分子生物學(xué)試題及答案精簡(jiǎn)版

分子生物學(xué)試題及答案

一、名詞解釋

1．cDNA與cccDNA：cDNA是由mRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA；cccDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。

2．標(biāo)準(zhǔn)折疊單位：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元α－螺旋與β－折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因此又將其稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。3．CAP：環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMPreceptorprotein），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（cAMPactivatedprotein）

4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列，常是限制性酶切位點(diǎn)。

5．micRNA：互補(bǔ)干擾RNA或稱反義RNA，與mRNA序列互補(bǔ)，可抑制mRNA的翻譯。

6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。

7．模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域

8．信號(hào)肽：在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個(gè)氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。

9．弱化子：在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。

10．魔斑：當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)過程中，遇到氨基酸全面缺乏時(shí)，細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng)，停止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp與pppGpp的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子，而是影響一大批，所以稱他們是超級(jí)調(diào)控子或稱為魔斑。

11．上游啟動(dòng)子元件：是指對(duì)啟動(dòng)子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的DNA序列，-10區(qū)的TATA、-35區(qū)的TGACA及增強(qiáng)子，弱化子等。

12．DNA探針：是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA，用以檢測(cè)未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。

13．SD序列：是核糖體與mRNA結(jié)合序列，對(duì)翻譯起到調(diào)控作用。14．單克隆抗體：只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。

15．考斯質(zhì)粒：是經(jīng)過人工構(gòu)建的一種外源DNA載體，保留噬菌體兩端的COS區(qū)，與質(zhì)粒連接構(gòu)成。

16．藍(lán)-白斑篩選：含LacZ基因（編碼β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)產(chǎn)生藍(lán)色，從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后，LacZ基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。稱之為藍(lán)-白斑篩選。

17．順式作用元件：在DNA中一段特殊的堿基序列，對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用的基因元件。

18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是從DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性

19．錨定PCR：用于擴(kuò)增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分別用多聚dC和已知的序列作為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

20．融合蛋白：真核蛋白的基因與外源基因連接，同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)的生物合成(一)名詞解釋1．翻譯(translation)：以mRNA為模板，氨酰-tRNA為原料直接供體，在多種蛋白質(zhì)因子和酶的參與下，在核糖體上將mRNA分子上的核苷酸順序表達(dá)為有特定氨基酸順序的蛋白質(zhì)的過程。2．密碼子(codon)：mRNA中堿基順序與蛋白質(zhì)中氨基酸順序的對(duì)應(yīng)關(guān)系是通過密碼實(shí)現(xiàn)的，mRNA中每三個(gè)相鄰的堿基決定一個(gè)氨基酸，這三個(gè)相鄰的堿基稱為一個(gè)密碼子。3．密碼的簡(jiǎn)并性(degeneracy)：—個(gè)氨基酸具有兩個(gè)以上密碼子的現(xiàn)象。4．同義密碼子(synonymcodon)：為同—種氨基酸編碼的各個(gè)密碼子，稱為同義密碼了。5．變偶假說(wobblehypothesis)：指反密碼子的前兩個(gè)堿基(3’-端)按照標(biāo)準(zhǔn)與密碼子的前兩個(gè)堿基(5’-端)配對(duì)，而反密碼子中的第三個(gè)堿墓則有某種程度的變動(dòng)，使其有可能與幾種不同的堿基配對(duì)。6．移碼突變(frame-shiftmutation)：在mRNA中，若插入或刪去一個(gè)核苷酸，就會(huì)使讀碼發(fā)錯(cuò)誤，稱為移碼，由于移碼而造成的突變、稱移碼突變。7，同功受體(isoacceptor)：轉(zhuǎn)運(yùn)同一種氨基酸的幾種tRNA稱為同功受體。8．反密碼子(anticodon)：指tRNA反密碼子環(huán)中的三個(gè)核苷酸的序列，在蛋白質(zhì)合成過程中通過堿基配對(duì)，識(shí)別并結(jié)合到mRNA的特殊密碼上。9．多核糖體(polysome)：mRNA同時(shí)與若干個(gè)核糖體結(jié)合形成的念珠狀結(jié)構(gòu)，稱為多核糖體。核酸的生物合成(一)名詞解釋1．中心法則(centraldogma)：生物體遺傳信息流動(dòng)途徑。最初由Crick(1958)提出，經(jīng)后人的不斷補(bǔ)充和修改，現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和RNA復(fù)制等內(nèi)容。2．半保留復(fù)制(簡(jiǎn)稱復(fù)制)（semiconservativereplication)：親代雙鏈DNA以每條鏈為模板，按堿基配對(duì)原則各合成一條互補(bǔ)鏈，這樣一條親代DNA雙螺旋，形成兩條完全相同的子代DNA螺旋，子代DNA分子中都有一條合成的“新”鏈和一條來自親代的舊鏈，稱為半保留復(fù)制。3．DNA聚合酶(DNApolymerase)：指以脫氧核苷三磷酸為底物，按5’→3’方向合成DNA的一類酶，反應(yīng)條件：4種脫氧核苷三磷酸、Mg+、模板、引物。DNA聚合酶是多功能酶，除具有聚合作用外，還具有其它功能，不同DNA聚合酶所具有的功能不同。4．解旋酶(helicase)：是一類通過水解ATP提供能量，使DNA雙螺旋兩條鏈分開的酶，每解開一對(duì)堿基，水解2分子ATP。5．拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase)：是一類引起DNA拓?fù)洚悩?gòu)反應(yīng)的酶，分為兩類：類型I的酶能使DNA的一條鏈發(fā)生斷裂和再連接，反應(yīng)無(wú)需供給能量，類型Ⅱ的酶能使DNA的兩條鏈同時(shí)發(fā)生斷裂和再連接，當(dāng)它引入超螺旋時(shí)，需要由ATP供給能量。6．單鏈DNA結(jié)合蛋白(single-strand

