腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制

關(guān)于腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制惡性腫瘤為什么會(huì)侵襲與轉(zhuǎn)移？過(guò)程中有無(wú)標(biāo)記？能否預(yù)防？

問(wèn)題解答最終將是從腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制中尋找。瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的過(guò)程是瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞之間相互作用的連續(xù)過(guò)程，這個(gè)過(guò)程是復(fù)雜、多步驟的。1第2頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤轉(zhuǎn)移(tumormetastasis)是指腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)生長(zhǎng)部位,通過(guò)各種途徑的轉(zhuǎn)運(yùn),在機(jī)體內(nèi)遠(yuǎn)離原發(fā)部位的器官/組織繼續(xù)增殖生長(zhǎng),形成同樣性質(zhì)腫瘤(轉(zhuǎn)移瘤)的過(guò)程.在原發(fā)部位生長(zhǎng)的腫瘤稱為原發(fā)瘤（primarytumor）,在遠(yuǎn)隔部位生長(zhǎng)的腫瘤稱為轉(zhuǎn)移瘤(metastatictumor).腫瘤轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤最顯著的生物學(xué)特性之一,是臨床腫瘤病人的主要死因.2第3頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移步驟：

①

腫瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附降低，從原發(fā)灶脫離；

②腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）發(fā)生異質(zhì)型粘附增加；

③ECM降解；腫瘤細(xì)胞與ECM中大分子作用，分泌蛋白降解酶類降解ECM成分，形成腫瘤細(xì)胞移動(dòng)的通道，并以此為誘導(dǎo)血管生成的基礎(chǔ)；

④

腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)性增強(qiáng)在粘附降解的過(guò)程中移動(dòng)，穿透ECM，并穿透血管壁的基底膜進(jìn)入循環(huán)；

⑤

在循環(huán)中運(yùn)行逃避免疫系統(tǒng)識(shí)別與破壞；

⑥

到達(dá)繼發(fā)部位后，在有新生血管形成的前提下增殖，形成轉(zhuǎn)移灶。3第4頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天4第5頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤轉(zhuǎn)移的主要途徑淋巴道轉(zhuǎn)移：淋巴道轉(zhuǎn)移是癌轉(zhuǎn)移的重要途徑，少數(shù)肉瘤如滑膜肉瘤、惡性纖維組織細(xì)胞瘤也可發(fā)生淋巴道轉(zhuǎn)移。淋巴道轉(zhuǎn)移與淋巴引流的方向相同，但少數(shù)情況下也可發(fā)生跳躍轉(zhuǎn)移或逆行轉(zhuǎn)移。瘤細(xì)胞侵入淋巴管，隨引流淋巴液進(jìn)入局部淋巴結(jié)，先聚集在淋巴結(jié)邊緣竇，逐漸累及破壞整個(gè)淋巴結(jié)，并可進(jìn)一步轉(zhuǎn)移到下一站引流淋巴結(jié)，最終經(jīng)胸導(dǎo)管進(jìn)入體循環(huán)。受累的淋巴結(jié)腫大、變硬、互相粘連成團(tuán)，切面灰白而干燥。顯微鏡下淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)被破壞，出現(xiàn)數(shù)量不等的腫瘤細(xì)胞，嚴(yán)重者整個(gè)淋巴結(jié)被腫瘤組織取代。5第6頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天6血道轉(zhuǎn)移：血道轉(zhuǎn)移是肉瘤轉(zhuǎn)移的重要途徑，部分癌如腎細(xì)胞癌、肝細(xì)胞癌、肺癌以及其它癌的晚期也發(fā)生血道轉(zhuǎn)移。肝、肺是兩個(gè)血道轉(zhuǎn)移的主要靶器官。種植性轉(zhuǎn)移：體腔內(nèi)器官的腫瘤累及到器官的表面時(shí)，瘤細(xì)胞可脫落并種植到體腔各器官的表面，形成種植性轉(zhuǎn)移瘤。腹腔、胸腔最常受累，心包腔、蛛網(wǎng)膜下腔亦可受累。常在漿膜面形成多數(shù)轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)，很少侵入器官的深層，并常伴血性積液，積液內(nèi)可查到腫瘤細(xì)胞。第7頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第一節(jié)瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附下降

