現(xiàn)代分離與測試技術(shù)課件

傳統(tǒng)（經(jīng)典）提取分離技術(shù)溶劑提取法（浸漬、滲漉、煎煮、回流等）水蒸汽蒸餾法溶劑分離法分餾法沉淀法升華法結(jié)晶法傳統(tǒng)結(jié)構(gòu)測試技術(shù)理化性質(zhì)測定波譜數(shù)據(jù)化學(xué)降解化學(xué)轉(zhuǎn)換半合成全合成文獻(xiàn)比較現(xiàn)代分離技術(shù)色譜技術(shù)

吸附、分配、離子交換、分子篩、親和色譜等類型低壓快速、逆流液滴分溶（DCCC）、高效液相（HPLC）等分子蒸餾超臨界萃取膜分離毛細(xì)管電泳現(xiàn)代測試技術(shù)核磁共振（NMR）2D-NMR質(zhì)譜（MS）HRMS

紅外（IR）紫外（UV）旋光（ORD）X射線單晶衍射（X-RayCrystalAnalysis）嗎啡（morphine）的研究1804-1806年發(fā)現(xiàn)1925年提出確定結(jié)構(gòu)1952年人工全合成合計約150年從發(fā)現(xiàn)、確定結(jié)構(gòu)，到人工全合成，僅花4年時間（1952－1956）利血平（reserpine）的研究分離測試聯(lián)用技術(shù)氣質(zhì)聯(lián)用液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)液核聯(lián)用(LC-NMR)主要內(nèi)容1.提取分離前的準(zhǔn)備工作2.一般原理及常用方法3.活性成分的分離方法4.注意事項1.提取分離前的準(zhǔn)備工作1.1考察研究材料的學(xué)名、產(chǎn)地、藥用部位、采集時間與方法等1.2文獻(xiàn)調(diào)研，以了解利用前人經(jīng)驗1.3化學(xué)成分預(yù)試實驗1.4確定提取分離方案2.一般原理及常用方法2.1提取溶劑法、水蒸汽蒸餾法、升華法等2.2分離

2.2.1根據(jù)物質(zhì)溶解度2.2.2根據(jù)物質(zhì)在兩相溶劑中的分配比2.2.3根據(jù)物質(zhì)的吸附性2.2.4根據(jù)物質(zhì)分子大小2.2.5根據(jù)物質(zhì)解離程度2.2.1根據(jù)物質(zhì)溶解度差別改變溫度：結(jié)晶、重結(jié)晶改變極性：沉淀多糖、蛋白質(zhì)等改變pH值：酸堿法分離生物堿、黃酮，等電點分離氨基酸等加入沉淀劑2.2.2根據(jù)物質(zhì)在溶劑中的分配比液液萃取分配系數(shù)：K=CU/CL分離因子：

=KA/KB

>50逆流分溶：

<50液液分配柱色譜正相色譜與反相色譜加壓液相柱色譜液滴逆流色譜（DCCC）及高速逆流色譜（HSCCC）

2.2.3根據(jù)物質(zhì)的吸附性差別固－液吸附、物理吸附和化學(xué)吸附吸附規(guī)律：相似者易于吸附（吸附劑、溶質(zhì)、溶劑）簡單吸附法進(jìn)行物質(zhì)的濃縮與精制吸附柱色譜用于物質(zhì)的分離硅膠、氧化鋁、聚酰胺、大孔吸附樹脂等分離材料2.2.4根據(jù)物質(zhì)分子大小差別透析法凝膠法

原理種類：葡聚糖凝膠（Sephadex）和羥丙基葡聚糖凝膠（SephadexLH-20）超濾法超速離心法離子交換法電泳技術(shù)2.2.5根據(jù)物質(zhì)解離程度不同3.活性成分的分離方法分離得到純品后再進(jìn)行活性測試

分離與活性測試分為兩個階段，結(jié)果易判斷，但盲目性大，活性成分易丟失（微量成分）活性指導(dǎo)法進(jìn)行分離

選用簡易、靈敏、可靠的活性測試方法作指導(dǎo)，對分離進(jìn)行活性評估，追蹤活性部分和活性成分。能有效地指導(dǎo)分離，排除干擾，調(diào)整方案，得到活性成分，但需具備分離和活性測試的知識、設(shè)備、經(jīng)費(fèi)等。主要內(nèi)容結(jié)構(gòu)測試的策略結(jié)構(gòu)測試的步驟和技術(shù)應(yīng)用舉例注意事項結(jié)構(gòu)測試的策略文獻(xiàn)調(diào)研判斷化合物類型波譜學(xué)等技術(shù)進(jìn)行測試

分子式、官能團(tuán)、結(jié)構(gòu)片斷、基本骨架、平面結(jié)構(gòu)和立體結(jié)構(gòu)等

結(jié)構(gòu)測試的步驟和技術(shù)鑒定化合物的純度初步推斷化合物的類型測定分子式并計算不飽和度確定官能團(tuán)、結(jié)構(gòu)片斷和基本骨架確定平面結(jié)構(gòu)確定立體結(jié)構(gòu)鑒定化合物的純度熔點法TLC、PPC法GC、HPLC法初步推斷化合物的類型提取分離過程中的行為有關(guān)理化性質(zhì)結(jié)合文獻(xiàn)測定分子式并計算不飽和度元素定量分析和分子量測定法同位素峰度法高分辨質(zhì)譜法（HI-MS）不飽和度計算U=Ⅳ-Ⅰ/2+Ⅲ/2+1

確定官能團(tuán)、結(jié)構(gòu)片斷和基本骨架官能團(tuán)定性及定量相關(guān)波譜學(xué)測定及解析UVIRMS1HNMR13CNMR確定平面結(jié)構(gòu)提出一個或幾個可能結(jié)構(gòu)綜合分析波譜測試結(jié)果結(jié)合文獻(xiàn)調(diào)研比較已知化合物或化學(xué)溝通（化學(xué)降解、衍生物制備或化學(xué)合成）確定立體結(jié)構(gòu)測定CD或ORD測定NOE或NOESYX－射線單晶衍射人工合成應(yīng)用舉例灰毛漿果楝D（cipadesinsD,24）的結(jié)構(gòu)鑒定HRESIMS確定灰毛漿果楝D的分子式calcdforC33H40Na1O13[M+Na]+,667.2361