bindingprotein,SSB)：是一類特異性和單鏈區(qū)DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)。它的功能在于穩(wěn)定DNA解開的單鏈，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈部分不被核酸酶降解。7．DNA連接酶(DNAligase)：是專門催化雙鏈DNA中缺口共價(jià)連接的酶，不能催化兩條游離的單鏈DNA鏈間形成磷酸二酯鍵。反應(yīng)需要能量。8．引物酶及引發(fā)體(primase＆primosome)：以DNA為模板，以核糖核苷酸為底物，在DNA合成中，催化形成RNA引物的酶稱為引物酶及引物體。大腸桿菌的引物酶單獨(dú)沒有活性，只有與其它蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，形成一個(gè)復(fù)合體，即引發(fā)體才有生物活性。9．復(fù)制叉(replicationfork)：復(fù)制中的DNA分子，末復(fù)制的部分是親代雙螺旋，而復(fù)制好的部分是分開的，由兩個(gè)子代雙螺旋組成，復(fù)制正在進(jìn)行的部分呈丫狀叫做復(fù)制叉。10．復(fù)制眼θ結(jié)構(gòu)：在一段DNA上，正在復(fù)制的部分形成眼狀結(jié)構(gòu)。復(fù)制眼在環(huán)狀DNA上形成的結(jié)構(gòu)與字母θ相象，所以叫θ結(jié)構(gòu)。11．前導(dǎo)鏈(1eadingstrand)：在DNA復(fù)制過程中，以親代鏈(3’→5’為模板時(shí)，子代鏈的合成(5’→3’)是連續(xù)的．這條能連續(xù)合成的鏈稱前導(dǎo)鏈。12．岡崎片段(Okazakifragment)、后隨鏈(1aggingstrand)：在DNA復(fù)制過程中，以親代鏈(5’→3’)為模板時(shí)，子代鏈的合成不能以3’→5’方向進(jìn)行，而是按5’→3’方向合成出許多小片段，因?yàn)槭菍榈热搜芯堪l(fā)現(xiàn)，因此稱岡崎片段。由許多岡崎片段連接而成的子代鏈稱為后隨鏈。13．半不連續(xù)復(fù)制(Semidiscontinuousreplication)：在DNA復(fù)制過程中，一條鏈的合成是連續(xù)的，另一條鏈的合成是不連續(xù)的，所以叫做半不連續(xù)復(fù)制。14．逆轉(zhuǎn)錄(reversetranscription)：以RNA為模板合成DNA的過程。15．逆轉(zhuǎn)錄酶(reversetranseriptase)：催化以RNA為模板合成DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程的酶。Temin(1960)首次從勞氏肉瘤病毒中發(fā)現(xiàn)。逆轉(zhuǎn)錄酶具有多種酶活性：依賴RNA的DNA聚合酶活性；依賴DNA的DNA聚合酶活性，RNA水解酶活性，DNA合成方向5’→3’。合成時(shí)需要引物與模板。16．突變(mutation)：基因組DNA順序上的任何一種改變都叫做突變。分點(diǎn)突變和結(jié)構(gòu)畸變。17．點(diǎn)突變(Pointmutation)：是指一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)被置換(replacement)，這種置換又分兩種形式：轉(zhuǎn)換(transition)一--指用一個(gè)嘌呤堿置換另一個(gè)嘌呤堿，一個(gè)嘧啶堿置換另一個(gè)嘧啶堿；顛換(transversion)一--指用嘌呤堿置換嘧啶堿或用嘧啶堿置換嘌呤堿。18．結(jié)構(gòu)畸變：基因中的缺口、或插入(insertion)或缺失(deletion)某些堿基造成移碼突變使DNA的模板鏈?zhǔn)スδ堋?9．誘變劑(mutagen)：使基因組發(fā)生突變的物理、化學(xué)、生物因素叫誘變劑。20．修復(fù)(repair)：除去DNA上的損傷，恢復(fù)DNA的正常結(jié)構(gòu)和功能是生物機(jī)體的一種保護(hù)功能。21．光裂合酶修復(fù)(又稱光復(fù)活)(photoreactivation)：可見光將光裂合酶激活，它分解DNA上由紫外線照射而形成的嘧啶二聚體，使它們恢復(fù)成兩個(gè)單獨(dú)的嘧啶堿。22．切除修復(fù)(excisionrepair)：在一系列酶的作用下，將DNA分子中受損傷部分切除，以互補(bǔ)鏈為模板，合成出空缺的部分，使DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)的過程。23．重組修復(fù)(recombinationrepair)：DNA在有損傷的情況下也可以復(fù)制，復(fù)制時(shí)子代鏈躍過損傷部位并留下缺口，通過分子間重組，從完整的另一條母鏈上將相應(yīng)的核苷酸序列片段移至子鏈缺口處，然后用再合成的多核苷酸的序列補(bǔ)上母鏈的空缺，此過程稱重組修復(fù)。24．誘導(dǎo)修復(fù)和應(yīng)急反應(yīng)(inductionrepairandSOSresponse)(SOS修復(fù))：由于DNA受到損傷或復(fù)制系統(tǒng)受到抑制所誘導(dǎo)引起的一系列復(fù)雜的應(yīng)急效應(yīng)，稱為應(yīng)急反應(yīng)。SOS反應(yīng)主要包括兩個(gè)方面：DNA損傷修復(fù)(SOS修復(fù)或稱誘導(dǎo)修復(fù))和誘變效應(yīng)。SOS修復(fù)是一種易出差錯(cuò)的修復(fù)過程，雖能修復(fù)DNA的損傷而避免死亡。但卻帶來高的變異率。25．DNA重組(recombination)：DNA重組是指在真核生物減數(shù)分裂過程中，細(xì)菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化中、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中等發(fā)生的DNA片段的交換或插入。26．基因工程(又稱基因重組技術(shù))(gene/geneticengineering)：是將外源基因經(jīng)過剪切加工，再插入到一個(gè)具有自我復(fù)制能力的載體DNA中，將新組合的DNA轉(zhuǎn)移到一個(gè)寄主細(xì)胞中，外源基因就可以隨著寄主細(xì)胞的分裂進(jìn)行繁殖，寄主細(xì)胞也借此獲得外源基因所攜帶的新特性。27．轉(zhuǎn)錄(transcription)：由依賴于DNA的RNA聚合酶催化，以DNA的一條鏈的一定區(qū)段為模板，按照堿基配對(duì)原則，合成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA鏈的過程。28．模板鏈(templatestrand)[又稱負(fù)(-)鏈，反意義鏈(antisensestrand)]：轉(zhuǎn)錄過程中用作模板的這條DNA鏈，稱模板鏈。29．非模板鏈(nontemplatestrand)[又稱正(+)鏈，編碼鏈(codingstrand)，有意義鏈(sensestrand)]：與模板鏈互補(bǔ)的那條DNA鏈，稱非模板鏈。30．不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄(asymmetrictranscription)：因?yàn)镽NA的轉(zhuǎn)錄只在DNA的任一條鏈上進(jìn)行，所以把RNA的合成叫做不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄。31．啟動(dòng)子(promoter)：DNA鏈上能指示RNA轉(zhuǎn)錄起始的DNA序列稱啟動(dòng)子。32．轉(zhuǎn)錄單位(transcriptionunit)：RNA的轉(zhuǎn)錄只在DNA的一個(gè)片段上進(jìn)行，這段DNA序列叫轉(zhuǎn)錄單位。33．內(nèi)含子(intron)：真核生物基因中，不為蛋白質(zhì)編碼的、在mRNA加工過程中消失的DNA序列，稱內(nèi)含子。34．外顯子(exon)：真核生物基因中，在mRNA上出現(xiàn)并代表蛋白質(zhì)的DNA序列，叫外顯子。35．轉(zhuǎn)錄加工(post-transcriptionalprocessing)：細(xì)菌中很多RNA分子和幾乎全部真核生物的RNA在合成后都需要不同程度的加工，才能形成成熟的RNA分子，這個(gè)過程叫轉(zhuǎn)錄后加工。36．核內(nèi)不均一RNA(hnRNA)：是真核生物細(xì)胞核內(nèi)的mRNA前體分子，分子量較大，并且不均一，含有許多內(nèi)含子。37．RNA的復(fù)制(RNAreplication)：某些病毒RNA既可以做為模板合成病毒蛋白質(zhì)又可在RNA復(fù)制酶(RNAreplicase)的催化下，以自身RNA為模板，合成互補(bǔ)的RNA新鏈，合成方向5'→3’，這一過程叫RNA復(fù)制。

二、填空

1．DNA的物理圖譜是DNA分子的（限制性內(nèi)切酶酶解）片段的排列順序。

2．RNA酶的剪切分為（自體催化）、（異體催化）兩種類型。

3．原核生物中有三種起始因子分別是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。4．蛋白質(zhì)的跨膜需要（信號(hào)肽）的引導(dǎo)，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)）。

5．啟動(dòng)子中的元件通?？梢苑譃閮煞N：（核心啟動(dòng)子元件）和（上游啟動(dòng)子元件）。

6．分子生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容主要包含（結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)）、（基因表達(dá)與調(diào)控）、（DNA重組技術(shù)）三部

7．證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是（肺炎球菌感染小鼠）、（T2噬菌體感染大腸桿菌）這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是：（生物體吸收的外源DNA改變了其遺傳潛能）。

8．hnRNA與mRNA之間的差別主要有兩點(diǎn)：（hnRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)閙RNA的過程中經(jīng)過剪接，）、

（mRNA的5′末端被加上一個(gè)m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。

9．蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點(diǎn)是（亞基對(duì)DNA的利用來說是一種經(jīng)濟(jì)的方法）、（可以減少蛋白質(zhì)合成過程中隨機(jī)的錯(cuò)誤對(duì)蛋白質(zhì)活性的影響）、（活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉）。

