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第二章細(xì)胞工程第一節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程(第2課時(shí))【課程標(biāo)準(zhǔn)】2.3闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指在一定的條件下將兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞,通過物理、化學(xué)或生物方法,結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。2.4概述動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。2.5簡述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值?!局攸c(diǎn)難點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用【課前預(yù)習(xí)】自主預(yù)習(xí)教材p6669的內(nèi)容,完成下列填空:1、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)是指在一定的條件下將___________動(dòng)物細(xì)胞,通過______、______或______方法,結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。在體外培養(yǎng)條件下,生物細(xì)胞會(huì)自發(fā)融合,但頻率______。(1)一些病毒可以促使細(xì)胞融合,這些病毒可以與___________發(fā)生作用,使細(xì)胞緊密凝集,直至融合。其中,___________在細(xì)胞融合中的應(yīng)用較為廣泛。(2)利用化學(xué)試劑也可誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合。其中,____________法因其使用方便且誘導(dǎo)細(xì)胞融合的成功率高,是較為常用的細(xì)胞融合方法。該方法也有一定的局限性,如______________________________。(3)也可用____________法等物理方法進(jìn)行細(xì)胞融合。物理方法的優(yōu)勢有____________,目前已被廣泛應(yīng)用,成為細(xì)胞融合的重要技術(shù)手段。2、讓單個(gè)漿細(xì)胞進(jìn)行____________形成細(xì)胞群,這樣的細(xì)胞群就能產(chǎn)生_____________、_____________,即單克隆抗體。針對(duì)漿細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下不能無限增殖的問題,利用__________________具有_____________的特性,成功地設(shè)計(jì)出一個(gè)制備單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)方案。實(shí)驗(yàn)室制備單克隆抗體可通過動(dòng)物____________或____________兩種途徑獲得,工業(yè)化制備單克隆抗體一般通過_____________獲得。3、干細(xì)胞是指動(dòng)物(包括人)____________________________________________的細(xì)胞。干細(xì)胞在形態(tài)上具有共性,通常呈_____________________,細(xì)胞體積___,核相對(duì)較___。根據(jù)干細(xì)胞所處的發(fā)育階段,將其分為______干細(xì)胞和______干細(xì)胞。根據(jù)干細(xì)胞的分化潛能,將其分為______干細(xì)胞、______干細(xì)胞和______干細(xì)胞三類。【課堂活動(dòng)】活動(dòng)一:動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)1.概念在一定的條件下將____________動(dòng)物細(xì)胞,通過____________________方法,結(jié)合形成________細(xì)胞的技術(shù)。3.過程[易錯(cuò)提醒]病毒在生物技術(shù)中的應(yīng)用(1)滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑,未滅活的病毒不能作為誘導(dǎo)劑。(2)病毒在不同過程或操作中的“身份不同”。在免疫調(diào)節(jié)中病毒屬于抗原,在基因工程中可作為載體,在細(xì)胞工程中可作為誘導(dǎo)劑?!纠}1】完善植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較表:項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理步驟用酶解法去掉_________后,誘導(dǎo)_________融合,形成雜種體細(xì)胞,再經(jīng)過植物組織培養(yǎng)形成雜種植株分散成單個(gè)細(xì)胞后,誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法結(jié)果形成__________形成__________【例題2】若動(dòng)物細(xì)胞之間或動(dòng)物與人細(xì)胞之間都可以進(jìn)行融合,則進(jìn)行細(xì)胞融合后的細(xì)胞有多少種?_______________(不考慮兩個(gè)以上細(xì)胞之間的融合)?!纠}3】(2023·南京高二期中)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的敘述,正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理不同B.動(dòng)物細(xì)胞融合后形成的雜交細(xì)胞一般為雙核細(xì)胞C.常用的誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的因素或方法有聚乙二醇誘導(dǎo)融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法、電場誘導(dǎo)融合法、紫外線照射等D.