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實(shí)驗(yàn)七、酵母菌的形態(tài)觀察
及死活細(xì)胞的鑒定實(shí)驗(yàn)的目的要求觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式;學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法;掌握酵母菌的一般形態(tài)特征及其與細(xì)菌的區(qū)別。酵母菌的形態(tài)、大小、結(jié)構(gòu)酵母菌是單細(xì)胞真菌,并非系統(tǒng)演化分類(lèi)的單元。酵母菌細(xì)胞的形態(tài)通常為圓形、卵圓形或橢圓形。也有特殊形態(tài),如檸檬形、三角形、藕節(jié)狀、臘腸形,假菌絲等。比細(xì)菌的單細(xì)胞個(gè)體要大得多,一般為1-5微米×5-20微米。酵母菌無(wú)鞭毛,不能游動(dòng)。酵母菌具有典型的真核細(xì)胞結(jié)構(gòu),有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、液泡、線粒體等,有的還具有微體。死活細(xì)胞鑒別原理美藍(lán)(氧化型)藍(lán)色美藍(lán)(還原型)無(wú)色酵母活細(xì)胞新陳代謝還原能力美藍(lán)對(duì)細(xì)胞是無(wú)毒的。酵母菌的繁殖方式無(wú)性繁殖有性繁殖無(wú)性孢子(節(jié)孢子、擲孢子、厚垣孢子、芽生孢子)芽殖子囊孢子裂殖酵母菌的繁殖方式有人把只進(jìn)行無(wú)性繁殖的酵母菌稱(chēng)作"假酵母",而把具有有性繁殖的酵母菌稱(chēng)作"真酵母"。
酵母菌的圖片母細(xì)胞芽細(xì)胞芽痕實(shí)驗(yàn)材料菌種:釀酒酵母試劑:0.05%和0.2%的呂氏堿性美藍(lán)染色液革蘭氏染色用碘液。儀器和用具:載玻片蓋玻片濾紙顯微鏡鏡頭紙方法美藍(lán)浸片的觀察水-碘液浸片的觀察(細(xì)胞內(nèi)的貯藏物質(zhì)肝糖顆粒被染成深紅色
)注意:細(xì)胞個(gè)體大,涂片的方法有可能損傷細(xì)胞。美藍(lán)浸片的觀察在載玻片中央加一滴呂氏堿性美藍(lán)染色液,用接種環(huán)挑取少量酵母菌苔,混合均勻;用鑷子取一塊蓋玻片,先將一邊與菌液接觸,然后慢慢將蓋玻片放下使其蓋在菌液上;將制片放置約3分鐘,先低倍鏡后高倍鏡觀察酵母形態(tài)和出芽情況,并根據(jù)顏色區(qū)別死活細(xì)胞。染色30分鐘后再次觀察,注意死活細(xì)胞數(shù)量的變化;用其它濃度的呂氏堿性美藍(lán)染色液重復(fù)上述操作。染液過(guò)多會(huì)溢出,過(guò)少產(chǎn)生大量氣泡蓋玻片不宜平著放下在一個(gè)視野里計(jì)數(shù)死細(xì)胞和活細(xì)胞共計(jì)數(shù)5~6個(gè)視野酵母菌死亡率一般用百分?jǐn)?shù)來(lái)表示:死亡率=死細(xì)胞總數(shù)÷死活細(xì)胞總數(shù)×100%水-碘液浸片的觀察在載玻片中央滴一滴革蘭氏染色用碘液,在其上加3滴水,用接種環(huán)挑取少量酵母菌苔,混合均勻;用鑷子取一塊蓋玻片,先將一邊與菌液接觸,然后慢慢將蓋玻
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