同質(zhì)型（homotypic）粘附是指同種細(xì)胞間的粘附，主要由存在于細(xì)胞表面的粘附分子（celladhesionmoleculeCAM）所介導(dǎo)。同質(zhì)型粘附下降，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞從瘤體上脫落，所以CAM在腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中起重要作用。7CAM是指由細(xì)胞合成并組裝與細(xì)胞表面或分泌至胞外基質(zhì)可存進(jìn)細(xì)胞粘附的一類分子。介導(dǎo)細(xì)胞之間或細(xì)胞與胞外基質(zhì)之間的選擇性粘附，在機(jī)體的發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、炎癥反應(yīng)、凝血和維持組織結(jié)構(gòu)完整性起著重要作用。第8頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天粘附因子相關(guān)腫瘤變化趨勢(shì)整合素 a2b1 a4b1 a5b1 a7b1 a6b1鈣粘蛋白 E-鈣粘蛋白免疫球蛋白超家族 DCC ICAM-1 CEA其他因子

選擇素 CD44

粘蛋白受體乳腺癌、肺癌黑色素瘤乳腺癌、小細(xì)胞肺癌黑色素瘤結(jié)腸癌乳腺癌、頭頸腫瘤結(jié)直腸癌黑色素瘤結(jié)腸癌淋巴瘤乳腺癌、結(jié)直腸癌、肺癌增加或減少增加減少增加增加減少減少增加增加增加增加增加8第9頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天1、鈣粘蛋白（Cadherin）

鈣粘蛋白是鈣依賴性跨膜糖蛋白，是一組依賴細(xì)胞外Ca2+的CAM，介導(dǎo)Ca2+依賴性細(xì)胞間粘附，通過(guò)同類或同分子親和反應(yīng)相結(jié)合。鈣粘蛋白參與建立和維持細(xì)胞間連接，可能是最重要的形成細(xì)胞間聯(lián)系的細(xì)胞粘附因子之一。已克隆了4種鈣粘蛋白，一級(jí)結(jié)構(gòu)相似，由723-748個(gè)氨基酸組成，每個(gè)鈣粘蛋白分子包含一個(gè)信號(hào)肽，一個(gè)含三個(gè)重復(fù)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞外區(qū)，一個(gè)跨膜錨定作用的高疏水區(qū)，還有一個(gè)較長(zhǎng)的胞內(nèi)尾部。不同組織不同種族之間鈣粘蛋白的同源性為50-60%。9第10頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第11頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

根據(jù)基因克隆免疫學(xué)特征及分布組織不同，將鈣粘蛋白家族分為三個(gè)亞類:①E-Cad：見(jiàn)于成熟上皮細(xì)胞;②N-Cad：成熟神經(jīng)組織及肌肉組織;③P-Cad:

起初在胎盤及上皮基底層發(fā)現(xiàn)，后來(lái)發(fā)現(xiàn)發(fā)育過(guò)程中在其它組織也有短暫表達(dá)。

近來(lái)又發(fā)現(xiàn)新的亞類，如內(nèi)皮細(xì)胞鈣粘蛋白和橋連粘附蛋白（desmoglein），以及V-Cad,M-Cad,B-Cad，R-Cad,T-Cad等。10第12頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天鈣粘蛋白選擇性地與同種分子親和性結(jié)合，這種粘附反應(yīng)是利用其細(xì)胞外結(jié)構(gòu)中“組-丙-頡”（HAV）序列來(lái)識(shí)別和介導(dǎo)的，鈣粘蛋白的功能依賴于胞漿內(nèi)結(jié)構(gòu)與細(xì)胞骨架元件之間的作用。但這種作用是間接的與三種胞漿連鎖蛋白（catenin）αβγ結(jié)合，這些分子與鈣粘蛋白一起位于細(xì)胞的粘附小帶(zonuleadherin)上，參與連接的形成與穩(wěn)定。鈣粘蛋白也是重要的形態(tài)分子，E-Cad作用于形成完整的上皮層，P-Cad則在基底層起作用，這些鈣粘蛋白的存在對(duì)于保持上皮和內(nèi)皮結(jié)構(gòu)很重要，其表達(dá)改變將導(dǎo)致細(xì)胞-細(xì)胞間正常連接完整性的喪失。11第13頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天目前認(rèn)為與腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切的是E-Cad。許多研究證實(shí)E-Cad與腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，可能由于E-Cad能促進(jìn)瘤細(xì)胞的同質(zhì)型粘附不易使瘤細(xì)胞從瘤體上脫落。在很多腫瘤組織中呈低表達(dá)、不均勻性表達(dá)、甚至表達(dá)缺失狀態(tài)，其表達(dá)強(qiáng)度往往隨著腫瘤分化程度的降低而下降。表達(dá)下調(diào)是多種上皮源性惡性腫瘤如乳腺癌、頭頸部鱗癌、婦科腫瘤等發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要原因之一。12第14頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天Biawy報(bào)道67%舌鱗癌E-Cad表達(dá)下降。E-Cad（-）者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率遠(yuǎn)高于E-Cad（+）者。以攜帶E-CadmRNA的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染高侵襲性的癌細(xì)胞，可使其侵襲性消失。因此認(rèn)為E-Cad是一種抑制侵襲轉(zhuǎn)移的因子。然而并非所有腫瘤的轉(zhuǎn)移都與E-Cad表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。GunjiN等報(bào)道E-Cad表達(dá)與原發(fā)性胰腺癌肝轉(zhuǎn)移不存在顯著關(guān)系。13第15頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天2、腫瘤細(xì)胞表面電荷增加

