T-SDYZXCP 003-2023 畜禽產(chǎn)品中硝基呋喃代謝物、氯霉素殘留量的檢測 微陣列生物芯片試劑盒法

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65.120學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載CCS

B

46團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/SDYZXCP

003—2023畜禽產(chǎn)品中硝基呋喃代謝物、氯霉素殘留量的檢測 發(fā)布學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載T/SDYZXCP

003—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載 本文件按照

GB/T

—《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第

1

起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由山東省優(yōu)質(zhì)畜產(chǎn)品協(xié)會提出并歸口。本文件主要起草人：湯迪朋、張博文、王英英、李俊玲、李周敏、張坤、朱曉飛、智軍海、李晴、吳立國、楊豪男、孟超、時(shí)川、許丹科、閆傳琦、張超、周嘉明、徐海峰。Ⅰ學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)兔兔ｗ下載學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載T/SDYZXCP

003—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載1 范圍本文件規(guī)定了畜禽產(chǎn)品中呋喃它酮代謝物、呋喃唑酮代謝物、呋喃西林代謝物、呋喃妥因代謝物、氯霉素殘留量檢測的微陣列生物芯片試劑盒法。謝物、氯霉素的檢測。本文件硝基呋喃代謝物的檢出限為

0.17

μg/kg

0.07

，定量限為

μg/kg。2 規(guī)范性引用文件文件。GB/T6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4 原理標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。5 試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。5.1 水：GB/T

，三級。5.2乙酸乙酯。5.3 正己烷。5.4 甲醇：優(yōu)級純。5.5 抗體溶液：含有抗呋喃它酮代謝物單克隆抗體、抗呋喃唑酮代謝物單克隆抗體、抗呋喃西林代謝物單克隆抗體、抗呋喃妥因代謝物單克隆抗體、抗氯霉素單克隆抗體。2

℃～8

℃避光保存，有效期

6個(gè)月，使用前搖勻。5.6 顯色液

A：稱取

0.17

g

100

的硝酸銀溶液。2

℃～8

℃避光保存，有效期

6

個(gè)月，使用前搖勻。1學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載T/SDYZXCP

003—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載5.7 顯色液

B：稱取

1.10

g

對苯二酚，用水溶解后定容至

100

，得到濃度為

的對苯二酚溶液。2

℃～8

℃

6

個(gè)月，使用前搖勻。5.8 混合顯色液：臨用前將顯色液

A（5.6）和顯色液

B（5.7）

混合均勻。5.9

2.68

g

NaHPO·12HO0.39

g

NaHPOOg

氯化鈉（NaCl

1

000

。5.10 洗滌液：稱取

2.68

g

磷酸氫二鈉（NaHPO·12HO），0.39

g

磷酸二氫鈉（NaHPOO），8.5

g

氯化鈉（NaCl），2

吐溫-20，加水溶解后稀釋至

1000

。5.11

0.15

g

100

。2

℃～8

℃效期

6

個(gè)月，使用前搖勻。5.12 1

鹽酸溶液：移取

100

。5.13 1

4.0

g

100

。5.14 磷酸鹽緩沖溶液：稱取

8

g

氯化鈉（NaCl），0.2

g

氯化鉀（KCl），3.63

g

磷酸氫二鈉（NaHPO·12HO）,0.24

g

磷酸二氫鉀（KHPO），溶于

900

7，加水定容至

1000

。5.15 硝基呋喃代謝物衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（

）：分別準(zhǔn)確稱取適量的呋喃它酮代謝物

A執(zhí)行）（準(zhǔn)確至

0.000

1

g5.4

100

20

℃6

個(gè)月。5.16氯霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（

μg/mL）：準(zhǔn)確稱取適量的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品（按照附錄

A

執(zhí)行）

（準(zhǔn)確至

0.000

1

g），用甲醇（5.4）溶解并定容至

100

。-20℃

6

個(gè)月。5.17 硝基呋喃代謝物混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（100

）：分別準(zhǔn)確稱取適量的呋喃它酮代謝物、呋喃

A

執(zhí)行）

（準(zhǔn)確至

0.000

1

g用甲醇溶解并定容至

100

。-

℃以下避光保存，有效期

6

個(gè)月。5.18 硝基呋喃代謝物衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（

）：準(zhǔn)確量取

1

00

硝基呋喃代謝物衍生物混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（5.15）于

100

容量瓶中，用水定容。2

℃～8

℃避光保存，有效期

6

個(gè)月。5.19 氯霉素標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（

）：準(zhǔn)確量取

5.16）于

100

容量瓶中，用水定容。2

℃～8

℃

6

個(gè)月。5.20100

備溶液（5.17）于

容量瓶中，用水定容。2

℃～8

℃

6

個(gè)月。5.215.185.195.20制成標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，具體濃度見附錄

