醫(yī)院常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)教材教學(xué)課件

醫(yī)院常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)教材教學(xué)課件目錄contents細(xì)菌培養(yǎng)基礎(chǔ)知識(shí)常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)方法臨床標(biāo)本采集與處理細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)方法醫(yī)院感染防控策略與措施實(shí)驗(yàn)室安全與廢棄物處理01細(xì)菌培養(yǎng)基礎(chǔ)知識(shí)03螺形菌弧菌、螺桿菌、螺旋體等01球菌單球菌、雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等02桿菌棒狀桿菌、分枝桿菌、乳酸桿菌等細(xì)菌種類與形態(tài)水、碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子等營養(yǎng)需求溫度、pH值、氧氣需求等生長條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基、營養(yǎng)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等培養(yǎng)基類型細(xì)菌生長條件及培養(yǎng)基類型無菌室準(zhǔn)備清潔、消毒、滅菌等無菌操作原則避免污染、減少微生物數(shù)量等無菌操作技術(shù)無菌接種、無菌劃線、無菌涂布等無菌操作技術(shù)要點(diǎn)污染來源空氣、水、培養(yǎng)基、操作工具等預(yù)防措施定期清潔消毒實(shí)驗(yàn)室、使用無菌操作技術(shù)、選用優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基和試劑等常見污染來源及預(yù)防措施02常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)方法

平板劃線法操作步驟在無菌操作臺(tái)上，用接種環(huán)沾取少量菌液，在平板培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，然后將平板倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項(xiàng)劃線時(shí)力度要均勻，避免劃破培養(yǎng)基；接種環(huán)要灼燒滅菌，避免污染。優(yōu)缺點(diǎn)平板劃線法簡單易行，但劃線區(qū)域容易干燥，影響細(xì)菌生長。注意事項(xiàng)傾注前要確保平板無菌，樣品與生理鹽水要充分混勻。操作步驟將待測(cè)樣品與適量無菌生理鹽水混合均勻，傾注到無菌平板培養(yǎng)基上，迅速旋轉(zhuǎn)平板使樣品均勻分布，然后靜置凝固，倒置放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。優(yōu)缺點(diǎn)傾注平板法適用于各種樣品，操作簡便，但平板較厚，觀察菌落形態(tài)不夠清晰。傾注平板法將待測(cè)樣品進(jìn)行系列稀釋，選擇適宜稀釋度的菌液接種到液體培養(yǎng)基中，放入恒溫?fù)u床中振蕩培養(yǎng)。操作步驟注意事項(xiàng)優(yōu)缺點(diǎn)稀釋過程中要確保無菌操作，選擇合適的稀釋度以避免菌液過濃或過稀。液體稀釋法適用于細(xì)菌計(jì)數(shù)和測(cè)定細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性，但操作相對(duì)繁瑣。030201液體稀釋法適用于專性厭氧菌的培養(yǎng)，需要在無氧環(huán)境下進(jìn)行。厭氧培養(yǎng)法適用于需要高濃度二氧化碳才能生長的細(xì)菌培養(yǎng)。二氧化碳培養(yǎng)法通過在培養(yǎng)基中加入特定抑制劑或選擇劑，選擇性地抑制非目標(biāo)菌的生長，促進(jìn)目標(biāo)菌的生長。