SN-T4280-2-2016國境口岸德國小蠊形態(tài)及DNA條形碼鑒定方法

中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T4280.2—2016國境口岸德國小蠊形態(tài)及DNA條形碼鑒定方法2016-08-23發(fā)布ISN/T4280《國境口岸德國小蠊形態(tài)及DNA條形碼鑒定方法》共分為以下4個部分：——SN/T4280.1——SN/T4280.2——SN/T4280.3——SN/T4280.4國境口岸紅頭麗蠅DNA條形碼鑒定方法；國境口岸德國小蠊形態(tài)及DNA條形碼鑒定方法；國境口岸澳洲大蠊形態(tài)及DNA條形碼鑒定方法；國境口岸美洲大蠊形態(tài)及DNA條形碼鑒定方法。本部分為SN/T4280的第2部分。本部分按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本部分由國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會提出并歸口。本部分起草單位：中華人民共和國廣東出入境檢驗檢疫局。1國境口岸德國小蠊形態(tài)及DNA條形碼鑒定方法SN/T4280的本部分規(guī)定了德國小蠊[Blattellagermanica(Linnaeus,1767)]的形態(tài)和DNA條本部分適用于國境口岸對德國小蠊成蟲的形態(tài)和對肢體不全的成蟲，以及卵夾、若蟲等非成蟲標(biāo)本的DNA條形碼鑒定工作。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。SN/T1876醫(yī)學(xué)媒介生物標(biāo)本采集、制作及保存規(guī)程SN/T4278國境口岸醫(yī)學(xué)媒介昆蟲DNA條形碼鑒定操作規(guī)程下列術(shù)語和定義適用于本文件。前足股節(jié)刺式frontfemurtype用數(shù)字表示，標(biāo)記在類型的后面。如A型具2或者3個大端刺，則表示為A2或A3型，如B型具2或者3個大端刺，則表示為B2或B3型。參見附錄A。由雄性蜚蠊腹部第10背板或雌性蜚蠊第8背板特化而成，兩后側(cè)端著生尾須。其形狀，是否特化，由雄性蜚蠊腹部第9腹板或雌性第7腹板特化而成，它的形狀多樣，特化形式多，后緣是否凸出，是2雄性外生殖器malegenitalia由左陽莖(leftphallomere)、中陽莖(medianphallomere)、右陽莖(rightphallomere)組成。雄性外4形態(tài)鑒定德國小蠊的成蟲依照其形態(tài)特征進(jìn)行鑒定。其分類地位、生態(tài)習(xí)性和國內(nèi)外分布參見附錄C。姬蠊科分類檢索表見附錄D。4.2標(biāo)本的制作和保存標(biāo)本的制作和保存見SN/T1876。4.3形態(tài)鑒別要點(diǎn)體小型，黃褐色。前胸背板具兩條黑色縱條紋。腹部第8節(jié)背板腺體近圓形。4.4.1體小型，黃褐色，前胸背板長×寬2.1mm～2.7mm×2.6mm～3.6mm,前翅長7.6mm~11.2mm,體連翅長10mm～13.5mm。頭黃褐色塊，部分個體額及唇基紅棕色。觸角基節(jié)淺褐色，其余黑褐色(參見附錄E中的圖E.1～圖E.4)。4.4.2頭頂兩復(fù)眼間距略小于觸角窩間距(參見圖E.2和圖E.4)。前胸背板略呈梯形，前緣近平直，后緣中部略突出，中域具2條縱向的黑褐色斑紋，兩縱紋上窄下寬，間距隨之也上窄下寬(參見圖E.1和圖E.3)。雄蟲前后翅未達(dá)腹部末端，僅達(dá)肛上板中部(參見圖E.1)。前足股節(jié)內(nèi)緣刺式B型，具端刺3根(參見圖E.2和圖E.4),為B3型。跗節(jié)具爪墊，前跗具中墊節(jié)，爪對稱，不特化。雄蟲腹部背板第1背板不特化；第7、第8背板特化，第7節(jié)背板中域兩凹槽半遮，第8節(jié)背板近前緣兩腺體近圓形(參見圖E.5箭頭所示)。