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某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng),因此可以根據(jù)顏色的變化確定某些化學(xué)成分或結(jié)構(gòu)的存在。下面對(duì)“分子與細(xì)胞”模塊中涉及顏色反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行歸納,并列舉高考真題進(jìn)行分析,以提升同學(xué)們的實(shí)驗(yàn)技能和生物科學(xué)素養(yǎng)。一、顏色反應(yīng)歸納及拓展待鑒定物使用試劑顏色反應(yīng)待鑒定物使用試劑顏色反應(yīng)淀粉碘藍(lán)色DNA甲基綠綠色還原糖斐林試劑(班氏)磚紅色沉淀RNA吡羅紅紅色脂肪蘇丹Ⅲ蘇丹Ⅳ橘黃色紅色CO2澄清Ca(OH)2溴麝香草汾藍(lán)水溶液變渾濁藍(lán)變綠再變黃蛋白質(zhì)雙縮脲紫色酒精酸性重鉻酸鉀溶液灰綠色線粒體健那綠藍(lán)綠色染色體堿性染料深色知識(shí)拓展:
(1)碘應(yīng)是單質(zhì)成分,不是離子成分。若用碘來(lái)檢測(cè)葉片光合作用產(chǎn)生的淀粉,則需要先對(duì)葉片進(jìn)行脫色處理。
(2)斐林試劑和雙縮脲試劑均由NaOH溶液和Cu2SO4溶液組成,但兩者NaOH溶液的濃度不同,并且兩者的使用方法也不同。如斐林試劑甲液和乙液要等量混合均勻后使用,即現(xiàn)用現(xiàn)配,而且要水浴50-60℃加熱,而雙縮脲試劑在使用時(shí),先加甲液后再加乙液,加的量不同(甲液1mL,乙液4滴),而且不需要加熱。
(3)蛋白質(zhì)的鑒定是在堿性環(huán)境下Cu2+與蛋白質(zhì)的肽鍵結(jié)合成特定化合物的紫色反應(yīng)。而還原糖的鑒定是新制的的Cu(OH)2與還原糖的醛基反應(yīng),生成磚紅色的Cu2O沉淀。
(4)健那綠染液是專(zhuān)一性染線粒體的活細(xì)胞染料??墒够罴?xì)胞中的線粒體染成藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色。
(5)觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布時(shí)用的是甲基綠和吡羅紅混合染色劑(即吡羅紅甲基綠染色劑),而不是單獨(dú)染色,應(yīng)該注意的是該試劑應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。
(6)根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變黃的時(shí)間長(zhǎng)短,可以定量檢測(cè)酵母菌培養(yǎng)液中CO2的產(chǎn)生情況。
(7)染色體(染色質(zhì))容易被堿性染料龍膽紫溶液染成深紫色,用高倍顯微鏡可以觀察細(xì)胞的有絲分裂過(guò)程中染色體的行為。另外,脂肪的鑒定和細(xì)胞中線粒體的觀察,也需要染色后,再借助顯微鏡觀察。
(8)龍膽紫和醋酸洋紅均為堿性染料,染色體被龍膽紫染成紫色,而被醋酸洋紅染成紅色。二、高考真題賞析
例1(2012·山東卷)某小組進(jìn)行觀察洋蔥根尖分生組織細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn),下列關(guān)于該實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是()
A.鹽酸和酒精混合液主要起固定作用
B.堿性染料吡羅紅(派洛寧)可用于染色體染色
C.觀察到分裂末期細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞板向四周擴(kuò)展形成新的細(xì)胞壁
D.細(xì)胞內(nèi)染色體的存在狀態(tài)可作為判斷有絲分裂各時(shí)期的依據(jù)
解析:觀察洋蔥根尖分生組織細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn)中鹽酸和酒精混合液的主要作用是解離,故A錯(cuò);吡羅紅是用來(lái)染RNA的,故B錯(cuò);觀察洋蔥根尖分生組織細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn)中觀察到的細(xì)胞是死細(xì)胞,不可能觀察到擴(kuò)展的過(guò)程,故C錯(cuò);根據(jù)染色體的形態(tài),可判斷細(xì)胞所處的時(shí)期,故D對(duì)。答案:D例2(2012·安徽卷)某同學(xué)以新鮮洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮為材料,經(jīng)不同處理和染色劑染色,用高倍顯微鏡觀察。下列描述正確的是()A.經(jīng)吡羅紅甲基綠染色,可觀察到紅色的細(xì)胞核B.經(jīng)吡羅紅甲基綠染色,可觀察到綠色的細(xì)胞質(zhì)C.經(jīng)健那綠染色,可觀察到藍(lán)綠色顆粒狀的線粒體D.經(jīng)蘇丹Ⅲ染色,可觀察到橘黃色顆粒狀的蛋白質(zhì)解析:甲基綠能將DNA染成綠色,吡羅紅能將RNA染成紅色,DNA主要分布在細(xì)胞核中,RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中,A、B項(xiàng)錯(cuò)誤;健那綠可將線粒體染成藍(lán)綠色,C項(xiàng)正確;蘇丹Ⅲ可以用來(lái)鑒定脂肪,不能用來(lái)鑒定蛋白質(zhì),D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案:C
例3(2012·廣東卷)分析下表,可推測(cè)()溶液雙縮脲試劑碘液斐林試劑甲+--乙-++-甲、乙混合+++
注:“+”顯色,“++”顯色更深;“-”不顯色。
A.甲溶液含有淀粉酶
B.乙溶液含有還原糖
C.混合溶液不含淀粉
D.混合溶液含有淀粉酶