瘤細(xì)胞表面電荷增加時(shí)瘤細(xì)胞間的排斥力增大，促使瘤細(xì)胞從瘤體上脫落。瘤細(xì)胞表面電荷大小可以通過(guò)電泳速度表現(xiàn)出來(lái)。細(xì)胞電泳率的大小與轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。所以細(xì)胞電泳速度被認(rèn)為是篩選不同浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移潛能瘤細(xì)胞的初篩標(biāo)記。此外溶解性酶的釋放，細(xì)胞間隙壓力的增加，也有利于瘤細(xì)胞從瘤體上脫落下來(lái)。14第16頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第二節(jié)瘤細(xì)胞異質(zhì)型粘附的增加

異質(zhì)型（heterotypic）粘附是指瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞，或宿主基質(zhì)的粘附。瘤細(xì)胞脫離瘤體，浸潤(rùn)到基底膜或穿過(guò)基底膜遭遇宿主基質(zhì)和宿主細(xì)胞，這一過(guò)程就是異質(zhì)型粘附的過(guò)程。這一過(guò)程有利于瘤細(xì)胞穿過(guò)基質(zhì)、基底膜的血管壁，有利于瘤細(xì)胞在血管內(nèi)聚積。15第17頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）整合素（Integrin）

是一組介導(dǎo)異質(zhì)粘附的細(xì)胞粘附分子。

整合素：是一類廣泛分布的具有二價(jià)陽(yáng)離子依賴性的細(xì)胞表面糖蛋白。由α/β亞單位通過(guò)非共價(jià)鍵相連的異二聚體，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)18種α亞單位和11種β亞單位，可形成20多種整合素。

16第18頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天整合素配體：Ⅰ型、Ⅳ型膠原、LN、FN、Vitronectin、endotoxin、ICAM-1、VCAM-1。整合素與相鄰細(xì)胞上或ECM中相應(yīng)配體相結(jié)合，介導(dǎo)細(xì)胞間以及與ECM間的粘附作用，參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)及影響細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)。在細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、形成連接和維持極性等方面起重要作用。在整合素配體中多含有RGD（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）序列，這一序列是整合素的結(jié)合位點(diǎn)。17第19頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天根據(jù)作用方式分三類：介導(dǎo)細(xì)胞與ECM的粘附反應(yīng)：α4/β1、α5/β1、αV/β1均可與FN相結(jié)合；αV/β3、αV/β5可與LN相結(jié)合，αV/β3還可與纖維蛋白原結(jié)合介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞間粘附反應(yīng)：αL/β2（LFA-1）的配體是ICAM-1，αM/β2（MAC-1）的配體是ICAM-1、C3bi、Endotoxin;α4/β1的配體是VCAM-1。既介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞又介導(dǎo)細(xì)胞-ECM的粘附反應(yīng)：VLA-4及αM/β2。18第20頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天ListofIntegrinReceptorsandTheirLigands19第21頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天樁蛋白踝蛋白紐蛋白紐蛋白（黏著斑蛋白、聯(lián)結(jié)蛋白VCL）：連接肌動(dòng)蛋白與質(zhì)膜踝蛋白（Talin）：膜下的一種細(xì)胞骨架蛋白樁蛋白（Paxillin）

聚焦粘附激酶（FAK）

引起細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝，將細(xì)胞外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)到胞質(zhì)核糖體合成基因轉(zhuǎn)錄所需的蛋白質(zhì)。20第22頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天Regulationofintracellularsignallingbyintegrins

