畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測色譜分析新方法驗(yàn)證規(guī)范

1DBXX/XXXXX—XXXX畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測色譜分析新方法驗(yàn)證規(guī)范本文件規(guī)定了畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測色譜分析方法驗(yàn)證的術(shù)語和定義、要求、驗(yàn)證方法和驗(yàn)證結(jié)論。本文件適用于畜產(chǎn)品色譜分析檢測新方法的實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T3358.2統(tǒng)計(jì)學(xué)詞匯及符號第2部分：應(yīng)用統(tǒng)計(jì)GB/T6379.1測量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度（正確度與精密度）第1部分：總則與定義GB/T6379.6測量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度（正確度與精密度）第6部分：準(zhǔn)確度值的實(shí)際應(yīng)用GB/T32467-2015化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制術(shù)語及定義GB/T27404-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測GB31650食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中獸藥最大殘留限量GB2763-2021食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量NY/T1896-2010獸藥殘留實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范JJF1507-2015標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的選擇與應(yīng)用RB/T063-2021檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)管理和技術(shù)能力評價方法的驗(yàn)證和確認(rèn)要求3術(shù)語和定義GB/T3358.2、GB/T6379.1、GB/T32467-2015界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1方法檢出限methoddetectionlimit用特定分析方法在給定的置信度內(nèi)可從樣品中檢出待測物質(zhì)的最低濃度或最小量。3.2方法定量限methodquantitativelimit用特定分析方法在給定的置信度內(nèi)可從樣品中定量檢出待測物質(zhì)的最低濃度或最小量。3.3精密度precision在規(guī)定條件下，對同一或類似被測對象重復(fù)測量所得示值或測得的量值間的一致程度。2DBXX/XXXXX—XXXX3.4正確度trueness多次重復(fù)測量所得測得的量值的平均值與一個參考量值間的一致程度。3.5驗(yàn)證verification提供客觀證據(jù)，證明給定項(xiàng)目滿足規(guī)定的要求。4驗(yàn)證要求4.1基本要求4.1.1畜產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測色譜分析新方法（以下簡稱新方法）的驗(yàn)證應(yīng)能夠證實(shí)新方法適用于適用范圍內(nèi)畜產(chǎn)品中特定物質(zhì)的殘留檢測，應(yīng)在新方法正式使用前完成。4.1.2新方法的驗(yàn)證包括實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證試驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證試驗(yàn)兩種。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)驗(yàn)證應(yīng)由該實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的一名檢驗(yàn)員在該實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有檢測環(huán)境及條件下完成驗(yàn)證試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證應(yīng)由不少于三個實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)。4.1.3驗(yàn)證的內(nèi)容應(yīng)涵蓋該方法適用的所有樣品范圍、目標(biāo)化合物種類，還應(yīng)包含但不僅限于校準(zhǔn)曲線、線性范圍、正確度、精密度、檢出限和定量限。4.1.4新方法的驗(yàn)證應(yīng)在方法的線性工作范圍內(nèi)，對該驗(yàn)證方法使用的畜產(chǎn)品樣品范圍和所有目標(biāo)化合物進(jìn)行驗(yàn)證復(fù)核試驗(yàn)，并得到相應(yīng)的驗(yàn)證數(shù)據(jù)。