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學(xué)習(xí)內(nèi)容2第八章革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌鑒定學(xué)習(xí)內(nèi)容3形態(tài)鞭毛葡萄糖氧化/發(fā)酵試驗氧化酶試驗?zāi)c桿菌科桿菌周鞭毛或無發(fā)酵—弧菌科弧狀、桿狀單鞭毛發(fā)酵+非發(fā)酵革蘭陰性菌桿狀單、叢、周鞭毛或無氧化或不分解+注:不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌氧化酶試驗為陰性4第一節(jié)腸桿菌科掌握腸桿菌科的共同特性1掌握大腸埃希菌、沙門菌、志賀菌、克雷伯菌屬和變形菌屬的生物學(xué)特性及微生物檢驗2熟悉其他重要腸桿菌(腸桿菌屬、耶爾森菌屬)的生物學(xué)特性及檢驗3學(xué)習(xí)任務(wù)了解腸桿菌科細(xì)菌的臨床意義4一、概述6什么是腸道桿菌?一大群生物學(xué)性狀近似的革蘭陰性短小桿菌多數(shù)為腸道的正常菌群至少有30個菌屬,120個以上的菌種少數(shù)為致病菌與腸道腹瀉及醫(yī)院感染相關(guān)7腸桿菌科的主要菌屬:志賀菌屬沙門菌屬耶爾森菌屬埃希菌屬克雷伯菌屬致病菌(腸內(nèi)感染)正常菌群(腸外感染)腸桿菌科細(xì)菌變形桿菌屬沙雷菌屬摩根菌屬腸桿菌屬一、概述形態(tài)很相似培養(yǎng)不特殊生化項目多抗原較復(fù)雜一、概述9一、生物學(xué)性狀(一)形態(tài)染色G-桿菌,無芽胞,大多有周鞭毛(除志賀菌屬、克雷伯菌屬、鼠疫桿菌外),致病菌常有菌毛。一、概述10一、生物學(xué)性狀一、概述鞭毛菌體菌體表面物質(zhì)菌毛11一、生物學(xué)性狀一、概述12一、生物學(xué)性狀(二)營養(yǎng)要求與培養(yǎng)

營養(yǎng)要求不高,需氧或兼性厭氧,最適37℃,最適pH7.4~7.6。

普通平板/血平板上大多呈灰白色、S型菌落,但變形桿菌——遷徙生長現(xiàn)象克雷伯菌——粘液狀菌落

一、概述13一、生物學(xué)性狀奇異變形桿菌肺炎克雷伯菌一、概述14一、生物學(xué)性狀(三)生化反應(yīng)腸桿菌科共同的生化反應(yīng)特征:

葡萄糖:發(fā)酵分解(F)

氧化酶:陰性

觸酶:陽性

硝酸鹽還原:陽性不同菌屬對糖和蛋白質(zhì)的分解能力差異較大一、概述一、生物學(xué)性狀一、概述腸桿菌科:埃希菌屬克雷伯菌屬腸桿菌屬志賀菌屬沙門菌屬變形桿菌屬耶爾森菌屬乳糖發(fā)酵陽性:埃希菌屬克雷伯菌屬腸桿菌屬陰性:志賀菌屬沙門菌屬變形桿菌屬耶爾森菌屬16一、生物學(xué)性狀(四)抗原構(gòu)造一、概述鞭毛:H抗原不耐熱(60℃可破壞)菌體:O抗原細(xì)胞壁脂多糖層,耐熱(100℃不被破壞)菌體表面物質(zhì)表面抗原:K抗原Vi抗原不耐熱,可致O不凝集菌毛抗原17一、生物學(xué)性狀(五)變異性常見變異現(xiàn)象有:S-R變異H-O變異

耐藥性變異一、概述18一、生物學(xué)性狀(六)抵抗力抵抗力不強(qiáng),耐低溫,不耐高溫對化學(xué)消毒劑敏感對膽鹽耐受可抵抗某些染料的抑菌作用制備腸道選擇性培養(yǎng)基一、概述19一、生物學(xué)性狀

