒法。滅菌指示劑第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作①殺菌譜廣；②有效殺菌濃度低；③作用速度快；④性質(zhì)穩(wěn)定，不易受有機(jī)物、酸、堿及其他物理、化學(xué)因素的影響；四、化學(xué)滅菌法理想的化學(xué)滅菌劑應(yīng)具備以下條件：第三節(jié)滅菌方法與無(wú)菌操作⑤易溶于水，可在低溫下使用；⑥毒性低，對(duì)物品無(wú)腐蝕性，不易燃燒爆炸；⑦無(wú)色，無(wú)味，無(wú)臭，滅菌后易于從被滅菌物品上除去，無(wú)殘留；⑧價(jià)格低廉，來(lái)源豐富，便于運(yùn)輸。四、化學(xué)滅菌法理想的化學(xué)滅菌劑應(yīng)具備以下條件