高三生物pcr技術復習試題

高三生物pcr技術復習試題高三生物PCR技術復習試題一、知識回顧PCR技術是一種體外擴增DNA的技術，可在短時間內(nèi)將目的基因擴增上百萬倍，達到肉眼可見的量。其具體過程為：首先，將DNA加熱使其雙鏈分開；然后將人工合成的一段單鏈核苷酸即DNA引物黏附到DNA單股螺旋上；之后按照引物就能夠復制出DNA來，重復放大50次后就可以制成10億個基因。在PCR放大過程中的關鍵是利用耐熱DNA聚合酶使少量的DNA在短期內(nèi)即能擴增數(shù)百萬倍，便于分析、檢測。二、試題精練1、PCR技術是一種DNA的擴增技術。在一定條件下，加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以實現(xiàn)DNA的擴增。據(jù)此判斷不合理的是C．DNA擴增過程未加解旋酶，可以通過先適當加溫的方法破壞氫鍵，使模板DNA解旋2、PCR技術是一種體外迅速擴增DNA片段的技術。PCR過程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán)：95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復性（引物與DNA模板鏈結合）→72℃下引物鏈延伸（形成新的脫氧核苷酸鏈）。下列有關PCR過程的敘述中不正確的是：（）D．PCR與細胞內(nèi)DNA復制相比所需要酶的最適溫度較高3、下列有關PCR技術的敘述，不正確的是：（）C．PCR技術需在體內(nèi)進行4、PCR技術擴增DNA,需要的條件是()A、①②③④5、在基因工程中，將目的基因放入PCR儀中擴增4代，需要將胞嘧啶脫氧核苷酸的個數(shù)至少設為多少？A．640B．8100C．600D．8640正確答案：D6、對禽流感的確診，先用PCR技術將標本基因大量擴增，然后利用基因探針，測知待測標本與探針核酸的堿基異同。下圖中，哪份標本最有可能確診為禽流感？（圖片省略）A．MB．NC．QD．W正確答案：C7、某考古學家在西伯利亞泰加林地區(qū)的冰中，發(fā)現(xiàn)了一種冰凍的已滅絕的巨大動物的肌肉。他想了解該巨型動物的DNA與現(xiàn)今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下檢測工作，正確的操作步驟及順序是什么？①通過PCR技術擴增巨型動物和大象的DNA②降低溫度，檢測處理后形成的雜合DNA雙鏈區(qū)段③把巨型動物的DNA導入大象的細胞中④在一定的溫度條件下，將巨型動物和大象的DNA水浴共熱正確答案：B8、聚合酶鏈式反應（PCR技術）是在實驗室中以少量樣品DNA制備大量DNA的生化技術，反應系統(tǒng)中包括微量樣品DNA、DNA聚合酶、引物、四種脫氧核苷酸及ATP等。反應中新合成的DNA又可以作為下一輪反應的模板，故DNA數(shù)以指數(shù)方式擴增。請回答以下問題：（1）某個DNA樣品有1000個脫氧核苷酸，已知它的一條單鏈上堿基A:G:T:C=1:2:3:4，則經(jīng)過PCR儀五次循環(huán)后，將產(chǎn)生多少個DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脫氧核苷酸的數(shù)量至少是多少個？（2）分別以不同生物的DNA樣品為模板合成的各個新DNA之間存在差異，這些差異是什么？（3）請指出PCR技術與轉(zhuǎn)錄過程的三個不同之處。正確答案：（1）經(jīng)過PCR儀五次循環(huán)后，將產(chǎn)生326200個DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脫氧核苷酸的數(shù)量至少是8640個。（2）分別以不同生物的DNA樣品為模板合成的各個新DNA之間存在堿基（脫氧核苷酸）的數(shù)目、比例和排列順序不同。（3）PCR技術以DNA的兩條單鏈為模板合成子代DNA，轉(zhuǎn)錄以DNA的一條單鏈為模板合成RNA；PCR技術的原料為脫氧核苷酸，轉(zhuǎn)錄的原料是核糖核苷酸；二者反應時的催化酶不同。資料顯示，近十年來，PCR技術（DNA聚合酶鏈式反應技術）已成為分子生物實驗中的常規(guī)手段。其原理是利用DNA半保留復制的特性，在試管中進行DNA的人工復制，將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍，使分子生物實驗所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。加熱至94℃的目的是使DNA樣品的鍵斷裂，這一過程在生物體細胞內(nèi)是通過酶的作用來完成的。通過分析得出新合成的DNA分子中，A=T，C=G，這個事實說明DNA分子的合成遵循堿基互補配對原則。新合成的DNA分子與模板DNA分子完全相同的原因是DNA分子中獨特的雙螺旋結構，或以模板DNA分子的一條鏈為模板進行半保留復制。復制過程中嚴格遵循堿基互補配對原則。通過PCR技術使DNA分子大量復制時，若將一個用N標記的模板DNA分子（第一代）放入試管中，以N15標記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復制到第五代時，含N標記的DNA分子單鏈數(shù)占全部DNA總單鏈數(shù)的比例為1/16。PCR技術不僅為遺傳病的診斷帶來了便利，而且改進了檢測細菌和病毒的方法。若要檢測一個人是否感染了艾滋病病毒，可以用PCR擴增血液中的病毒核酸。另一方面，甲圖中的DNA決定某一多肽鏈中的酪氨酸和丙氨酸過程示意圖，乙圖示樣品DNA經(jīng)PCR技術擴增，可以獲取大量DNA克隆分子。甲圖中含有8種核苷酸，丙氨酸的遺傳密碼子是GCC。該圖表示了DNA中遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。有一種貧血癥是血紅蛋白分子的一條多肽鏈上，一個酪氨酸被一個苯丙氨酸所替代造成的。此種貧血癥的根本原因是基因突變，即發(fā)生了DNA的堿基序列或基因結構的改變。乙圖的“PCR”與人體內(nèi)的DNA復制相比有何特殊之處？離體條件，需要高溫，高溫酶是PCR技術與人體內(nèi)DNA復制的主要區(qū)別。現(xiàn)在要通過“PCR”得到甲圖中DNA片段的1024個克隆片段，則至少要向試管中加入3069個腺嘌呤脫氧核苷酸。1.DNA分子復制所需的條件是模板、原料、能量和酶。在細胞核中，DNA分子復制需要進行解旋。95℃條件下變性30s的目的是使DNA分子解旋。反應體系中的緩沖液相當于細胞核中的核液。2.如果反應體系中加入了100個模板DNA分子，則經(jīng)過30個循環(huán)后，DNA分子的數(shù)量將達到23000個。1.PCR技術能把某一DNA片段進行擴增，是依據(jù)DNA的復制原理。利用PCR技術擴增DNA片段時用到的“體外酶”通常是指DNA聚合酶。2.電泳過程中分子的遷移率除與本身所帶電荷的多少有關以外，還受到分子的大小和形狀的影響。3.由圖1可推知該蛋白質(zhì)由12種氨基酸構成，該蛋白質(zhì)水解時需要的水分子數(shù)是47個。4.根據(jù)圖2中DNA指紋圖譜的比較，F(xiàn)1最可能是該小孩的生物學父親?，F(xiàn)在我們使用了三種不同的限制性內(nèi)切酶來剪切一段長度為6.2kb的線狀DNA，并通過凝膠電泳將各DNA