耐缺氧檢驗方法_第1頁
耐缺氧檢驗方法_第2頁
耐缺氧檢驗方法_第3頁
耐缺氧檢驗方法_第4頁
耐缺氧檢驗方法_第5頁
全文預(yù)覽已結(jié)束

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

八、耐缺氧檢驗方法1常壓耐缺氧實驗1.1原理缺氧對機體是一種緊張性刺激,影響機體各種代謝,特別是影響機體的氧化供能,最終會導致機體的心、腦等主要器官缺氧供能不足而死亡。1.2材料250mL磨口瓶、秒表、凡士林、鈉石灰(或等量氫氧化鈉和碳酸鈣)。1.3實驗動物推薦用近交系成年小鼠,單一性別,18-22g,每組10-15只。1.4劑量分組及受試樣品給予時間實驗設(shè)三個劑量組和一個陰性對照組,以人體推薦量的10倍為其中的一個劑量組,另設(shè)二個劑量組,必要時設(shè)陽性對照組。受試樣品給予時間30天,必要時可延長至45天。1.5實驗步驟各劑量組經(jīng)口連續(xù)給予不同濃度受試樣品,對照組給予同等容量溶劑,于末次灌胃后1小時,將各組小鼠分別放入盛有5g鈉石灰的250mL磨口瓶內(nèi)(每瓶1只用凡士林封瓶口,蓋嚴,使之不漏氣,立即計時,以呼吸停止為指標,觀察小鼠因缺氧而死亡的時間。1.6統(tǒng)計方法及結(jié)果判定缺氧時間為計量數(shù)據(jù),采用方差分析,但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗,方差齊,計算F值,F(xiàn)值<F0.05,結(jié)論:各組均數(shù)間差異無顯著性;F值≥F0.05,P≤0.05,用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計;對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊要求后,用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計;若變量轉(zhuǎn)換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的,改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。受試樣品組與對照組比較,存活時間延長,并具有統(tǒng)計學意義,則判定該實驗結(jié)果陽性。1.7注意事項:1.7.1每個磨口瓶內(nèi)最好只放1只小鼠,以防互相干擾影響耐缺氧能力的測定。1.7.2磨口瓶一定要密閉封嚴,以防漏氣,否則會影響實驗結(jié)果。1.7.3磨口瓶必須等容量(誤差1mL實驗前先用水加以校正。1.7.4每批實驗動物的體重應(yīng)盡量保持一致。2亞硝酸鈉中毒存活實驗2.1原理亞硝酸鈉使正常二價鐵血紅蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)槿齼r鐵血紅蛋白,破壞血紅蛋白攜氧能力,造成組織缺氧死亡。2.2材料亞硝酸鈉、秒表、1mL注射器2.3實驗動物推薦用近交系成年小鼠,單一性別,18-20g,每組10-15只。2.4劑量分組2.5實驗步驟各劑量組經(jīng)口連續(xù)給予不同濃度受試樣品,對照組給予同等容量溶劑,于末次灌胃后1小時,各組動物按200-240mg/kgBW劑量腹腔注射亞硝酸鈉(注射量為0.1mL/10g立即計時,記錄動物存活時間。2.6統(tǒng)計方法及結(jié)果判定存活時間為計量數(shù)據(jù),采用方差分析,但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗,方差齊,計算F值,F(xiàn)值<F0.05,結(jié)論:各組均數(shù)間差異無顯著性;F值≥F0.05,P≤0.05,用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計;對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊要求后,用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計;若變量轉(zhuǎn)換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的,改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。受試樣品組與對照組比較,存活時間延長,并具有統(tǒng)計學意義,則判定該實驗結(jié)果陽性。3急性腦缺血性缺氧實驗3.1原理動物斷頭后,由于腦供血終止,在短時間內(nèi)腦中原有的血液和營養(yǎng)物質(zhì)尚能使腦功能維持短暫時間,顯示出有規(guī)律地張口喘氣,以喘氣時間為指標,可觀察受試樣品對腦缺血性缺氧的保護作用,凡能使腦耗氧降低的受試樣品,均能延長動物喘氣時間。3.2材料剪刀、秒表3.3實驗動物3.4劑量分組3.5實驗步驟各劑量組經(jīng)口連續(xù)給予不同濃度受試樣品,對照組給予同等容量溶劑,于末次灌胃后1小時,各組動物自頸部逐只斷頭,立即按秒表記錄小鼠斷頭后至張口喘氣停止時間。3.6統(tǒng)計方法及結(jié)果判定喘氣停止時間為計量數(shù)據(jù),采用方差分析,但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗,方差齊,計算F值,F(xiàn)值<F0.05,結(jié)論:各組均數(shù)間差異無顯著性;F值≥F0.05,P≤0.05,用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計;對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊要求后,用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計;若變量轉(zhuǎn)換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的,改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。受試樣品組與對照組比較,喘氣時間延長,并具有統(tǒng)計學意義,則判定該實驗結(jié)果陽性。3.7結(jié)果判定常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗、急性腦缺血性缺氧實驗三項實驗中任二項實驗結(jié)果陽性,可判定該受試樣品具有耐缺氧的

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論