21第23頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天IntegrinbindingtoECMligandspreventsapoptosis

失巢凋亡anoikis22第24頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天表達(dá)可隨腫瘤轉(zhuǎn)移的不同階段而改變。如在轉(zhuǎn)移早期，某些整合素（如FN受體、α5β1）表達(dá)減弱或功能喪失，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞間及腫瘤細(xì)胞與ECM間的粘附作用降低而易于從瘤體脫落；而當(dāng)腫瘤細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)后，瘤細(xì)胞表面某些整合素分子如α2β1（膠原/LN受體）表達(dá)增強(qiáng)，促進(jìn)了與血管內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附，有助于轉(zhuǎn)移灶的最終形成。23第25頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天整合素分子結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的改變與腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移行為密切相關(guān)。并且在各種不同的瘤細(xì)胞中表達(dá)頻率不同，如：α4β1、α1β1、α2Bβ3主要在黑色素瘤中表達(dá)；浸潤(rùn)性黑色素細(xì)胞瘤β3亞單位表達(dá)上升；在黑色素細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中VLA-4整合素增加，α6亞單位表達(dá)下降。N膠質(zhì)細(xì)胞瘤、惡性星形細(xì)胞瘤的VN-R、αv/β3表達(dá)增加。當(dāng)N母細(xì)胞瘤有αv/β3、α4/β1、α6/β4表達(dá)而無(wú)N-myc原癌基因表達(dá)時(shí)腫瘤預(yù)后較好。24第26頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天上皮性腫瘤的整合素表達(dá)也有異質(zhì)性，分化差的腫瘤中一些整合素亞單位（尤其是膠原、LN結(jié)合亞單位α2、α3、α6）表達(dá)下降。在許多研究中發(fā)現(xiàn)基底膜完整性與整合素表達(dá)之間存在一定關(guān)系，浸潤(rùn)性腫瘤基底膜缺乏完整性，與基底膜結(jié)合的整合素（如α6）趨于不表達(dá)；膠原的α2/β1在正常乳腺細(xì)胞中有較強(qiáng)表達(dá)，而在浸潤(rùn)性乳腺癌中表達(dá)明顯下降。α5β1主要在乳腺癌和小細(xì)胞肺癌中表達(dá)。α6β主要在結(jié)腸癌中表達(dá)。25第27頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）LN受體（LN—R）腫瘤細(xì)胞只有通過(guò)基底膜才能產(chǎn)生浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移。LN是基底膜的重要組成部分，腫瘤細(xì)胞通過(guò)其表面的LN-R與基底膜中的LN結(jié)合而穿過(guò)基底膜。

其高表達(dá)與乳癌，肺癌，結(jié)腸癌等許多腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移能力呈正相關(guān)。26第28頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）CD44及其變體

也稱為Hermes抗原，H-CAM、Pag-1抗原，細(xì)胞外基質(zhì)受體Ⅲ（ECM-Ⅲ）。CD44V1-10，分子量約85-160KD，目前研究較多的是CD44v6。CD44是一種淋巴細(xì)胞表面的歸巢（homing）受體，在多種高轉(zhuǎn)移性癌中高表達(dá)。CD44原為淋巴細(xì)胞和小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞有關(guān)的分子，CD44陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞也可能因此獲得淋巴細(xì)胞的偽裝，更易進(jìn)入淋巴結(jié)形成轉(zhuǎn)移。27第29頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天CD44是一種多功能的跨膜透明質(zhì)酸受體,介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞間，細(xì)胞與ECM間的相互作用.28第30頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天胞膜外區(qū):是CD44分子發(fā)揮生物學(xué)功能的重要結(jié)構(gòu)，在此區(qū)域，CD44分子信號(hào)肽的氮末段功能區(qū)（糖基化位點(diǎn)和硫酸軟骨素連接位點(diǎn)）能夠連接胞外基質(zhì)及基底膜的透明質(zhì)酸，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)及形態(tài)；跨膜區(qū):由21個(gè)疏水氨基酸組成；胞漿區(qū):部分可作為蛋白激酶C（PKC）的底物被磷酸化，參與信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程。N-連接的糖基化位點(diǎn)

連接的糖基化位點(diǎn)

硫酸軟骨素連接位點(diǎn)