選擇性培養(yǎng)基法其他特殊培養(yǎng)方法03臨床標(biāo)本采集與處理采集時(shí)間采集部位采集量標(biāo)本處理血液標(biāo)本采集與處理01020304建議在患者寒戰(zhàn)或發(fā)熱初起時(shí)采集，同時(shí)避免在患者使用抗菌藥物之前采集。成人一般選擇肘靜脈，新生兒和嬰兒可選擇頸靜脈或股靜脈。成人一般采集5-10ml，嬰幼兒采集2-5ml。將血液注入無菌的血培養(yǎng)瓶中，輕輕混勻，防止凝固。一般建議在清晨第一次排尿時(shí)采集。采集時(shí)間清潔尿道口后，留取中段尿10-20ml于無菌容器中。采集方法將尿液充分混勻后，取10ml注入無菌的尿培養(yǎng)瓶中。標(biāo)本處理尿液標(biāo)本采集與處理采集方法用無菌容器收集痰液，避免混入唾液和鼻咽部分泌物。標(biāo)本處理將痰液用無菌生理鹽水稀釋后，取適量注入無菌的痰培養(yǎng)瓶中。采集時(shí)間建議在清晨漱口后用力咳出深部痰液。痰液標(biāo)本采集與處理其他類型標(biāo)本采集與處理用無菌注射器穿刺抽取病變部位的液體，注入無菌的穿刺液培養(yǎng)瓶中。用無菌手術(shù)刀或剪刀取病變組織，放入無菌的組織培養(yǎng)瓶中。用無菌棉拭子擦拭咽部或扁桃體表面，將棉拭子放入無菌的咽拭子培養(yǎng)瓶中。用無菌棉簽挑取糞便中的異常部分或黏液膿血部分，放入無菌的糞便培養(yǎng)瓶中。穿刺液組織標(biāo)本咽拭子糞便標(biāo)本04細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)方法通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，用酒精脫色，再用蕃紅復(fù)染，根據(jù)細(xì)胞壁成分和性質(zhì)的不同，可將細(xì)菌分為革蘭陽性菌和革蘭陰性菌。革蘭染色法原理涂片、干燥、固定、初染、媒染、脫色、復(fù)染、鏡檢。革蘭染色法步驟紫色為革蘭陽性菌，紅色為革蘭陰性菌。革蘭染色法結(jié)果判讀革蘭染色法鑒定細(xì)菌種類不同種類的細(xì)菌具有不同的酶系統(tǒng)，對(duì)底物的分解能力和代謝產(chǎn)物不同，通過檢測(cè)細(xì)菌對(duì)底物的分解產(chǎn)物，可以鑒定細(xì)菌種類。生化反應(yīng)原理糖發(fā)酵試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、VP試驗(yàn)等。生化反應(yīng)種類根據(jù)細(xì)菌對(duì)底物的分解能力和代謝產(chǎn)物不同，判斷細(xì)菌種類。生化反應(yīng)結(jié)果判讀生化反應(yīng)鑒定細(xì)菌種類藥敏試驗(yàn)方法紙片擴(kuò)散法、稀釋法、E-test法等。藥敏試驗(yàn)結(jié)果判讀根據(jù)抑菌圈大小或最低抑菌濃度（MIC）判斷細(xì)菌對(duì)藥物的敏感性。藥敏試驗(yàn)原理通過檢測(cè)細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感性，指導(dǎo)臨床合理用藥，減少耐藥性的產(chǎn)生。藥敏試驗(yàn)原理及方法介紹綜合革蘭染色法、生化反應(yīng)和藥敏試驗(yàn)結(jié)果，確定細(xì)菌種類和藥物敏感性。結(jié)果判讀為臨床醫(yī)生提供準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷和用藥指導(dǎo)，減少經(jīng)驗(yàn)性用藥和盲目使用抗菌藥物的現(xiàn)象，提高治療效果和患者生活質(zhì)量。同時(shí)，也有助于減少耐藥性的產(chǎn)生和傳播，保障公共衛(wèi)生安全。臨床意義結(jié)果判讀及臨床意義05醫(yī)院感染防控策略與措施醫(yī)院感染定義指住院病人在醫(yī)院內(nèi)獲得的感染，包括在住院期間發(fā)生的感染和在醫(yī)院內(nèi)獲得出院后發(fā)生的感染；但不包括入院前已開始或入院時(shí)已處于潛伏期的感染。危害性分析醫(yī)院感染不僅增加患者痛苦和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，還影響醫(yī)院聲譽(yù)和醫(yī)療質(zhì)量，甚至引發(fā)醫(yī)療糾紛和醫(yī)療事故。