4.1.5新方法驗(yàn)證所用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)遵循JJF1507-2015《標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的選擇與應(yīng)用》。4.1.6新方法驗(yàn)證所用樣品應(yīng)為經(jīng)驗(yàn)證過的空白無干擾樣品。4.1.7實(shí)驗(yàn)室應(yīng)是取得認(rèn)證認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器、設(shè)備、人員、設(shè)施等情況也應(yīng)滿足實(shí)驗(yàn)要求，并符合RB/T063-2021中5.1對人員及檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)的要求。4.2驗(yàn)證指標(biāo)要求4.2.1校準(zhǔn)曲線及工作范圍新方法如采用校準(zhǔn)曲線進(jìn)行目標(biāo)化合物的定量檢測，驗(yàn)證試驗(yàn)的校準(zhǔn)曲線及工作范圍應(yīng)達(dá)到該色譜分析方法的相關(guān)參數(shù)要求，并符合GB/T27404-2008附錄F.2規(guī)定。4.2.2正確度新方法的正確度以回收率表達(dá)，應(yīng)達(dá)到該色譜分析方法的相關(guān)參數(shù)要求，并符合NY/T1896-2010附錄D中表D.2的規(guī)定。4.2.3精密度新方法的重復(fù)性精密度和再現(xiàn)性精密度均應(yīng)達(dá)到該色譜分析方法的相關(guān)參數(shù)要求，并符合NY/T1896-2010附錄D中表D.3規(guī)定。3DBXX/XXXXX—XXXX4.2.4檢出限和定量限新方法的檢出限和定量限應(yīng)達(dá)到該色譜分析方法的相關(guān)參數(shù)要求，并符合NY/T1896-2010附錄D中表D.1規(guī)定。5驗(yàn)證方法5.1校準(zhǔn)曲線及工作范圍5.1.1應(yīng)在檢測方法規(guī)定的工作范圍內(nèi)均勻布置校準(zhǔn)曲線的各個濃度點(diǎn)，濃度范圍應(yīng)能覆蓋一個數(shù)量級，至少包含5個點(diǎn)（不包括空白）。5.1.2校準(zhǔn)曲線濃度點(diǎn)應(yīng)包括定量限濃度、日常檢測平均濃度、工作范圍最高點(diǎn)濃度等。每個濃度點(diǎn)的測定次數(shù)至少要重復(fù)2次。5.1.3應(yīng)給出校準(zhǔn)曲線的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)和工作范圍。進(jìn)行篩選方法時，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98，進(jìn)行確證方法時，相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99，測試溶液中目標(biāo)化合物組分濃度應(yīng)在校準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)。5.1.4在校準(zhǔn)曲線及工作范圍的匯總數(shù)據(jù)中，對數(shù)據(jù)處理和計(jì)算結(jié)果進(jìn)行說明，相關(guān)測試數(shù)據(jù)和匯總數(shù)據(jù)格式參見表A.1和表A.5。5.2正確度5.2.1檢測方法的正確度通過測定空白基質(zhì)中加入已知量目標(biāo)化合物組分的回收率測得，按不同的添加濃度所得回收率范圍分別表達(dá)。5.2.2方法適用的每種基質(zhì)和每種目標(biāo)化合物組分均應(yīng)做回收率試驗(yàn)，每一組同樣基質(zhì)的樣品均應(yīng)進(jìn)行每種目標(biāo)組分的三個水平添加：對于禁用物質(zhì)，回收率試驗(yàn)在方法定量限（如無定量限，則按檢出限）、兩倍定量限（如無定量限，則按檢出限）和十倍定量限（如無定量限，則按檢出限）進(jìn)行三水平試驗(yàn)；對于已制定最高殘留限量（MRL）的目標(biāo)化合物，回收率試驗(yàn)在方法定量限（如無定量限，則按檢出限）、MRL、選一合適濃度點(diǎn)進(jìn)行三水平試驗(yàn)；未制定MRL的目標(biāo)化合物，回收率試驗(yàn)在方法定量限（如無定量限，則按檢出限）、常見限量指標(biāo)、選一合適濃度點(diǎn)進(jìn)行三水平試驗(yàn)。每一水平不少于3批次，每一批次至少6個樣品。5.2.3應(yīng)給出所有正確度試驗(yàn)的測試數(shù)據(jù)和匯總數(shù)據(jù)，相關(guān)數(shù)據(jù)格式參見附錄A中表A.2和表A.6。5.2.4正確度結(jié)果應(yīng)符合4.2.2要求。5.3精密度5.3.1重復(fù)性5.3.1.1重復(fù)性驗(yàn)證是測試在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一操作者使用相同設(shè)備、按照相同的測試方法，并在短時間內(nèi)從同一被測對象取得相互獨(dú)立測試結(jié)果的一致性程度。