29第31頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

CD44的功能：1）作為透明質(zhì)酸受體（C-C,C–ECM間的黏附）；2）為淋巴細(xì)胞歸巢分子；3）賦予腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能；4）參與正常免疫應(yīng)答(Tc活動(dòng)和炎癥反應(yīng)）。

30第32頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

腫瘤細(xì)胞表達(dá)CD44刺激腫瘤生長(zhǎng)的途徑：1）固定腫瘤細(xì)胞，為克隆形成提供病灶場(chǎng)所；2）腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞相互作用產(chǎn)生EGF及VEGF，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)；3）CD44還可識(shí)別宿主組織的額外配體，直接刺激腫瘤細(xì)胞增殖；4）CD44的胞漿內(nèi)部分與細(xì)胞骨架蛋白作用，傳導(dǎo)細(xì)胞分裂信號(hào)。31第33頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天Culty等進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，乳癌細(xì)胞CD44表達(dá)與其浸潤(rùn)能力呈正相關(guān)，只有CD44高表達(dá)的細(xì)胞株才有結(jié)合降解透明質(zhì)酸鹽的能力，[H3]標(biāo)記的透明質(zhì)酸鹽降解率與CD44含量和細(xì)胞浸潤(rùn)生物學(xué)潛能密切相關(guān)，CD44結(jié)合降解透明質(zhì)酸鹽能力可被抗CD44抗體Hermes-1阻斷。介導(dǎo)降解透明質(zhì)酸鹽是CD44在腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)過(guò)程中主要功能之一。32第34頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天Washington等免疫組化分析表明，CD44表達(dá)與胃癌浸潤(rùn)表型及生存期有關(guān)，認(rèn)為CD44高表達(dá)是浸潤(rùn)表型及預(yù)后差的指標(biāo)。Castella等用免疫組化方法檢測(cè)14例早期胃癌，37例晚期胃癌，18例胃周圍轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。結(jié)果表明浸潤(rùn)程度與CD44表達(dá)沒(méi)有明顯關(guān)系，但腸型胃癌轉(zhuǎn)移灶CD44V6陽(yáng)性率比彌漫型胃癌轉(zhuǎn)移灶中CD44V6陽(yáng)性率顯著增高，說(shuō)明CD44V6表達(dá)可能與腸型胃癌，而不是彌漫型胃癌的轉(zhuǎn)移有關(guān)。

33第35頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

Guo等用ELISA測(cè)定腫瘤病人血清中CD44濃度，表明血清CD44濃度與腫瘤轉(zhuǎn)移及腫瘤增殖有關(guān)，外科切除腫瘤后血清CD44水平明顯下降，認(rèn)為血清CD44濃度可作為監(jiān)測(cè)腫瘤增殖及腫瘤轉(zhuǎn)移的指標(biāo)。Matsumura等測(cè)定尿中脫落細(xì)胞的CD446號(hào)外顯子產(chǎn)物診斷膀胱癌，敏感性91%（40/44），特異性83%（38/46）。體液：治療：抗CD44抗體在腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的治療中有潛力。（靜脈，皮下）34第36頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（四）路易斯寡糖（SLEX）

SLEX在正常成人分布于粒細(xì)胞，單核細(xì)胞表面。在腫瘤分布于上皮性腫瘤細(xì)胞表面如肺癌，胃癌，結(jié)腸癌等。SLEX可分泌入血，腫瘤病人血清中可查到SLEX。最近研究指出，腫瘤細(xì)胞表面唾液酸化的SLEX作為血管內(nèi)皮細(xì)胞上的E-選擇素的配體，是結(jié)腸癌早期診斷、癌浸潤(rùn)、預(yù)后不良的一個(gè)指標(biāo)。結(jié)腸癌細(xì)胞表面SLEX抗原結(jié)構(gòu)和數(shù)量的變化是導(dǎo)致轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素。所以檢測(cè)血清或腫瘤組織中SLEX可以有效監(jiān)測(cè)腫瘤，尤其是結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移。35第37頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天36選擇素是一類新發(fā)現(xiàn)的以唾液化路易斯a和x抗原為識(shí)別配體的跨膜蛋白。在腫轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟如進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)腫瘤細(xì)胞的聚集，腫瘤細(xì)胞與特定臟器血管內(nèi)皮的錨定粘附等，選擇素被認(rèn)為是可能與腫瘤轉(zhuǎn)移的器官選擇性有關(guān)。第38頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天1、開(kāi)始黏附選擇素與糖蛋白E\Pselectin---Ec---CD34

