高效液相色譜分析操作條件選擇課件

高效液相色譜儀操作條件選擇組員：魏鵬翔、崔建哲、張龍、韓守印、李淼、孫磊。指導(dǎo)教師：姜洪文高效液相色譜分析操作條件選擇目錄實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理儀器與試劑實(shí)驗(yàn)步驟儀器清洗（結(jié)束工作）高效液相色譜分析操作條件選擇一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆丈V分析的原理掌握高效液相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)和工作原理掌握SY-8100高效液相色譜儀的基本操作步驟掌握HPLC條件試驗(yàn)的方法以及分離條件的確定高效液相色譜分析操作條件選擇二、實(shí)驗(yàn)原理本次實(shí)驗(yàn)采用ODS-C18色譜柱，以甲醇+水混合液為流動相，根據(jù)混合物中萘、聯(lián)苯和菲在固定相與流動相間分配性質(zhì)的不同，進(jìn)行分離。不同比例的甲醇+水混合液為流動相，流動相的極性發(fā)生改變，因此混合液的分離條件也發(fā)生了改變，選擇能將混合液中各組分能充分分離并且相對分析時(shí)間短的條件，綜合確定HPLC法分析萘、聯(lián)苯、菲的分析條件，完成對混合液的分析。檢測器采用紫外分光（UV）檢測器，檢測波長為254nm。高效液相色譜分析操作條件選擇三、儀器與試劑儀器：

SY-8100高效液相色譜儀 1臺

KQ-50B超聲波清洗器 1臺

AP-01P真空泵 1臺過濾裝置 1套微量注射器 50μL 1支容量瓶 50mL 7只藥品：萘（G.R.）、聯(lián)苯（G.R.）、菲（G.R.）、甲醇（G.R.）、二次蒸餾水高效液相色譜分析操作條件選擇四、實(shí)驗(yàn)步驟流動相的準(zhǔn)備1、流動相的過濾安裝抽濾裝置，選用有機(jī)相過濾膜，過濾試劑甲醇；選用無機(jī)相過濾膜，過濾二次蒸餾水。高效液相色譜分析操作條件選擇2、流動相的脫氣

將盛有過濾好甲醇、二次蒸餾水的試劑瓶分別放于超聲波清洗器中，進(jìn)行脫氣處理。高效液相色譜分析操作條件選擇儀器的準(zhǔn)備1、更換流動相將A泵的輸液管放入處理好的甲醇試劑瓶中；B泵的輸液管放入處理好的二次蒸餾水試劑瓶中。2、分別排除A、B兩個(gè)泵輸液管中的氣泡高效液相色譜分析操作條件選擇3、開啟高壓泵A、高壓泵B、UV檢測器、混合器的電源，打開工作站

高效液相色譜分析操作條件選擇分析步驟1、分別設(shè)置兩個(gè)高壓泵的流量，使總流量為F＝1.00mL/min，分別啟動兩泵高效液相色譜分析操作條件選擇2、待基線穩(wěn)定后，完成標(biāo)樣的分析，記錄分析所獲得的各組分的保留時(shí)間、理論塔板數(shù)、分離度。數(shù)據(jù)填表3、選擇最佳流動相配比，調(diào)整A、B兩泵的流量。待基線穩(wěn)定后吸取標(biāo)樣，完成分析后建立組分表，再完成試樣的分析，測得試樣中萘、聯(lián)苯和菲的含量，完成實(shí)驗(yàn)高效液相色譜分析操作條件選擇實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

保留時(shí)間分離度理論塔板次數(shù)萘聯(lián)苯菲萘聯(lián)苯菲萘聯(lián)苯菲高效液相色譜分析操作條件選擇五、儀器的清理（結(jié)束工作）更換流動相將流動相重新更換為處理過的甲醇，以利于色譜柱的保護(hù)。清洗“進(jìn)樣閥”用適量的甲醇清洗進(jìn)樣器、進(jìn)樣閥，以避免樣品組分的殘留。高效液相色譜分析操作條件選擇THEENDTHANKSPPT模板下載：

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