人教版生物選修1課時(shí)分層作業(yè)2-1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

課時(shí)分層作業(yè)(四)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)(建議用時(shí)：40分鐘)題組一培養(yǎng)基及無(wú)菌技術(shù)1．不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含()A．碳源、磷酸鹽和維生素B．氮源和維生素C．水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽D．碳元素、氧元素、氫元素、氮元素C[培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽，此外還應(yīng)考慮pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及O2等條件。]2．如何判斷制作的培養(yǎng)基是否滅菌徹底()A．看培養(yǎng)基是否透明B．有沒(méi)有消滅細(xì)菌菌體C．未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2天后有無(wú)菌落生長(zhǎng)D．是否消滅了微生物的芽孢、孢子C[配制好的培養(yǎng)基，是否滅菌徹底，通常在使用前在恒溫箱中保溫1～2天后檢驗(yàn)有無(wú)菌落生長(zhǎng)，若無(wú)則說(shuō)明滅菌徹底。]3．在微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，下列各項(xiàng)操作不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行的是()A．配制培養(yǎng)基 B．倒平板C．接種 D．培養(yǎng)A[配制培養(yǎng)基時(shí)不需要無(wú)菌操作，因?yàn)榕渲坪蟮呐囵B(yǎng)基需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。]4．煮沸消毒法與巴氏消毒法的主要區(qū)別是()A．溫度不同B．時(shí)間不同C．前者適用于固體消毒，后者適用于液體消毒D．沒(méi)有區(qū)別A[煮沸消毒法是指在100℃條件下煮沸5～6min，而巴氏消毒法則是在70～75℃條件下煮30min或在80℃條件下煮15min，二者的關(guān)鍵區(qū)別是溫度不同。]5．關(guān)于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制備，敘述錯(cuò)誤的是()A．操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板D．等平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過(guò)來(lái)放置A[制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，其操作順序?yàn)橛?jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板；由于牛肉膏比較黏稠，稱量時(shí)可連同稱量紙一同放入燒杯；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板；平板冷凝后，應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)放置，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。]6．下列有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述中，錯(cuò)誤的是()A．首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B．然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C．適宜條件下培養(yǎng)D．結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落D[稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)。只有在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物才能被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。故選D。]7．某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察、計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問(wèn)題：(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌的培養(yǎng)提供了________和________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是________和________。(2)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，應(yīng)該采用的方法是________。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種________作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(4)培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說(shuō)明湖水樣品中有________種細(xì)菌。一般來(lái)說(shuō)，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越________。[解析]用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般含有微生物所需要的碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等成分，碳源、氮源一般分別由糖類和蛋白質(zhì)類物質(zhì)所提供。對(duì)培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。在檢測(cè)湖水中細(xì)菌的污染情況時(shí)，應(yīng)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，才能得出可靠的結(jié)果。[答案](1)氮源碳源無(wú)機(jī)鹽水(2)高壓蒸汽滅菌法(3)恒溫培養(yǎng)箱無(wú)菌水(4)多高題組二純化大腸桿菌8．獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是()A．將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌B．接種純種細(xì)菌C．適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D．防止外來(lái)雜菌的入侵D[獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵。]9．能夠測(cè)定樣品活菌數(shù)的方法是()A．稀釋涂布平板法 B．重量法C．直接計(jì)數(shù)法 D．比濁法A[利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的情況下，將細(xì)菌個(gè)體從固體培養(yǎng)基上分離出來(lái)，并可以繁殖形成菌落，可根據(jù)菌落數(shù)測(cè)定樣品活菌數(shù)。]10．在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：eq\x(配制培養(yǎng)基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(培養(yǎng))→eq\x(觀察)請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：(1)配制培養(yǎng)基時(shí)，各成分含量確定的原則是________________________。不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進(jìn)行的是______________。(2)倒平板的適宜溫度是50℃左右，原因是_____________。待平板冷凝后，要將平板倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止____________________。(3)純化菌株時(shí)，若使用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，應(yīng)選擇的涂布工具是圖中的________；若使用平板劃線法進(jìn)行接種，應(yīng)選擇的接種工具是圖中的________。