細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限性,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能【例題4】右圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是()A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與A.b細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)膜的流動(dòng)性無關(guān)D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因活動(dòng)二:動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用1.單克隆抗體的含義采取單個(gè)漿細(xì)胞進(jìn)行____________形成細(xì)胞群,該細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)_____________、特異性____________的抗體。2.單克隆抗體的制備過程3.單克隆抗體的應(yīng)用(1)制備單克隆抗體靶向制劑。(2)疾病診斷,例如腫瘤診斷?!纠}4】給健康小鼠注射特定抗原,目的是______________________________________。在篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交細(xì)胞時(shí),需要經(jīng)過兩次篩選。第一次是篩選出_______________________________,第二次是篩選出_______________________________。在用_________________篩選雜交細(xì)胞的過程中,篩選淘汰了____________________和____________________,只有融合的雜交細(xì)胞被選擇保留了下來?!纠}5】對(duì)于右邊制備單克隆抗體過程示意圖的敘述,錯(cuò)誤的是()A.圖中有1處明顯錯(cuò)誤B.②中兩兩融合的細(xì)胞有3種,篩選保留了1種C.③雜交細(xì)胞均能產(chǎn)生抗體D.⑤可以無限增殖并分泌相應(yīng)抗體【例題6】(多選)(2023·南京高二期中)下圖是單克隆抗體制備過程示意圖,1~3代表相關(guān)過程,a~e代表相關(guān)細(xì)胞,其中c是兩兩融合的細(xì)胞。以下敘述正確的是()A.過程2促融的方法有電場誘導(dǎo)融合法、聚乙二醇誘導(dǎo)融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等B.c細(xì)胞有三種,每種細(xì)胞染色體組數(shù)不相等,e細(xì)胞是能產(chǎn)生特定抗體的雜交細(xì)胞C.過程3是進(jìn)行抗體檢測,并克隆產(chǎn)生陽性細(xì)胞的過程D.單克隆抗體可以運(yùn)載藥物,單克隆抗體自身也能用于治療疾病活動(dòng)三:干細(xì)胞技術(shù)及其應(yīng)用1.干細(xì)胞(1)概念動(dòng)物(包括人)胚胎及某些器官中同時(shí)具有____________和____________的細(xì)胞。(2)形態(tài)特征通常呈圓球形或橢圓球形,細(xì)胞體積__________,核相對(duì)__________。(3)類型①根據(jù)所處的發(fā)育階段,將其分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞。②根據(jù)分化潛能劃分2.干細(xì)胞技術(shù)的應(yīng)用(1)疾病治療①研究表明,神經(jīng)系統(tǒng)疾病、糖尿病、心臟疾病、腎臟疾病、肝臟疾病和癌癥等許多疾病,都有望借助干細(xì)胞技術(shù)得到治療。②利用干細(xì)胞具有____________的特性,人們?cè)隗w外培養(yǎng)環(huán)境中給予干細(xì)胞一定的誘導(dǎo)條件,就可以將其定向分化為____________的細(xì)胞。(2)新藥研制和開發(fā)(教材p70)[溫馨提示](1)胚胎干細(xì)胞不僅可以誘導(dǎo)分化形成各種組織細(xì)胞,還可以誘導(dǎo)分化形成各種組織、器官,甚至是動(dòng)物個(gè)體;(2)成體干細(xì)胞只能分化形成特定的細(xì)胞或組織,不能分化形成完整的動(dòng)物個(gè)體;(3)iPS細(xì)胞是體外誘導(dǎo)產(chǎn)生的多能干細(xì)胞,雖然類似于胚胎干細(xì)胞,但一般認(rèn)為不能誘導(dǎo)分化形成完整的生物個(gè)體?!纠}7】(2023·揚(yáng)州高二期中)間充質(zhì)干細(xì)胞是一種多能干細(xì)胞,人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞具有更好的增殖性和更低的免疫原性,能定向分化成機(jī)體的多種功能細(xì)胞。與其他體細(xì)胞相比,下列關(guān)于間充質(zhì)干細(xì)胞的敘述,正確的是()A.間充質(zhì)干細(xì)胞特有的基因調(diào)控其增殖分化B.異體移植間充質(zhì)干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)C.如果體細(xì)胞也能變?yōu)殚g充質(zhì)干細(xì)胞,則此過程中沒有基因的選擇性表達(dá)D.間充質(zhì)干細(xì)胞可用胰蛋白酶處理進(jìn)行傳代培養(yǎng)【例題8】判斷正誤:(1)動(dòng)物細(xì)胞融合過程中既有細(xì)胞質(zhì)膜融合也有細(xì)胞核的融合。()(2)與植物原生質(zhì)體融合相比,動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒。()(3)動(dòng)物體細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞仍然是二倍體細(xì)胞。()(4)單克隆抗體的制備技術(shù)是在動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)上發(fā)展起來的。()(5)雜交細(xì)胞的培養(yǎng)可以采取體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)兩種方式。()(6)多能干細(xì)胞具有形成完整個(gè)體的分化潛能。()【核心突破】1.兩種抗體的比較2.