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《微生物基礎》課程標準一、課程基本信息表1課程基本信息明細表課程學時總學時:64理論學時:22實踐學時:42課程學分4開課學期第3學期課程類型□理論課□實踐課eq\o\ac(□,√)理論+實踐(實驗)□理實一體課二、課程制定依據(jù)本標準依據(jù)食品生物技術專業(yè)教學標準中的人才培養(yǎng)目標、規(guī)格要求和對《微生物基礎》課程教學目標要求而制訂。用于指導《微生物基礎》課程建設與課程教學。三、課程性質(zhì)與作用《微生物基礎》課程是食品生物技術專業(yè)的專業(yè)基礎課程之一。通過學習,學生能夠掌握微生物檢驗的基本理論知識和實驗操作技術(顯微鏡技術、消毒滅菌技術、純培養(yǎng)技術、微生物檢驗技術),具備守法、客觀、公正、準確的微生物檢驗的職業(yè)素質(zhì)。運用微生物的知識和實驗技術對食品中各類物質(zhì)中的微生物進行分析和檢測。適合食品生產(chǎn)和食品檢測方向職業(yè)崗位需要的應用型、技能型人才的培養(yǎng)模式?!段⑸锘A》將為學生畢業(yè)后從事以食品為主的微生物檢測、微生物培養(yǎng)等工作奠定堅實的基礎。四、本課程與其它課程的關系表2微生物基礎課程與其它課程的關系序號前期課程名稱為本課程支撐的主要能力后續(xù)課程名稱需要本課程支撐的主要功能1有機化學熟知烴、醇、醛、酸、酮、酯等有機分子的結構和性質(zhì)。食品營養(yǎng)與衛(wèi)生應用微生物能生產(chǎn)食品并可提高食品營養(yǎng)價值;微生物也能破壞食品降低營養(yǎng)價值。2生物化學熟知糖、蛋白質(zhì)、脂類、核酸生物大分子的結構、性質(zhì)和功能以及生物代謝;熟知酶、維生素的結構,性質(zhì)和功能。食品分析與檢驗微生物檢驗技術;對實驗數(shù)據(jù)進行正確處理,對結果作出正確的分析,撰寫規(guī)范的檢驗報告的能力。3食品加工技術應用微生物進行各類發(fā)酵食品的生產(chǎn)及各類發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)要求的菌種、培養(yǎng)、保藏、生長控制條件。4食品安全與質(zhì)量管理通過控制微生物的生長達到控制食品質(zhì)量的目的;并能應用微生物實驗技術對微生物基礎指標進行質(zhì)量檢驗和控制。5生產(chǎn)實習能利用微生物的基礎知識,生產(chǎn)啤酒、白酒等產(chǎn)品。6頂崗實習根據(jù)《微生物基礎》課程所學的基本知識及基本技能,能熟練地在企業(yè)進行各種產(chǎn)品的微生物指標檢測,質(zhì)量管理與控制工作。五、課程教育目標(一)總體目標通過本課程學習,使學生逐步獲得微生物分離純化、無菌操作技術、微生物培養(yǎng)及控制、微生物保藏、微生物檢測的知識與能力;以及守法、客觀、公正、準確的微生物檢驗的職業(yè)素質(zhì)。(二)知識目標1.熟悉細菌、放線菌、酵母菌、霉菌和病毒五大類微生物類群的形態(tài)特征、菌落特征、生長繁殖特征,以及在食品加工中的應用與危害。2.熟悉光學顯微鏡的工作原理和技術要點。3.熟悉無菌操作技術要點。4.熟悉微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)的種類、功能及其運輸方式;培養(yǎng)基的配制原則和方法。5.熟悉微生物生長的規(guī)律以及影響微生物生長的因素,明確有益微生物的培養(yǎng)條件,明確有害微生物的控制措施與方法。6.熟悉微生物數(shù)量測定和微生物生長量測定方法。7.了解微生物生態(tài)學。8.熟悉微生物基礎檢驗中常用檢樣的制備技術、檢驗設備的使用、檢驗藥品的配制;熟悉微生物檢驗的基本程序和要求;掌握菌落總數(shù)、大腸菌群的含義和衛(wèi)生學意義及檢驗程序。(三)技能目標1.能在微生物檢驗過程中嚴格遵守無菌操作規(guī)程。2.會正確使用光學顯微鏡、高壓蒸汽滅菌鍋、干燥箱、均質(zhì)器、超凈工作臺等微生物檢驗有關儀器和設備。