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學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載ICS
65.120學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載CCS
B
46團 體 標(biāo) 準(zhǔn)
002—2023畜禽產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留量的檢測微陣列生物芯片試劑盒法 發(fā)布學(xué)ww.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)兔兔w下載學(xué)ww.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)兔兔w下載學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載T/SDYZXCP
002—2023學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載 本文件按照
GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第
1
起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由山東省優(yōu)質(zhì)畜產(chǎn)品協(xié)會提出并歸口。張坤、孟超、時川、謝天群、閆傳琦、張超、許丹科、周嘉明、徐海峰。Ⅰ學(xué)ww.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)兔兔w下載學(xué)ww.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)兔兔w下載學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載T/SDYZXCP
002—2023學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載 1 范圍本文件規(guī)定了畜禽產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留量檢測的微陣列生物芯片試劑盒法。本文件適用于畜禽肉及其內(nèi)臟中甲氧芐啶的檢測。本文件方法的檢出限為
,定量限為
μg/kg。2規(guī)范性引用文件文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3 術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4 原理固定的人工抗原點競爭結(jié)合抗體,加入納米顆粒進行顯色,用生物芯片分析儀檢測,標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。5 試劑或材料除非另有規(guī)定,僅使用分析純試劑。5.1 水:GB/T6682,三級。5.2 乙腈。5.3 正己烷。5.4 抗體溶液:含有抗甲氧芐啶單克隆抗體。2
℃~8
℃避光保存。使用前搖勻。5.5 顯色液
A:稱取
0.17
g
硝酸銀,用水溶解后定容至
100
,得到濃度為
的硝酸銀溶液,2
℃~8
℃避光保存,有效期
6
個月。使用前搖勻。5.6 顯色液
B:稱取
1.10
g
對苯二酚,用水溶解后定容至
100
,得到濃度為
的對苯二酚溶液,2
℃~8
℃
6
個月。使用前搖勻。5.7 混合顯色液:臨用前將顯色液
A(5.5)和顯色液
B(5.6)
混合均勻。5.8
2.68
g
NaHPO·12HO),0.39
g
NaHPOO),8.5
g氯化鈉(NaCl
1
000
。5.9
2.68
g
NaHPO·12HO),0.39
g
NaHPOO),8.5
g氯化鈉(NaCl),2
吐溫-20,加水溶解后稀釋至
1
。1學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載T/SDYZXCP
002—2023學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載5.10 10
):準(zhǔn)確稱取
1
CAS
號:-70-595.0%),準(zhǔn)確至
0.000
1g,用乙腈(5.2)溶解,定容至
100
。-
℃以下避光保存,有效期
6
個月。5.11 1
μg/mL
1
5.10
10
。2℃~8℃避光保存,有效期
6
個月。5.12 ),用復(fù)溶液(
0
μg/mL、0.6
μg/L、
μg/mL、
、
μg/mL、9.6
標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液,2℃~8℃期
6
個月。5.13 微陣列生物芯片:
微孔。固定有人工合成甲氧芐啶抗原。2
℃~8
℃
個月。使用前置于
20
℃~
℃平衡
30
min
以上。6 儀器設(shè)備6.1
生物芯片分析儀:分辨率不低于
1200
ppi6.2
分析天平:精度為
0.01
g
和
0.000
1
g。6.3
芯片孵育儀:可調(diào)溫度范圍為室溫~100
℃
600
。6.4
離心機:轉(zhuǎn)速不低于
4000
。6.5
氮吹儀。6.6
渦旋振蕩器。7 樣品取不少于
g
樣品,去除皮、筋膜及脂肪,均質(zhì)混勻,-18
℃以下避光保存。取類型相同,均勻一致,且儀器響應(yīng)值小于方法定量限
30%的樣品,作為空白樣品。8 試驗步驟8.1 提取平行做兩份試驗。稱取試樣
1.00
g±0.05
g(準(zhǔn)確至
0.01g)至
5
乙腈(5.2),渦旋
3
min,4000
離心
5
min
55℃
1
復(fù)溶液(5.8)和
1
正己烷(),渦旋
2
min,4000
離心
5
min。除去上層有機相,下層清液待測。8.2 加樣分別取
50
μL
5.12)、50
μL
8.15.13再加入
50
μL
37℃、600
反應(yīng)
15
min。8.3洗板倒出孔中液體,加入
250
洗滌液(5.9
10
s
后倒掉洗滌液,反復(fù)洗滌
3
次,在吸水紙上拍干。8.4 顯色加入
℃、600
2學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載??2
×
學(xué)兔兔www.bzfxw.com標(biāo)準(zhǔn)下載??2
×
??
×
1000
×
1000
???????????(1)避光顯色
±1
min
μL
5.9
3
干,待測。8.5測定將顯色后的芯片放入生物芯片分析儀中進行分析。以標(biāo)準(zhǔn)品百分比灰度值為縱坐標(biāo)(%μg/L據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算試樣所對應(yīng)的濃度對數(shù)后,再轉(zhuǎn)化成甲氧芐啶的濃度。9試驗數(shù)據(jù)處理試樣中甲氧芐啶的含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)
計,數(shù)值以毫克每千克()表示,按式(1)計算:??
= ??
×
??1
×
??
×
1000式中:——試樣中甲氧芐啶的含量,單位為毫克每千克(mg/kg);C——由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的試樣溶液中甲氧芐啶的質(zhì)量濃度,單位為納克每毫升(ng/mL);——提取溶液的體積,單位為毫升();——定容的體積,單位為毫升();——分取溶液的體積,單位為毫升();——g);1000——單位換算。10 質(zhì)量控制10.1 陰性對照稱取空白試樣,按照
8.1~8.5
操作。10.2 陽性對照稱取空白試樣
1.00
g±0.05
g(準(zhǔn)確至
0.01g),置于
()
,此質(zhì)控樣中的甲氧芐啶的濃度為
。按
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