10．蛋白質(zhì)折疊機(jī)制首先成核理論的主要內(nèi)容包括（成核）、（結(jié)構(gòu)充實(shí)）、（最后重排）。

11．半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用；一方面（可以作為碳源供細(xì)胞生長(zhǎng)）；另一方面（它又是細(xì)胞壁的成分）。所以需要一個(gè)不依賴于cAMP—CRP的啟動(dòng)子S2進(jìn)行本底水平的永久型合成；同時(shí)需要一個(gè)依賴于cAMP—CRP的啟動(dòng)子S1對(duì)高水平合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。有G時(shí)轉(zhuǎn)錄從（S2）開始，無(wú)G時(shí)轉(zhuǎn)錄從（S1）開始12．DNA重組技術(shù)也稱為（基因克?。┗颍ǚ肿涌寺。?。最終目的是（把一個(gè)生物體中的遺傳信息DNA轉(zhuǎn)入另一個(gè)生物體）。典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包含以下幾個(gè)步驟：

①提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個(gè)新的重組DNA分子。

②將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存，這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。

③對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。

④對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。13、質(zhì)粒的復(fù)制類型有兩種：受到宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的嚴(yán)格控制的稱為（嚴(yán)緊型質(zhì)粒），不受宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的嚴(yán)格控制稱為（松弛型質(zhì)粒）。

14．PCR的反應(yīng)體系要具有以下條件：

a、被分離的目的基因兩條鏈各一端序列相互補(bǔ)的DNA引物（約20個(gè)堿基左右）。

b、具有熱穩(wěn)定性的酶如：TagDNA聚合酶。

c、dNTP

d、作為模板的目的DNA序列

15．PCR的基本反應(yīng)過程包括：（變性）、（退火）、（延伸）三個(gè)階段。

16、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本過程通常包括：

①將克隆的外源基因?qū)氲揭粋€(gè)受精卵或胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞核中；②接種后的受精卵或胚胎干細(xì)胞移植到雌性的子宮；

③完成胚胎發(fā)育，生長(zhǎng)為后代并帶有外源基因；

④利用這些能產(chǎn)生外源蛋白的動(dòng)物作為種畜，培育新的純合系。

17．雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生是由（脾B）細(xì)胞與（骨髓瘤）細(xì)胞雜交產(chǎn)生的，由于（脾細(xì)胞）可以利用次黃嘌呤，（骨細(xì)胞）提供細(xì)胞分裂功能，所以能在HAT培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。

18．隨著研究的深入第一代抗體稱為（多克隆抗體）、第二代（單克隆抗體）、第三代（基因工程抗體）。19．目前對(duì)昆蟲病毒的基因工程改造主要集中于桿狀病毒，表現(xiàn)在引入（外源毒蛋白基因）；（擾亂昆蟲正常生活周期的基因）；（對(duì)病毒基因進(jìn)行修飾）。

20．哺乳類RNA聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子中常見的元件TATA、GC、CAAT所對(duì)應(yīng)的反式作用蛋白因子分別是（TFIID）、（SP-1）和（CTF/NF1）。21．RNA聚合酶Ⅱ的基本轉(zhuǎn)錄因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他們的結(jié)合順序是：（D、A、B、E）。其中TFII-D的功能是（與TATA盒結(jié)合）。

22．與DNA結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子大多以二聚體形式起作用，轉(zhuǎn)錄因子與DNA結(jié)合的功能域常見有以下幾種（螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋）、（鋅指模體）、（堿性-亮氨酸拉鏈模體）。

23．限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是（在對(duì)稱軸5'側(cè)切割產(chǎn)生5'粘端）、（在對(duì)稱軸3'側(cè)切割產(chǎn)生3'粘端）（在對(duì)稱軸處切割產(chǎn)生平段）。

24．質(zhì)粒DNA具有三種不同的構(gòu)型分別是：（SC構(gòu)型）、（oc構(gòu)型）、（L構(gòu)型）。在電泳中最前面的是（SC構(gòu)型）。

25．外源基因表達(dá)系統(tǒng)，主要有（大腸桿菌）、（酵母）、（昆蟲）和（哺乳類細(xì)胞表）。

26．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的方法有：（逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法）、（DNA顯微注射法）、（胚胎干細(xì)胞法）。1．蛋白質(zhì)的生物合成是以__mRNA為模板，以__

氨酰-tRNA__為原料直接供體，以__核糖體__為合成楊所。2．生物界共有_64__個(gè)密碼子，其中__61_個(gè)為氨基酸編碼，起始密碼子為_AUG_；終止密碼子為_UAA_、UAG_、_UGA__。3．原核生物的起始tRNA以_tRNAf_表示，真核生物的起始tRNA以tRNAi_表示，延伸中的甲硫氨酰tRNA以_tRNAm__表示。4．植物細(xì)胞中蛋白質(zhì)生物合成可在____核糖體___、_線粒體____和__葉綠體___三種細(xì)胞器內(nèi)進(jìn)行。5．延長(zhǎng)因子T由Tu和Ts兩個(gè)亞基組成，Tu為對(duì)熱___不穩(wěn)定___蛋白質(zhì)，Ts為對(duì)熱__穩(wěn)定_蛋白質(zhì)。6．原核生物中的釋放因子有三種，其中RF-1識(shí)別終止密碼子_UAA_、_UAG__；RF-2識(shí)別_UAA_、_UGA_；真核中的釋放因子只有_RF_一種。7．氨酰-tRNA合成酶對(duì)___氨基酸__和相應(yīng)的__tRNA__有高度的選擇性。8．原核細(xì)胞的起始氨基酸是__甲酰甲硫氨酸___，起始氨酰-tRNA是___甲酰甲硫氨酰-tRNA___。9．原核細(xì)胞核糖體的__小___亞基上的___16SrRNA___協(xié)助辨認(rèn)起始密碼子。l0．每形成一個(gè)肽鍵要消耗__4_個(gè)高能磷酸鍵，但在合成起始時(shí)還需多消耗__1___個(gè)高能磷酸鍵。11．肽基轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)生物合成中的作用是催化___肽鍵__形成和_肽酰-tRNA___的水解。12．肽鏈合成終止時(shí)，__終止因子__進(jìn)人“A”位，識(shí)別出_終止密碼子_，同時(shí)終止因子使_肽基轉(zhuǎn)移酶__的催化作用轉(zhuǎn)變?yōu)開水解作用。13．原核生物的核糖體由__30S___小亞基和_50S__大亞基組成，真核生物核糖體由_40S__小亞基和__60S___大亞基組成。14.