3.能熟練掌握無菌操作技術、培養(yǎng)基制備技術、消毒滅菌技術、分離純培養(yǎng)和接種技術、染色技術、菌種保藏技術等微生物基本操作技能。4.通過對微生物進行個體形態(tài)和菌落的觀察,能辨別細菌、酵母菌、霉菌、放線菌等各類微生物。5.能理解各類食品檢樣的菌落總數(shù)、大腸菌群、乳酸菌、霉菌及酵母菌等常規(guī)項目的檢測技術;能分析總結實驗結果,并做出正確、規(guī)范的實驗報告。(四)素質(zhì)目標1.培養(yǎng)學生自覺學習新技術、新知識的能力。2.具有分析問題、解決問題的能力。3.具有獲取信息、語言表達、團隊合作、社會交往等綜合素質(zhì);拓展、創(chuàng)新等可持續(xù)性發(fā)展能力。4.養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難、以及守法、客觀、公正、準確的食品檢驗的職業(yè)素質(zhì)。表3、具體目標明細表具體目標目標內(nèi)容學生達到該目標時的表現(xiàn)知識目標(1)熟悉細菌、放線菌、酵母菌、霉菌和病毒五大類微生物類群的形態(tài)特征、菌落特征、生長繁殖特征,以及在食品加工中的應用與危害;(2)熟悉光學顯微鏡的工作原理和技術要點;(3)熟悉無菌操作技術要點;(4)熟悉微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)的種類、功能及其運輸方式;培養(yǎng)基的配制原則和方法;(5)熟悉微生物生長的規(guī)律以及影響微生物生長的因素,明確有益微生物的培養(yǎng)條件,明確有害微生物的控制措施與方法;(6)熟悉微生物數(shù)量測定和微生物生長量測定方法;(7)了解微生物生態(tài)學;(8)熟悉微生物基礎檢驗中常用檢樣的制備技術、檢驗設備的使用、檢驗藥品的配制;熟悉微生物檢驗的基本程序和要求;掌握菌落總數(shù)、大腸菌群的含義和衛(wèi)生學意義及檢驗程序。(1)熟悉細菌、放線菌、酵母菌、霉菌和病毒五大類微生物類群的形態(tài)特征、菌落特征、生長繁殖特征,以及在食品加工中的應用與危害;(2)能熟練使用光學顯微鏡;(3)能熟練進行無菌操作;(4)會配制培養(yǎng)基;(5)知道有益微生物的培養(yǎng)條件,知道有害微生物的控制措施與方法;(6)熟悉微生物數(shù)量測定和微生物生長量測定方法;(7)了解微生物生態(tài)學;(8)熟悉微生物基礎檢驗中常用檢樣的制備技術、檢驗設備的使用、檢驗藥品的配制;熟悉微生物檢驗的基本程序和要求;掌握菌落總數(shù)、大腸菌群的含義和衛(wèi)生學意義及檢驗程序。技能目標(1)能在微生物檢驗過程中嚴格遵守無菌操作規(guī)程;(2)會正確使用光學顯微鏡、高壓蒸汽滅菌鍋、干燥箱、均質(zhì)器、超凈工作臺等微生物檢驗有關儀器和設備;(3)能熟練掌握無菌操作技術、培養(yǎng)基制備技術、消毒滅菌技術、分離純培養(yǎng)和接種技術、染色技術、菌種保藏技術等微生物基本操作技能;(4)通過對微生物進行個體形態(tài)和菌落的觀察,能辨別細菌、酵母菌、霉菌、放線菌等各類微生物;(5)能理解各類食品檢樣的菌落總數(shù)、大腸菌群、乳酸菌、霉菌及酵母菌等常規(guī)項目的檢測技術;能分析總結實驗結果,并做出正確、規(guī)范的實驗報告。(1)能在微生物檢驗過程中嚴格遵守無菌操作規(guī)程;(2)會正確使用光學顯微鏡、高壓蒸汽滅菌鍋、干燥箱、均質(zhì)器、超凈工作臺等微生物檢驗有關儀器和設備;(3)能熟練掌握無菌操作技術、培養(yǎng)基制備技術、消毒滅菌技術、分離純培養(yǎng)和接種技術、染色技術、菌種保藏技術等微生物基本操作技能;(4)通過對微生物進行個體形態(tài)和菌落的觀察,能辨別細菌、酵母菌、霉菌、放線菌等各類微生物;(5)能理解各類食品檢樣的菌落總數(shù)、大腸菌群、乳酸菌、霉菌及酵母菌等常規(guī)項目的檢測技術;能分析總結實驗結果,并做出正確、規(guī)范的實驗報告。