B。2

℃～8

℃避光保存，有效期

6

個(gè)月。5.22 微陣列生物芯片：

微孔。固定有人工合成呋喃它酮代謝物抗原、人工合成呋喃唑酮代謝物抗2

℃～8

℃避光保存，有效期

℃～25

℃平衡

30

min

以上。6 儀器設(shè)備6.1

生物芯片分析儀，分辨率不低于

1200

ppi6.2

分析天平：精度為

0.01

g

和

0.000

1

g。6.3

芯片孵育儀：可調(diào)溫度范圍為室溫～100℃。轉(zhuǎn)速不低于

。6.4

離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于

4000

。2學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載T/SDYZXCP

003—2023學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載6.5 氮吹儀。6.6 渦旋振蕩器。6.7 水浴鍋。7 樣品取不少于

g

樣品，去除皮、筋膜及脂肪，均質(zhì)混勻，-18

℃下避光保存。取類型相同，均勻一致，且儀器響應(yīng)值小于方法定量限

30%的樣品，作為空白樣品。8 試驗(yàn)步驟8.1 提取

g±0.05

g

50

4

），

1

5.12），100

），渦旋

3

80

℃水浴

5

5.14）、

1

5.13

6

5.2），渦旋

30

s。4000

離心

5

min

3

上層清液至

55

℃

復(fù)溶液（）和

1

正己烷（5.3），渦旋

30

s，4000

離心

5

min，取下層清液待測。8.2 加樣分別取

50

μL

5.21）、

8.15.22

℃、600

反應(yīng)

。8.3 洗板

250

5.10

10

s

3

紙上拍干。8.4顯色加入

37

℃、

避光顯色

12

min±1

min

內(nèi)。甩干孔內(nèi)液體，加入

μL

洗滌液（5.10

3

次，在吸水紙上拍干，待測。8.5 測定將顯色后的芯片放入生物芯片分析儀中進(jìn)行分析。以標(biāo)準(zhǔn)品百分比灰度值為縱坐標(biāo)（%μg/L物、呋喃妥因代謝物、氯霉素的濃度。9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理mg/kg13學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載??

=

??學(xué)兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下載??

=

??

??×…………………（1）??12

式中：??

——量，單位為毫克每千克（mg/kg）；c——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中呋喃它酮代謝物、呋喃唑酮代謝物、呋喃西林代謝物、呋喃妥因代謝物、氯霉素的質(zhì)量濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；——提取溶液的體積，單位為毫升（）；

——）；——分取溶液的體積，單位為毫升（）；

——g）；1

000——單位換算。10 質(zhì)量控制10.1 陰性對照稱取空白試樣，按照

8.1～8.5

操作。10.2 陽性對照準(zhǔn)確稱取空白試樣

1.00

g（準(zhǔn)確至

0.01

g），置于

50

離心管中，加入硝基呋喃代謝物混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（5.20）5

μL，氯霉素標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（5.19）2

μL，此質(zhì)控樣中的呋喃它酮代謝物、呋喃唑酮代謝物、呋喃西林代謝物和呋喃妥因代謝物的濃度為

μg/kg，氯霉素的濃度為

0.2

，按照

8.1～8.5

操作。11方法準(zhǔn)確度和精密度11.1 準(zhǔn)確度質(zhì)控試驗(yàn)回收率為

80%～120%。11.2 精密度在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對差值不大于該算術(shù)平均值的

20%。4中文名稱英文名稱登記號分子式分子量純度%呋喃它酮代謝物衍生物2-NP-AMOZ183193-59-115H18N4O5334.33≥95.0呋喃唑酮代謝物衍生物2-NP-AOZ19687-73-110H9N3O4235.20≥95.0呋喃西林代謝物衍生物2-NP-SEM16004-43-68H8N4O3208.17≥95.0呋喃妥因代謝物衍生物2-NP-AHD10H8N4O4248.19≥95.0呋喃它酮代謝物3-Amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone,

43056-63-98H15N3O3201.22≥95.0呋喃唑酮代謝物3-Amino-2-oxazolidinone,

3H6N2O2102.09≥95.0呋喃西林代謝物

SEM57-56-75N3O75.07≥95.0呋喃妥因代謝物1-Aminohydantoin

AHD2827-56-73H5N3O2151.55≥95.0氯霉素Chloramphenicol,

CAP56-75-711H12N2O5323.13≥95.0載．ｃｘｗｚｆ．ｂ學(xué)兔兔ｗｗｗｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下T/SDYZXCP

003—2023載．ｃｘｗｚｆ．ｂ學(xué)兔兔ｗｗｗｏｍ標(biāo)準(zhǔn)下附 錄 A（規(guī)范性）硝基呋喃代謝物和氯霉素中英文名稱、CAS

號、分子式、分子量和純度硝基呋喃代謝物和氯霉素中英文名稱、CAS

號、分子式、分子量和純度見表

A.1。表

表

硝基呋喃代謝物和氯霉素中英文名稱、CAS

號、分子式、分子量和純度標(biāo)準(zhǔn)品名稱2-NP-AMOZμg/kg2-NP-AOZμg/kg2-NP-SEMμg/kg2-NP-AHDμg/kg氯霉素μg/kg標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

100000標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

20.150.150.150.150.06標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

30.300.300.300.300.12標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

4