ABCD(4)劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有______________________。(5)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。[解析]培養(yǎng)基中各成分含量要根據(jù)微生物的生長(zhǎng)需要來(lái)確定。微生物生長(zhǎng)需要一定的pH，所以培養(yǎng)基裝瓶前需要調(diào)節(jié)pH。由圖可知，A為接種環(huán)，B為涂布器，C為膠頭滴管，D為接種針，故稀釋平板法應(yīng)選擇的涂布工具應(yīng)是B，平板劃線法應(yīng)選擇的接種工具是A。由題意分析可知，造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個(gè)：一是接種環(huán)灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡；二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時(shí)未從第一區(qū)域末端開始。有的大腸桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素，因此，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。[答案](1)所培養(yǎng)微生物對(duì)各營(yíng)養(yǎng)成分的需要量調(diào)整pH(2)溫度過(guò)高會(huì)燙手，過(guò)低培養(yǎng)基又會(huì)凝固皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染(3)BA(4)①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始(5)滅菌11．某研究小組從有機(jī)廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌B．轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線C．接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D．培養(yǎng)過(guò)程中每隔一周觀察一次B[培養(yǎng)基滅菌后再分裝到培養(yǎng)皿中；轉(zhuǎn)換劃線角度后要灼燒接種環(huán)，冷卻后再?gòu)纳洗蝿澗€的末端開始進(jìn)行劃線；接種后的培養(yǎng)皿必須放在恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)，一般每隔12h或24h觀察一次。]12．金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，下列敘述實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的做法錯(cuò)誤的是()A．對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理B．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉C．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉D．接種后雙手必須用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭C[金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，所以在操作時(shí)一定要做到安全防范，接種后雙手用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭，以起到殺菌的作用；對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒也可以殺滅細(xì)菌，防止污染環(huán)境；高壓蒸汽滅菌也可殺死培養(yǎng)基中的金黃色葡萄球菌；如果只對(duì)帶菌培養(yǎng)基進(jìn)行加熱，殺不盡其中的致病菌，因?yàn)榇司哪透邷啬芰軓?qiáng)，會(huì)污染環(huán)境。]13．如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5。下列操作方法正確的是()A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B．劃線操作須在火焰上進(jìn)行C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌D[本題考查平板劃線的操作方法。在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線操作是在火焰邊進(jìn)行。在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落。]14．下列關(guān)于四種生物的能源、碳源、氮源和代謝類型的描述，其中正確的一組是()項(xiàng)目硝化細(xì)菌乳酸菌酵母菌衣藻能源氧化NH3分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖類糖類CO2氮源NH3N2N2NOeq\o\al(－,3)代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型A．硝化細(xì)菌、乳酸菌B．乳酸菌、酵母菌C．酵母菌、衣藻D．硝化細(xì)菌、衣藻D[本題考查的知識(shí)有：①各種微生物的代謝類型，②微生物所需的能源、碳源和氮源的不同。解答此題時(shí)應(yīng)明確：硝化細(xì)菌、乳酸菌屬于細(xì)菌，酵母菌屬于真菌，衣藻屬于真核生物。微生物所需的能源、碳源、氮源因其同化作用類型的不同而不同。]15．下表是培養(yǎng)某微生物的培養(yǎng)基的配方，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：試劑牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂加水定容至用量5g10g5g20g1000mL(1)培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、________和無(wú)機(jī)鹽。上述培養(yǎng)基配方中能充當(dāng)碳源的成分是____________________。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行________處理。(2)在配制培養(yǎng)基時(shí)，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮________、________和滲透壓等條件。(3)在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和________；空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)________，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(4)分離純化微生物最常使用的接種方法是______________和____________。(5)在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是____________________________________。[解析](1)培養(yǎng)基中都應(yīng)含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。培養(yǎng)基配制完成后要調(diào)pH和滅菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作為有機(jī)碳源。(2)配制培養(yǎng)基時(shí)，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(3)滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，所以要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌。消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物，故操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒。紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(4)分離純化微生物常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法。(5)培養(yǎng)微生物時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。[答案](1)氮源牛肉膏和蛋白胨滅菌(2)溫度酸堿度(3)滅菌消毒變性(4)平板劃線法稀釋涂布平板法(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生不能正確辨