素質(zhì)目標(1)培養(yǎng)學生自覺學習新技術、新知識的能力;(2)具有分析問題、解決問題的能力;(3)具有獲取信息、語言表達、團隊合作、社會交往等綜合素質(zhì);拓展、創(chuàng)新等可持續(xù)性發(fā)展能力;(4)養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難、以及守法、客觀、公正、準確的食品檢驗的職業(yè)素質(zhì)。(1)自覺學習新技術、新知識;(2)具有分析問題、解決問題的能力;(3)具有獲取信息、語言表達、團隊合作、社會交往等綜合素質(zhì);拓展、創(chuàng)新等可持續(xù)性發(fā)展能力;(4)養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難、以及守法、客觀、公正、準確的食品檢驗的職業(yè)素質(zhì)。表4、課程教學編排學時序號一級學習模塊/項目/情景二級學習模塊/項目/情景學時教學形式備注1引言引言2理實一體化2項目一:微生物的類群任務一:原核類微生物——細菌和放線菌6理實一體化任務三:真核類微生物——酵母菌和霉菌2理實一體化任務五:非細胞型微生物——病毒2理實一體化3項目二:微生物的生理任務一:微生物的營養(yǎng)2理實一體化任務二:微生物的生長2理實一體化任務三:微生物的代謝和遺傳變異2理實一體化4項目三:微生物的應用任務一:微生物對食品的污染與危害實用微生物發(fā)酵技術2理實一體化任務三:微生物基礎檢驗技術2理實一體化5項目四:微生物的實驗任務一:玻璃器皿的清洗與包扎2理實一體化任務二:培養(yǎng)基的配制與高壓蒸汽滅菌6理實一體化任務三:微生物的接種與培養(yǎng)4理實一體化任務四:普通光學顯微鏡的使用與酵母菌的形態(tài)結構觀察4理實一體化任務五:細菌的革蘭氏染色和形態(tài)觀察4理實一體化任務六:霉菌的載玻片培養(yǎng)2理實一體化任務七:霉菌的形態(tài)結構觀察2理實一體化任務八:微生物的顯微計數(shù)2理實一體化6項目五:食品微生物綜合訓練任務一:食品中落總數(shù)的測定8理實一體化任務二:食品中大腸菌群的MPN計數(shù)8理實一體化合計64六、課程教學設計表4課程教學設計項目1項目名稱引言課時數(shù)理論教學實踐教學20學習目標知識目標1.掌握微生物的概念和種類2.了解微生物在自然界中的地位3.了解微生物的特點及利用4.掌握微生物的分類與命名技能目標養(yǎng)成課前預習,上課認真做筆記,課后復習的好習慣。使學生對微生物在食品安全領域的重要地位有一個初步的認識。素質(zhì)目標1.通過認識微生物,培養(yǎng)學生自覺學習新技術、新知識的能力;提高分析問題、解決問題的能力;2.通過微生物實驗,培養(yǎng)學生的實踐工作能力,提高團隊合作能力;拓展、創(chuàng)新等可持續(xù)性發(fā)展能力;3.養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難的良好職業(yè)素養(yǎng)。學習內(nèi)容與訓練項目1.掌握微生物的概念和種類2.了解微生物在自然界中的地位3.了解微生物的特點及利用4.掌握微生物的分類與命名教學方法手段教學方法:理論實踐一體化教學法、問題探究法、目標教學法、講授法教學資源1.教學設施設備:多媒體教室2.教材:《微生物技術》主編:楊雅蘭、陽志軍華中科技大學出版社3.教案:《微生物基礎》規(guī)范教案4.網(wǎng)絡資源:課程中心院級精品課程、云桌面、PPT、建立QQ討論群校企雙師授課安排建議校內(nèi)教師授課內(nèi)容:1.掌握微生物的概念和種類2.了解微生物在自然界中的地位3.了解微生物的特點及利用4.掌握微生物的分類與命名企業(yè)兼職教師授課內(nèi)容:1.無教學效果檢測采取課后習題的方式,對學生的學習效果進行檢測。項目2項目名稱項目一、微生物的類群課時數(shù)理論教學實踐教學100學習目標知識目標1.原核類微生物——細菌2.原核類微生物——放線菌和其他重要的原核微生物3.