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人教版高中生物選修一專題3課題1《菊花的組織培養(yǎng)》課件人教版高中生物選修一專題3課題1《菊花的組織培養(yǎng)》課件人教版高中生物選修一專題3課題1《菊花的組織培養(yǎng)》課件通過必修課的學(xué)習(xí),我們已經(jīng)了解到大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那么,有沒有不用種子來培育植物的方法呢?組織培養(yǎng)營養(yǎng)繁殖無性生殖扦插壓條嫁接人教版高中生物選修一專題3課題1《菊花的組織培養(yǎng)》課件人教1

通過必修課的學(xué)習(xí),我們已經(jīng)了解到大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那么,有沒有不用種子來培育植物的方法呢?組織培養(yǎng)營養(yǎng)繁殖無性生殖扦插壓條芽接嫁接通過必修課的學(xué)習(xí),我們已經(jīng)了解到大多綠色開花植物都是2專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)金塔縣中學(xué)高二生物備課組李發(fā)軍專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)金塔縣中學(xué)高二生物備課組李發(fā)3專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1菊花的組織培養(yǎng)金塔縣中學(xué)高二生物備課組李發(fā)軍專題3植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題1菊花的組織培養(yǎng)金塔縣中學(xué)4學(xué)習(xí)目標能說出植物組織培養(yǎng)的基本原理、過程學(xué)會植物組織培養(yǎng)的基本技術(shù)熟悉菊花的組織培養(yǎng)的過程學(xué)習(xí)目標5

指植物的離體部分(包括任何器官、組織、細胞或原生質(zhì)體),在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件(溫度及光照)下,得以生長和分化成完整植株的一種無菌培養(yǎng)技術(shù)。又稱:植物離體培養(yǎng)(一)植物組織培養(yǎng)的概念和原理一、基礎(chǔ)知識1、概念指植物的離體部分(包括任何器官、組織、細胞或原生6人教版高中生物選修一專題3課題1《菊花的組織培養(yǎng)》-課件7人教版高中生物選修一專題3課題1《菊花的組織培養(yǎng)》-課件8概念:細胞的全能性是指已分化的細胞具有發(fā)育成完整個體的潛能。原因:是生物體的每一個細胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)2、原理:植物細胞的全能性概念:2、原理:植物細胞的全能性91、什么叫細胞分化?其實質(zhì)是什么?2、什么叫脫(去)分化?3、愈傷組織的細胞有什么特點?4、什么叫再分化?閱讀32頁解決下列問題:

(二)植物組織培養(yǎng)的基本過程1、什么叫細胞分化?其實質(zhì)是什么?閱讀32頁解決下列問題:10脫分化:再分化:細胞分化:愈傷組織細胞特點:基因的選擇性表達概念、實質(zhì)讓已經(jīng)分化的細胞,經(jīng)過誘導(dǎo)后,失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細胞的過程。細胞排列疏松、無規(guī)則、高度液泡化的無定形的薄壁細胞。脫分化的細胞,在一定的條件下,又重新分化成各種特異性的組織細胞的過程。脫分化:再分化:細胞分化:愈傷組織細胞特點:基因的選擇性11(二)植物組織培養(yǎng)的基本過程外植體(二)植物組織培養(yǎng)的基本過程外植體12(三)影響植物組織培養(yǎng)的因素植物材料的選擇直接關(guān)系到實驗的成敗離體的植物組織和細胞,對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊,需要配制適宜的培養(yǎng)基

MS培養(yǎng)基生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素適宜的PH、溫度、光照等條件那么如何控制細胞的脫分化與再分化?(三)影響植物組織培養(yǎng)的因素植物材料的選擇直接關(guān)系到實驗的成131、植物材料的選擇煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)比較難同一植物材料的年齡、保存時間的長短會影響實驗結(jié)果菊花的組織培養(yǎng)一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝(三)影響植物組織培養(yǎng)的因素1、植物材料的選擇煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易枸杞愈傷組織14人教版高中生物選修一專題3課題1《菊花的組織培養(yǎng)》-課件152、不同的離體組織和細胞對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊,需配置不同的培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基主要成分包括:A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有機物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等2、不同的離體組織和細胞對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相16討論:你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?答:微量元素和大量元素:蔗糖:甘氨酸、維生素等:提供植物細胞生活所必需的無機鹽提供碳源,同時能夠維持細胞的滲透壓滿足離體植物細胞特殊營養(yǎng)需求微生物培養(yǎng)基:MS培養(yǎng)基:同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?以有機營養(yǎng)為主則需提供大量無機營養(yǎng),無機鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。

請回答:在MS培養(yǎng)基配制好之后,常常需要加入_____________植物激素討論:你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?答:微量元素和大量元素:17(1)常用的植物激素:生長素、細胞分裂素和赤霉素3、植物激素的影響使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素,后使用細胞分裂素先使用細胞分裂素后使用生長素同時使用

有利于細胞分裂,但細胞不分化細胞既分裂也分化分化頻率高(2)生長素和細胞分裂素作用(1)常用的植物激素:生長素、細胞分裂素和赤霉素3、植物激素18生長素細胞分裂素:>有利于根的分化生長素細胞分裂素:<有利于芽的分化,抑制根的分化生長素細胞分裂素:≈促進愈傷組織生長(3)生長素和細胞分裂素同時使用,用量的比例對植物細胞發(fā)育方向的影響4、pH、溫度、光照pH控制在5.8左右,溫度控制在18-22。C,每日用日光燈照射12h生長素細胞分裂素:>有利于根的分化生長素細胞分裂素:<有利于19植物組織培養(yǎng)過程:離體組織或細胞植物體脫分化生長素≈細胞分裂素愈傷組織芽根生長素<細胞分裂素生長素>細胞分裂素再分化不需要光需要光