蛋白質(zhì)中可進(jìn)行磷酸化修飾的氨基酸殘基主要為__Ser___、__Thr___、___Tyr____。(三)填空題1．Meselson-Stahl的DNA半保留復(fù)制證實(shí)試驗(yàn)中，區(qū)別不同DNA用__同位素示蹤__方法。分離不同DNA用_超速離心__方法，測(cè)定DNA含量用__紫外分光光度_方法，2．DNA聚合酶I(E．coli)的生物功能有_聚合作用___、__5’→3’外切酶作用__和_3’→5’外切酶__作用。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I，可將其分為大、小兩個(gè)片段，其中__大___片段叫Klenow片段，具有__5’→3’聚合酶作用__和__3’→5’外切酶____作用，另外一個(gè)片段具有__5’→3’外切酶__活性。3．在E．coli中，使DNA鏈延長(zhǎng)的主要聚合酶是_DNA聚合酶Ⅲ__，它由_7__亞基組成。DNA聚合酶Ⅱ主要負(fù)責(zé)DNA的_修復(fù)_作用。4．真核生物DNA聚合酶有__DNA聚合酶α_____，___DNA聚合酶β_，__DNA聚合酶γ____，__DNA聚合酶δ___。其中在DNA復(fù)制中起主要作用的是___DNA聚合酶α____和___DNA聚合酶σ__。5．解旋酶的作用是___使DNA雙螺旋打開____，反應(yīng)需要ATP_提供能量，結(jié)合在后隨鏈模板上的解旋酶，移動(dòng)方向__5’→3’____，結(jié)合在前導(dǎo)鏈的rep蛋白，移動(dòng)方向___3’→5’____。6．在DNA復(fù)制過程中，改變DNA螺旋程度的酶叫__拓?fù)洚悩?gòu)酶___。7．SSB的中文名稱___單鏈DNA結(jié)合蛋白____，功能特點(diǎn)是___使單鏈保持伸長(zhǎng)狀態(tài)____。8．DNA連接酶只能催化_雙__鏈DNA中的缺口形成3’,5’-磷酸二酯鍵，不能催化兩條游離的單鏈間形成3’,5’-磷酸二酯鍵，真核生物DNA連接酶以_ATP_作為能源，大腸桿菌則以NAD+作為能源，DNA連接酶在DNA_復(fù)制_、___修復(fù)_、_重組__中起作用。9．DNA生物合成的起始，需要一段___RNA____為引物，引物由__引物_____酶催化完成，該酶需與—些特殊___蛋白質(zhì)____結(jié)合形成___引物體____復(fù)合物才有活性。10．DNA生物合成的方向是5’→3’，岡奇片段合成方向是5’→3’。11．由逆轉(zhuǎn)錄酶所催化的核酸合成是以_RNA__為模板，以__三磷酸脫氧核苷酸(dNTP)__為底物，產(chǎn)物是__與RNA互補(bǔ)的DNA鏈__。12．DNA突變主要分為__點(diǎn)突變_____和__結(jié)構(gòu)畸變_____兩大類。13．誘變劑大致分為__物理誘變劑_____、_化學(xué)誘變劑______、__生物誘變劑_____三種類型。14．RNA生物合成中，RNA聚合酶的活性需要__DNA_____模板，原料是__ATP__、__GTP__、__UTP_、___CTP。15．大腸桿菌RNA聚合酶為多亞基酶，亞基組成α2ββ’δ_，稱為__全__酶，其中_α2ββ’__亞基組成稱為核心酶，功能__合成RNA鏈__；σ亞基的功能__σ保證RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子的特異識(shí)別。16．用于RNA生物合成的DNA模板鏈稱為_反意義鏈__或__負(fù)鏈___。17．RNA聚合酶沿DNA模板3’→5’方向移動(dòng)，RNA合成方向5’→3’___。18．真核生物RNA聚合酶共三種RNA聚合酶I、RNA聚合酶Ⅱ、RNA聚合酶Ⅲ_，它們分別催化_rRNA__、mRNA__和tRNA5SrRNA__的生物合成。19．某DNA雙螺旋中，單鏈5’…ATCGCTCGA…3’為有意義鏈，若轉(zhuǎn)錄mRNA，其中堿其排列順序?yàn)?’…__AUCGCUCGA___…3’。20；能形成DNA--RNA雜交分子的生物合成過程有__轉(zhuǎn)錄_____、___逆轉(zhuǎn)錄____。形成的分子基礎(chǔ)是__堿基互補(bǔ)配對(duì)_____。21．DNA復(fù)制中，___前導(dǎo)__鏈的合成是___連續(xù)__的，合成的方向和復(fù)制叉移動(dòng)方向相同；_后隨_鏈的合成是___不連續(xù)____的，合成的方向與復(fù)制叉方向相反。22．一條單鏈DNA(+)的堿基組成A2l％、G29％，復(fù)制后，RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物的堿基組成是_A21％、G29％、U21％、C29％_。23．RNA聚合酶中能識(shí)別DNA模板上特定起始信號(hào)序列的亞基是__因子__，該序列部位稱__啟動(dòng)子部位_。24．在細(xì)菌細(xì)胞中，獨(dú)立于染色體之外的遺傳因子叫質(zhì)粒。它是一種_環(huán)_狀雙鏈DNA，在基因工程中，它做為_基因載體_。25．hnRNA加工過程中，在mRNA上出現(xiàn)并代表蛋白質(zhì)的DNA序列叫外顯子。不在mR—NA上出現(xiàn)，不代表蛋白質(zhì)的DNA序列叫內(nèi)含子_。(四)選擇題1．蛋白質(zhì)生物合成的方向是(④)。①?gòu)腃→N端②定點(diǎn)雙向進(jìn)行③從N端、C端同時(shí)進(jìn)行④從N→C端2．不能合成蛋白質(zhì)的細(xì)胞器是(③)。①線粒體②葉綠體③高爾基體④核糖體3．真核生物的延伸因子是(④)。①EF—Tu②EF一2③EF--G④EF一14．真核生物的釋放因子是(①)。①RF②RF一1③RF一2④RF一35．能與tRNA反密碼子中的I堿基配對(duì)的是(④)。①A、G②C、U③U④U、C、A6．蛋白質(zhì)合成所需能量來自(③)。①ATP②GTP③ATP、GTP④GTP7．tRNA的作用是(②)。①將一個(gè)氨基酸連接到另一個(gè)氨基酸上②把氨基酸帶到mRNA位置上③將mRNA接到核糖體上④增加氨基酸的有效濃度8．關(guān)于核糖體的移位，敘述正確的是(③)。①空載tRNA的脫落發(fā)生在“A”位上②核糖體沿mRNA的3’→5’方向相對(duì)移動(dòng)③核糖體沿mRNA的5’→3’方向相對(duì)移動(dòng)④核糖體在mRNA上一次移動(dòng)的距離相當(dāng)于二個(gè)核苷酸的長(zhǎng)度9．在蛋白質(zhì)合成中，下列哪一步不需要消耗高能磷酸鍵(①)。①肽基轉(zhuǎn)移酶形成肽鍵②氨酰一tRNA與核糖體的“A，’位點(diǎn)結(jié)合③核糖體沿mRNA移動(dòng)④fMet—tRNAf與mRNA的起始密碼子結(jié)合以及與大、小亞基的結(jié)合10．在真核細(xì)胞中肽鏈合成的終止原因是(④)。①已達(dá)到mRNA分子的盡頭②具有特異的tRNA識(shí)別終止密碼子③終止密碼子本身具有酯酶作用，可水解肽酰與tRNA之是的酯鍵④終止密碼子被終止因子(RF)所識(shí)別11．蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是(①④⑤)。①UAA②UAU③UAC④UAG⑤UGA12．根據(jù)擺動(dòng)假說，當(dāng)tRNA反密碼子第1位堿基是I時(shí)，能夠識(shí)別哪幾種密碼子(①②⑤)①A②C③G④T⑤U13．下列哪些因子是真核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子(③④⑤)。①IF1②IF2③eIF2④eIF4⑤elF4A蛋白質(zhì)生物合成具有下列哪些特征(①②③⑤)。①氨基酸必須活化②需要消耗能量③每延長(zhǎng)一個(gè)氨基酸必須經(jīng)過進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位、稅落四個(gè)步驟④合成肽鏈由C端向N端不斷延長(zhǎng)⑤新生肽鏈需加工才能成為活性蛋白質(zhì)15．下列哪些內(nèi)容屬于蛋白質(zhì)合成后的加工、修飾(②③④⑤)。①切除內(nèi)含子，連接外顯子②切除信號(hào)肽③切除N-端Met④形成二硫鍵⑤氨的側(cè)鏈修飾16．蛋白質(zhì)生物合成過程中，下列哪些步驟需要消耗能量(①②③⑤)。①氨基酸分子的活化②70S起始復(fù)合物的形成③氨酰tRNA進(jìn)入核糖體A位④肽鍵形成⑤核糖體移位17．原核生物的肽鏈延伸過程有下列哪些物質(zhì)參與(①②③⑤)。①肽基轉(zhuǎn)移酶②鳥苷三磷酸③mRNA④甲酰甲硫氨酰-tRNA⑤EF-Tu、EF-Ts、EF-G18.Shine-Dalgarno順序(SD-順序)是指:(①)①在mRNA分子的起始碼上游8-13個(gè)核苷酸處的順序②在DNA分子上轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)前8-13個(gè)核苷酸處的順序③16srRNA3'端富含嘧啶的互補(bǔ)順序④啟動(dòng)基因的順序特征⑤以上都正確19.