IR顯示羰基信號

IR吸收峰νmax1749、1738cm-1

灰毛漿果楝D的UV譜圖

灰毛漿果楝D的1HNMR譜圖

1個β取代的呋喃環(huán)4個與季碳相連的甲基3個乙酰基1個甲氧基灰毛漿果楝D的13CNMR譜圖

顯示33個信號，除1個甲氧基、3個乙酰基外，剩余26個信號，包括1個β取代的呋喃環(huán)和4個與季碳相連的甲基，表明24可能為四降三萜類化合物灰毛漿果楝D的HSQC譜圖

灰毛漿果楝D的HMBC譜圖

HMBC實驗推定灰毛漿果楝D的結(jié)構(gòu)ImportantHMBCcorrelationsofcipadesinsD灰毛漿果楝D的NOESY譜圖

NOESY實驗確定灰毛漿果楝D的相對構(gòu)型ImportantNOESYcorrelationsofcipadesinsDX-射線單晶衍射實驗證明結(jié)構(gòu)ORTEPdiagramof24主要內(nèi)容概述儀器及其基本原理質(zhì)譜解析應(yīng)用概述質(zhì)譜法（MassSpectrometry,MS）

化合物

離子化質(zhì)量分析器檢測器特點：

范圍寬、靈敏度高、速度快、信息直觀、確定分子量和分子式儀器及其基本原理質(zhì)譜儀器離子源及離子化技術(shù)質(zhì)量分析器及質(zhì)量分離原理進(jìn)樣系統(tǒng)離子檢測器TheMassSpectrometer

SampleinletIonsourceMassanalyzerDatasystemdetector離子源及離子化技術(shù)離子源離子化技術(shù)1.Electronimpactionization(EI)：2.Chemicalionization(CI)3.Fielddesorptionionization(FD)4.Fastatombombardmentionization(FAB)5.Matrixassistedlaserdesorptionionization(MALDI)6.Atmosphericpressureionization(API)(1).Electrosprayionization(ESI)(2).Atmosphericpressurechemicalionization(APCI)不同樣品所適用的離子化技術(shù)常規(guī)樣品采取EI法為提高分子離子峰豐度采用CI或FD法難揮發(fā)、高極性或分子量大的樣品，可采用FAB、MALDI和ESI法等質(zhì)譜解析質(zhì)譜中的離子質(zhì)譜裂解規(guī)律質(zhì)譜解析質(zhì)譜中的離子MolecularionsFragmentionsIsotopicionsMultiplyionsMetastableionsOddelectronionsEvenelectronions分子離子的識別分子離子峰的強(qiáng)弱取決于分子離子的穩(wěn)定性N規(guī)則合理的中性丟失改變試驗條件采用其它離子化方法分子離子的作用給出分子量給出分子式推測化合物的結(jié)構(gòu)類型分子離子峰的相對豐度與分子的結(jié)構(gòu)有關(guān)。FormulaC6H12C5H8OC4H8N2Mass84.093984.057584.0688質(zhì)譜裂解規(guī)律裂解的產(chǎn)生：70eV、內(nèi)部不安定因素電離發(fā)生的位置：最低電離電位的電子影響離子豐度的因素：

穩(wěn)定性、stevenson規(guī)則、最大烷基丟失裂解方式：均裂、異裂和半異裂開裂的類型及簡單機(jī)理：

單純、重排和復(fù)雜開裂質(zhì)譜解析參考被測樣品的其它已知信息所用離子化方法確定分子離子確定分子式推測可能含有的官能團(tuán)分析基峰及主要碎片離子可能代表的結(jié)構(gòu)單元推測、篩選可能的結(jié)構(gòu)式應(yīng)用質(zhì)譜在天然產(chǎn)物分析中的應(yīng)用質(zhì)譜在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用在天然產(chǎn)物分析中的應(yīng)用電離方式相關(guān)技術(shù)超微量樣品離子化相關(guān)技術(shù)現(xiàn)場樣品前處理質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)電離方式相關(guān)技術(shù)LC／APCI－MS測定了綠茶和紅茶中的12種微量兒茶酚檢測分析蔬菜汁中多種弱極性分子β胡蘿卜素異構(gòu)體ESI-multi-CHEFSORI-CIDFTMS)法解析muraymycinA1和B1的精確分子量和分子式超微量樣品離子化相關(guān)技術(shù)納升級電噴霧質(zhì)譜(nano－ESI)技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展使質(zhì)譜的檢測限大為降低,達(dá)到nmol級,甚至amol級應(yīng)用nano－ESI，用前體離子掃描定量分析了amol級的甾族化合物樣品應(yīng)用nano－ESI四極桿飛行時間質(zhì)譜測定了海藻中的一種單二甲基含砷糖現(xiàn)場樣品前處理質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用脈沖超濾質(zhì)譜，篩選并評價了多種COX2抑制劑應(yīng)用固相微提取質(zhì)譜技術(shù),測定了幾種揮發(fā)和半揮發(fā)化學(xué)試劑和兩種除草劑，檢測靈敏度達(dá)到ppb級和ppt級在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用質(zhì)譜與蛋白質(zhì)分析

質(zhì)譜與核酸研究質(zhì)譜與臨床醫(yī)學(xué)質(zhì)譜與檢測展望質(zhì)譜與蛋白質(zhì)分析蛋白質(zhì)分子量的測定：MALI－MS技術(shù)

蛋白質(zhì)組研究：1.多肽、蛋白質(zhì)的質(zhì)量2.肽指紋圖譜測定（肽指紋譜的方法比氨基酸組成分析更為可靠）3.氨基酸序列測定等（串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)）

