新型冠狀病毒核酸樣本采集及管理

新型冠狀病毒核酸樣本采集及管理采集對象新型冠狀病毒肺炎疑似病例和聚集性病例需要進(jìn)行新型冠狀病毒感染診斷或鑒別診斷者需要進(jìn)一步篩查檢測的環(huán)境或生物材料123標(biāo)本采集要求防護(hù)裝備一次性工作帽、護(hù)目鏡或防護(hù)面屏、N95醫(yī)用防護(hù)口罩、醫(yī)用一次性防護(hù)服、防水防滲漏隔離衣、雙層乳膠手套、一次性防水靴套。1.采集人員應(yīng)經(jīng)過生物安全培訓(xùn)且考核合格，具備相應(yīng)的實驗技能，采集時著PPE；2.住院病例的標(biāo)本由所在醫(yī)院醫(yī)護(hù)人員采集。3.密切接觸者標(biāo)本由當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)采集。4.根據(jù)實驗室檢測工作的需要，可結(jié)合病程及研究需求多次采樣。如果接觸了患者血液、體液、分泌物或排泄物，應(yīng)及時更換外層乳膠手套。標(biāo)本類型上呼吸道標(biāo)本：包括鼻咽拭子、咽拭子下呼吸道標(biāo)本：深咳痰液、肺泡灌洗液、支氣管灌洗液、呼吸道吸取物便標(biāo)本：留取糞便標(biāo)本約10克（花生大小），如果不便于留取便標(biāo)本，可采集肛拭子。全血標(biāo)本：發(fā)病后7天內(nèi)采集，EDTA真空釆血管血清標(biāo)本：急性期（發(fā)病后7天內(nèi)）、恢復(fù)期（發(fā)病后第3～4周）雙份血清。無抗凝劑的真空釆血管。血清標(biāo)本主要用于抗體的測定，不進(jìn)行核酸檢測（核酸檢出率8-15%）。尿標(biāo)本：中段晨尿采樣流程標(biāo)本采集前，采樣人員應(yīng)當(dāng)對受檢者身份信息進(jìn)行核對并在公共區(qū)域以信息公告形式告知核酸檢測報告發(fā)放時限和發(fā)放方式。每個標(biāo)本應(yīng)當(dāng)至少記錄以下信息：1.受檢者（患者）姓名、身份證號、居住地址、聯(lián)系方式；2.采樣單位名稱、標(biāo)本編號，標(biāo)本采集的日期、時間、采集部位等。標(biāo)本采集鼻咽拭子

采樣人員站于被采樣人員側(cè)面，一手輕扶被采集人員的頭部，一手執(zhí)拭子，拭子貼鼻孔進(jìn)入，沿下鼻道的底部向后緩緩深入，由于鼻道呈弧形，不可用力過猛，以免發(fā)生外傷出血。待拭子頂端到達(dá)鼻咽腔后壁時，輕輕旋轉(zhuǎn)一周（如遇反射性咳嗽，應(yīng)停留片刻），然后緩緩取出拭子，將拭子頭浸入含2～3ml病毒保存液（也可使用等滲鹽溶液、組織培養(yǎng)液或磷酸鹽緩沖液）的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。標(biāo)本采集標(biāo)本采集2．咽拭子被采集人員頭部微仰，嘴張大，并發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，將拭子越過舌根，在被采集者兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，將拭子頭浸入含2～3ml病毒保存液（也可使用等滲鹽溶液、組織培養(yǎng)液或磷酸鹽緩沖液）的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。咽拭子也可與鼻咽拭子放置于同一管中。禁止將拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起過敏。標(biāo)本采集混檢標(biāo)本的采集和檢測1.采樣方法。前述進(jìn)行樣本采集。

2.樣本混合。將采集的數(shù)個樣本（原則上不超過5個）各取200ul進(jìn)行充分混合，形成混合待檢樣本。

3.混檢樣本的結(jié)果判斷與重測。檢測結(jié)果先按照各檢測試劑盒使用說明書的要求，對被檢測基因位點逐一判定，出現(xiàn)任一位點陽性或能測出Ct值的混合樣本，均作為重測對象，按照常規(guī)方法進(jìn)行單樣本核酸檢測。關(guān)于印發(fā)醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行）的通知聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制醫(yī)療發(fā)〔2020〕271號混檢標(biāo)本的采集和檢測市衛(wèi)生健康委關(guān)于印發(fā)《新型冠狀病毒核酸混合檢測樣本采集、處理及檢測技術(shù)指南（試行）的通知》（渝衛(wèi)發(fā)〔2020〕46號）文件混檢標(biāo)本的采集和檢測市衛(wèi)生健康委關(guān)于印發(fā)《新型冠狀病毒核酸混合檢測樣本采集、處理及檢測技術(shù)指南（試行）的通知》（渝衛(wèi)發(fā)〔2020〕46號）文件標(biāo)本采集3．鼻咽抽取物或呼吸道抽取物用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。將收集器頭部插入鼻腔或氣管，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采樣液沖洗收集器1次（亦可用小兒導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來替代收集器）。

標(biāo)本采集4．深咳痰液要求病人深咳后，將咳出的痰液收集于含3ml采樣液的50ml螺口塑料管中。如果痰液未收集于采樣液中，可在檢測前，加入2～3ml采樣液，或加入痰液等體積的痰消化液。5．支氣管灌洗液