5.3.1.2方法適用的每種基質(zhì)和每種目標(biāo)組分均應(yīng)在重復(fù)性條件下進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，每一組同樣基質(zhì)的樣品均應(yīng)進(jìn)行每種目標(biāo)組分的三個水平添加試驗(yàn)，添加水平及重復(fù)次數(shù)按5.2.2進(jìn)行。4DBXX/XXXXX—XXXX5.3.1.3應(yīng)給出所有重復(fù)性精密度驗(yàn)證試驗(yàn)的測試數(shù)據(jù)和匯總數(shù)據(jù)，并對數(shù)據(jù)處理和結(jié)果計(jì)算進(jìn)行說明。相關(guān)格式參見附錄A中表A.3和表A.7。5.3.1.4重復(fù)性驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)符合4.2.3相關(guān)要求。5.3.2再現(xiàn)性5.3.2.1再現(xiàn)性驗(yàn)證是測試在不同實(shí)驗(yàn)室，由不同操作者按相同的測試方法，從同一被測對象取得相對獨(dú)立的測試結(jié)果的一致性程度。5.3.2.2試驗(yàn)應(yīng)在不同實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室個數(shù)不少于3個（不包括標(biāo)準(zhǔn)起草單位），應(yīng)選擇通過資質(zhì)認(rèn)定的實(shí)驗(yàn)室。5.3.2.3方法適用的每種基質(zhì)和每種目標(biāo)組分均應(yīng)在再現(xiàn)性條件下進(jìn)行再現(xiàn)性試驗(yàn)，每一組同樣基質(zhì)的樣品均應(yīng)進(jìn)行每種目標(biāo)組分的三水平添加試驗(yàn)，添加水平和重復(fù)次數(shù)按5.2.2進(jìn)行。5.3.2.4應(yīng)給出所有再現(xiàn)性精密度驗(yàn)證試驗(yàn)的測試數(shù)據(jù)和匯總數(shù)據(jù)，并對數(shù)據(jù)處理和結(jié)果計(jì)算進(jìn)行說明。相關(guān)格式參見附錄A中表A.3和表A.7。5.3.2.5再現(xiàn)性驗(yàn)證結(jié)果應(yīng)符合4.2.3相關(guān)要求。5.4檢出限和定量限5.4.1應(yīng)結(jié)合檢測方法的特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備水平制定檢出限和定量限。方法包括但不限于空白標(biāo)準(zhǔn)偏差的倍數(shù)、信噪比法、逐步稀釋法、儀器靈敏度法、方法分辨率法、檢測能力計(jì)算法等。應(yīng)選擇最佳方法表示該方法的檢出限。對于能夠顯示基線噪音的儀器分析方法，方法檢測限應(yīng)滿足信噪比大于等于3:1，方法定量限應(yīng)滿足信噪比大于等于10:1。5.4.2應(yīng)驗(yàn)證給出的檢出限和定量限水平上，對每一組同樣基質(zhì)的樣品進(jìn)行每種目標(biāo)組分的標(biāo)準(zhǔn)添加試驗(yàn)，具體參照5.2.2進(jìn)行。5.4.3使用空白標(biāo)準(zhǔn)偏差倍數(shù)法計(jì)算出檢出限和定量限的測定，數(shù)據(jù)格式參見附錄A中表A.4，數(shù)據(jù)匯總見附錄A中表A.8。5.4.4方法檢出限及定量限應(yīng)滿足4.2.4的要求，方法定量限驗(yàn)證的正確度和精密度應(yīng)滿足4.2.2和4.2.3的要求。6驗(yàn)證結(jié)論6.1應(yīng)說明驗(yàn)證試驗(yàn)是否符合第5章要求。6.2應(yīng)說明驗(yàn)證數(shù)據(jù)異常值的解釋、更正或剔除情況及理由。6.3應(yīng)說明方法各項(xiàng)驗(yàn)證指標(biāo)的最終結(jié)果。6.4應(yīng)依據(jù)第4章的驗(yàn)證要求對各項(xiàng)驗(yàn)證結(jié)果給出符合性評估結(jié)論。6.5應(yīng)說明驗(yàn)證方法的檢出限、定量限和線性范圍是否符合國家規(guī)定。6.6驗(yàn)證過程涉及方法的特殊性指標(biāo)（包括但不僅限于特異性、耐用性、穩(wěn)定性等指標(biāo)），應(yīng)依據(jù)相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)要求，說明驗(yàn)證過程、計(jì)算結(jié)果、驗(yàn)證結(jié)果及符合性評估結(jié)論。5DBXX/XXXXX—XXXX6.7如果驗(yàn)證各項(xiàng)指標(biāo)均符合本標(biāo)準(zhǔn)6.1-6.6要求，則方法評估為適用，并依據(jù)附錄A中驗(yàn)證內(nèi)容形成驗(yàn)證報(bào)告。如有不符合本標(biāo)準(zhǔn)6.1-6.6要求，則方法評估為不適用，并提出修改意見和建議，重新進(jìn)行新方法驗(yàn)證試驗(yàn)并對結(jié)果進(jìn)行重新評估。6.8如果實(shí)驗(yàn)室出于提高檢測性能與效率的需要，對標(biāo)準(zhǔn)方法或官方方法中規(guī)定的儀器操作條件進(jìn)行調(diào)整，但不能超過相關(guān)規(guī)定，如有超過，則視為方法變動，不適用于本標(biāo)準(zhǔn)。具體調(diào)整范圍參見GB/T32465-2015《化學(xué)分析方法驗(yàn)證確認(rèn)和內(nèi)部質(zhì)量控制要求》附錄A《色譜分析領(lǐng)域方法調(diào)整準(zhǔn)則》。