真核類微生物——酵母菌4.真核類微生物——霉菌和其他重要的真核微生物5.非細胞型微生物——病毒技能目標1、了解常用的細菌染色方法2、熟記革蘭氏染色法的步驟、結果和原理3、能夠通過菌落特征鑒別細菌、放線菌、酵母菌和霉菌素質(zhì)目標1.通過本項目的學習,培養(yǎng)學生的無菌觀念;提高分析問題、解決問題的能力;2.通過微生物實驗,培養(yǎng)學生的實踐工作能力,提高團隊合作能力;拓展、創(chuàng)新等可持續(xù)性發(fā)展能力;3.養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難的良好職業(yè)素養(yǎng)。教學方法手段教學方法:理論實踐一體化教學法、問題探究法、目標教學法、講授法學習內(nèi)容與訓練項目1.原核類微生物——細菌2.原核類微生物——放線菌和其他重要的原核微生物3.真核類微生物——酵母菌4.真核類微生物——霉菌和其他重要的真核微生物5.非細胞型微生物——病毒教學資源1.教學設施設備:多媒體教室2.教材:《微生物技術》主編:楊雅蘭、陽志軍華中科技大學出版社3.教案:《微生物基礎》規(guī)范教案4.網(wǎng)絡資源:課程中心院級精品課程、云桌面、PPT、建立QQ討論群校企雙師授課安排建議校校內(nèi)教師授課內(nèi)容:1.原核類微生物——細菌2.原核類微生物——放線菌和其他重要的原核微生物3.真核類微生物——酵母菌4.真核類微生物——霉菌和其他重要的真核微生物5.非細胞型微生物——病毒企業(yè)兼職教師授課內(nèi)容:無教學效果檢測采取課后習題的方式,對學生的學習效果進行檢測。項目3項目名稱項目二、微生物的生理課時數(shù)理論教學實踐教學60學習目標知識目標1.掌握微生物的營養(yǎng)物的種類、微生物營養(yǎng)類型2.掌握培養(yǎng)基的概念、種類、配制原則和配制方法3.掌握微生物生長的概念4.掌握食品因素對微生物生長的影響。5.了解微生物培養(yǎng)方法6.掌握微生物菌種的退化的原因和防止退化的措施、菌種復壯的方法、菌種保藏的原理和方法技能目標1.能正確配制微生物培養(yǎng)基2.能熟練使用高壓蒸汽滅菌鍋3.能對微生物細胞進行分離和培養(yǎng)4.掌握微生物生長規(guī)律及對生產(chǎn)實踐的指導意義5.能正確對微生物菌種進行保藏素質(zhì)目標1.通過本項目的學習,進一步培養(yǎng)學生的無菌觀念,系統(tǒng)學習能力;提高分析問題、解決問題的能力;2.通過本項目的實驗,培養(yǎng)學生的實踐工作能力,提高團隊合作能力。3.養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難;以及守法、客觀、公正、準確的食品檢驗的職業(yè)素質(zhì)。學習內(nèi)容與訓練項目1.微生物的營養(yǎng)2.微生物的生長3.微生物的代謝4.微生物的遺傳和變異教學方法手段教學方法:理論實踐一體化教學法、問題探究法、目標教學法、講授法教學資源1.教學設施設備:多媒體教室2.教材:《微生物技術》主編:楊雅蘭、陽志軍華中科技大學出版社3.教案:《微生物基礎》規(guī)范教案4.網(wǎng)絡資源:課程中心院級精品課程、云桌面、PPT、建立QQ討論群校企雙師授課安排建議校內(nèi)教師授課內(nèi)容:1.微生物的營養(yǎng)2.微生物的生長3.微生物的代謝4.微生物的遺傳和變異企業(yè)兼職教師授課內(nèi)容:無教學效果檢測采取課后習題的方式,對學生的學習效果進行檢測。項目4項目名稱項目三、微生物的應用課時數(shù)理論教學實踐教學40學習目標知識目標1.微生物對食品的污染與危害2.實用微生物發(fā)酵技術3.微生物基礎檢驗技術技能目標1.掌握菌落總數(shù)、大腸菌群的測定原理和方法2.掌握食品的腐敗變質(zhì)與微生物的關系以及如何判斷和防止食品腐敗變質(zhì)3.了解微生物在發(fā)酵食品生產(chǎn)中的應用;理解微生物在發(fā)酵食品生產(chǎn)中的作用素質(zhì)目標1.