NY-5070-2002-無公害食品-水產(chǎn)品中漁藥殘留限量

NY5070—2002無公害食品水產(chǎn)品中漁藥殘留限量1范疇本標準規(guī)定了無公害水產(chǎn)品中漁藥及通過環(huán)境污染造成的藥物殘留的最高限量。本標準適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖品及初級加工水產(chǎn)品、冷凍水產(chǎn)品，其他水產(chǎn)加工品能夠參照使用。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓舞按照本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。NY5029—2001無公害食品豬肉NY5071無公害食品漁用藥物使用準則SC/T3303—1997凍烤鰻SN/T0197—1993出口肉中喹乙醇殘留量檢驗方法SN0206—1993出口活鰻魚中噁喹酸殘留量檢驗方法SN0208—1993出口肉中十種磺胺殘留量檢驗方法SN0530—1996出口肉品中呋喃唑酮殘留量的檢驗方法液相色譜法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1漁用藥物fisherydrugs用以預(yù)防、操縱和治療水產(chǎn)動、植物的病、蟲、害，促進養(yǎng)殖品種健康生長，增強機體抗病能力以及改善養(yǎng)殖水體質(zhì)量的一切物質(zhì)，簡稱“漁藥”。3.2漁藥殘留residuesoffisherydrugs在水產(chǎn)品的任何食用部分中漁藥的原型化合物或/和其代謝產(chǎn)物，并包括與藥物本體有關(guān)雜質(zhì)的殘留。3.3最高殘留限量maximumresidueLimit,MRL承諾存在于水產(chǎn)品表面或內(nèi)部（要緊指肉與皮或/和性腺）的該藥（或標志殘留物）的最高量/濃度（以鮮重計，表示為：g/kg或mg/kg）。4要求4.1漁藥使用水產(chǎn)養(yǎng)殖中禁止使用國家、行業(yè)頒布的禁用藥物，漁藥使用時按NY5071的要求進行。4.2水產(chǎn)品中漁藥殘留限量要求水產(chǎn)品中漁藥殘留限量要求見表1。

表1水產(chǎn)品中漁藥殘留限量藥物類別藥物名稱指標（MPL）/（g/kg）中文英文抗生素類四環(huán)素類金霉素chlortetracycline100土霉素Oxytetracycline100四環(huán)素Tetracycline100氯霉素類氯霉素Chloramphenicol不得檢出磺胺類及增效劑磺胺嘧啶Sulfadiazine磺胺甲基嘧啶Sulfamerazine磺胺二甲基嘧啶Sulfadimidine磺胺甲噁唑sulfamethoxazole100（以總量計）甲氧芐啶Trimethoprim50喹諾酮類噁喹酸Oxilinicacid300硝基呋喃類呋喃唑酮Furazolidone不得檢出其他己烯雌酚Diethylstilbestrol不得檢出喹乙醇Olaquindox不得檢出5檢測方法5.1金霉素、土霉素、四環(huán)霉金霉素測定按NY5029—2001中附錄B規(guī)定執(zhí)行，土霉素、四環(huán)素按SC/T3303—1997中附錄A規(guī)定執(zhí)行。5.2氯霉素氯霉素殘留量的選擇測定方法按本標準中附錄A執(zhí)行，測定按NY5029—2001中附錄D（氣相色譜法）的規(guī)定執(zhí)行。5.3磺胺類磺胺類中的磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶的測定按SC/T3303的規(guī)定執(zhí)行，其他磺胺類按SN/T0208的規(guī)定執(zhí)行。5.4噁喹酸噁喹酸的測定按SN/T0206的規(guī)定執(zhí)行。5.5呋喃唑酮呋喃唑酮的測定按SN/T0530的規(guī)定執(zhí)行。5.6己烯雌酚己烯雌酚殘留量的選擇測定方法按本標準中附錄B規(guī)定執(zhí)行。5.7喹乙醇喹乙醇的測定按SN/T0197的規(guī)定執(zhí)行。6檢驗規(guī)則6.1檢驗項目按相應(yīng)產(chǎn)品標準的規(guī)定項目進行。6.2抽樣6.2.1組批規(guī)則同一水產(chǎn)養(yǎng)殖場內(nèi)，在品種、養(yǎng)殖時刻、養(yǎng)殖方式差不多相同的養(yǎng)殖水產(chǎn)品為一批（同一養(yǎng)殖池，或多個養(yǎng)殖池）；水產(chǎn)加工品按批號抽樣，在原料及生產(chǎn)條件差不多相同下同一天或同一班組生產(chǎn)的產(chǎn)品為一批。