在研究蛋白合成中,可利用嘌呤霉素,這是因?yàn)樗?(②)①使大小亞基解聚②使肽鏈提前釋放③抑制氨基酰-tRNA合成酶活性④防止多核糖體形成⑤以上都正確20.

氨基酸活化酶：(④)①活化氨基酸的氨基②利用GTP作為活化氨基酸的能量來源③催化在tRNA的5’磷酸與相應(yīng)氨基酸間形成酯鍵④每一種酶特異地作用于一種氨基酸及相應(yīng)的tRNA⑤以上都不正確(四)選擇題1．DNA以半保留方式復(fù)制，如果一個(gè)具有放射性標(biāo)記的雙鏈DNA分子，在無(wú)放射性標(biāo)記的環(huán)境中經(jīng)過兩輪復(fù)制。其產(chǎn)物分子的放射性情況如何(①)。①其中一半沒有放射性②都有放射性③半數(shù)分子的兩條鏈都有放射性④都不含放射性2．關(guān)于DNA指導(dǎo)下的RNA合成的下列論述除了哪一項(xiàng)都是正確的(②)。①只有存在DNA時(shí)，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯鍵的形成。②在合成過程中，RNA聚合酶需要一個(gè)引物。③RNA鏈的延長(zhǎng)方向是5’→3’。④在多數(shù)情況下，只有一條DNA鏈作為模板。3．下列關(guān)于DNA和RNA聚合酶的論述哪一種是正確的(④):①RNA聚合酶用核苷二磷酸而不是核苷三磷酸來合成多核苷酸鏈②RNA聚合酶需要引物，并在生長(zhǎng)的多核苷酸鏈的5’端加上核苷酸③DNA聚合酶能在核苷酸鏈的兩端加上核苷酸④所有RNA和DNA聚合酶只能在生長(zhǎng)的多核苷酸鏈的3’端加上核苷酸。4．修補(bǔ)胸腺嘧啶有數(shù)種方法，其中之一是用DNA連接酶、DNA聚合酶等催化進(jìn)行，試問這些酶按下列哪種順序發(fā)揮作用(③)：①DNA連接酶→DNA聚合酶→核酸內(nèi)切酶②DNA聚合酶→核酸內(nèi)切酶→DNA連接酶③核酸內(nèi)切酶→DNA聚合酶→DNA連接酶④核酸內(nèi)切酶→DNA連接酶→DNA聚合酶5．DNA聚合酶在分類時(shí)屬于六大酶類中的哪一種(①)。①合成酶類②轉(zhuǎn)移酶類③裂解酶類④氧化還原酶類6．催化真核生物mRNA生物合成的RNA聚合酶Ⅱ?qū)Ζ?-鵝膏蕈堿(③)。①不敏感②敏感③高度敏感④低度敏感7．DNA復(fù)制中RNA引物的主要作用是(①)。①引導(dǎo)合成岡奇片段②作為合成岡奇片段的模板③為DNA合成原料dNTP提供附著點(diǎn)④激活DNA聚合酶8．下列關(guān)于單鏈結(jié)合蛋白的描述哪個(gè)是錯(cuò)誤的(④)。①與單鏈DNA結(jié)合防止堿基重新配對(duì)②保護(hù)復(fù)制中單鏈DNA不被核酸酶降解③與單鏈DNA結(jié)合，降低雙鏈DNATm值④以上都不對(duì)9．紫外線對(duì)DNA的損傷主要是(②)。①引起堿基置換②形成嘧啶二聚體③導(dǎo)致堿基缺失④發(fā)生堿基插入l0．有關(guān)轉(zhuǎn)錄的錯(cuò)誤描述是(③)。①只有在DNA存在時(shí)，RNA聚合酶方可催化RNA②需要NTP做原料③RNA鏈的延伸方向是3’→5’④RNA的堿基需要與DNA互補(bǔ)11．關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄作用的錯(cuò)誤敘述是(③)。①以RNA為模板合成DNA②需要一個(gè)具有3’-OH末端的引物③以5’→3’方向合成，也能3’→5’方向合成④以dNTP為底物12．體內(nèi)參與甲基化反應(yīng)的直接甲基供體是(②)。①M(fèi)et②S—腺苷甲硫氨酸③甲酰甲硫氨酸④Met-tRNA13．關(guān)于大腸桿菌DNA聚合酶I的下列論述哪些是正確的(①②③)。①它是一個(gè)金屬酶②它能從3’-OH端逐步水解單股DNA鏈③它在雙螺旋區(qū)有5’→3’核酸酶活性④它需要DNA模板上的游離5’-OH；14．試將下列DNA復(fù)制的有關(guān)步驟按正確的順序排列(②→①→③→⑤→④)。①DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶合成RNA引物②解旋蛋白打開DNA雙鏈③DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶合成的DNA互補(bǔ)鏈④DNA連接酶連接DNA片段⑤核酸內(nèi)切酶切除RNA引物15．下列關(guān)于核不均一RNA(hnRNA)的論述哪些是正確的(①③⑤)。①它們的壽命比大多數(shù)細(xì)胞液的RNA為短②在3’端有一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)長(zhǎng)尾，是由DNA編碼的③它們存在于細(xì)胞核的核仁外周部分④鏈內(nèi)核苷酸不發(fā)生甲基化反應(yīng)⑤有大約四分之三成份將被切除棹，以形成mRNA16．DNA復(fù)制的精確性遠(yuǎn)高于RNA的合成，這是因?yàn)?②④)。①新合成的DNA鏈與模板鏈形成了雙螺旋結(jié)構(gòu)，而RNA鏈不能②DNA聚合酶有3'→5'外切酶活力，而RNA聚合酶無(wú)相應(yīng)活力③脫氧核苷酸之間的氫鍵配對(duì)精確性高于脫氧核苷酸與核苷酸之間的配對(duì)④DNA聚合酶有5’→3’外切酶活力，RNA聚合酶無(wú)此活性17．有關(guān)逆轉(zhuǎn)錄酶的論述哪些是正確的(①②④)。①具有依賴于RNA的DNA聚合酶活性②具有依賴于DNA的DNA聚合酶活性③不具備5’→3’或3’→5’核酸外切酶活性④催化合成反應(yīng)時(shí)，需要模板及3’-OH引物18．下列哪幾種突變最可能是致命的(③④)。①腺嘌呤取代胞嘧啶②胞嘧啶取代尿嘧啶③缺失三個(gè)核苷酸④插入二個(gè)核苷酸19．Crick于1958年提出的中心法則包括(①③⑤)。①DNA復(fù)制②RNA復(fù)制③轉(zhuǎn)錄④逆轉(zhuǎn)錄⑤翻譯20．DNA生物合成中需要以下哪些酶參與(①②③④⑤)。①引物酶②解旋酶③解鏈酶④DNA連接酶⑤DNA聚合酶21．RNA聚合酶的核心酶由以下哪些亞基組成(①③④)。①α②σ③β④β’⑤δ22．RNA生物合成的終止需要以下哪些成分(①②)。①終止子②ρ因子③δ因子④dnaβ蛋白⑤α亞基23．RNA與DNA生物合成相同的是(②④⑤)。①需RNA引物②以3’→5’方向DNA為模板③兩條模板鏈同時(shí)合成④新鏈生成方向5’→3’⑤形成3’,5’-磷酸二酯鍵24．DNA的切除修復(fù)需要以下哪幾種酶參與(②③④)①光裂合酶②核酸內(nèi)切酶③DNA聚合酶I④DNA連接酶⑤RNA聚合酶25．目的基因的制備方法有(③④⑤)①DNA復(fù)制②RNA轉(zhuǎn)錄③mRNA逆轉(zhuǎn)錄④化學(xué)合成法⑤限制性內(nèi)切酶切取26．真核細(xì)胞mRNA的加工修飾包括以下內(nèi)容(①②④⑤)。①切除內(nèi)含子，連接外顯子②5’端接上“帽子”③3’端接上CCA④3’端添加多聚(A)尾⑤堿基甲基化27.指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因大多數(shù)是(①)①單考貝順序

