菊花的組織培養(yǎng)

課題1菊花的組織培育經(jīng)過必修課的學習，我們曾經(jīng)了解到大多綠色開花植物都是靠種子來繁衍的。那么，有沒有不用種子來培育植物的方法呢？營養(yǎng)繁衍扦插嫁接壓條植物的組織培育一、根底知識1、植物的組織培育〔1〕細胞的分化①概念：在個體發(fā)育中，一樣細胞的后代在形狀、構造、生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差別的過程有絲分裂受精卵細胞分化1、細胞分化的概念一、知識回想一、根底知識1、植物的組織培育〔1〕細胞的分化①概念：在個體發(fā)育中，一樣細胞的后代在形狀、構造、生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差別的過程④結果：構成不同的細胞和組織黑色素細胞在體外培育30多代后仍能合成黑色素；離體培育的上皮細胞，一直堅持為上皮細胞，而不會變成其他類型的細胞。2、穩(wěn)定性3、不可逆性細胞分化發(fā)生在整個生命進程中。1、耐久性2、細胞分化的特點造血干細胞原紅細胞早幼紅細胞中幼紅細胞晚幼紅細胞成熟紅細胞死亡4、普遍性細胞分化能否意味著細胞中遺傳物質的改動？遺傳物質沒有改動，不同組織的細胞共同來源于受精卵，經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生。3、細胞分化的本質ABDCEEDCABEDCABEDCABEDCAB基因在個體發(fā)育過程中，不同細胞中遺傳信息的執(zhí)行情況不同即基因的選擇性表達的過程一、根底知識1、植物的組織培育〔1〕細胞的分化①概念：在個體發(fā)育中，一樣細胞的后代在形狀、構造、生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差別的過程④結果：構成不同的細胞和組織⑤緣由：基因選擇性表達的結果〔一〕植物組織培育概念在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培育在人工配置的培育基上，給予適宜的培育條件，誘導其脫分化產(chǎn)生愈傷組織再分化構成叢芽，最終構成完好的植株。又稱：植物離體培育1、植物組織培育的原理是什么？植物細胞具有全能性思索：〔2〕細胞的全能性①定義：已分化的細胞具有發(fā)育成完好個體的潛能的特性②原理：生物體的每一個細胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質，都有發(fā)育成為完好個體所必需的全部基因高度特化的動物細胞，從整個細胞來說，全能性遭到限制。但它的細胞核依然堅持著全能性，這是由于細胞核內(nèi)含有該物種遺傳性所需求的遺傳物質已分化的植物細胞，仍具有全能性③實例：④全能性的大小比較：受精卵>生殖細胞(卵細胞、精子等〕>體細胞植物細胞>動物細胞(動物細胞核具全能性)例1、以下有關細胞全能性的含義，正確的選項是：A、每個生物體內(nèi)的一切細胞都具有一樣的功能B、生物體內(nèi)的任何一個細胞可以完成該個體的全部功能C.已分化的細胞具有發(fā)育成完好個體的潛能D、生物體的每個細胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生長、衰老、死亡的全過程正確答案：C例2、在生物體內(nèi)，細胞沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化為不同的組織、器官，是由于：正確答案：A、細胞喪失了全能性B、基因的表達有選擇性C、不同的細胞內(nèi)基因不完全一樣BD、在個體發(fā)育的不同時期，細胞內(nèi)的基因發(fā)生了變化〔3〕植物組織培育外植體〔離體的植物組織或細胞〕②必要條件：適宜物質的誘導和調(diào)理〔植物激素〕適宜的營養(yǎng)物質溫度、酸堿度、光照等條件的控制①原理:植物細胞的全能性無菌操作二、植物組織培育的根本過程外植體離體的植物器官、組織、細胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體2-3周，愈傷組織開場構成。(2).愈傷組織：愈傷組織是經(jīng)過細胞分裂構成的，其細胞陳列疏松而無規(guī)那么，高度液泡化呈無定外形狀的薄壁細胞。(1).脫分化〔去分化〕：曾經(jīng)分化的植物器官、組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程。

(曾經(jīng)分化的植物器官、組織或細胞，當遭到創(chuàng)傷或進展離體〔也遭到創(chuàng)傷〕培育時，已停頓分裂的細胞，又重新恢復分裂，細胞改動原有的分化形狀，失去原有構造和功能，成為具有未分化特性的細胞。)(3).再分化：愈傷組織繼續(xù)培育，重新分化成根和芽等器官的過程。

3-5周之后，誘導出的新葉片和芽。三、影響植物組織培育的要素：不同植物的組織培育難度不同大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有機物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等植物激素：生長素、細胞分裂素、赤霉素等1、植物資料的選取2、培育基的配制(MS培育基)