4.4.3雄性外生殖器肛上板對稱，舌狀，端部鈍圓(參見圖E.6)。下生殖板端部平截，左側(cè)角具斜“U”較近，約等于左尾刺的長度(參見圖E.7)。鉤狀陽莖位于下生殖板左側(cè)，鉤狀部位內(nèi)緣光滑(參見蜚蠊成蟲形態(tài)符合4.3～4.4者，判定為德國小蠊成蟲。5DNA條形碼鑒定5.1儀器及試劑耗材3比對見SN/T4278。5.4參比序列TAGGGACATCCTTAAGAATATTAATTCGAGCTGAATTAAATCAACCCGGCTCATTAATTGGAGATGATCAAATTTATAATGTTATTGTAACAGCACATGCCTTTGTAATAATTTTCTTTATAGTTATACCAATTTTAATTGGGGGATTCGGAAATTGGTTAGTACCTTTAATATTAGGAGCTCCTGATATAGCATTTCCTCGAATAAATAATATAAGTTTTTGGCTTCTACCTCCCTCTCTTTCTCTCTTACTAGCTAGTAGTTTAGTCGAAAGAGGGGCTGGGACTGGTTGAACCGTATACCCACCGTTAGCAAGAGGTATTGCCCATGCCGGAGCTTCAGTAGATTTAGCTATTTTTTCCCTTCACCTTGCTGGAGTATCTTCAATTTTAGGTGCTGTAAATTTTATTTCAACAATTATTAATATAAAACCAATTAATATAAGACCTGAACGAATTCCCTTATTTGTATGATCAGTAGGAATTACTGCATTATTACTATTATTATCATTACCTGTCCTTGCGGGTGCAATTACAATACTATTAACAGATCGAAACTTAAATACATCATTCTTTGATCCTGCAGGTGGTGGAGATCCAATTT注：粗斜體為引物序列，序列分析時不包含引物部分(德國小蠊DNA條形碼BOLD系統(tǒng)參比序列號為GBMIN12722-13)。5.5結(jié)果判定目標(biāo)序列與BOLD數(shù)據(jù)庫中德國小蠊序列相似度大于或等于99.0%者，DNA條形碼方法鑒定為德國小蠊。大于98.0%小于99.0%者.需結(jié)合外部形態(tài)特征進(jìn)行綜合判斷，小于或等于98.0%者，不予以DNA條形碼種類判斷。4(資料性附錄)蜚蠊足及前足股節(jié)刺式蜚蠊足及前足股節(jié)刺式見圖A.1～圖A.5。圖A.1蜚蠊足結(jié)構(gòu)示意圖圖A.2前足股節(jié)內(nèi)緣刺式A型圖A.3前足股節(jié)內(nèi)緣刺式B型圖A.4前足股節(jié)內(nèi)緣刺式C型圖A.5前足股節(jié)內(nèi)緣刺式D型5(資料性附錄)蜚蠊跗節(jié)及爪式蜚蠊跗節(jié)及爪式見圖B.1～圖B.5。圖B.1蜚蠊前跗節(jié)示意圖圖B.2前跗節(jié)爪對稱，不特化圖B.3前跗節(jié)爪不對稱，不特化圖B.4前跗節(jié)爪對稱，特化圖B.5前跗節(jié)爪不對稱，特化6(資料性附錄)德國小蠊分類地位、生態(tài)習(xí)性及分布C.1分類地位德國小蠊Blattellagermanica(Linnaeus,1767)隸屬于蜚蠊目(Blattodea),姬蠊科(Ectobiidae),姬蠊亞科(Blattellinae),小蠊屬(Blattella)。C.2生態(tài)習(xí)性易隨火車、輪船、飛機(jī)等交通工具四散傳播。能攜帶和傳播數(shù)十種病原體，對人類的生命健康造成嚴(yán)重危害。每頭雌蟲能產(chǎn)卵夾3個～7個，每個卵夾含卵35?！?5粒，在常溫下經(jīng)4周～6周孵化成若蟲，若蟲蛻皮6次羽化為成蟲；成蟲壽命5個～8個月，成蟲與若蟲均群棲性。C.3分布C.3.1國內(nèi)分布全國均有分布。除南極洲沒有報道外，其余六個洲均有分布。