通過本項目的學習,進一步培養(yǎng)學生的無菌觀念,系統(tǒng)學習能力;提高分析問題、解決問題的能力;2.通過本項目的實驗,培養(yǎng)學生的實踐工作能力,提高團隊合作能力。3.養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難;以及守法、客觀、公正、準確的食品檢驗的職業(yè)素質(zhì)。學習內(nèi)容與訓練項目1.微生物對食品的污染與危害2.實用微生物發(fā)酵技術3.微生物基礎檢驗技術教學方法手段教學方法:理論實踐一體化教學法、問題探究法、目標教學法、講授法教學資源1.教學設施設備:多媒體教室2.教材:《微生物技術》主編:楊雅蘭、陽志軍華中科技大學出版社3.教案:《微生物基礎》規(guī)范教案4.網(wǎng)絡資源:課程中心院級精品課程、云桌面、PPT、建立QQ討論群校企雙師授課安排建議校內(nèi)教師授課內(nèi)容:1.微生物對食品的污染與危害2.實用微生物發(fā)酵技術3.微生物基礎檢驗技術企業(yè)兼職教師授課內(nèi)容:無教學效果檢測采取課后習題的方式,對學生的學習效果進行檢測。項目5項目名稱微生物的實驗課時數(shù)理論教學實踐教學026學習目標知識目標1.掌握玻璃器皿的清洗與包扎的原理2.掌握培養(yǎng)基的配制與高壓蒸汽滅菌的原理3.掌握微生物的接種與培養(yǎng)的原理4.掌握普通光學顯微鏡的使用與酵母菌的形態(tài)結構觀察的原理5.掌握細菌的革蘭氏染色和形態(tài)觀察的原理6.掌握霉菌的載玻片培養(yǎng)的原理7.掌握菌的形態(tài)結構觀察的原理8.掌握微生物的顯微計數(shù)的原理技能目標1.掌握玻璃器皿的清洗與包扎的方法2.掌握培養(yǎng)基的配制與高壓蒸汽滅菌的方法3.掌握微生物的接種與培養(yǎng)的方法4.掌握普通光學顯微鏡的使用與酵母菌的形態(tài)結構觀察的方法5.掌握細菌的革蘭氏染色和形態(tài)觀察的方法6.掌握霉菌的載玻片培養(yǎng)的方法7.掌握霉菌的形態(tài)結構觀察的方法8.掌握微生物的顯微計數(shù)的方法素質(zhì)目標1.通過本項目的學習,培養(yǎng)學生在未來食品行業(yè)中從事食品衛(wèi)生檢驗的能力以及應用微生物進行食品生產(chǎn)的能力。2.提高在實踐工用中分析問題、解決問題的能力;提高團隊合作能力;拓展、創(chuàng)新等可持續(xù)性發(fā)展能力。3.養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難的良好職業(yè)素養(yǎng);以及守法、客觀、公正、準確的食品檢驗的職業(yè)素質(zhì)。學習內(nèi)容與訓練項目1.玻璃器皿的清洗與包扎2.培養(yǎng)基的配制與高壓蒸汽滅菌3.微生物的接種與培養(yǎng)4.普通光學顯微鏡的使用與酵母菌的形態(tài)結構觀察5.細菌的革蘭氏染色和形態(tài)觀察6.霉菌的載玻片培養(yǎng)7.霉菌的形態(tài)結構觀察8.微生物的顯微計數(shù)教學方法手段教學方法:理論實踐一體化教學法、問題探究法、目標教學法、講授法教學資源1.教學設施設備:微生物實驗室2.教材:《微生物技術》主編:楊雅蘭、陽志軍華中科技大學出版社3.教案:《微生物基礎》規(guī)范教案4.網(wǎng)絡資源:課程中心院級精品課程、云桌面、PPT、建立QQ討論群校企雙師授課安排建議校內(nèi)教師授課內(nèi)容:無企業(yè)兼職教師授課內(nèi)容:1.玻璃器皿的清洗與包扎2.培養(yǎng)基的配制與高壓蒸汽滅菌3.微生物的接種與培養(yǎng)4.普通光學顯微鏡的使用與酵母菌的形態(tài)結構觀察5.細菌的革蘭氏染色和形態(tài)觀察6.霉菌的載玻片培養(yǎng)7.霉菌的形態(tài)結構觀察8.微生物的顯微計數(shù)教學效果檢測采取課后習題與實驗相結合的方式,對學生的學習效果進行檢測。項目6實訓項目食品微生物綜合訓練參考學時16工作任務內(nèi)容水樣中菌落總數(shù)及大腸菌群數(shù)的測定。