質(zhì)譜與核酸研究ESI和MALDI質(zhì)譜技術(shù)與寡核苷酸及其類似物的結(jié)構(gòu)和序列分析

外切酶從3’或5’端進(jìn)行部分降解，在不同時間內(nèi)分別取樣進(jìn)行質(zhì)譜分析

質(zhì)譜應(yīng)用于DNA研究領(lǐng)域

M．L．Vestal和鄧慧敏等把離子延遲引出技術(shù)（lonDelayedExtraction,DE）應(yīng)用于MALDI－MS中，測定混合堿基DNA，獲得了高分辨率的DNA質(zhì)譜圖。

質(zhì)譜與臨床醫(yī)學(xué)對藥物代謝產(chǎn)物的動態(tài)分析癌細(xì)胞蛋白質(zhì)的鑒定同位素標(biāo)記物的檢測等

用同位素14C標(biāo)記的14C-尿素呼吸試驗和15

N標(biāo)記的15

N-排泄試驗已成為臨床檢測胃幽門螺桿菌（HP）的有效手段。

質(zhì)譜與檢測生物工程產(chǎn)品與MALDI-TOF-MS

技術(shù)蔡耘等用上述技術(shù)對重組的人表皮生長因子（hEGF）白細(xì)胞介素-3（IL－3）、腫瘤壞死因子（TNF）粒細(xì)胞＼巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM－CSF）、粒細(xì)胞集落刺激因子（G—CSF）堿性成纖維生長因子（bFGF）等六種基因工程產(chǎn)品進(jìn)行了測定，獲得了準(zhǔn)確的分子量信息及純度信息

1.1概述1.2紅外光譜與有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)1.3

分子中基團(tuán)的基本振動形式1.4影響峰位變化的因素1.紅外光譜分析基本原理分子中基團(tuán)的振動和轉(zhuǎn)動能級躍遷產(chǎn)生：振-轉(zhuǎn)光譜1.1概述紅外光譜圖：縱坐標(biāo)為吸收強(qiáng)度，橫坐標(biāo)為波長λ（μm）和波數(shù)1/λ

單位：cm-1可以用峰數(shù)，峰位，峰形，峰強(qiáng)來描述。應(yīng)用：有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)解析。定性：基團(tuán)的特征吸收頻率；定量：特征峰的強(qiáng)度；1.2紅外光譜與有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)1.紅外光譜產(chǎn)生的條件

滿足兩個條件：

(1)輻射應(yīng)具有能滿足物質(zhì)產(chǎn)生振動躍遷所需的能量；

(2)輻射與物質(zhì)間有相互偶合作用。

對稱分子：沒有偶極矩，輻射不能引起共振，無紅外活性。

如：N2、O2、Cl2

等。

非對稱分子：有偶極矩，紅外活性。偶極子在交變電場中的作用示意圖2.分子振動方程式分子的振動能級（量子化）：

E振=（V+1/2）h

V：化學(xué)鍵的振動頻率；

：振動量子數(shù)。(1)雙原子分子的簡諧振動及其頻率化學(xué)鍵的振動類似于連接兩個小球的彈簧(2)分子振動方程式任意兩個相鄰的能級間的能量差為：K化學(xué)鍵的力常數(shù)，與鍵能和鍵長有關(guān)，

為雙原子的折合質(zhì)量

=m1m2/（m1+m2）發(fā)生振動能級躍遷需要能量的大小取決于鍵兩端原子的折合質(zhì)量和鍵的力常數(shù)，即取決于分子的結(jié)構(gòu)特征。表某些鍵的伸縮力常數(shù)（毫達(dá)因/埃）鍵類型:—CC—>—C=C—>—C—C—力常數(shù):15

179.5

9.94.5

5.6峰位:4.5m6.0m7.0m化學(xué)鍵鍵強(qiáng)越強(qiáng)（即鍵的力常數(shù)K越大）原子折合質(zhì)量越小，化學(xué)鍵的振動頻率越大，吸收峰將出現(xiàn)在高波數(shù)區(qū)。1.3

分子中基團(tuán)的基本振動形式

1．兩類基本振動形式伸縮振動亞甲基：變形振動亞甲基例１水分子２．峰位、峰數(shù)與峰強(qiáng)（1）峰位化學(xué)鍵的力常數(shù)k越大，原子折合質(zhì)量越小，鍵的振動頻率越大，吸收峰將出現(xiàn)在高波數(shù)區(qū)（短波長區(qū)）；反之，出現(xiàn)在低波數(shù)區(qū)（高波長區(qū)）。（2）峰數(shù)峰數(shù)與分子自由度有關(guān)。無瞬間偶基距變化時，無紅外吸收。例2CO2分子（4）由基態(tài)躍遷到第一激發(fā)態(tài)，產(chǎn)生一個強(qiáng)的吸收峰，基頻峰；（5）由基態(tài)直接躍遷到第二激發(fā)態(tài)，產(chǎn)生一個弱的吸收峰，倍頻峰；（3）瞬間偶基距變化大，吸收峰強(qiáng)；鍵兩端原子電負(fù)性相差越大（極性越大），吸收峰越強(qiáng)；

1．內(nèi)部因素（1）電子效應(yīng)a．誘導(dǎo)效應(yīng)：吸電子基團(tuán)使吸收峰向高頻方向移動（藍(lán)移）1.4影響峰位變化的因素

化學(xué)鍵的振動頻率不僅與其性質(zhì)有關(guān)，還受分子的內(nèi)部結(jié)構(gòu)和外部因素影響。各種化合物中相同基團(tuán)的特征吸收并不總在一個固定頻率上。R-COR

C=01715cm-1;R-COH

C=01730cm-1

；R-COCl

C=01800cm-1;R-COF

C=01920cm-1;F-COF

C=01920cm-1;R-CONH2

C=01928cm-1;ｂ．共軛效應(yīng)cm-1cm-1cm-1cm-1

共軛效應(yīng)使共軛體系中的電子云密度平均化，使其吸收頻率向低波數(shù)方向移動。CHCHCHCH1576cm-11611cm-11644cm-11781cm-11678cm-11657cm-11651cm-1（２）空間效應(yīng)

場效應(yīng)；空間位阻；環(huán)張力CH3060-3030cm-12900-2800cm-12222（3）氫鍵效應(yīng)