7SN/T4280.2—2016(規(guī)范性附錄)姬蠊科檢索表D.1姬蠊科Ectobiidae分亞科檢索表1鉤狀陽莖位于下生殖板右側(cè) 擬葉蠊亞科Pseudophyllodromiinae鉤狀陽莖位于下生殖板左側(cè) 22唇基與額分界明顯，唇基凸出；體型微?。恢嘘柷o和右陽莖復(fù)雜 褶翅蠊亞科Anaplectinae唇基與額分界不明顯唇基不凸出；體形較大；中陽莖和右陽莖相對簡單 姬蠊亞科BlattellinaeD.2姬蠊亞科Blattellinae分屬檢索表1雄蟲下生殖板無尾刺 2雄蟲下生殖板具尾刺 32前足股節(jié)腹緣刺式B3 氈蠊屬JacobsoninaHebard,1929前足股節(jié)腹緣刺式A3 新葉蠊屬NeolobopteraPrincis,19533后翅端具附屬區(qū) 4后翅端不具附屬區(qū) 64后翅肘脈僅具1條分支，附屬區(qū)約占40% 微蠊屬AnaplectellaHanitsch,1928后翅肘脈局多條分支，附屬區(qū)占25% 55后翅肘脈具4條～8條偽完全脈和不完全脈 卷翅蠊屬AnaplectoideaShelford,1906后翅肘脈具0條～4條偽完全脈和不完全脈 瑪啦蠊屬M(fèi)alaccinaHebard,19296爪對稱，特化 齒爪蠊屬SymplocodesHebard,1929爪對稱，不特化 87后翅頂三角區(qū)較大，中陽莖具分支 擬截尾蠊屬HemithyrsoceraSaussure,1893不如上述 88尾刺圓柱形，背板不特化 亞蠊屬ParcoblattaHebard,1917尾刺不如上述 99后翅中脈和肘脈呈“S”形彎曲，肛上板對稱 刺板蠊屬ScalidaHebard,1929不如上述 10第1背板不特化，前胸背板常具2條縱向黑帶 小蠊屬BlattellaCaudell,1903不如上述 11第9背板不特化，下生殖板左側(cè)緣端部不上卷 歪尾蠊屬SymploceHebard,1916第9背板特化，少有不特化，下生殖板左側(cè)緣端部上卷 擬歪尾蠊屬EpisymploceBei-Bienko,1950D.3小蠊屬Blattella分種檢索表1下生殖板左側(cè)凹陷處具1個尾刺 單尾小蠊B.singularisWang,Che&.Feng2010下生殖板左側(cè)凹陷處具2個尾刺 28SN/T4280.2—20162左右尾刺明顯不等長，左尾刺球狀，著生于下生殖板左側(cè)凹陷的后部；右尾刺較左尾刺小，或幾乎退化消失。腹部第7背板或第7、第8背板特化 3尾刺刺狀，左右尾刺等長或稍不等長，尾刺不呈球狀，不退化消失。僅腹部第7背板特化 83腹部第8背板兩腺體間具一條縱向的凹槽，或平坦不具凹陷 4腹部第8背板兩腺體間具一條狹窄的縱向隆線 54腹部第8背板中部凹槽明顯，向下延長至兩腺體中間。兩腺體呈圓形 德國小蠊B.germanica(Linnaeus,1767)腹部第8背板中部平坦，不具凹槽，或凹槽不明顯。如果具凹槽，則凹槽不向下延長至兩腺體間。兩腺體近矩形，向兩側(cè)延伸，后緣不向前彎曲 阿氏小蠊B.asahinaiMizukubo,19815腹部第8背板兩腺體間隆線縱向向后延伸且逐漸變窄的。兩腺體向前彎曲，延長至第8背板前緣 擬德國小蠊B.lituricollis(Walker,1868)腹部第8背板兩腺體間隆線向后延伸，貫穿整個第8背板，不變窄 66腹部第7、第8背板均特化。第8背板兩腺體向兩側(cè)延伸，不觸及第8背板前緣 雙紋小蠊B.bisignata(BrunnervonWattenwyl,1893)僅腹部第7背板特化。第8背板腺體不如上述 77前后翅短，后翅僅達(dá)腹部第3背板 卡氏小蠊B.karnyiPrincis,1969前后翅長度超過腹部末端 臺灣小蠊B.formosana(Karny,1915)8肛上板后緣中部具凹陷 索氏小蠊B.sauteri(Karny,1915)肛上板后緣中部不具凹陷 99肛上板后緣橫截。尾刺圓柱型，端部鈍圓 褐紋小蠊B.biligata(Walker,1868)肛上板后緣圓弧形。尾刺圓錐形，端