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文檔簡介

中華人民共和國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)2004-12-01實(shí)施國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局I本標(biāo)準(zhǔn)由國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會(huì)提出并歸口。1本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了弓形蟲病的間接血凝(IHA)試驗(yàn)操作方法。2.2可調(diào)式微量移液器及吸頭。2.4弓形蟲1HA診斷液(抗原效價(jià)≥1:1024),標(biāo)準(zhǔn)陰性對(duì)照血清(效價(jià)≤1:4),標(biāo)準(zhǔn)陽性對(duì)照血清(效價(jià)≥1:1024)。無菌采動(dòng)物靜脈血液約1mL～2mL,靜置自然析出血清或待血液凝固后以60056℃水浴滅活30min,預(yù)冷，用健康公綿羊紅細(xì)胞(按血清/紅細(xì)胞體積比約1:1混勻)室溫吸附2h25μL加入第三列孔中，如此4倍稀釋至第6孔，混勻即1:4096棄去25μL(對(duì)于大量樣品可只稀釋至1:64見表1)?？滋?hào)234567血清稀釋度(1:)44096稀釋液空白對(duì)照稀釋液/μL受檢血清/μL診斷液/μL感作22℃~37℃靜置2h～3h結(jié)果舉例(樣)十十十十十十十十—25結(jié)果判定c)50%的紅細(xì)胞松散的凝集在孔底四周，其余50%未凝集的紅細(xì)胞沉積在孔底中央呈較大的圓d)25%的紅細(xì)胞凝集在孔底四周，其余大部分未凝集的紅細(xì)胞沉積在孔底中央呈很大的圓點(diǎn)，b)當(dāng)陽性對(duì)照血清抗體滴度不低于1:1024,陰性對(duì)照血清各孔均為“一”(第一孔允許存在前c)受檢血清抗體滴度≥1:64時(shí)判為陽性(如表1所示血清抗體滴度為1:64,判為陽性),≤1:16判為陰性。(規(guī)范性附錄)A.1pH7.2,0.15mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS):磷酸氫二鈉(Na?HPO.·12H?O)19.34g磷酸二氫鉀(KH?PO?)2.86g疊氮化鈉(NaN?)雙蒸水(或去離子水)A.2無菌取98mL上述PBS溶液，加入2mL經(jīng)56℃30min滅活的健康兔血清，混勻，4℃下保藏(規(guī)范性附錄)A.1pH7.2,0.15mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS):磷酸氫二鈉(Na?HPO.·12H?O)19.34g磷酸二氫鉀(KH?PO?)2.86g疊氮化鈉(NaN?)雙蒸水(或去離子水)A.2

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