②中度重復(fù)順序

③高度重復(fù)順序

④回文順序⑤以上都正確28.下面哪些因素可防止DNA上的一個(gè)點(diǎn)突變表現(xiàn)在蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)?(⑤)①DNA的修復(fù)作用

②密碼的簡(jiǎn)并性

③校正tRNA的作用④核糖體對(duì)mRNA的校正

⑤以上都正確29.紫外線照射對(duì)DNA分子的損傷主要是(④)①堿基替換②磷酸酯鍵斷裂③堿基丟失④形成共價(jià)連接的嘧啶二聚體⑤堿基插入30.能編碼多肽鏈的最小DNA單位是(⑤)①順反子②操縱子③啟動(dòng)子④復(fù)制子⑤轉(zhuǎn)錄子(五)是非題1．DNA不僅決定遺傳性狀，而且還直接表現(xiàn)遺傳性狀。(×)2．密碼子在mRNA上的閱讀方向?yàn)?’→3’。(√)3．每—種氨基酸都有兩種以上密碼子。(×)4．一種tRNA只能識(shí)別一種密碼子。(×)5．線粒體和葉綠體的核糖體的亞基組成與原核生物類似。(√)6．大腸桿菌的核糖體的小亞基必須在大亞基存在時(shí)，才能與mRNA結(jié)合。(×)7．大腸桿菌的核糖體的大亞基必須在小亞存在時(shí)，才能與mRNA結(jié)合。(√)8．在大腸桿菌中，一種氨基酸只對(duì)應(yīng)于一種氨酰-tRNA合成酶。(√)9．氨基酸活化時(shí)，在氨酰-tRNA合成酶的催化下，由ATP供能，消耗—個(gè)高能磷酸鍵。(×)10．線粒體和葉綠體內(nèi)的蛋白質(zhì)生物合成起始與原核生物相同。(√)11．每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對(duì)應(yīng)。(×)12．AUG既可作為fMet-tRNAf和Met-tRNAi的密碼子，又可作為肽鏈內(nèi)部Met的密碼子。(√)13．構(gòu)成密碼子和反密碼子的堿基都只是A、U、C、G。(×)14．核糖體大小亞基的結(jié)合和分離與Mg2+，的濃度有關(guān)。(√)15．核糖體的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亞基上。(×)16.E.coli中，DnaA與復(fù)制起始區(qū)DNA結(jié)合，決定復(fù)制的起始。(√)1．大腸桿菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。(×)2．原核生物DNA的合成是單點(diǎn)起始，真核生物為多點(diǎn)起始。(√)3．DNA生物合成不需要核糖核苷酸。(×)4．以一條親代DNA(3’→5’)為模板時(shí)，子代鏈合成方向5’→3’，以另一條親代DNA鏈5’→3’)為模板時(shí)，子代鏈合成方向3’→5’。(×)5．在DNA生物合成中，半保留復(fù)制與半不連續(xù)復(fù)制指相同概念。(×)6．在DNA合成終止階段由DNA聚合酶Ⅱ切除引物。(×)7．目前發(fā)現(xiàn)的逆轉(zhuǎn)錄酶大部分來自于病毒粒子。(√)8．依賴DNA的RNA聚合酶由緊密結(jié)合的α2ββ’σ亞基組成，其中σ因子具有識(shí)別起始部位和催化RNA合成的功能。(×)9．RNA的生物合成不需要引物。(√)10．大腸桿菌的mRNA在翻譯蛋白質(zhì)之前不需要加工。(√)11．DNA聚合酶I切除引物RNA屬3’→5’外切酶作用，切除錯(cuò)配的核苷酸屬5’→3’外切酶作用。(×)12．岡崎片段的合成需要RNA引物。(√)線形DAN復(fù)制后，先導(dǎo)鏈引物切除后，無(wú)法延伸，故DNA鏈的一股鏈縮短13．轉(zhuǎn)錄時(shí)，RNA聚合酶的核心酶沿模板DNA向其5’端移動(dòng)。(√)14．RNA不能做為遺傳物質(zhì)。(√)15．以單鏈DNA為遺傳載體的病毒，DNA合成時(shí)一般要經(jīng)過雙鏈的中間階段。(√)16．亞硝酸做為一種有效誘變劑，是因?yàn)樗苯幼饔糜贒NA，使堿基中的氨基氧化生成羰(酮)基，造成堿基配對(duì)錯(cuò)誤。(√)17．大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ只起聚合作用，不能校對(duì)錯(cuò)配堿基。(×)18．RNA也能以自身為模板合成一條互補(bǔ)的RNA鏈。(√)19．真核生物的各種RNA都必須經(jīng)過剪切、修飾才能成熟。(√)20.真核基因外顯子是指保留在成熟RNA中的相對(duì)應(yīng)的序列，不管它是否被翻譯。(×)

三、簡(jiǎn)答

1．分別說出5種以上RNA的功能？

轉(zhuǎn)運(yùn)RNAtRNA轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸；核蛋白體RNArRNA核蛋白體組成成；信使RNAmRNA蛋白質(zhì)合成模板；不均一核RNAhnRNA成熟mRNA的前體；小核RNAsnRNA參與hnRNA的剪接；小胞漿RNAscRNA/7SL-RNA蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成的信號(hào)識(shí)別體的組成成分；反義RNAanRNA/micRNA對(duì)基因的表達(dá)起調(diào)節(jié)作用；核酶RibozymeRNA有酶活性的RNA

2．原核生物與真核生物啟動(dòng)子的主要差別？

原核生物

TTGACA---TATAAT------起始位點(diǎn)

-35-10

真核生物

增強(qiáng)子---GC---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位點(diǎn)

-110-70-25

3．對(duì)天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面？

天然質(zhì)粒往往存在著缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必須對(duì)之進(jìn)行改造構(gòu)建：

a、加入合適的選擇標(biāo)記基因，如兩個(gè)以上，易于用作選擇,通常是抗生素基因。

b、增加或減少合適的酶切位點(diǎn)，便于重組。

c、縮短長(zhǎng)度，切去不必要的片段，提高導(dǎo)入效率，增加裝載量。

d、改變復(fù)制子，變嚴(yán)緊為松弛，變少拷貝為多拷貝。

e、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件

4．舉例說明差示篩選組織特異cDNA的方法？

制備兩種細(xì)胞群體，目的基因在其中一種細(xì)胞中表達(dá)或高表達(dá)，在另一種細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)，然后通過雜交對(duì)比找到目的基因。例如：在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中，腫瘤細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)與正常細(xì)胞表達(dá)水平不同的mRNA，因此，可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關(guān)的基因。也可利用誘導(dǎo)的方法，篩選出誘導(dǎo)表達(dá)的基因。

5．雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選？

脾B細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞，加聚乙二醇（PEG）促進(jìn)細(xì)胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長(zhǎng)出來的脾B-骨髓瘤融合細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。

細(xì)胞融合物中包含：

脾-脾融合細(xì)胞：不能生長(zhǎng)，脾細(xì)胞不能體外培養(yǎng)。

骨-骨融合細(xì)胞：不能利用次黃嘌呤，但可通過第二途徑利用葉酸還原酶合成嘌呤。氨基蝶呤對(duì)葉酸還原酶有抑制作用，故不能生長(zhǎng)骨-脾融合細(xì)胞：在HAT中能生長(zhǎng)，脾細(xì)胞可以利用次黃嘌呤，骨細(xì)胞提供細(xì)胞分裂功能。

6、利用雙脫氧末端終止法（Sanger法）測(cè)定DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的原理與方法？

原理是采用核苷酸鏈終止劑—2，，3，-雙脫氧核苷酸終止DNA的延長(zhǎng)。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂鍵所需要的3-OH，一旦參入到DNA鏈中，此DNA鏈就不能進(jìn)一步延長(zhǎng)。根據(jù)堿基配對(duì)原則，每當(dāng)DNA聚合酶需要dNMP參入到正常延長(zhǎng)的DNA鏈中時(shí)，就有兩種可能性，一是參入ddNTP,結(jié)果導(dǎo)致脫氧核苷酸鏈延長(zhǎng)的終止；二是參入dNTP,使DNA鏈仍可繼續(xù)延長(zhǎng)，直至參入下一個(gè)ddNTP。根據(jù)這一方法，就可得到一組以ddNTP結(jié)尾的長(zhǎng)短不一的DNA片段。