菊花的組織培育，普通選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝。為什么？微生物培育基以有機營養(yǎng)為主。MS培育基那么需提供大量無機營養(yǎng)，無機鹽混合物包括植物生長必需的大量元素和微量元素兩大類1.同微生物培育基相比，MS培育基的配方有哪些明顯的不同？生長素和細胞分裂素作用植物中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。在生長素存在的情況下，細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢使用順序實驗結果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但不利分化先使用細胞分裂素后使用生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率高生長素細胞分裂素：>有利于根的分化生長素細胞分裂素：<有利于芽的分化生長素細胞分裂素：＝促進愈傷組織生長生長素和細胞分裂素同時運用，用量的比例對植物細胞發(fā)育方向的影響〔3〕pH、溫度、光照pH控制在5.8左右，溫度控制在18－22。C,每日用日光燈照射12h為什么每日要光照12h？再分化過程中，細胞中葉綠素的構成需求光。2、植物為自養(yǎng)生物，為什么在培育的過程中需求參與糖類等有機物？由于植物組織培育是利用離體的植物組織或細胞，在其脫分化過程中不能進展光協(xié)作用合成糖類，因此必需參與糖類，作為碳源和能源物質，同時維持培育基的浸透壓。植物組織培育過程:離體組織或細胞植物體脫分化細胞分裂素≈生長素愈傷組織芽根細胞分裂素>生長素細胞分裂素<生長素再分化植物細胞培育不需求光?需求光制備MS固體培育基外植體消毒接種培養(yǎng)栽培四、實驗操作移栽〔一〕制備MS固體培育基1、配置各種母液2、配置培育基①定容②調(diào)PH③培育基的分裝3、滅菌分裝好的培育基連同其他器械一同進展高壓蒸汽滅菌1、選材：菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝〔二〕外植體消毒2、消毒：流水沖洗—酒精—無菌水沖洗—氯化汞—無菌水沖洗至少三次之上〔三〕接種用70％的酒精噴霧使空氣消毒，酒精搽洗任務臺并用紫外線照射20分鐘1、接種室消毒2、無菌操作要求操作要在酒精燈火焰旁完成，每次運用器械后，都需求用火焰灼燒滅菌3、資料的切取和接種4、接種本卷須知①每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分數(shù)為75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種②外植體在培育基中要分布均勻，普通胡蘿卜3－4塊，菊的莖或葉6－8塊，也不要太少，以充分利用培育基中的營養(yǎng)成分和光照條件③插入時應留意方向，不要倒插。莖段、莖尖基部插入培育基利于吸收水分和營養(yǎng)〔四〕培育無菌箱中培育，定期消毒，堅持適宜的溫度，光照〔五〕移栽等到生根后可進展移栽。清洗根部的培育基，轉移至消過毒的蛭石或珍珠巖中幼苗長壯后，移栽到土壤中〔六〕栽培在培育的整個過程中，要進展一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作。為什么？由于所利用的植物資料體積小，抗性差，對培育條件的要求高。培育資料一旦被微生物污染，就會導致實驗失敗。1、外植體帶菌2、培育基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔組織培育污染的主要途徑及怎樣預防污染？思考在整個操作過程中，是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的？1、培育基的滅菌〔高壓蒸汽滅菌〕2、外植體的消毒〔酒精、氯化汞〕3、接種的無菌操作〔酒精、酒精燈——灼燒〕4、無菌箱中的培育；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。〔1〕快速。采用常規(guī)的方法如分株法，一棵花卉一年普通只能消費幾株或幾十株，但用組織培育的方法那么每年可以繁衍出幾萬甚至數(shù)百萬的小植株〔2〕周年消費?；ɑ芙M織培育快速繁衍是在實驗室中進展，因條件可控，所以不受季節(jié)限制，可以全年進展延續(xù)消費。而常規(guī)的無性繁衍那么受季節(jié)限制，只能在花卉生長季節(jié)進展繁衍。〔3〕經(jīng)濟效益高。花卉組織培育快速繁衍所需求的空間小，在一個200平方米的培育室內(nèi)一年可消費試管苗上百萬株。如按每株1元計算，每年產(chǎn)值上百萬元?！?〕以組織培育繁衍的種苗與母株有著一樣的遺傳基因。所以運用這項技術可讓優(yōu)良的種類不斷地延續(xù)。組織培育與常規(guī)繁衍相比優(yōu)點眾多1、植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是A.導入其他植物細胞的基因B.將成熟的細胞核移植到去核的卵細胞中C.用適當濃度的秋水仙素處置D.脫離母體后，給予適宜的營養(yǎng)和適宜的溫度等外界條件正確答案：D2、在離體的植物器官、組織或細胞脫分化構成愈傷組織的過程中，以下哪一項條件是不需求的A.消毒滅菌 B.適宜的溫度C.充足的光照 D.適宜的養(yǎng)料和激素正確答案：C3、細胞具有全能性的緣由是A.生物體細胞具有使后代細胞構成完好個體的潛能B.生物體的每一個細胞都具有全能性C.生物體的每一個細胞都含有個體發(fā)育的全部基因D.生物體的每一個細胞都是由受精卵發(fā)育來的正確答案：C4、植物組織培育過程中的脫分化是指A.植物體的分生組織經(jīng)過細胞分裂產(chǎn)生新細胞B.未成熟的種子經(jīng)過處置培育出幼苗的過程C.植物的器官、組織或細胞，經(jīng)過離體培育產(chǎn)生愈傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程正確答案：C例1、植物組織培育構成的愈傷組織進展培育，又可以分化構成根、芽等器官，這一過程稱為：正確答案：CA、脫分化B、去分化C、再分化D、脫分化或去分化例2、以下不能作為植物組織培育的資料是：正確答案：DA、秋海棠的葉B、馬鈴薯的塊莖C、成熟的花粉D、木質部中的導管細胞21、(每空1分，共13分)右圖是植物組織培育的簡單表示。據(jù)此回答：〔1〕①表