漿細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交細(xì)胞的比較3.兩次篩選的比較【課后鞏固】()1、動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中,正確的是A.誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段完全相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成雜種細(xì)胞()2、下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交比較的敘述,錯(cuò)誤的是A.它們的原理都涉及細(xì)胞質(zhì)膜的流動(dòng)性B.都可以用聚乙二醇融合法誘導(dǎo)融合C.融合前都需用纖維素酶或果膠酶處理細(xì)胞D.前者主要為了獲得細(xì)胞產(chǎn)品,后者主要為了獲得雜種植株()3、下圖為動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)過程圖,相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.圖中C為滅活的病毒,此外還可用物理方法或化學(xué)方法誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合B.圖中①過程發(fā)生了細(xì)胞質(zhì)膜的融合,體現(xiàn)了細(xì)胞質(zhì)膜的選擇透過性C.圖中②過程表示細(xì)胞核融合形成雜種細(xì)胞D.動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果是獲得融合細(xì)胞()4、用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體,下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是A.將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞
B.用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞
C.用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑,促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合
D.篩選雜交瘤細(xì)胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體
()5、關(guān)于制備單克隆抗體的敘述正確的是A.單克隆抗體產(chǎn)自淋巴細(xì)胞B.單克隆抗體的制備要經(jīng)過細(xì)胞融合C.單克隆抗體的獲得不需要使細(xì)胞癌變D.誘導(dǎo)融合的手段相同()6、(2023·蘇州高二月考)犬細(xì)小病毒單克隆抗體(CPVMcAb)可抑制病毒對(duì)宿主細(xì)胞的侵染及病毒的復(fù)制,進(jìn)而殺滅幼犬體內(nèi)病毒。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.在CPVMcAb的制備過程中用到了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)B.給幼犬注射CPV后,CPV抗體檢測呈陽性,說明發(fā)生了體液免疫反應(yīng)C.經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選出來的雜交細(xì)胞即可直接生產(chǎn)CPVMcAbD.培養(yǎng)雜交細(xì)胞時(shí),需要無菌、無毒的環(huán)境,且溫度、氣體環(huán)境等要適宜()7、(2023·淮安高二階段練)單克隆抗體在生物工程和臨床醫(yī)學(xué)上有著極為重要的地位和巨大的應(yīng)用。下列有關(guān)單克隆抗體技術(shù)及其應(yīng)用的敘述,正確的是A.新冠病毒檢測單克隆抗體診斷試劑盒需要根據(jù)新冠病毒內(nèi)部的核酸研制B.將選擇培養(yǎng)基篩選得到的雜交細(xì)胞直接用于生產(chǎn)單克隆抗體C.利用抗原—抗體雜交技術(shù)可篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交細(xì)胞D.“生物導(dǎo)彈”中的單克隆抗體能特異性地結(jié)合抗原并殺死癌細(xì)胞()8、將患者腫瘤細(xì)胞與抗原呈遞細(xì)胞“雜交”制成的新型腫瘤疫苗,能使人體免疫系統(tǒng)識(shí)別并殺傷腫瘤細(xì)胞,有效控制腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā),為癌癥治療增添了新手段。下列說法錯(cuò)誤的是A.細(xì)胞融合前,可以用胰蛋白酶處理腫瘤組織B.該技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使細(xì)胞遠(yuǎn)緣雜交成為可能C.該技術(shù)可采用滅活病毒作為動(dòng)物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑D.兩種細(xì)胞誘導(dǎo)融合完成后,可直接將融合細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)()9、(2023·南通高二階段練)下圖是單克隆抗體制備過程示意圖,下列相關(guān)敘述正確的是A.1過程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱分別為抗原和T淋巴細(xì)胞B.3過程需要使用纖維素酶和聚乙二醇等物質(zhì)促進(jìn)細(xì)胞融合C.4過程是為了篩選出既能產(chǎn)生單一抗體又能無限增殖的細(xì)胞D.D物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或糖類,具有純度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)()10、(2023·揚(yáng)州高二期中)抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)可以實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷,其機(jī)理如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.