解析:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的某些有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。雙縮脲試劑、碘液、斐林試劑分別檢測(cè)蛋白質(zhì)、淀粉和還原性糖。據(jù)表可以推測(cè),甲與雙縮脲試劑發(fā)生顯色反應(yīng),含有蛋白質(zhì),但不能確定是否為淀粉酶,A錯(cuò)誤。乙遇碘液變色,含有淀粉,B錯(cuò)誤?;旌先芤号c碘液顯色,說(shuō)明含有淀粉,C錯(cuò)誤。甲和乙混合能夠產(chǎn)生還原性糖,證明甲中含有淀粉酶,將淀粉分解產(chǎn)生還原性糖,D正確。
答案:D
鞏固練習(xí)1(2011·新課標(biāo)卷)下表是根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,所需選用的試劑與預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果正確的是(
)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康臋z測(cè)試劑預(yù)期顯色結(jié)果A觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂醋酸洋紅染色體被染成紫紅色B檢測(cè)植物組織中的脂肪雙縮脲試劑脂肪顆粒被染成紅色C檢測(cè)植物組織中的葡萄糖甲基綠葡萄糖與甲基綠作用,生成綠色沉淀D觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布斐林試劑吡羅紅斐林試劑將DNA染成綠色,吡羅紅將RNA染成紅色
解析:脂肪用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液鑒定,分別被染成橘黃色和紅色;葡萄糖是還原糖,應(yīng)該用斐林試劑或班氏試劑鑒定,生成磚紅色沉淀;觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布,要用甲基綠和吡羅紅混合染色劑,甲基綠將DNA染成綠色,吡羅紅將RNA染成紅色
答案:A
2(2011·山東卷)只有在保持細(xì)胞活性的條件下,才能顯示細(xì)胞中某物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)是(
)
A.蘇丹Ⅲ染色體觀察花生種子子葉細(xì)胞中的脂肪
B.龍膽紫染色觀察洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞的有絲分裂
C.健那綠(詹納斯綠B)染色觀察動(dòng)物細(xì)胞的線粒體
D.甲基綠、派洛寧(呲羅紅)染色觀察動(dòng)物細(xì)胞中的DNA和RNA
答案:A
解析:健那綠染液是專(zhuān)一性染線粒體的活細(xì)胞染料,可使活細(xì)胞中的線粒體染成藍(lán)綠色;龍膽紫染色前,解離液已經(jīng)將細(xì)胞殺死;甲基綠、派洛寧(呲羅紅)染色前,用到鹽酸,已經(jīng)殺死細(xì)胞;蘇丹Ⅲ染色時(shí),花生種子子葉細(xì)胞已經(jīng)死亡,染色劑才能進(jìn)入細(xì)胞。
3(2011·福建卷)回答下列Ⅰ、Ⅱ題
Ⅱ.使用染色劑染色是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的方法,某同學(xué)對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)做了如下歸納:實(shí)驗(yàn)觀察對(duì)象染色劑實(shí)驗(yàn)結(jié)果①花生子葉細(xì)胞的脂肪顆粒蘇丹Ⅲ脂肪顆粒被染成橘黃色②人口腔上皮細(xì)胞中的DNA和RNA分布毗羅紅甲基綠細(xì)胞內(nèi)染成綠色的面積顯著大于染成紅色的面積③人口腔上皮細(xì)胞中的線粒體健那綠線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色④洋蔥根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂龍膽紫間期細(xì)胞不著色,分裂期細(xì)胞染色體著色
(1)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果的歸納,正確的有_______(實(shí)驗(yàn)序號(hào))。
(2)實(shí)驗(yàn)②和實(shí)驗(yàn)④在染色之前,都使用了一定濃度的鹽酸處理。其中,實(shí)驗(yàn)②用鹽酸可改變______通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞;實(shí)驗(yàn)④用鹽酸與酒精混合,對(duì)材料進(jìn)行解離。在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)操作中,都要注意鹽酸濃度,處理材料時(shí)的溫度和______。
(3)健那綠使線粒體著色與線粒體內(nèi)膜的酶系統(tǒng)有關(guān)。線粒體內(nèi)膜上的酶主要催化有氧呼吸的第______階反應(yīng),該反應(yīng)變化是____________。
解析:該題對(duì)高中教材有關(guān)實(shí)驗(yàn)的鑒定試劑和檢測(cè)方法進(jìn)行了綜合考查。DNA主要分布在細(xì)胞核內(nèi),而RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中,因此應(yīng)該是細(xì)胞內(nèi)染成綠色的面積顯著小于染成紅色的面積。間期細(xì)胞中的染色質(zhì)進(jìn)入分裂期時(shí)轉(zhuǎn)變?yōu)槿旧w,染色體和染色質(zhì)在本質(zhì)上是同一種物質(zhì),
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