氫鍵(分子內(nèi)氫鍵；分子間氫鍵)：對峰位，峰強(qiáng)產(chǎn)生極明顯影響，使伸縮振動頻率向低波數(shù)方向移動。2．外部因素溶劑效應(yīng)物質(zhì)的狀態(tài)2.1儀器類型與結(jié)構(gòu)2.2制樣方法2.3聯(lián)用技術(shù)2.儀器與方法2.1儀器類型與結(jié)構(gòu)

兩種類型：色散型干涉型（付立葉變換紅外光譜儀）內(nèi)部結(jié)構(gòu)Nicolet公司的AVATAR360FT-IR傅里葉變換紅外光譜儀結(jié)構(gòu)框圖干涉儀光源樣品室檢測器顯示器繪圖儀計算機(jī)干涉圖光譜圖FTS傅里葉變換紅外光譜儀工作原理圖邁克爾干涉儀工作原理圖2.2制樣方法1）氣體——?dú)怏w池2）液體：①液膜法——難揮發(fā)液體（bp>80C）②溶液法——液體池溶劑：CCl4，CS2常用。3)固體:①研糊法（液體石臘法）②KBr壓片法③薄膜法2.3聯(lián)用技術(shù)GC/FTIR（氣相色譜紅外光譜聯(lián)用）LC/FTIR（液相色譜紅外光譜聯(lián)用）PAS/FTIR（光聲紅外光譜）MIC/FTIR（顯微紅外光譜）——微量及微區(qū)分析3.1紅外光譜的特征性3.2有機(jī)化合物分子中常見基團(tuán)吸收峰3.3基團(tuán)吸收帶數(shù)據(jù)3.紅外光譜與分子結(jié)構(gòu)3.1紅外光譜的特征性

與一定結(jié)構(gòu)單元相聯(lián)系的、在一定范圍內(nèi)出現(xiàn)的化學(xué)鍵振動頻率——基團(tuán)特征頻率（特征峰）；例：2800

3000cm-1—CH3特征峰；1600

1850cm-1—C=O特征峰；基團(tuán)所處化學(xué)環(huán)境不同，特征峰出現(xiàn)位置變化：—CH2—CO—CH2—1715cm-1

酮—CH2—CO—O—1735cm-1

酯—CH2—CO—NH—1680cm-1

酰胺紅外光譜與分子結(jié)構(gòu)常見的有機(jī)化合物基團(tuán)頻率出現(xiàn)的范圍：4000

670cm-1依據(jù)基團(tuán)的振動形式，分為四個區(qū)：(1)4000

2500cm-1X—H伸縮振動區(qū)（X=O，N，C，S）(2)2500

1900cm-1

三鍵，累積雙鍵伸縮振動區(qū)(3)1900

1200cm-1

雙鍵伸縮振動區(qū)(4)1200

670cm-1

X—Y伸縮，

X—H變形振動區(qū)3.2有機(jī)化合物分子中常見基團(tuán)吸收峰3.2.1．X—H伸縮振動區(qū)（4000

2500cm-1）（1）—O—H3650

3200cm-1

確定醇，酚，酸

在非極性溶劑中，濃度較?。ㄏ∪芤海r，峰形尖銳，強(qiáng)吸收；當(dāng)濃度較大時，發(fā)生締合作用，峰形較寬。（3）不飽和碳原子上的=C—H（

C—H

）

苯環(huán)上的C—H3030cm-1

=C—H3010

2260cm-1

C—H3300

cm-1（2）飽和碳原子上的—C—H3000cm-1以上

—CH3

2960

cm-1

反對稱伸縮振動2870

cm-1

對稱伸縮振動

—CH2—2930

cm-1反對稱伸縮振動2850

cm-1

對稱伸縮振動

—C—H2890cm-1

弱吸收3000cm-1以下3.2.2．雙鍵伸縮振動區(qū)(1200

1900cm-1)（1）RC=CR’1620

1680cm-1

強(qiáng)度弱，

R=R’（對稱）時，無紅外活性。（2）單核芳烴的C=C伸縮振動出現(xiàn)在1600cm-1和1500cm-1附近，有兩個峰，這是芳環(huán)的骨架結(jié)構(gòu)，用于確認(rèn)有無芳核的存在。（3）苯衍生物在1650

2000cm-1出現(xiàn)C-H和C=C鍵的面內(nèi)變形振動的泛頻吸收（強(qiáng)度弱），可用來判斷取代基位置。（4）C=O（1850

1600cm-1）碳氧雙鍵的特征峰，強(qiáng)度大，峰尖銳。3.2.3．叁鍵伸縮振動區(qū)(2500

1900cm-1)3.2.4.X—Y，X—H變形振動區(qū)<1650cm-

指紋區(qū)(1350

650cm-1),較復(fù)雜。

C-H，N-H的變形振動；

C-O，C-X的伸縮振動；

C-C骨架振動等。精細(xì)結(jié)構(gòu)的區(qū)分。（1）RCCH（2100

2140cm-1）

RCCR’（2190

2260cm-1）

R=R’時，無紅外活性（2）RCN（2100

2140cm-1）非共軛2240

2260cm-1

共軛2220

2230cm-1

3.3基團(tuán)吸收帶數(shù)據(jù)常見基團(tuán)的紅外吸收帶特征區(qū)指紋區(qū)500100015002000250030003500C-H，N-H，O-HN-HCNC=NS-HP-HN-ON-NC-FC-XO-HO-H（氫鍵）C=OC-C，C-N，C-O=C-HC-HCCC=C

紅外光譜法廣泛用于有機(jī)化合物的定性分析和定量分析。4.1定性分析

4.1.1.已知物的鑒定

將試樣的譜圖與標(biāo)準(zhǔn)的譜圖進(jìn)行對照，或者與文獻(xiàn)上的譜圖進(jìn)行對照。幾種標(biāo)準(zhǔn)譜圖（1）薩特勒（Sadtler）標(biāo)準(zhǔn)紅外光譜圖（2）Aldrich紅外譜圖庫（3）SigmaFourier紅外光譜圖庫4.紅外光譜法的應(yīng)用4.1.2.未知物結(jié)構(gòu)的測定測定未知物的結(jié)構(gòu)，是紅外光譜法定性分析的一個重要用途。如果未知物不是新化合物，可以通過兩種方式利用標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行查對：（1）查閱標(biāo)準(zhǔn)譜圖的譜帶索引，與尋找試樣光譜吸收帶相同的標(biāo)準(zhǔn)譜圖；（2）進(jìn)行光譜解析，判斷試樣的可能結(jié)構(gòu)，然后在由化學(xué)分類索引查找標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照核實。

