1.2微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（第2課時）（原卷版）

第一章發(fā)酵工程第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（課前+課中+課后，三案一體）第2課時微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)課前案【預習新知】一、選擇培養(yǎng)基1.實驗室中微生物篩選的原理：人為提供有利于生長的條件（包括等），同時抑制或阻止的生長。2.選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，允許微生物生長，同時其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。二、微生物的選擇培養(yǎng)1.培養(yǎng)基：配制相應(yīng)的選擇培養(yǎng)基。2.樣品處理：對樣品進行充分稀釋。3.接種方法：稀釋涂布平板法。4.培養(yǎng)（細菌）：將平板，放入的恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)d。三、微生物的數(shù)量測定1.稀釋涂布平板法（1）原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單一菌落，來源于樣品稀釋液中的。通過統(tǒng)計平板上的，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。（2）計數(shù)原則：平板上菌落數(shù)應(yīng)在個，同一稀釋度下，應(yīng)至少對3個平板進行重復計數(shù)，然后求出平均值。（3）不足：當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目。2.顯微鏡直接計數(shù)法（1）計數(shù)工具：顯微鏡、（2）不足：由于計數(shù)結(jié)果是的總和，所以一般比活菌的實際數(shù)目。四、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)1.原理：絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成的微生物才能分解尿素。利用以為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離的細菌。2.步驟【預習自測】1.因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同，所以，為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離。()2.測定土壤中細菌總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同。()3.在同一稀釋度下，如果得到了兩個或兩個以上菌落數(shù)目在30300的平板，澤爾說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數(shù)。（）4.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目明顯少于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌種。（）第2課時微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)課中案【導】自然界中微生物數(shù)量繁多，種類龐雜，要想從中分離出需要的特定微生物并不容易，尤其當要分離的微生物在混合的菌群中不是優(yōu)勢種群時，僅通過一般的平板劃線法或稀釋涂布平板法很難實現(xiàn)。該怎么辦呢?【思】1.怎樣運用生物與環(huán)境相適應(yīng)的觀點來理解選擇培養(yǎng)基的原理？2.如何通過調(diào)整培養(yǎng)基的配方來有目的地培養(yǎng)某種微生物？3.測定微生物數(shù)量的常用方法有哪些？【議】1.你如何設(shè)計培養(yǎng)基配方，將土壤稀釋液中能分解尿素的細菌分離出來？2.該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基有哪些共同點和不同點？3.為什么只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長？4.設(shè)計對照實驗：如何驗證所用的選擇培養(yǎng)基沒有受到污染？5.在初次實驗中，對于稀釋的范圍沒有把握，怎樣做才能保證從中選擇出菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)？6.甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果。(1)甲同學在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230，該同學的統(tǒng)計結(jié)果是否真實可靠？為什么？(2)乙同學在該濃度下涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為21、212、256，該同學將21舍去，然后取平均值。該同學對實驗結(jié)果的處理是否合理？為什么？【展】學生展示討論結(jié)果【評】1.稀釋涂布平板法操作步驟2.對比平板劃線法和稀釋涂布平板法【檢】引導學生總結(jié)本節(jié)課內(nèi)容【練】完成課后案第2課時微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)課后案1．幽門螺桿菌（Hp）生存于人體胃的幽門部位，能夠引起慢性胃炎等胃部疾病。尿素在酶的作用下分解產(chǎn)生NH3和CO2。體檢時常用14C呼氣試驗來診斷測試者是否感染Hp，測試者口服含14C標記的尿素膠囊，一段時間后通過測定呼出的氣體是否含有14CO2來診斷是否感染Hp。醫(yī)務(wù)工作者也可以采集胃病患者樣本進行微生物的純化操作，判斷是否感染Hp。下列相關(guān)分析錯誤的是（

）A．呼氣試驗的前提是Hp能合成和分泌脲酶，從而催化尿素分解.B．對樣本進行微生物的純化操作時，一般采用固體培養(yǎng)基C．篩選Hp的培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，能抑制雜菌生長D．在培養(yǎng)基中可加入醋酸洋紅液來鑒定是否分離得到了Hp2．血細胞計數(shù)板是一種常用于計數(shù)細菌、酵母菌等微生物數(shù)量的生物學工具。下列關(guān)于血細胞計數(shù)板及其使用的說法，正確的是（）A．血細胞計數(shù)板是一塊特制的載玻片，其上有1個計數(shù)室B．若取樣的小方格中酵母菌過多，可選擇鄰近的一個小方格計數(shù)C．滴加培養(yǎng)液后，用濾紙在血細胞計數(shù)板一側(cè)邊緣吸引進行引流D．待酵母菌菌體沉降到計數(shù)室底部后應(yīng)先在低倍鏡下觀察3．某興趣小組擬檢測某品牌冰淇淋中的大腸桿菌數(shù)量是否超標。下列敘述正確的是（

）A．在實驗前，應(yīng)將微生物培養(yǎng)的器皿、接種工具、操作者的手等進行滅菌B．制作大腸桿菌培養(yǎng)基時，一般需將培養(yǎng)基pH調(diào)至酸性C．用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，結(jié)果往往比實際值低D．可利用血細胞計數(shù)板對大腸桿菌直接進行觀察和計數(shù)4．一定濃度的抗生素會殺死細菌，但變異的細菌可能產(chǎn)生耐藥性。為探究某種抗生素對大腸桿菌的選擇作用，將大腸桿菌培養(yǎng)液接種到培養(yǎng)基上后，繼續(xù)放置含該抗生素的圓形濾紙片和不含抗生素的圓形濾紙片，一段時間后測量濾紙片周圍抑菌圈的直徑，第一代培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。然后再重復上述步驟培養(yǎng)三代。與上述實驗相關(guān)的描述不符的是（）A．圖中1處放入不含抗生素的濾紙片起到對照作用B．可采用稀釋涂布平板法將大腸桿菌接種到固體培養(yǎng)基上C．應(yīng)從抑菌圈邊緣的菌落里挑取大腸桿菌繼續(xù)培養(yǎng)D．隨培養(yǎng)代數(shù)增多，抑菌圈的直徑變得越大，說明細菌的耐藥性越強5．細菌氣溶膠是由懸浮于大氣或附著于顆粒物表面的細菌形成的。利用