該單克隆抗體制備過程中可以用腫瘤抗原對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行免疫處理B.該單克隆抗體可以利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合等技術(shù)獲得C.ADC與細(xì)胞質(zhì)膜上的受體特異性結(jié)合,以胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞D.ADC中的藥物會(huì)在溶酶體中降解,從而失去對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用()11、(多選)將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合,可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體,其依據(jù)是A.B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無限增殖B.B淋巴細(xì)胞只有與骨髓瘤細(xì)胞融合后才能產(chǎn)生抗體C.骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體D.骨髓瘤細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無限增殖()12、(多選)(2023·連云港高二期中)下列關(guān)于干細(xì)胞技術(shù)及其應(yīng)用的敘述,正確的是A.胚胎干細(xì)胞是從早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出來的一種高度未分化的細(xì)胞系B.骨髓多能造血干細(xì)胞可分化出多種細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能C.上皮組織基底層的干細(xì)胞、肌肉中的成肌細(xì)胞屬于多能干細(xì)胞D.利用培植皮膚干細(xì)胞的技術(shù)可以治療大面積燒傷的患者()13、(多選)(2023·南京高二檢測)細(xì)胞融合技術(shù)有著廣泛應(yīng)用,下圖為細(xì)胞融合的簡略過程。分析下圖,下列敘述正確的是A.甲形成過程中,a和b需要通過細(xì)胞質(zhì)膜接觸完成識(shí)別和結(jié)合B.乙形成過程中培養(yǎng)液滲透壓略大于細(xì)胞質(zhì)滲透壓,有助于植物細(xì)胞利用酶解法去壁C.若a和b分別是基因型為AaBB、aaBb的植株的花粉細(xì)胞,則去壁后兩兩融合可得到4種基因型的細(xì)胞D.借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用能將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置()14、(多選)(2023·揚(yáng)州高二期中)單克隆抗體在多種疾病的診斷和治療中發(fā)揮重要的作用,下圖為利用小鼠制備單克隆抗體的過程,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.提取的B淋巴細(xì)胞有多種,是因?yàn)橐环N抗原可誘導(dǎo)產(chǎn)生多種B細(xì)胞B.誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合的方法不完全相同C.在具有雜交細(xì)胞的培養(yǎng)板上滴加相應(yīng)抗體,出現(xiàn)陽性反應(yīng)的即為目標(biāo)細(xì)胞D.篩選出的目標(biāo)雜交細(xì)胞可在體外條件或注射到小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)一步增殖培養(yǎng)()15、(多選)(2023·南京高二期中)抗PDL1單克隆抗體能與骨髓瘤細(xì)胞質(zhì)膜表面的PDL1特異性結(jié)合,因而具有治療某些癌癥的作用。下圖是制備抗PDL1單克隆抗體的示意圖,下列敘述正確的是A.在分離B淋巴細(xì)胞前,需要對(duì)小鼠注射PDL1進(jìn)行免疫處理B.多孔玻璃板中的細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞C.圖中細(xì)胞集落a~d既能大量增殖,又能產(chǎn)生抗體D.圖中細(xì)胞集落a可用于擴(kuò)大化培養(yǎng)生產(chǎn)抗PDL1單克隆抗體()16、(多選)(2023·淮安高二階段練)下圖為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)用于治療糖尿病的示意圖,下列相關(guān)敘述正確的是A.干細(xì)胞存在于多種組織和器官中,可分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞B.誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有發(fā)育的全能性C.除圖中的成纖維細(xì)胞,已分化的T細(xì)胞和B細(xì)胞等均能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞D.將分化得到的胰島細(xì)胞移植回病人體內(nèi)治療,理論上可避免免疫排斥反應(yīng)17、下圖表示細(xì)胞工程的流程圖(a、b表示過程),請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:(1)若圖示為動(dòng)物細(xì)胞融合的過程,則a特有的誘導(dǎo)劑是________________。單克隆抗體的制備技術(shù)是在動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)上發(fā)展起來的,通過把能產(chǎn)生抗體的__________細(xì)胞與能在體外大量增殖的____________細(xì)胞進(jìn)行融合,得到既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專一抗體的雜交細(xì)胞。(2)若圖示為植物體細(xì)胞雜交過程,則在甲、乙細(xì)胞融合之前,需要用__________________(填酶名稱)制備____________。這項(xiàng)工程的意義是_______________。(3
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