在定性分析過程中，除了獲得清晰可靠的圖譜外，最重要的是對譜圖作出正確的解析。所謂譜圖的解析就是根據(jù)實驗所測繪的紅外光譜圖的吸收峰位置、強(qiáng)度和形狀，利用基團(tuán)振動頻率與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系，確定吸收帶的歸屬，確認(rèn)分子中所含的基團(tuán)或鍵，進(jìn)而推定分子的結(jié)構(gòu)。簡單地說，就是根據(jù)紅外光譜所提供的信息，正確地把化合物的結(jié)構(gòu)“翻譯”出來。往往還需結(jié)合其他實驗資料，如相對分子質(zhì)量、物理常數(shù)、紫外光譜、核磁共振波譜及質(zhì)譜等數(shù)據(jù)才能正確判斷其結(jié)構(gòu)。4.1.3譜圖的解析準(zhǔn)備工作

在進(jìn)行未知物光譜解析之前，必須對樣品有透徹的了解，例如樣品的來源、外觀，根據(jù)樣品存在的形態(tài)，選擇適當(dāng)?shù)闹茦臃椒?；注意視察樣品的顏色、氣味等，它們住往是判斷未知物結(jié)構(gòu)的佐證。還應(yīng)注意樣品的純度以及樣品的元素分析及其它物理常數(shù)的測定結(jié)果。樣品的相對分子質(zhì)量、沸點、熔點、折光率、旋光率等物理常數(shù)，可作光譜解釋的旁證，并有助于縮小化合物的范圍。根據(jù)未知物不飽和度判斷

當(dāng)

=0時，表示分子是飽和的，應(yīng)在鏈狀烴及其不含雙鍵的衍生物。當(dāng)

=1時，可能有一個雙鍵或脂環(huán)；當(dāng)

=2時，可能有兩個雙鍵和脂環(huán)，也可能有一個叁鍵；當(dāng)

=4時，可能有一個苯環(huán)等。

根據(jù)上表可以粗略估計可能存在的基團(tuán)，并推測其可能的化合物類別，然后進(jìn)行紅外的圖譜解析。官能團(tuán)分析根據(jù)官能團(tuán)的初步分析可以排除一部分結(jié)構(gòu)的可能性，肯定某些可能存在的結(jié)構(gòu)，并初步可以推測化合物的類別。小結(jié)

圖譜的解析主要是靠長期的實踐、經(jīng)驗的積累，至今仍沒有一一個特定的辦法。一般程序是先官能團(tuán)區(qū)，后指紋區(qū)；先強(qiáng)峰后弱峰；先否定后肯定。首先在官能團(tuán)區(qū)（4000~1300cm-1）搜尋官能團(tuán)的特征伸縮振動，再根據(jù)指紋區(qū)的吸收情況，進(jìn)一步確認(rèn)該基團(tuán)的存在以及與其它基團(tuán)的結(jié)合方式。如果是芳香族化合物，應(yīng)定出苯環(huán)取代位置。最后再結(jié)合樣品的其它分析資料，綜合判斷分析結(jié)果，提出最可能的結(jié)構(gòu)式，然后用已知樣品或標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照，核對判斷的結(jié)果是否正確。如果樣品為新化合物，則需要結(jié)合紫外、質(zhì)譜、核磁等數(shù)據(jù)，才能決定所提的結(jié)構(gòu)是否正確。4.2定量分析

紅外光譜定量分析是通過對特征吸收譜帶強(qiáng)度的測量來求出組份含量。其理論依據(jù)是朗伯-比耳定律。

由于紅外光譜的譜帶較多，選擇的余地大，所以能方便地對單一組份和多組份進(jìn)行定量分析。此外，該法不受樣品狀態(tài)的限制，能定量測定氣體、液體和固體樣品。因此，紅外光譜定量分析應(yīng)用廣泛。但紅外光譜法定量靈敏度較低，尚不適用于微量組份的測定。紅外譜圖解析示例1．烷烴2.烯烴對比烯烴順反異構(gòu)體3.醇?xì)滏I締合

基于物質(zhì)光化學(xué)性質(zhì)而建立起來的分析方法稱之為光化學(xué)分析法。分為:光譜分析法和非光譜分析法。光譜分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通過測量物質(zhì)產(chǎn)生的發(fā)射光、吸收光或散射光的波長和強(qiáng)度來進(jìn)行分析的方法。

吸收光譜分析發(fā)射光譜分析分子光譜分析原子光譜分析１.基本原理

在光譜分析中，依據(jù)物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立起來的分析方法稱為吸光光度法,主要有:

紅外吸收光譜：分子振動光譜，吸收光波長范圍2.51000m,主要用于有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)鑒定。

紫外吸收光譜：電子躍遷光譜，吸收光波長范圍200400nm（近紫外區(qū)），可用于結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析。

可見吸收光譜：電子躍遷光譜，吸收光波長范圍400750nm，主要用于有色物質(zhì)的定量分析。

１.２.1．光的基本性質(zhì)

光是一種電磁波，具有波粒二象性。光的波動性可用波長

、頻率

、光速c、波數(shù)（cm-1）等參數(shù)來描述：

=c

；波數(shù)=1/

=

/c

光是由光子流組成，光子的能量：

E=h=hc/

（Planck常數(shù)：h=6.626×10-34J×S)

光的波長越短（頻率越高），其能量越大。白光(太陽光)：由各種單色光組成的復(fù)合光

單色光：單波長的光(由具有相同能量的光子組成)

可見光區(qū)：400-750nm

紫外光區(qū)：近紫外區(qū)200-400nm

遠(yuǎn)紫外區(qū)10-200nm（真空紫外區(qū)）１.２紫外可見吸收光譜

１.２.2.物質(zhì)對光的選擇性吸收及吸收曲線M+熱M+熒光或磷光

E=E2-

E1=h

量子化；選擇性吸收;