6.2.2抽樣方法6.2.2.1養(yǎng)殖水產(chǎn)品隨機從各養(yǎng)殖池抽取有代表性的樣品，取樣量見表2。表2取樣量生物數(shù)量/（尾、只）取樣量/（尾、只）500以內(nèi)2500～100041001～5000105001～1000020≥10001306.2.2.2水產(chǎn)加工品每批抽取樣本以箱為單位，100箱以內(nèi)取3箱，以后每增加100箱（包括不足100箱）則抽1箱。按所取樣本從每箱內(nèi)各抽取樣品許多于3件，每批取樣量許多于10件。6.3取樣的樣品的處理采集的樣品應(yīng)分成兩等份，其中一份作為留樣。從樣本中取有代表性的樣品，裝入適當容器，并保證每份樣品都能滿足分析的要求；樣品的處理按規(guī)定的方法進行，通過細切、絞肉機絞碎、縮分，使其混合平均；魚、蝦、貝、藻等各類樣品量許多于200g。各類樣品的處理方法如下：a）魚類：先將魚體表面雜質(zhì)洗凈，去掉鱗、內(nèi)臟，取肉（包括脊背和腹部）肉和皮一起絞碎，專門要求除外。b）龜鱉類：去頭、放出血液，取其肌肉包括裙邊，絞碎后進行測定。c）蝦類：洗凈后，去頭、殼，取其肌肉進行測定。d）貝類：鮮的、冷凍的牡蠣、蛤蜊等要把肉和體液調(diào)制平均后進行分析測定。e）蟹：取肉和性腺進行測定。f）混勻的樣品，如不及時分析，應(yīng)置于清潔、密閉的玻璃容器，冰凍儲存。6.4判定規(guī)則按不同產(chǎn)品的要求所檢的漁藥殘留各指標均應(yīng)符合本標準的要求，各項指標中的極限值采納修約值比較法。超過限量標準規(guī)定時，承諾加倍抽樣將此項指標復(fù)驗一次，按復(fù)驗結(jié)果判定本批產(chǎn)品是否合格。經(jīng)復(fù)檢后所檢指標仍不合格的產(chǎn)品則判為不合格品。

附錄A（規(guī)范性附錄）氯霉素殘留的酶聯(lián)免疫測定法A.1適用范疇本方法適用于測定水產(chǎn)品肌肉組織中氯霉素的殘留量。A.2原理利用抗體抗原反應(yīng)。微孔板包被有針對兔免疫球蛋白（IgG）（氯霉素抗體）的羊抗體，加入氯霉素抗體、氯霉素標記物、標準和樣品溶液。游離氯霉素與氯霉素酶標記物競爭氯霉素抗體，同時氯霉素抗體與羊抗體連接。沒有連接的酶標記物在洗滌步驟中被洗去。將酶基質(zhì)（過氧化尿素）和發(fā)色劑（四甲基聯(lián)苯胺）加入到孔中并孵育；結(jié)合的酶標記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化成藍色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍變?yōu)辄S，在450nm處測量，吸光度與樣品的氯霉素濃度成反比。A.3檢測限選擇方法的檢測下限為1g/kg。A.4儀器A.4.1離心機。A.4.2微孔酶標儀（450nm）。A.4.3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。A.4.4混合器。A.4.5移液器。A.4.650L，100L，450L微量加液器等。A.5藥品和試劑除非另有講明，在分析中僅使用確認為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當純度的水。A.5.1乙酸乙酯。A.5.2乙腈。A.5.3正己烷。A.5.4磷酸鹽緩沖液（PBS）（pH7.2）：0.55g磷酸二氫鈉（NaH2PO4·H2O），2.85g磷酸氫二鈉（Na2HPO4·2H2O），9g氯化鈉（NaCl）加入蒸餾水至1000mL。A.6標準溶液分別取標準濃縮液50L用450L緩沖液1（試劑盒提供）稀釋并混平均，制成0、50ng/L、50ng/L、450ng/L、1350ng/L、4050ng/L的標準溶液。A.7樣品提取和純化A.7.1取5.0g粉碎的魚肉樣品（樣品先去脂肪組織），與20mL乙腈水溶液（86+16）混合10min,15℃離心10min（4000r/min）。A.7.2取3mL上清液與3mL蒸餾水混合，加入4.5mL乙酸乙酯混合10min，15℃離心10min（4000r/min）。A.7.3將乙酸乙酯層轉(zhuǎn)移至另一瓶中連續(xù)干燥，用1.5mL緩沖液1溶液干燥的殘留物，加入1.5mL正己烷混合。A.7.4完全除去正己烷層（上層），取50L水箱進行分析。A.8樣品測定程序A.8.1將足夠標準和樣品所用數(shù)量的孔條插入微孔架，記錄下標準和樣品的位置，每一樣品和標準做兩個平行實驗。A.8.2加入50L稀釋了的酶標記物到微孔底部，再加入50L的標準或處理好的樣品液到各自的微孔中。A.8.3加入50L稀釋了的抗體溶液到每一個微孔底部充分混合，在室溫孵育2h。A.8.4倒出孔中的液體，將微孔架倒置在吸水紙上拍打（每行拍打3次）以保證完全除去孔中的液體，然后用250L蒸餾水充入孔中，再次倒掉微孔中的液體，再重復(fù)操作兩次。