方法是分成四組分別為ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反應(yīng)后，聚丙烯酰胺凝膠電泳按泳帶可讀出DNA序列。

7、激活蛋白（CAP）對(duì)轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用？

環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMPreceptorprotein），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（cAMPactivatedprotein）。當(dāng)大腸桿菌生長(zhǎng)在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基中時(shí)，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等啟動(dòng)子的功能。一些依賴于CRP的啟動(dòng)子缺乏一般啟動(dòng)子所具有的典型的-35區(qū)序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶難以與其結(jié)合。

CAP的存在（功能）：能顯著提高酶與啟動(dòng)子結(jié)合常數(shù)。主要表現(xiàn)以下二方面：

①CAP通過改變啟動(dòng)子的構(gòu)象以及與酶的相互作用幫助酶分子正確定向,以便與-10區(qū)結(jié)合，起到取代-35區(qū)功能的作用。

②CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點(diǎn)的結(jié)合，從而提高與其特定啟動(dòng)子結(jié)合的概率。

8、典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包括哪些步驟？

a、提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個(gè)新的重組DNA分子。

b、將這個(gè)重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存，這個(gè)過程稱為轉(zhuǎn)化。

c、對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。

d、對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。9、基因文庫(kù)的構(gòu)建對(duì)重組子的篩選舉出3種方法并簡(jiǎn)述過程。

抗生素抗性篩選、抗性的插入失活、蘭-白斑篩選或PCR篩選、差式篩選、DNA探針

多數(shù)克隆載體均帶有抗生素抗性基因（抗氨芐青霉素、四環(huán)素）。當(dāng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌中后，該菌便獲得抗性，沒有轉(zhuǎn)入的不具有抗性。但不能區(qū)分是否已重組。

在含有兩個(gè)抗性基因的載體中，如果外源DNA片段插入其中一個(gè)基因并導(dǎo)致該基因失活，就可用兩個(gè)分別含不同藥物的平板對(duì)照篩選陽(yáng)性重組子。如pUC質(zhì)粒含LacZ基因（編碼β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)產(chǎn)生藍(lán)色，從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后，LacZ基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。

10、說明通過胚胎干細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本過程？

胚胎干細(xì)胞（embryonicstemcell,ES）：是胚胎發(fā)育期的胚細(xì)胞，可以人工培養(yǎng)增殖并具有分化成其它類型細(xì)胞的功能。

ES細(xì)胞的培養(yǎng)：

分離胚泡的內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)。ES在無(wú)飼養(yǎng)層中培養(yǎng)時(shí)會(huì)分化為肌細(xì)胞、N細(xì)胞等多種功能細(xì)胞，在含有成纖維細(xì)胞中培養(yǎng)時(shí)ES將保持分化功能。

可以對(duì)ES進(jìn)行基因操作，不影響它的分化功能可以定點(diǎn)整合，解決了隨機(jī)整合的問題。向胚胎干細(xì)胞導(dǎo)入外源基因，然后植入到待孕雌鼠子宮，發(fā)育成幼鼠，雜交獲得純合鼠。1．參與蛋白質(zhì)生物合成體系的組分有哪些?它們具有什么功能?①mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板；②tRNA：蛋白質(zhì)合成的氨基酸運(yùn)載工具；③核糖體：蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所；④輔助因子：(a)起始因子—--參與蛋白質(zhì)合成起始復(fù)合物形成；(b)延長(zhǎng)因子—--肽鏈的延伸作用；(c)釋放因子一--終止肽鏈合成并從核糖體上釋放出來。2．遺傳密碼是如何破譯的?提示：三個(gè)突破性工作(1)體外翻譯系統(tǒng)的建立；(2)核糖體結(jié)合技術(shù)；(3)核酸的人工合成。3．遺傳密碼有什么特點(diǎn)?(1)密碼無(wú)標(biāo)點(diǎn)：從起始密碼始到終止密碼止，需連續(xù)閱讀，不可中斷。增加或刪除某個(gè)核苷酸會(huì)發(fā)生移碼突變。(2)密碼不重疊：組成一個(gè)密碼的三個(gè)核苷酸只代表一個(gè)氨基酸，只使用一次，不重疊使用。(3)密碼的簡(jiǎn)并性：在密碼子表中，除Met、Trp各對(duì)應(yīng)一個(gè)密碼外，其余氨基酸均有兩個(gè)以上的密碼，對(duì)保持生物遺傳的穩(wěn)定性具有重要意義。(4)變偶假說：密碼的專一性主要由頭兩位堿基決定，第三位堿基重要性不大，故在與反密碼子的相互作用中具有一定靈活性。(5)通用性及例外：地球上的一切生物都使用同一套遺傳密碼，但近年來已發(fā)現(xiàn)某些個(gè)別例外現(xiàn)象，如某些哺乳動(dòng)物線粒體中的UGA不是終止密碼而是色氨酸密碼子。(6)起始密碼子AUG，同時(shí)也代表Met，終止密碼子UAA、UAG、UGA使用頻率不同。4．簡(jiǎn)述三種RNA在蛋白質(zhì)生物合成中的作用。(1)mRNA：DNA的遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄作用傳遞給mRNA，mRNA作為蛋白質(zhì)合成模板，傳遞遺傳信息，指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成。(2)tRNA：蛋白質(zhì)合成中氨基酸運(yùn)載工具，tRNA的反密碼子與mRNA上的密碼子相互作用，使分子中的遺傳信息轉(zhuǎn)換成蛋白質(zhì)的氨基酸順序是遺傳信息的轉(zhuǎn)換器。(3)rRNA核糖體的組分，在形成核糖體的結(jié)構(gòu)和功能上起重要作用，它與核糖體中蛋白質(zhì)以及其它輔助因子一起提供了翻譯過程所需的全部酶活性。5．簡(jiǎn)述核糖體的活性中心的二位點(diǎn)模型及三位點(diǎn)模型的內(nèi)容。(1)二位點(diǎn)模型A位：氨酰-tRNA進(jìn)入并結(jié)合的部位；P位：起始氨酰-tRNA或正在延伸的肽基-tRNA結(jié)合部位，也是無(wú)載的tRNA從核糖體上離開的部位。(2)三位點(diǎn)模型大腸桿菌上的70S核糖體上除A位和P位外，還存在第三個(gè)結(jié)合tRNA的位點(diǎn)，稱為E位，它特異地結(jié)合無(wú)負(fù)載的tRNA及無(wú)負(fù)載的tRNA最后從核糖體上離開的位點(diǎn)。6．氨基酸在蛋白質(zhì)合成過程中是怎樣被活化的?催化氨基酸活化的酶稱氨酰-tRNA合成酶，形成氨酰-tRNA，反應(yīng)分兩步進(jìn)行：(1)活化需Mg2+和Mn2+，由ATP供能，由合成酶催化，生成氨基酸-AMP-酶復(fù)合物。，(2)轉(zhuǎn)移在合成酶催化下將氨基酸從氨基酸—AMP—酶復(fù)合物上轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的tRNA上，形成氨酰-tRNA。7．簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)生物合成過程。蛋白質(zhì)合成可分四個(gè)步驟，以大腸桿菌為例：(1)氨基酸的活化：游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參與蛋白質(zhì)合成，由氨酰-tRNA合成酶催化，消耗1分子ATP，形成氨酰-tRNA。(2)肽鏈合成的起始：由起始因子參與，mRNA與30S小亞基、50S大亞基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始復(fù)合物，整個(gè)過程需GTP水解提供能量。(3)肽鏈的延長(zhǎng)：起始復(fù)合物形成后肽鏈即開始延長(zhǎng)。首先氨酰-tRNA結(jié)合到核糖體的A位，然后，由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化與P位的起始氨基酸或肽?；纬呻逆I，tRNAf或空載tRNA仍留在P位．最后核糖體沿mRNA5’→3’方向移動(dòng)一個(gè)密碼子距離，A位上的延長(zhǎng)一個(gè)氨基酸單位的肽酰-tRNA轉(zhuǎn)移到P位，全部過程需延伸因子EF-Tu、EF-Ts，能量由GTP提供。(4)肽鏈合成終止，當(dāng)核糖體移至終止密碼UAA、UAG或UGA時(shí)，終止因子RF-1、RF-2識(shí)別終止密碼，并使肽酰轉(zhuǎn)移酶活性轉(zhuǎn)為水解作用，將P位肽酰-tRNA水解，釋放肽鏈，合成終止。8．蛋白質(zhì)合成中如何保證其翻譯的正確性?提示：(1)氨基酸與tRNA的專一結(jié)合，保證了tRNA攜帶正確的氨基酸；(2)攜帶氨基酸的tRNA對(duì)mRNA的識(shí)別，mRNA上的密碼子與tRNA上的反密碼子的相互識(shí)別，保證了遺傳信息準(zhǔn)確無(wú)誤地轉(zhuǎn)譯；(3)起始因子及延長(zhǎng)因子的作用，起始因子保證了只有起始氨酰-tRNA能進(jìn)入核糖體P位與起始密碼子結(jié)合，延伸因子的高度專一性，保證了起始tRNA攜帶的fMet不進(jìn)入肽鏈內(nèi)部；(4)核糖體三位點(diǎn)模型的E位與A位的相互影響，可以防止不正確的氨酰-tRNA進(jìn)入A位，從而提高翻譯的正確性；(5)校正作用：氨酰-tRNA合成酶和tRNA的校正作用；對(duì)占據(jù)核糖體A位的氨酰-tRNA的校對(duì)；變異校對(duì)即基因內(nèi)校對(duì)與基因間校對(duì)等多種校正作用可以保證翻譯的正確。9．原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在合成蛋白質(zhì)的起始過程有什么區(qū)別。(1)起始因子不同：原核為IF-1，IF-2，IF-2，真核起始因子達(dá)十幾種。(2)起始氨酰-tRNA不同：原核為fMet-tRNAf，真核Met-tRNAi(3)核糖體不同：原核為70S核粒體，可分為30S和50S兩種亞基，真核為80S核糖體，分40S和60S兩種亞基10．蛋白質(zhì)合成后的加工修飾有哪些內(nèi)容?提示：(1)水解修飾；(2)肽鍵中氨基酸殘基側(cè)鏈的修飾；(3)二硫鍵的形成；(4)輔基的連接及亞基的聚合。11．蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)是怎樣形成的?提示：蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)是由氨基酸的順序決定的，不同的蛋白質(zhì)有不同的氨基酸順序，各自按一定的方式折疊而成該蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)。折疊是在自然條件下自發(fā)進(jìn)行的，在生理?xiàng)l件下，它是熱力學(xué)上最穩(wěn)定的形式，同時(shí)離不開環(huán)境因素對(duì)它的影響。對(duì)于具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，其亞基可以由一個(gè)基因編碼的相同肽鏈組成，也可以由不同肽鏈組成，不同肽鏈可以通過一條肽鏈加工剪切形成，或由幾個(gè)不同單順反子mRNA翻譯，或由多順反子mRNA翻譯合成。12．真核細(xì)胞與原核細(xì)胞核糖體組成有什么不同?如何證明核糖體是蛋白質(zhì)的合成場(chǎng)所?原核細(xì)胞：70S核糖體由30S和50S兩個(gè)亞基組成；真核細(xì)胞：80S核糖體由40S和60S兩個(gè)亞基組成。利用放射性同位素標(biāo)記法，通過核糖體的分離證明之。13.