6.9本標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布實(shí)施后，任何單位和個人如有問題和意見建議，均可以通過來電和來函等方式進(jìn)行反饋，我們將及時答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實(shí)際情況依法進(jìn)行評估及復(fù)審。歸口管理部門通訊地址：遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳(沈陽市和平區(qū)太原北街2號)，聯(lián)系電話標(biāo)準(zhǔn)起草單位通訊地址：遼寧省農(nóng)產(chǎn)品及獸藥飼料產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測院(沈陽市沈河區(qū)小南街281號)，聯(lián)系電話024－24194916。6DBXX/XXXXX—XXXX方法驗(yàn)證報(bào)告內(nèi)容A.1驗(yàn)證報(bào)告內(nèi)容驗(yàn)證報(bào)告內(nèi)容應(yīng)包括但不僅限于參加驗(yàn)證試驗(yàn)的人員情況、實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)試劑、實(shí)驗(yàn)過程、驗(yàn)證指標(biāo)、驗(yàn)證原始數(shù)據(jù)、驗(yàn)證數(shù)據(jù)匯總整理、驗(yàn)證數(shù)據(jù)異常值的處理、驗(yàn)證數(shù)據(jù)可接受性檢驗(yàn)、各項(xiàng)驗(yàn)證指標(biāo)的計(jì)算、評估及驗(yàn)證結(jié)論等。并由技術(shù)負(fù)責(zé)人簽發(fā)，具體數(shù)據(jù)如下：A.2驗(yàn)證數(shù)據(jù)、處理和結(jié)果A.2.1原始測試數(shù)據(jù)A.2.1.1校準(zhǔn)曲線及工作范圍測試數(shù)據(jù)見表A.1。表A.1校準(zhǔn)曲線及工作范圍測試數(shù)據(jù)序號標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（單位）x響應(yīng)值y目標(biāo)組分名稱123456線性回歸方程y=a+bx工作范圍（單位）相關(guān)系數(shù)r注：x-目標(biāo)組份標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（橫坐標(biāo)）y-響應(yīng)值或峰面積（縱坐標(biāo)）a-y軸上的截距b-斜率A.2.1.2方法正確度測試數(shù)據(jù)見表A.2表A.2方法正確度測試數(shù)據(jù)平行樣品編號試樣名稱（單位）加標(biāo)量1加標(biāo)量2加標(biāo)量3回收量測試結(jié)果y（回收率，%）123456加標(biāo)回收率平均值7DBXX/XXXXX—XXXX標(biāo)準(zhǔn)偏差S相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD注1：y為樣品回收率，為（測定值-空白值）/加標(biāo)值A(chǔ).2.1.3方法精密度測試數(shù)據(jù)見表A.3表A.3精密度測試數(shù)據(jù)平行樣品編號試樣名稱加標(biāo)量1加標(biāo)量2加標(biāo)量3123456標(biāo)準(zhǔn)偏差S相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD注：x為樣品測試結(jié)果，為測定值-空白值A(chǔ).2.1.4方法檢出限和定量限測試數(shù)據(jù)見表A.4表A.4方法檢出限和定量限測試數(shù)據(jù)樣品編號試樣名稱檢出限濃度定量限濃度測定結(jié)果x123456平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差S相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD檢出限定量限注：x為樣品測試結(jié)果，為測定值-空白值A(chǔ).2.2驗(yàn)證數(shù)據(jù)匯總、處理和結(jié)果A.2.2.1校準(zhǔn)曲線及工作范圍匯總數(shù)據(jù)、數(shù)據(jù)處理及結(jié)果見表A.58DBXX/XXXXX—XXXX表A.5校準(zhǔn)曲線及工作范圍匯總數(shù)據(jù)實(shí)驗(yàn)室號目標(biāo)組份名稱線性回歸方程y=a+bx工作范圍（單位）相關(guān)系數(shù)r1234注：x-目標(biāo)組份標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（橫坐標(biāo)）y-響應(yīng)值或峰面積（縱坐標(biāo)）a-y軸上的截距b-斜率數(shù)據(jù)處理及結(jié)果：A.2.2.2方法正確度匯總數(shù)據(jù)、數(shù)據(jù)處理及結(jié)果見表A.6表A.6方法正確度匯總數(shù)據(jù)實(shí)驗(yàn)室編號試樣名稱（單位）加標(biāo)量1加標(biāo)量2加標(biāo)量3加標(biāo)量1的回收率yi加標(biāo)量2的回收率yi加標(biāo)量3的回收率yi1234相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RS