醫(yī)院感染定義及危害性分析接觸傳播、飛沫傳播、空氣傳播、消化道傳播、血液傳播等。傳播途徑老年人、嬰幼兒、孕產(chǎn)婦、手術(shù)患者、重癥患者、免疫力低下者等。易感人群特點(diǎn)醫(yī)院感染傳播途徑和易感人群特點(diǎn)包括環(huán)境清潔消毒、醫(yī)療器械清洗消毒、無菌技術(shù)操作規(guī)范等。定期對(duì)醫(yī)院各科室進(jìn)行消毒效果監(jiān)測(cè)和評(píng)估，確保消毒隔離制度得到有效執(zhí)行。消毒隔離制度執(zhí)行和監(jiān)督檢查監(jiān)督檢查消毒隔離制度包括洗手、衛(wèi)生手消毒和外科手消毒等操作規(guī)范。手衛(wèi)生規(guī)范通過培訓(xùn)、宣傳海報(bào)、宣傳視頻等多種形式，提高醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生意識(shí)和操作技能水平，促進(jìn)手衛(wèi)生規(guī)范的落實(shí)。同時(shí)，加強(qiáng)對(duì)患者和家屬的手衛(wèi)生宣傳教育，提高其自我防護(hù)意識(shí)。培訓(xùn)和宣傳推廣手衛(wèi)生規(guī)范培訓(xùn)和宣傳推廣06實(shí)驗(yàn)室安全與廢棄物處理BSL-1級(jí)適用于對(duì)健康成年人已知無致病作用的微生物，如非致病性球菌、桿菌等。要求實(shí)驗(yàn)室具備基本的生物安全防護(hù)水平，如門禁系統(tǒng)、生物安全柜等。BSL-2級(jí)適用于對(duì)人類或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物，如流感病毒、沙門氏菌等。要求實(shí)驗(yàn)室除滿足BSL-1級(jí)要求外，還需具備更嚴(yán)格的生物安全防護(hù)措施，如負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室、高效過濾排風(fēng)裝置等。BSL-3級(jí)適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素，如結(jié)核分枝桿菌、炭疽芽孢桿菌等。要求實(shí)驗(yàn)室采取更高級(jí)別的生物安全防護(hù)措施，如獨(dú)立建筑物、雙門互鎖傳遞窗等。實(shí)驗(yàn)室生物安全級(jí)別劃分及要求選擇棉質(zhì)、透氣、不易產(chǎn)生靜電的實(shí)驗(yàn)服，穿戴時(shí)要將衣袖和褲腳扎緊，避免皮膚暴露。實(shí)驗(yàn)服根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的口罩類型，如N95口罩、醫(yī)用外科口罩等。佩戴時(shí)要確保口罩緊貼面部，無漏氣現(xiàn)象?？谡诌x擇適合的手套材質(zhì)和大小，確保手套無破損。在實(shí)驗(yàn)過程中要定期更換手套，避免交叉污染。手套在處理可能產(chǎn)生飛濺或氣溶膠的實(shí)驗(yàn)時(shí)，需佩戴護(hù)目鏡或面罩以保護(hù)眼睛和面部。護(hù)目鏡或面罩個(gè)人防護(hù)裝備選擇和穿戴方法感染性廢棄物包括培養(yǎng)物、被污染的實(shí)驗(yàn)器材和防護(hù)用品等。需使用專用黃色感染性廢棄物袋進(jìn)行收集，并標(biāo)注“感染性廢棄物”標(biāo)識(shí)。收集后需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理或化學(xué)消毒處理后再進(jìn)行無害化處置。一般廢棄物包括未被污染的實(shí)驗(yàn)器材、紙張等。可使用普通垃圾袋進(jìn)行收集，并按照醫(yī)院垃圾分類要求進(jìn)行處置。廢棄物分類收集和處理流程VS發(fā)生實(shí)驗(yàn)室生物安全事故時(shí)，應(yīng)立即啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案，采取必要的控制措施，如關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室、疏散人員、封鎖現(xiàn)