分子結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性使其對不同波長光的吸收程度不同；用不同波長的單色光照射，測吸光度—吸收曲線與最大吸收波長

max；M+

h

M*

光的互補(bǔ)：藍(lán)

黃基態(tài)激發(fā)態(tài)E1

（△E）E2

（1）同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對應(yīng)的波長稱為最大吸收波長λmax

（2）不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收曲線形狀相似λmax不變。而對于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和λmax則不同。

（3）③吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)之一。（4）不同濃度的同一種物質(zhì)，在某一定波長下吸光度A有差異，在λmax處吸光度A的差異最大。此特性可作為物質(zhì)定量分析的依據(jù)。（5）在λmax處吸光度隨濃度變化的幅度最大，所以測定最靈敏。吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長的重要依據(jù)。吸收曲線的討論１.２.3.電子躍遷

物質(zhì)分子內(nèi)部三種運(yùn)動形式：

（1）電子相對于原子核的運(yùn)動（2）原子核在其平衡位置附近的相對振動（3）分子本身繞其重心的轉(zhuǎn)動分子具有三種不同能級：電子能級、振動能級和轉(zhuǎn)動能級三種能級都是量子化的，且各自具有相應(yīng)的能量分子的內(nèi)能：電子能量Ee

、振動能量Ev

、轉(zhuǎn)動能量Er

即E＝Ee+Ev+ErΔΕe>ΔΕv>ΔΕr

紫外-可見光譜屬于電子躍遷光譜。

電子能級間躍遷的同時總伴隨有振動和轉(zhuǎn)動能級間的躍遷。即電子光譜中總包含有振動能級和轉(zhuǎn)動能級間躍遷產(chǎn)生的若干譜線而呈現(xiàn)寬譜帶。能級躍遷討論：（1）轉(zhuǎn)動能級間的能量差ΔEr：0.005～0.050eV，躍遷產(chǎn)生吸收光譜位于遠(yuǎn)紅外區(qū)。遠(yuǎn)紅外光譜或分子轉(zhuǎn)動光譜；（2）振動能級的能量差ΔEv約為：0.05～１eV，躍遷產(chǎn)生的吸收光譜位于紅外區(qū)，紅外光譜或分子振動光譜；（3）電子能級的能量差ΔEe較大1～20eV。電子躍遷產(chǎn)生的吸收光譜在紫外—可見光區(qū)，紫外—可見光譜或分子的電子光譜

（4）吸收光譜的波長分布是由產(chǎn)生譜帶的躍遷能級間的能量差所決定，反映了分子內(nèi)部能級分布狀況，是物質(zhì)定性的依據(jù)。（5）吸收譜帶強(qiáng)度與分子偶極矩變化、躍遷幾率有關(guān)，也提供分子結(jié)構(gòu)的信息。通常將在最大吸收波長處測得的摩爾吸光系數(shù)εmax也作為定性的依據(jù)。不同物質(zhì)的λmax有時可能相同，但εmax不一定相同；（6）吸收譜帶強(qiáng)度與該物質(zhì)分子吸收的光子數(shù)成正比，定量分析的依據(jù)。討論：１.３分子吸收光譜與電子躍遷

有機(jī)化合物的紫外—可見吸收光譜，是其分子中外層價電子躍遷的結(jié)果（三種）：σ電子、π電子、n電子。

分子軌道理論：一個成鍵軌道必定有一個相應(yīng)的反鍵軌道。通常外層電子均處于分子軌道的基態(tài)，即成鍵軌道或非鍵軌道上。

外層電子吸收紫外或可見輻射后，就從基態(tài)向激發(fā)態(tài)(反鍵軌道)躍遷。主要有四種躍遷所需能量ΔΕ大小順序為：n→π＊

<π→π＊

<n→σ＊

<σ→σ＊

⑴

σ→σ＊躍遷

所需能量最大，σ電子只有吸收遠(yuǎn)紫外光的能量才能發(fā)生躍遷。飽和烷烴的分子吸收光譜出現(xiàn)在遠(yuǎn)紫外區(qū)(吸收波長λ<200nm，只能被真空紫外分光光度計檢測到)。如甲烷的λ為125nm,乙烷λmax為135nm。

⑵

n→σ＊躍遷

所需能量較大。吸收波長為150～250nm，大部分在遠(yuǎn)紫外區(qū)，近紫外區(qū)仍不易觀察到。含非鍵電子的飽和烴衍生物(含N、O、S和鹵素等雜原子)均呈現(xiàn)n→σ*躍遷。如一氯甲烷、甲醇、三甲基胺n→σ*躍遷的λ分別為173nm、183nm和227nm。

⑶π→π＊躍遷

所需能量較小，吸收波長處于遠(yuǎn)紫外區(qū)的近紫外端或近紫外區(qū)，摩爾吸光系數(shù)εmax一般在104L·mol－1·cm－1以上，屬于強(qiáng)吸收。不飽和烴、共軛烯烴和芳香烴類均可發(fā)生該類躍遷。如：乙烯π→π*躍遷的λ為162nm，

εmax為:1×104L·mol-1·cm－1。

⑷n→π＊躍遷

需能量最低，吸收波長λ>200nm。這類躍遷在躍遷選律上屬于禁阻躍遷，摩爾吸光系數(shù)一般為10～100L·mol-1·cm-1，吸收譜帶強(qiáng)度較弱。分子中孤對電子和π鍵同時存在時發(fā)生n→π＊躍遷。丙酮n→π＊躍遷的λ為275nmεmax為22L·mol-1·cm-1（溶劑環(huán)己烷)。生色團(tuán)與助色團(tuán)生色團(tuán)：

最有用的紫外—可見光譜是由π→π＊和n→π＊躍遷產(chǎn)生的。這兩種躍遷均要求有機(jī)物分子中含有不飽和基團(tuán)。這類含有π鍵的不飽和基團(tuán)稱為生色團(tuán)。簡單的生色團(tuán)由雙鍵或叁鍵體系組成，如乙烯基、羰基、亞硝基、偶氮基—N＝N—、乙炔基、腈基—C三N等。助色團(tuán)：