將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管（約30cm深處），注入5ml生理鹽水，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液沖洗收集器1次（亦可用小兒導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來替代收集）。標(biāo)本采集6．肺泡灌洗液

局部麻醉后將纖維支氣管鏡通過口或鼻經(jīng)過咽部插入右肺中葉或左肺舌段的支管，將其頂端契入支氣管分支開口，經(jīng)氣管活檢孔緩緩加入滅菌生理鹽水，每次30～50ml，總量100～250ml，不應(yīng)超過300ml。

7．糞便標(biāo)本

取1ml標(biāo)本處理液，挑取黃豆粒大小的便標(biāo)本加至管中，輕輕吹吸3-5次，室溫靜置10分鐘，以8000rpm離心5分鐘，吸取上清液進(jìn)行檢測。標(biāo)本采集8.肛拭子

用消毒拭子輕輕插入肛門3～5cm，再輕輕旋轉(zhuǎn)拔出，立即放入含有3～5ml病毒保存液的15ml外螺旋蓋采樣管中，棄去尾部，旋緊管蓋。標(biāo)本包裝標(biāo)本采集后在生物安全二級實驗室生物安全柜內(nèi)分裝；所有標(biāo)本應(yīng)放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有墊圈、耐冷凍的樣本采集管里，擰緊。容器外注明樣本編號、種類、姓名及采樣日期；將密閉后的標(biāo)本放入大小合適的塑料袋內(nèi)密封，每袋裝一份標(biāo)本。標(biāo)本保存用于病毒分離和核酸檢測的標(biāo)本用于抗體檢測的標(biāo)本<24小時

4℃>24小時暫存-20℃長期保存≤-70℃3天以內(nèi)4℃長期保存≤-20℃標(biāo)本送檢和接收標(biāo)本采集后室溫放置不超過4小時，應(yīng)在2-4h內(nèi)送到實驗室。如果需要長途運(yùn)輸標(biāo)本，應(yīng)采用干冰等制冷方式進(jìn)行保存，嚴(yán)格按照相關(guān)規(guī)定包裝運(yùn)輸。標(biāo)本接收人員的個人防護(hù)按采樣人員防護(hù)裝備執(zhí)行。標(biāo)本運(yùn)送人員和接收人員對標(biāo)本進(jìn)行雙簽收關(guān)于印發(fā)醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行）的通知聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制醫(yī)療發(fā)〔2020〕271號標(biāo)本送檢和接收市衛(wèi)生健康委關(guān)于印發(fā)《新型冠狀病毒核酸混合檢測樣本采集、處理及檢測技術(shù)指南（試行）的通知》（渝衛(wèi)發(fā)〔2020〕46號）文件復(fù)習(xí)醫(yī)囑核對：雙人核對醫(yī)囑，打印條形碼兩張著裝：洗手、佩戴N95口罩、帽子、雙層手套、防護(hù)服、護(hù)目鏡或面屏、腳套或筒靴，穿戴正確符合要求。評估：患者病情、意識狀態(tài)、鼻腔情況（鼻腔粘膜有無破損、出血、有無鼻中隔偏曲）、合作程度、周圍環(huán)境、問二便解釋：鼻咽拭子采集的目的、操作方法、配合要點，取得合作用物準(zhǔn)備：速干手消毒液、治療盤（盤內(nèi)盛放標(biāo)本條形碼、標(biāo)本采集管、咽拭子）、手電筒、無菌手套、生物安全袋、專用生物轉(zhuǎn)運(yùn)箱、紗布或紙巾、醫(yī)療垃圾桶、75%酒精噴壺、外科口罩一個復(fù)習(xí)查對、貼標(biāo)本條形碼（一張于標(biāo)本采集管、另一張粘貼于生物安全袋）安全、舒適1、操作者處于上風(fēng)口，避免正對患者2、查對：再次核對患者身份、查對信息是否與化驗單（或檢查單）一致3、協(xié)助被采集者取下口罩，洗手（快速手消毒法）4、拭子測量鼻孔到耳垂的距離并以手指做標(biāo)記5.1、操作者一手輕扶患者的頭部，另一手持拭子貼鼻孔進(jìn)入，沿下鼻道的底部向后緩緩深入，待拭子頂端到達(dá)鼻咽腔后壁時（作標(biāo)記的手指觸及鼻尖），輕輕旋轉(zhuǎn)一周（如遇反射性咳嗽，應(yīng)停留片刻），然后緩緩取出拭子，將拭子頭浸入病毒保存液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。5.2被采集人員頭部微仰，嘴張大，并發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，將拭子越過舌根，在被采集者兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，將拭子頭浸入病毒保存液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。咽拭子也可與鼻咽拭子放置于同一管中。6、將拭子投入病毒采集管中，沿折痕處折斷拭桿，使其完全置于管中（若需從兩個鼻孔采集，應(yīng)分別使用一個拭子）旋緊管蓋7、試管及化驗單放入生物安全袋內(nèi)密封，采集管應(yīng)直立，避免潑灑8、生物安全袋表面用75%酒精噴灑消毒9、放入專用生物轉(zhuǎn)運(yùn)箱送檢復(fù)習(xí)1、協(xié)助患者取舒適體位，佩戴口罩2、整理用物，分類處置3、按照流程正確脫防護(hù)服，防護(hù)服放入雙層黃色垃圾袋中（口述即可）4、洗手，記錄采集時間5、整體性6、操作時間7min標(biāo)本送檢