A.8.5加入50L基質(zhì)、50L發(fā)色試劑到微孔中，充分混合并在室溫、暗處孵育30min。A.8.6加入100L反應(yīng)停止液到微孔中，混合好，以空氣為空白，在450nm處測量吸光度值（注意：必須在加入反應(yīng)停止液后60min內(nèi)讀取吸光度值）。A.9結(jié)果所獲得的標準和樣品吸光度值的平均值除以第一個標準（0標準）的吸光度值再乘以100，得到以百分比給出的吸光度值，以式（A.1）表示： （A.1）式中：E——吸光度值，%；A——標準或樣品的吸光度值；A0——0標準的吸光度值。以運算的標準值繪成一個對應(yīng)氯霉素濃度（ng/L）的半對數(shù)坐標系統(tǒng)曲線圖，校正的曲線在50ng/L～1350ng/L的范疇內(nèi)應(yīng)成為線性，相對應(yīng)的每一個樣品的濃度，能夠從曲線上讀出。乘出稀釋倍數(shù)即可得到樣品中氯霉素的實際濃度（ng/kg）。

附錄B（規(guī)范性附錄）己烯雌酚（DES）殘留的酶聯(lián)免疫測定法B.1適用范疇本方法適用于測定水產(chǎn)品肌肉等可食組織中己烯雌酚的殘留量。B.2原理測定的基礎(chǔ)是利用抗體抗原反應(yīng)。微孔板包被有針對兔IgG（DES抗體）的羊抗體，加入DES抗、標準和樣品溶液。DES與DES抗體連接，同時DES抗體與羊抗體連接。洗滌步驟后，加入DES酶標記物，DES酶標記物與孔中未結(jié)合的DES抗體結(jié)合，然后在洗滌步驟中除去未結(jié)合的DES酶標記物。將酶基質(zhì)和發(fā)色劑（四甲基聯(lián)苯胺）加入到孔中并孵育；結(jié)合的酶標記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化為藍色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍變?yōu)辄S，在450nm處沒量，吸光度與樣品的己烯雌酚濃度成反比。B.3檢測限己烯雌酚檢測的下限為1g/kg。B.4儀器B.4.1微孔酶標儀（450nm）。B.4.2離心機。B.4.337℃恒溫箱。B.4.4移液器。B.4.550L，100L，450L微量加液器。B.4.6RIDAC18柱等。B.5試劑和標準溶液除非另有講明，在分析中僅使用確認為分析純的試劑和蒸餾水或去離子水或相當純度的水。B.5.1叔丁基甲基醚。B.5.2石油醚。B.5.3二氯甲烷。B.5.46mol/L磷酸。B.5.5乙酸鈉緩沖液等。B.5.6提供的DES標準液為直截了當使用液，濃度為0、12.5×10–9mol/L、25×10–9mol/L、50×10–9mol/L、100×10–9mol/L、200×10–9mol/L。B.6樣品處理B.6.1取5.0g肌肉（除去脂肪組織），用10mLpH為7.2的67mmol/L磷酸緩沖液研磨后，用8mL叔丁基甲基醚提取研磨物，強烈振蕩20min；離心10min（4000r/min）；移去上清液，用8mL叔丁基甲基醚重復(fù)提取沉淀物。B.6.2將兩次提取的醚相合并，同時蒸發(fā)；用1mL甲醇（70%）溶解干燥的殘留物；用3mL石油醚洗滌甲醇溶液（研磨15s，短時刻離心，吸除石油醚）。B.6.3蒸發(fā)甲醇溶液，用1mL二氯甲烷溶解后，再用3mL1mol/L的氫氧化鈉（NaOH）溶液提??；然后300L6mol/L磷酸中和提取液，用RIDAC18柱進行純化。B.7測定程序（室溫20℃～24℃條件下操作）B.7.1將足夠標準和樣品所用數(shù)量的孔條插入微孔架，標準和樣品做兩個平行實驗，記錄下標準和樣品的位置。B.7.2加入20L的標準和處理好的樣品到各自的微孔中，標準和樣品做兩個平行實驗。B.7.3加入50L稀釋后的DES抗體到每一個微孔中，充分混合并在2℃～8℃孵育過夜（注意：在第二早上連續(xù)進行實驗之前，微孔板應(yīng)在室溫下放置30min以上，稀釋用緩沖液也應(yīng)回到室溫，因此最好將緩沖液放在室溫下過夜）。B.7.4倒出孔中的液體，將微孔架倒置在吸水紙上拍打（每行拍打3次）以保證完全除去孔中的液體，用250L蒸餾水充入孔中，再次倒掉微孔中液體，再重復(fù)操作兩次。B.7.5加入5L稀釋的酶標記物到微孔底部，室溫孵育1h。B.7.6倒出孔中的液體，將微孔架倒置在吸水紙上拍打（每次拍打3次）以保證完全除去孔中的液體，用250L蒸餾水充入孔中，再次倒掉微孔中液體，再重復(fù)操作一次。B.7.7加入50L基質(zhì)和50L發(fā)色試劑到微孔中，充分混合并在室溫暗處孵育15min。B.7.8加入100L反應(yīng)停止液到微孔中，混合好在450nm處測量吸光度值（可選擇＞