已知一種突變的噬菌體蛋白是由于單個(gè)核苷酸插入引起的移碼突變的，將正常的蛋白質(zhì)和突變體蛋白質(zhì)用胰蛋白酶消化后，進(jìn)行指紋圖分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)肽段的差異，測(cè)得其基酸順序如下：

正常肽段Met-Val-Cys-Val-Arg

突變體肽段Met-Ala-Met-Arg

（1）什么核苷酸插入到什么地方導(dǎo)致了氨基酸順序的改變？

（2）推導(dǎo)出編碼正常肽段和突變體肽段的核苷酸序列.提示：有關(guān)氨基酸的簡(jiǎn)并密碼分別為

Val:GUUGUCGUAGUGArg:CGUCGCCGACGAGAAGG

Cys:UGUUGCAla:GCUGCCGCACGC提示：(1)在正常肽段的第一個(gè)Val的密碼GUA的G后插入了一個(gè)C；(2)

正常肽段的核苷酸序列為：AUGGUAUGCGU…CG…；突變體肽段的核苷酸序列為：AUGGCUAUGCGU。試列表比較核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。

核酸蛋白質(zhì)

DNARNA一級(jí)結(jié)構(gòu)核苷酸序列AGTTCT或AGUUCU的排列順序3，，5，-磷酸二酯鍵氨基酸排列順序、肽鍵二級(jí)結(jié)構(gòu)

雙螺旋主要是氫鍵，堿基堆積力配對(duì)（莖-環(huán)結(jié)構(gòu)）（同左）

有規(guī)則重復(fù)的構(gòu)象、氫鍵三級(jí)結(jié)構(gòu)

超螺旋

RNA空間構(gòu)象

一條肽鏈的空間構(gòu)象范德華力氫鍵疏水作用鹽橋二硫鍵等四級(jí)結(jié)構(gòu)

多條肽鏈或不同蛋白）15.試比較原核生物與真核生物的翻譯。原核生物與真核生物的翻譯比較如下：僅述真核生物的，原核生物與此相反。（1）.起始Met不需甲?；?；（2）.無(wú)SD序列，但需要一個(gè)掃描過程；（3）.tRNA先于mRNA與核糖體小亞基結(jié)合；（4）.起始因子比較多；（5）.只一個(gè)終止釋放因子。1．試述Meselson和Stahl關(guān)于DNA半保留復(fù)制的證明實(shí)驗(yàn)。提示：①將E．coli放入以15NH4Cl為唯一氮源的培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)十幾代，使所有DNA分子標(biāo)記上15N；②將15N標(biāo)記的E．coli再放入普通的14N培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在細(xì)胞生長(zhǎng)一代、二代、…、n代的時(shí)間間隔內(nèi)采樣；③采用氯化銫密度梯度離心分離DNA，并用紫外照相技術(shù)檢測(cè)DNA所在位置；④結(jié)果如下：其結(jié)果確切地證明DNA以半保留方式復(fù)制。2．描述大腸桿菌DNA聚合酶I在DNA生物合成過程中的作用。E．coliDNA聚合酶I是多功能酶，具有：①DNA聚合酶活性，能按模板要求，以5’→3’方向合成DNA，在DNA復(fù)制中，常用以填補(bǔ)引物切除后留下的空隙；②5'→3’外切酶活性，DNA復(fù)制后期，用于切除RNA引物；③3'→5’外切酶活性，用以校對(duì)復(fù)制的正確性，當(dāng)出現(xiàn)錯(cuò)配堿基時(shí)，切除錯(cuò)配堿基直到正確配對(duì)為止；DNA聚合酶I不是DNA復(fù)制和校正中的主要聚合酶，它功能主要是修復(fù)。3．試述DNA復(fù)制過程，總結(jié)DNA復(fù)制的基本規(guī)律。以E．coli為例，DNA復(fù)制過程分三個(gè)階段；①起始：從DNA上控制復(fù)制起始的序列即起始點(diǎn)開始復(fù)制，形成復(fù)制叉，復(fù)制方向多為雙向，也可以是單向，若以雙向進(jìn)行復(fù)制，兩個(gè)方向的復(fù)制速度不一定相同。由于DNA聚合酶不能從無(wú)到有合成新鏈，所以DNA