教學目標知識目標熟悉食品微生物檢驗中常用檢樣的制備技術、檢驗設備的使用、檢驗藥品的配制;熟悉微生物檢驗的基本程序和要求;掌握菌落總數(shù)、大腸菌群的含義和衛(wèi)生學意義及檢驗程序。技能目標能對食品衛(wèi)生指標(細菌總數(shù)和大腸菌群)進行檢測。素質(zhì)目標2.通過本項目的學習,培養(yǎng)學生在未來食品行業(yè)中從事食品衛(wèi)生檢驗的能力以及應用微生物進行食品生產(chǎn)的能力。2.提高在實踐工用中分析問題、解決問題的能力;提高團隊合作能力;拓展、創(chuàng)新等可持續(xù)性發(fā)展能力。3.養(yǎng)成嚴謹求實、自律、吃苦耐勞、熱愛專業(yè)的優(yōu)良品質(zhì)和細心、耐心、克服困難的良好職業(yè)素養(yǎng);以及守法、客觀、公正、準確的食品檢驗的職業(yè)素質(zhì)。教方法手段教學方法:理論實踐一體化教學法、問題探究法、目標教學法、講授法教學資源1.教學設施設備:顯微鏡、實驗室2.教材:〈食品微生物〉3.教案:〈食品微生物〉規(guī)范教案4.網(wǎng)絡資源:課程中心院級精品課程、云桌面、PPT、建立QQ討論群教學活動一:水中菌落總數(shù)的測定活動目標:測定水樣中的菌落總數(shù)?;顒觾?nèi)容與要求:1水樣的采集1.1自來水:先將水龍頭打開至最大,放水約3—5min,然后關閉水龍頭,用酒精燈火焰將水龍頭灼燒3—5min滅菌,或用70%酒精消毒水龍頭,再打開水龍頭,放水1min后,再用無菌的容器接取水樣。如果水樣中含有余氯,則采樣瓶在滅菌前應加入硫代硫酸鈉溶液(每500mL水樣中加入3%的硫代硫酸鈉溶液1mL),以消除余氯的影響,避免其繼續(xù)存在產(chǎn)生殺菌作用。1.2池水、河水或湖水:如采集的是表層水,可握住采樣瓶下部,直接將滅菌的帶玻璃瓶塞插入距水面10—15cm的深層處,除去玻璃瓶塞,瓶口朝水流方向,使水樣灌入瓶內(nèi)后,將瓶塞蓋好,將瓶從水中取出待測。如果采集的是一定深度的水樣時,課使用特制的采樣器。1.3水樣的處置:采集的水樣最好立即檢測,一般從取樣刀檢測不宜超過2h。如不能立即檢測,可在1—5℃下冰箱存放,但較清潔的水樣應在12h內(nèi)測定,污水則必須在6h內(nèi)測定完畢。如無法再規(guī)定時間內(nèi)完成,則應考慮采用延遲培養(yǎng)法,或者在報告中注明水樣采集與測定的間隔時間。取樣時要注明日期、溫度、水的來源、環(huán)境狀況、水的用途等,以供水質(zhì)評價時參考。2樣品的稀釋2.1液體樣品:以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。2.2用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL,沿管壁緩慢注于盛有9mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面),振搖試管使其混合均勻,制成1:100的樣品勻液。2.3按6.1.3操作程序,制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用1次1mL無菌吸管或吸頭。2.4根據(jù)對樣品污染狀況的估計,選擇2個—3個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液),在進行10倍遞增稀釋時,吸取1mL樣品勻液于無菌平皿內(nèi),每個稀釋度做兩個平皿。同時,分別吸取1mL空白稀釋液加入兩個無菌平皿內(nèi)作空白對照。2.5及時將15mL—20mL冷卻至46℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46℃±1℃恒溫水浴箱中保溫)傾注平皿,并轉動平皿使其混合均勻。3培養(yǎng)3.1待瓊脂凝固后,將平板翻轉,36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。