有一些含有n電子的基團(tuán)(如—OH、—OR、—NH２、—NHR、—X等)，它們本身沒有生色功能(不能吸收λ>200nm的光)，但當(dāng)它們與生色團(tuán)相連時，就會發(fā)生n—π共軛作用，增強(qiáng)生色團(tuán)的生色能力(吸收波長向長波方向移動，且吸收強(qiáng)度增加)，這樣的基團(tuán)稱為助色團(tuán)。

有機(jī)化合物的吸收譜帶常常因引入取代基或改變?nèi)軇┦棺畲笪詹ㄩLλmax和吸收強(qiáng)度發(fā)生變化:

λmax向長波方向移動稱為紅移，向短波方向移動稱為藍(lán)移(或紫移)。吸收強(qiáng)度即摩爾吸光系數(shù)ε增大或減小的現(xiàn)象分別稱為增色效應(yīng)或減色效應(yīng)，如圖所示。紅移與藍(lán)移影響吸收峰位置的因素溶劑效應(yīng)

由于溶劑對溶質(zhì)分子基態(tài)和激發(fā)態(tài)的穩(wěn)定化不同，溶劑極性增大，最大吸收峰位置改變：R帶藍(lán)移，K帶紅移。溶劑若形成氫鍵，則R帶藍(lán)移。結(jié)構(gòu)共軛體系的共軛程度增高導(dǎo)致紅移。1.4.1朗伯—比耳定律

布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年闡明了光的吸收程度和吸收層厚度的關(guān)系。A∝b

1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物濃度之間也具有類似的關(guān)系。A∝c

二者的結(jié)合稱為朗伯—比耳定律，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：

A＝lg（I0/It)=εbc

A：吸光度；描述溶液對光的吸收程度；

b：液層厚度(光程長度)，通常以cm為單位；

c：溶液的摩爾濃度，單位mol·L－１；

ε：摩爾吸光系數(shù)，單位L·mol－１·cm－１１.４光的吸收定律1.4.2摩爾吸光系數(shù)ε的討論

（1）吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)；

（2）不隨濃度c和光程長度b的改變而改變。在溫度和波長等條件一定時，ε僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；（3）可作為定性鑒定的參數(shù)；

（4）同一吸收物質(zhì)在不同波長下的ε值是不同的。在最大吸收波長λmax處的摩爾吸光系數(shù)，常以εmax表示。εmax表明了該吸收物質(zhì)最大限度的吸光能力，也反映了光度法測定該物質(zhì)可能達(dá)到的最大靈敏度。

（5）εmax越大表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，用光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高。ε>105：超高靈敏；

ε=(6～10）×104

：高靈敏；

ε<2×104：不靈敏。（6）ε在數(shù)值上等于濃度為1mol/L、液層厚度為1cm時該溶液在某一波長下的吸光度。1.4.3.偏離朗伯—比耳定律的原因

標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定未知溶液的濃度時，發(fā)現(xiàn)：標(biāo)準(zhǔn)曲線常發(fā)生彎曲（尤其當(dāng)溶液濃度較高時），這種現(xiàn)象稱為對朗伯—比耳定律的偏離。引起這種偏離的因素（兩大類）：（1）物理性因素，即儀器的非理想引起的；（2）化學(xué)性因素。

可見分光光度計2.儀器

紫外-可見分光光度計光源單色器樣品室檢測器顯示2.1.1.光源

在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命。

可見光區(qū)：鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在320～2500nm。紫外區(qū)：氫、氘燈。發(fā)射185～400nm的連續(xù)光譜。2.1基本組成

2.1.2.單色器

將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出一任波長單色光的光學(xué)系統(tǒng)。①入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；②準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；③色散元件：將復(fù)合光分解成單色光；棱鏡或光柵；

④聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫；⑤出射狹縫。2.1.3.樣品室

樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應(yīng)的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池兩種。在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。2.1.4.檢測器

利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號變成可測的電信號，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。2.1.5.結(jié)果顯示記錄系統(tǒng)檢流計、數(shù)字顯示、微機(jī)進(jìn)行儀器自動控制和結(jié)果處理2.2分光光度計的類型

2.2.1.單光束

簡單，價廉，適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。2.2.2.雙光束自動記錄，快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價格較高。2.2.3.雙波長

將不同波長的兩束單色光(λ1、λ2)快束交替通過同一吸收池而后到達(dá)檢測器。產(chǎn)生交流信號。無需參比池?！?/p>

=1～2nm。兩波長同時掃描即可獲得導(dǎo)數(shù)光譜。3有機(jī)化合物紫外光譜解析

了解共軛程度、空間效應(yīng)、氫鍵等；可對飽和與不飽和化合物、異構(gòu)體及構(gòu)象進(jìn)行判別。

紫外—可見吸收光譜中有機(jī)物發(fā)色體系信息分析的一般規(guī)律是：

⑴若在200～750nm波長范圍內(nèi)無吸收峰，則可能是直鏈烷烴、環(huán)烷烴、飽和脂肪族化合物或僅含一個雙鍵的烯烴等。⑵若在270～350nm波長范圍內(nèi)有低強(qiáng)度吸收峰(ε＝10～100L·mol-1·cm-1),（n→π躍遷），則可能含有一個簡單非共軛且含有n電子的生色團(tuán)，如羰基。

⑶若在2５0～300nm波長范圍內(nèi)有中等強(qiáng)度的吸收峰則可能為芳香族化合物。

⑷若在210～250nm波長范圍內(nèi)有強(qiáng)吸收峰，則可能含有2個共軛雙鍵；若在260～300nm波長范圍內(nèi)有強(qiáng)吸收峰，則說明該有機(jī)物含有3個或3個以上共軛雙鍵。⑸若該有機(jī)物的吸收峰延伸至可見光區(qū)，則該有機(jī)物可能是長鏈共軛或稠環(huán)化合物?！鱁=hν高能態(tài)低能態(tài)氫原子在外加磁場子中的取向r為旋磁比，h為Planck常數(shù)當(dāng)E射=

hν射=△E

時，質(zhì)子吸收電磁輻射的能量，從低能級躍起遷至高能級，這種現(xiàn)象即稱為核磁共振。凡是自旋量子數(shù)不等于零的原子核，都可發(fā)生核磁共振。常用1HNMR和13CNMR。第一節(jié)核磁共振基本原理共振條件(1)核有自旋(磁性核)(2)外磁場,能級裂分;(3)照射頻率與外磁場的比值