在腸道選擇平板上,因?qū)?/p>

的分解能力不同,形成不同顏色的菌落。一、概述伊紅美藍(lán)平板(EMB)麥康凱平板(MAC)沙門菌-志賀菌瓊脂平板(S-S)乳糖20一、生物學(xué)性狀伊紅美藍(lán)平板(EMB,弱選):乳糖、伊紅美藍(lán)染料乳糖分解型:紫黑色,金屬光澤菌落一、概述21一、生物學(xué)性狀麥康凱平板(MAC):膽鹽、乳糖、中性紅桃紅色菌落:乳糖分解型無色半透明菌落:乳糖非分解型一、概述22一、生物學(xué)性狀SS平板(沙門菌-志賀菌瓊脂平板):膽鹽、硫代硫酸鈉、煌綠等抑制劑,檸檬酸鐵、乳糖、中性紅

大腸埃希菌沙門菌志賀菌一、概述SS平板培養(yǎng)基一、生物學(xué)性狀一、概述24二、臨床意義一、概述占臨床分離菌總數(shù)的50%和G-菌總數(shù)的80%,將近50%的敗血癥,70%以上的泌尿道感染和大量的腸道感染是由腸桿菌科細(xì)菌引起的。全世界每年腹瀉病人數(shù)達(dá)40億人次我國每年腹瀉發(fā)病數(shù)為8.36億人次25二、臨床意義腸道致病菌腸道感染食物中毒消化道(糞-口)途徑非腸道致病菌(條件致病菌為主)其他途徑腸道外感染(敗血癥,呼吸道,泌尿系統(tǒng))一、概述鼠疫(烈性傳染?。?6正常菌群致病菌埃稀菌屬變形桿菌屬克雷伯菌屬腸桿菌屬沙雷菌屬枸櫞酸菌屬致病性大腸埃稀菌志賀菌屬沙門菌屬耶爾森菌屬大腸桿菌腸外感染普通變形桿菌:腸外感染、食物中毒醫(yī)院感染EPEC.ETEC.EIEC.EHEC.EAEC腸內(nèi)感染食物中毒A群痢疾志賀菌B群福氏志賀菌C群鮑氏志賀菌D群宋內(nèi)氏志賀菌急性菌痢慢性菌痢中毒性菌痢傷寒沙門菌甲、乙、丙鼠傷寒沙門菌豬霍亂沙門菌腸炎沙門菌腸熱癥食物中毒敗血癥小腸結(jié)腸炎耶爾森菌食物中毒鼠疫耶爾森菌鼠疫

腸道桿菌27三、微生物學(xué)檢驗(一)標(biāo)本采集腸外感染——感染部位標(biāo)本腸道感染——糞便、肛拭等(二)檢驗方法

大多數(shù)腸桿菌科細(xì)菌形態(tài)、染色性相似,故多用分離培養(yǎng)及生化試驗進(jìn)行鑒定一、概述28三、微生物學(xué)檢驗1、分離培養(yǎng)腸外感染標(biāo)本→(增菌培養(yǎng))→血平板(+弱選擇性平板)腸內(nèi)感染標(biāo)本→腸道強(qiáng)選擇性平板(SS等)、腸道弱選擇性平板(MAC、EMB等)

①標(biāo)本→接種平板進(jìn)行分離培養(yǎng)有雜菌的標(biāo)本無雜菌標(biāo)本一、概述三、微生物學(xué)檢驗血平板:可疑菌落必須做G染色選擇性平板弱選擇性平板:可疑菌落最好進(jìn)行G染色確認(rèn)強(qiáng)選擇性平板:可疑菌落可不進(jìn)行G染色確認(rèn)②觀察菌落→挑取可疑菌落進(jìn)行鑒定一、概述30三、微生物學(xué)檢驗定科形態(tài)特征(G-無芽胞桿菌)、氧化酶–、觸酶+、硝酸鹽還原+、O/F(F)定屬KIA、MIU等定種、群、型生化試驗(IMViC、糖發(fā)酵等)血清學(xué)鑒定(玻片凝集試驗)一、概述31三、微生物

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