水產(chǎn)品30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h。3.2如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時,可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基(約4mL),凝固后翻轉平板,按6.2.1條件進行培養(yǎng)。4菌落計數(shù)可用肉眼觀察,必要時用放大鏡或菌落計數(shù)器,記錄稀釋倍數(shù)和相應的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位(colony—formingunits,CFU)表示。4.1選取菌落數(shù)在30CFU—300CFU之間、無蔓延菌落生長的平板計數(shù)菌落總數(shù)。低于30CFU的平板記錄具體菌落數(shù),大于300CFU的可記錄為多不可計。每個稀釋度的菌落數(shù)應采用兩個平板的平均數(shù)。4.2其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù);若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2,代表一個平板菌落數(shù)。4.3當平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時,則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。成果與檢測:通過計數(shù)與計算,得出水樣中的菌落總數(shù)。教學活動二:大腸菌群的MPN計數(shù)活動目標:通過MP計數(shù)法,測定水樣中的大腸菌群數(shù)?;顒觾?nèi)容與要求:1樣品的稀釋1.1以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10的樣品勻液。1.2樣品勻液的pH值應在6.5—7.5之間,必要時分別用1mol/LNaOH或1mol/LHCl調(diào)節(jié)。1.3用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL,沿管壁緩緩注入9mL生理鹽水的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面),振搖試管,使其混合均勻,制成1:100的樣品勻液。1.4根據(jù)對樣品污染狀況的估計,按上述操作,依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次,換用1支1mL無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢,全過程不得超過15min。2初發(fā)酵試驗每個樣品,選擇3個適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液(液體樣品可以選擇原液),每個稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯,每管接種1mL(如接種量超過1mL,則用雙料LST肉湯),36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h,觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生,產(chǎn)氣者進行復發(fā)酵試驗。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。3復發(fā)酵試驗用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán),移種于煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)管中,36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h,觀察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者,計為大腸菌群陽性管。