小結(jié)芽發(fā)育成葉,葉肉細胞中葉綠素的合成需要光照條件植物組織培養(yǎng)過程:離體組織或細胞植物體脫分化生長素≈細胞分裂20二、實驗操作制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒

接種

培養(yǎng)栽培

移栽二、實驗操作制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒接種培21(一)制備MS固體培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基包括20多種營養(yǎng)成分,實驗室一般使用4℃保存配制好的培養(yǎng)基母液來制備1、配制各種母液2、配制培養(yǎng)基分裝到錐形瓶中,每瓶分裝50ml或100ml①配制培養(yǎng)液②調(diào)PH③培養(yǎng)基的分裝閱讀思考:菊花莖段的組織培養(yǎng),在培養(yǎng)基中是否需要添加植物激素?為什么?由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易,因此不必添加植物激素3、滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行高壓蒸汽滅菌(一)制備MS固體培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基包括20多種營養(yǎng)成221、選材:菊花莖段,取生長旺盛的嫩枝(二)外植體消毒2、消毒①流水沖洗

菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉,用軟刷輕輕刷洗,刷洗后在流水下沖洗20min左右②酒精處理

用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入體積分數(shù)為70%的酒精中搖動2-3次,持續(xù)6-7s,立即將外植體取出,在無菌水中清洗③消毒液處理

取出后用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在無菌水中至少清洗3次,漂凈消毒液什么是外植體?1、選材:菊花莖段,取生長旺盛的嫩枝(二)外植體消毒2、消毒23(三)接種1、接種室消毒2、無菌操作要求3、材料的切取和接種4、接種注意事項①每接種一塊外植體前,都要對鑷子滅菌②外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻,放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定③插入時應(yīng)注意方向,不要倒插(三)接種1、接種室消毒2、無菌操作要求3、材料的切取和接種24人教版高中生物選修一專題3課題1《菊花的組織培養(yǎng)》-課件25思考:

你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對照實驗嗎?答:每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對照實驗可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng),用以說明培養(yǎng)基制作合格,沒有被雜菌污染。思考:答:每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置26(四)培養(yǎng)接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養(yǎng),培養(yǎng)期間應(yīng)定期消毒培養(yǎng)溫度控制在18-22℃每日用日光燈光照12h(四)培養(yǎng)接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養(yǎng),培養(yǎng)期間應(yīng)定期27(五)移栽移栽生根的菊花試管苗之前,應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜,讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日1、打開封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移用流水清洗根部的培養(yǎng)基,將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間3、移栽幼苗長壯后,移栽到土壤中珍珠巖蛭石含水量高、蓄水性強、透性好(五)移栽移栽生根的菊花試管苗之前,應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的28(六)栽培

幼苗移栽后,每天觀察并記錄幼苗的生長情況,適時澆水、施肥,直至開花三、結(jié)果分析與評價(一)對接種操作中污染情況的分析(二)是否完成了對植物組織的脫分化和再分化(三)是否進行了統(tǒng)計、對照與記錄(四)生根苗的移栽是否合格(六)栽培幼苗移栽后,每天觀察并記錄幼苗的生長情況,291、培養(yǎng)基的滅菌2、外植體的消毒3、接種的無菌操作

在整個操作過程中,是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的?高壓蒸汽滅菌流水(洗衣粉)酒精、氯化汞酒精、酒精燈——灼燒4、無菌箱中的培養(yǎng);5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。1、培養(yǎng)基的滅菌在整個操作過程中,是如何來實現(xiàn)30正常苗污染苗正常苗污染苗311、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔污染途徑1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶32四、課題延伸1、一般來說,容易進行無性繁殖的植物,也容易進行組織培養(yǎng)2、實例:蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季四、課題延伸1、一般來說,容易進行無性繁殖的植物,33本課題內(nèi)容小結(jié)菊花組織培養(yǎng)基礎(chǔ)知識實驗操作植物體的組織培養(yǎng)影響組織培養(yǎng)的因素細胞分化細胞全能性組織培養(yǎng)過程營養(yǎng)激素環(huán)境條件MS固體培養(yǎng)基制備外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培本課題內(nèi)容小結(jié)菊花組織培養(yǎng)基礎(chǔ)知識實驗操作植物體的組織培養(yǎng)影34練習(xí)(課本P36)1.答:植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長,如一些細菌、真菌等的生長。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染,就會導(dǎo)致實驗前功盡棄,因此要進行嚴格的無菌操作。2.答:外植體的生理狀態(tài)是成功進行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。練習(xí)(課本P36)35

草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代,導(dǎo)致產(chǎn)量降低。品質(zhì)變差。運用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如下:外植體愈傷組織芽、根植株請回答:(1)微型繁殖培育無病毒草莓苗時,一般選取_________作為外植體,其依據(jù)是________________。(2)在過程①中,常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和______,在配制好的培養(yǎng)基中,常常需要添加________,有利于外植體啟動細胞分裂形成愈傷組織。接種后2~5d,若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染,原因可能是__________________。(3)在過程②中,愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是_______________。莖尖、根尖莖尖、根尖不含病毒有機物植物激素外植體消毒不徹底

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