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生物選修三專題一基因工程高三復(fù)習(xí)-第1頁(yè)共5頁(yè)專題一基因工程1.1DNA重組技術(shù)的基本工具一、基因工程的基本概念1.概念:基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),并通過(guò)_____________和___________等技術(shù),賦予生物以新的__________,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的__________和___________。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做_________________。2.基本原理:______________3.理論基礎(chǔ)(1)不同生物的基因可以拼接的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)——細(xì)胞生物的遺傳物質(zhì)都是_______,都是以_____________為基本單位構(gòu)成的雙鏈大分子。(2)目的基因轉(zhuǎn)入后可以表達(dá)的基礎(chǔ)——所有生物共用一套__________。(3)生物遺傳信息的表達(dá)都遵循_________。4.優(yōu)點(diǎn)(1)目的性強(qiáng),能_______的改造生物的性狀。(2)克服________________的障礙。二、限制性核酸內(nèi)切酶——分子手術(shù)刀1.簡(jiǎn)稱:__________。2.來(lái)源:主要是從__________中分離純化而來(lái)。3.功能特點(diǎn):特異性,即識(shí)別雙鏈DNA分子某種特定__________,并且使每一條鏈中____________的兩個(gè)核苷酸之間的_________斷開(kāi)。4.酶切結(jié)果:_______末端和_______末端。畫出EcoRⅠ酶切后的結(jié)果:↓GAATTCCTTAAG↑三、DNA連接酶——“分子縫合針”1.作用實(shí)質(zhì):將雙鏈DNA片段“縫合”起來(lái),恢復(fù)被限制酶切開(kāi)了的兩個(gè)核苷酸之間的________。2.作用前提:兩個(gè)DNA分子必須含有_________。3.種類(1)E·coliDNA連接酶①來(lái)源:___________②功能:只能連接___________(2)T4DNA連接酶①來(lái)源:____________②功能:既可以連接___________,又可以連接_________,但連接_________時(shí)效率比較低。【拓展】比較DNA連接酶與DNA聚合酶DNA連接酶DNA聚合酶作用實(shí)質(zhì)都是催化兩個(gè)核苷酸之間形成_______是否需模板______________連接DNA鏈____鏈____鏈作用過(guò)程在兩個(gè)DNA片段之間形成__________將_________加到已存在的核苷酸鏈上,形成____________作用結(jié)果將兩個(gè)DNA片段連接成__________合成___________四、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”1.基因工程中最常用的載體——_______(1)來(lái)源:________等微生物(2)結(jié)構(gòu):裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于___________之外,并具有____________的___________分子。2.基因的載體必須具備的條件(1)有______________個(gè)限制酶切割位點(diǎn),供外源DNA片段(基因)插入其中。(2)能在宿主細(xì)胞內(nèi)_________,或整合到染色體DNA上,隨染色體DNA進(jìn)行________。(3)有特殊的___________,如四環(huán)素抗性基因等,供重組DNA的鑒定和選擇。(4)必須是______的,不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害。(5)_______適合,以便提取和在體外進(jìn)行操作。3.載體的種類:除質(zhì)粒外,還有____________、__________________等。4.在進(jìn)行基因工程操作中,真正被用作載體的質(zhì)粒,都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過(guò)_________的。1.2基因工程的基本操作程序第5頁(yè)共5頁(yè)一、基因工程的基本操作程序1._____________的獲取。2._____________的構(gòu)建。3.將目的基因_____________。4.目的基因的_____________。二、目的基因的獲取1.目的基因主要是_________的結(jié)構(gòu)基因。2.獲取目的基因的方法(1)從基因文庫(kù)中獲取目的基因①基因文庫(kù)概念:將含有某種生物不同基因的許多__________,導(dǎo)入_______的群體中儲(chǔ)存,各個(gè)_______分別含有這種生物的不同的基因,稱為基因文庫(kù)。②基因文庫(kù)分類:可分為_(kāi)_____文庫(kù)和________文庫(kù)(如cDNA文庫(kù))。(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因①PCR技術(shù)是_____________的縮寫。PCR是一項(xiàng)在生物體外_____________的核酸合成技術(shù)。②PCR技術(shù)的原理:DNA的_________。③PCR擴(kuò)增的前提:要有一段已知目的基因的_______,以便根據(jù)這一序列合成引物。④PCR擴(kuò)增的條件:_____、_____(目的基因),原料——_______________(即dCTP、dATP、dGTP、dTTP),耐高溫的__________酶(Taq酶)。⑤PCR擴(kuò)增的過(guò)程a.變性:加熱到90-95℃b.復(fù)性(退火):冷卻到55-60℃c.延伸:加熱到70-75℃⑥結(jié)果:目的基因以____的方式成指數(shù)形式擴(kuò)增。(3)人工合成法:如果基因比較___,且________,可以通過(guò)___________用化學(xué)方法直接人工合成?!就卣埂縋CR技術(shù)和DNA復(fù)制的比較PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點(diǎn)原理__________________原料__________________條件_____、_____、_____不同點(diǎn)解旋_____解旋_______催化場(chǎng)所_____復(fù)制________酶熱穩(wěn)定的DNA聚合酶細(xì)胞內(nèi)含有的DNA聚合酶結(jié)果在短時(shí)間內(nèi)形成_________形成__________三、基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因
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