4大腸菌群最可能數(shù)(MPN)的報告按6.3確證的大腸菌群LST陽性管數(shù),檢索MPN表(見附錄B),報告每mL樣品中大腸菌群的MPN值。成果與檢測:通過計數(shù)與查表,得出水樣中的大腸菌群數(shù)。七、課程實施建議(一)授課實施建議1.授課資料編寫建議《微生物基礎》教材要打破長期以來的學科體系,要以項目和工作任務為載體,融教、學、做于一體,要結合了食品企業(yè)和食品質(zhì)量控制監(jiān)督部門的實際工作中常見的檢驗項目及國標推薦方法進行教材內(nèi)容的編排。要將微生物制片、染色及觀察技術;無菌操作技術;微生物分離、純化和培養(yǎng)技術;菌種保存技術;微生物分析檢驗技術為項目進行編寫;從基礎微生物檢驗技術的訓練到企業(yè)常見的檢驗項目的檢驗訓練,使學生在今后的工作崗位上能夠勝任微生物基礎檢驗項目的設計、檢驗操作與出具檢驗報告的職業(yè)能力。2.教學方法建議本課程堅持以教師主導、學生為主體的原則,隨著學習內(nèi)容的深入與專業(yè)技能的提升,循序漸進地采用多媒體、現(xiàn)場場景、圖片資料、實操訓練、課程中心、QQ討論群等手段有機結合。下面是一些常見教學方法,可根據(jù)教學內(nèi)容選擇運用。(1)理實一體化方法采用“理實一體化”教學方式,教師邊講邊操作,學生現(xiàn)場觀摩和練習,實現(xiàn)理論教學與職場訓練相結合、職業(yè)技能培訓與職業(yè)資格鑒定相結合、任務驅動與頂崗實習相結合、校內(nèi)成績考核與企業(yè)實踐考核相結合的工學結合教學模式。引導學生自主學習、體驗性學習,讓學生在做中學,在體驗中學,在解決問題中學,達到理論和實踐的有機結合。(2)項目化教學將工作任務優(yōu)化組合,形成教學項目:微生物制片、染色及觀察技術;無菌操作技術;微生物分離、純化和培養(yǎng)技術;菌種保存技術;微生物分析檢驗技術;從基礎微生物檢驗技術的訓練到企業(yè)常見的檢驗項目的檢驗訓練,使學生在今后的工作崗位上能夠勝任微生物基礎檢驗項目的設計、操作與出具檢驗報告的職業(yè)能力。(3)小組合作教學法以學生人數(shù)多寡、學生特點、設備與材料數(shù)量、空間運用的彈性為依據(jù),以小組合作教學方法,使學生在最合適的教學食品中學習知識、技能及職業(yè)道德,并獲得良好的人際關系。小組成員間知識、技能和素質(zhì)各有所長,通過互相學習、評價,讓好的學生發(fā)揮示范輔導作用,互相討論與切磋,共同提高技術水平,同時培養(yǎng)了學生相互溝通、尊重他人和關心他人的品德。(4)自主學習教學法學生充分利互聯(lián)網(wǎng),從校園網(wǎng)進入我們的課程中心,老師用心做好課程中心課程建設,同學們可以自主學習與小組學習結合,加深理解學過的內(nèi)容,拓寬知識面,課外師生充分利用網(wǎng)絡資源課后互動溝通,提高學生自主學習能力。(二)教材及其它教學資源教材1.教材:《微生物技術》主編:楊雅蘭、陽志軍華中科技大學出版社。2.主要參考書:翁連海。微生物基礎基礎與應用。北京:高等教育出版社,2005.何國慶。賈英民。微生物基礎學。中國農(nóng)業(yè)大學出版社,2002.周德慶。微生物學教程。北京:高等教育出版社,1993.鄭曉東。微生物基礎學。杭州:浙江大學出版社,2001.3.教學資源要求(1)教學硬件條件在學院課程中心開發(fā)了《微生物基礎檢驗技術》院級精品課程。實驗實訓室配置了適應理實一體化教學、培訓、鑒定的實驗室和實驗的儀器設備,以滿足日益增加的學生人數(shù)及不斷增加的實踐課程教學需要。表5、教學硬件食品條件序號名稱基本配置要求場地大小/m2功能說明1理實一體化實驗室顯微鏡、

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