0/H0=

/(2)在1950年，Proctor等人研究發(fā)現(xiàn)：質(zhì)子的共振頻率與其結(jié)構(gòu)（化學(xué)環(huán)境）有關(guān)。在高分辨率下，吸收峰產(chǎn)生化學(xué)位移和裂分，如右圖所示。由有機(jī)化合物的核磁共振圖，可獲得質(zhì)子所處化學(xué)環(huán)境的信息，進(jìn)一步確定化合物結(jié)構(gòu)。四、核磁共振波譜儀1．永久磁鐵：提供外磁場，要求穩(wěn)定性好，均勻，不均勻性小于六千萬分之一。掃場線圈。2．射頻振蕩器：線圈垂直于外磁場，發(fā)射一定頻率的電磁輻射信號。3．射頻信號接受器（檢測器）：當(dāng)質(zhì)子的進(jìn)動頻率與輻射頻率相匹配時，發(fā)生能級躍遷，吸收能量，在感應(yīng)線圈中產(chǎn)生毫伏級信號。4．樣品管：外徑5mm的玻璃管,測量過程中旋轉(zhuǎn),磁場作用均勻。第二節(jié)化學(xué)位移屏蔽作用與化學(xué)位移

理想化的、裸露的氫核；滿足共振條件：

0=

H0/(2

)產(chǎn)生單一的吸收峰；實際上，氫核受周圍不斷運(yùn)動著的電子影響。在外磁場作用下，運(yùn)動著的電子產(chǎn)生相對于外磁場方向的感應(yīng)磁場，起到屏蔽作用，使氫核實際受到的外磁場作用減?。?/p>

H=（1-

）H0

：屏蔽常數(shù)。

越大，屏蔽效應(yīng)越大。

化學(xué)位移：

0=[

/(2)]（1-

）H0由于屏蔽作用的存在，氫核產(chǎn)生共振需要更大的外磁場強(qiáng)度（相對于裸露的氫核），來抵消屏蔽影響。

在有機(jī)化合物中，各種氫核周圍的電子云密度不同（結(jié)構(gòu)中不同位置）共振頻率有差異，即引起共振吸收峰的位移，這種現(xiàn)象稱為化學(xué)位移?；瘜W(xué)位移的表示方法1．位移的標(biāo)準(zhǔn)沒有完全裸露的氫核，沒有絕對的標(biāo)準(zhǔn)。相對標(biāo)準(zhǔn)：四甲基硅烷Si(CH3)4（TMS）（內(nèi)標(biāo)）

位移常數(shù)

TMS=02．為什么用TMS作為基準(zhǔn)?(1)12個氫處于完全相同的化學(xué)環(huán)境，只產(chǎn)生一個尖峰；（2）屏蔽強(qiáng)烈，位移最大。與有機(jī)化合物中的質(zhì)子峰不重迭；（3）化學(xué)惰性；易溶于有機(jī)溶劑；沸點低，易回收。位移的表示方法

與裸露的氫核相比，TMS的化學(xué)位移最大，但規(guī)定

TMS=0，其他種類氫核的位移為負(fù)值，負(fù)號不加。

=[（樣-TMS)/

TMS]106(ppm)

小，屏蔽強(qiáng)，共振需要的磁場強(qiáng)度大，在高場出現(xiàn)，圖右側(cè)；

大，屏蔽弱，共振需要的磁場強(qiáng)度小，在低場出現(xiàn)，圖左側(cè)；常見結(jié)構(gòu)單元化學(xué)位移范圍各種基團(tuán)的δ值（1）δ

值從R-CH3,R2CH2,R3C-H

依次增加（2）δ

值從烴基、烯基、芳基依次增加；芳環(huán)中的π電子在外磁場作用下產(chǎn)生環(huán)流，使環(huán)上的H原子周圍產(chǎn)生感應(yīng)磁場，其方向與外磁場相同，增強(qiáng)了外磁場，所以在外磁場強(qiáng)度還沒有達(dá)到H0

時，就發(fā)生能級躍遷，它的δ值特別大，稱為反屏蔽作用。乙炔分子中π電子環(huán)流，產(chǎn)生的感應(yīng)磁場對抗外加磁場，故質(zhì)子受到屏蔽。其δ值較烯烴的小。（3）δ

值隨著鄰近原子電負(fù)性的增加而增加：（4）δ

值隨著H原子與電負(fù)性基團(tuán)距離的增大而減小，如：CH3CH3<CH3NH2

<CH3OH<CH3FR-O-C-C-C-H<R-O-C-C-H<R-O-C-H電負(fù)性與質(zhì)子相連元素的電負(fù)性越強(qiáng)，吸電子作用越強(qiáng)，價電子偏離質(zhì)子，屏蔽作用減弱，信號峰在低場出現(xiàn)。-CH3，

=1.6~2.0，高場；-CH2I，

=3.0~3.5,-O-H，-C-H，

大

小低場高場

價電子產(chǎn)生誘導(dǎo)磁場，質(zhì)子位于其磁力線上，與外磁場方向一致，去屏蔽。

價電子產(chǎn)生誘導(dǎo)磁場，質(zhì)子位于其磁力線上，與外磁場方向一致，去屏蔽。

苯環(huán)上的6個

電子產(chǎn)生較強(qiáng)的誘導(dǎo)磁場，質(zhì)子位于其磁力線上，與外磁場方向一致，去屏蔽。一、自旋偶合與自旋裂分二、峰裂分?jǐn)?shù)與峰面積第三節(jié)自旋偶合與自旋裂分一、自旋偶合與自旋裂分

每類氫核不總表現(xiàn)為單峰，有時多重峰。