NanoDrop-2000超微量分光光度計

1/1一、產(chǎn)品應(yīng)用ND-2000是目前國內(nèi)外實驗室中使用最為廣泛的一款微量分光光度計，其優(yōu)越的性能、準確的結(jié)果贏得了廣大用戶的好評。該產(chǎn)品可用于以下幾個方面：*紫外檢測：常規(guī)xx波長下檢測樣品吸光值；*核酸檢測：可檢測dsDNA、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度及其在260nm、280nm處的吸光值；*探針檢測：檢測熒光標記探針的吸光值，可用于去除未能標記探針的樣品；*細胞培養(yǎng)物檢測：檢測細胞培養(yǎng)物在600nm處的吸光值；*蛋白檢測：檢測普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值；*蛋白標記檢測：可檢測被BCA、Bradford或Lowry標定的蛋白樣品，自動畫出標準曲線并計算出待測蛋白質(zhì)濃度。二、產(chǎn)品簡介NanoDrop2000超微量分光光度計是NanoDrop的最新產(chǎn)品，應(yīng)用液體的表面張力特性，樣品體積只需要0.5~2ul，在檢測臺上，經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細管等耗材檢測吸收值的優(yōu)點。此產(chǎn)品設(shè)計受專利保護，并在全世界廣受歡迎，其準確度與便利性讓科學(xué)家得以更有效率進行各項研究。NanoDrop2000使用高能量氙燈（pulsedxenonflashlamp）可提供190~840nm的全光譜檢測，且不需要暖機，開機后立即使用。搭配高感度CCDarray檢測器，檢測吸收值可高達300Abs（dsDNA濃度2~15000ng/ul），大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測。待測樣品的均質(zhì)性是NanoDrop2000的最高要求，一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測前以vortexmixer震勻為最佳，若無vortexmixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔心genomicDNA可能因前述動作而斷裂，則改以55?C加熱約一分鐘，使樣品在偵測前呈現(xiàn)均勻狀態(tài)，以確保2ul具有代表性。檢測時選擇不同檢測模式，可以得到最快速的結(jié)果：●NucleicAcid?C吸收光譜、230nm,260nm,280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、、及核酸濃度?！馯V-Vis?C190~840nm間所有波長的吸收值及光譜（以1mm光徑吸收值呈現(xiàn)）?！馎280蛋白質(zhì)定量法?C280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì)，須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)（massextinctioncoefficient）方可計算?！馚CA、Bradford及Lowry?C依不同呈色劑提供不同波長吸收值結(jié)果，自動畫出標準曲線并計算Rsquare，待測蛋白質(zhì)濃度。*蛋白質(zhì)檢測模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑，因呈色劑隨時間會逐漸加深，使用前請詳閱試劑說明書并制備不同濃度的標準品，在最佳時間內(nèi)完成檢測，以得到良好的標準曲線。每個標準曲線最多可有七個標準品，每個標準品最多可做五重復(fù)。*測蛋白質(zhì)時樣品體積需使用2ul，每個樣品檢測后需以Kimwipes低塵擦拭紙（編號：34155）擦拭15~20回，以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。BCAmodifiedBradfordMini樣品核酸純BSALowryBradford種類最低濃度2ng/ul0.10mg/ml0.2mg/ml0.2mg/ml100ug/ml最高濃度15000ng/ul(dsDNA)12000ng/ul(RNA)100mg/ml8.0mg/ml4.0mg/ml8000ug/ml15ug/ml100ug/ml濃度范圍在濃度范圍2-100ng/ul在時，SD為±0.05-102ng/ulCV：±2%（在可偵測的濃度mg/ml范圍內(nèi)皆時，SD為然）±0.10mg/mlCV：±2%濃度范圍（在可偵測在的濃度范圍100-500內(nèi)皆然）ug/ml時，SD為±25ug/ml濃度范圍在15-50ug/ml時，SD為±4ug/ml濃度大于50ug/ml時，CV為±5%濃度范圍大于100ng/ul時，CV為±2%濃度大于10mg/ml時，CV為±2%濃度大于500ug/ml時，CV為±5%三、技術(shù)參數(shù)：1、波長范圍:190-840nm；2、波長精度:1nm；3、分辨率:<1.8nm(FWHMatHg253.7nm)；4、其它:1mm光程長度（可自動調(diào)整到0.05mm）；5、檢測下限：2ng/μl（dsDNA）；6、檢測上限：15000ng/μl（dsDNA）；7、吸光率精確度：0.002absorbance(1mm光程)；8、吸光率準確性：2%(at0.76at257nm)；9、吸光率范圍：0.02-300(相當于10mm光程)；10、核酸檢測周期：<5s；11、體積：14cm×20cm。四、使用方法舉例：dsDNA：在主畫面點選NucleicAcid，計算機與儀器自動完成聯(lián)機。依照DNA所溶于之液體準備該溶液（務(wù)必確認DNA溶于二次水、TEbuffer或哪一組kit的elutionbuffer）取出1.5ul點在偵測臺上，放下上臂后再按Blank。在右上方拉選SampleType選DNA-50，在SampleID位置輸入樣品名稱，將樣品混勻，取出1.5ul點在偵測臺上，放下上臂后再按Measure。五、結(jié)果整理：NanoDrop2000軟件在偵測一開始會詢問檔案欲存至何處，若未指定，則檔案會存在上一個使用者的檔案內(nèi)。六、注意事項：1.偵測后立即使用拭鏡紙（Kimwipe類）擦拭臺面。先取一張將上下臺面的液體吸走，再將此laboratorywipe吸過樣品的面反折到內(nèi)部，折迭四次后以單方向多次擦拭臺面（DNA擦5次，Protein擦20次）。2.同一滴液體只能做一次偵測，欲重復(fù)定量同一樣品，請擦掉前一滴，重新取出一滴進行偵測。3.基本上核酸樣品可使用1~2ul做測量，隨各液體體積特性之不同會有不同體積需求，原則上不超過2ul。并請使用2ulpipette避免體積不足導(dǎo)致液柱無法完整形成。唯蛋白質(zhì)樣品因呈色劑與蛋白質(zhì)本身特性，務(wù)必使用2ul進行偵測。4.當軟件跳出錯誤訊息時，請詳細閱讀并依指示進行障礙排除。最常發(fā)生的情形是在偵測過程液柱并未正確形成，軟件會出現(xiàn)以下訊息?？上扔萌庋塾^察液柱是否未完整連接上下臺面，或樣品內(nèi)有泡泡，將上臂拉起后，擦掉該滴樣品，再重新進行偵測，必要時可將樣品體積加大至2ul。5.不可使用含有HydrofluoricAcid(HF)之腐蝕樣品，其它無腐蝕性之液體皆可使用。品牌：NanoDrop2000c同一儀器整合了NanoDrop2000的所有特性以及比色皿功能高級微底座座技術(shù)雙模式——選擇比色皿或基座更寬的濃度范圍，可以測量很低或很高的濃度比色皿功能可以進行動力學(xué)（時間或時間/