SLEX----腫瘤細(xì)胞--Lselectin2、腫瘤細(xì)胞通過(guò)selectin的結(jié)合或介導(dǎo)selectin間的相互作用3、受體間相互作用出現(xiàn)牢固黏附4、腫瘤細(xì)胞與Ec表面同形分子（CD31）相互作用介導(dǎo)細(xì)胞間的移出。

37第39頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

（五）免疫球蛋白超家族（Ig-SF）Ig-SF包括許多有共同結(jié)構(gòu)特征的分子，這一結(jié)構(gòu)包含170-110氨基酸組成7-9個(gè)β折疊，每個(gè)單位在兩條β鏈之間由二硫鍵形成穩(wěn)定復(fù)合物。Ig-SF大部分成員參與細(xì)胞間識(shí)別（包括那些有免疫功能的分子，如MHA、CD4、CD8和T細(xì)胞受體，參與N發(fā)育（N-CAM，L1）白細(xì)胞交流（ICAM-1，VCAM-1，PECAM-1）和信息傳遞（CSF-1受體，血小板源性生長(zhǎng)因子受體）。38第40頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天39第41頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天1．CEA

CEA是一種高度糖基化的細(xì)胞表面糖蛋白，分子量為180KD。近年來(lái)對(duì)CEA基因及蛋白結(jié)構(gòu)分析表明，CEA是Ig-SF的成員之一，是一種重要的細(xì)胞粘附分子，可能有細(xì)胞識(shí)別和相互作用的功能，作為粘附分子，CEA可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞間的結(jié)合。Hostetter等給予外源性的CEA后，促進(jìn)結(jié)、直腸癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能。Benchimol等觀察到產(chǎn)生CEA多的細(xì)胞株比產(chǎn)生CEA少的細(xì)胞株聚集得快，這種聚集可被CEA抗體完全抑制。將CEA的cDNA轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞株，測(cè)定細(xì)胞株CEA表達(dá)水平，再將表達(dá)CEA不同的細(xì)胞株注射入裸鼠脾臟，結(jié)果表明，CEA高表達(dá)的細(xì)胞株肝臟轉(zhuǎn)移明顯高于CEA低表達(dá)者，并且有肝轉(zhuǎn)移的裸鼠血清CEA亦明顯升高。40第42頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天2．N-CAM

N-CAM是一種同種親和性鈣依賴性細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子，起初表達(dá)于N系統(tǒng)。N-CAM的表達(dá)隨發(fā)育而改變，N-CAM可降低細(xì)胞的粘附性，使細(xì)胞呈“漂浮”狀態(tài)。N-CAM在惡性發(fā)展過(guò)程中可能的機(jī)制：涉及細(xì)胞生長(zhǎng)的接觸抑制。轉(zhuǎn)化N-CAM的細(xì)胞株喪失接觸抑制，用抗N-CAM抗體則可抑制腫瘤的生長(zhǎng)。41第43頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天3．V-CAM-1（INCAM10）VCAM（vascularcelladhesionmolecule-1）或INCAM（induciblecelladhesionmolecule）是血管內(nèi)皮細(xì)胞中細(xì)胞因子誘導(dǎo)的粘附分子，屬Ig-SF成員，是VLA-4（α4/β1）的受體。VCAM-1的功能是介導(dǎo)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的粘附反應(yīng)，許多惡性細(xì)胞中也有VLA-4表達(dá)，因此VCAM-1在這些有VLA-4表達(dá)的腫瘤中作為腫瘤細(xì)胞粘附受體。42第44頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天4、ICAM-1是相對(duì)分子質(zhì)量為9000的糖蛋白，可與整合素αLβ2和Mac-l連接，主要參與細(xì)胞與細(xì)胞之間的連接，與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。除介導(dǎo)粘附外，實(shí)驗(yàn)證實(shí)ICAM-1可從腫瘤細(xì)胞表面脫落，進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)形成可溶性分子，可助腫瘤細(xì)胞逃逸CTL和NK細(xì)胞的免疫監(jiān)視效應(yīng)，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生與轉(zhuǎn)移。ICAM-1表達(dá)增加與黑色素瘤惡性發(fā)展，及增加轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)性有關(guān)。

43第45頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第三節(jié)

細(xì)胞外基質(zhì)降解

細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）主要由膠原，糖蛋白，蛋白多糖和氨基葡萄糖組成。ECM以基底膜和間質(zhì)結(jié)締組織的形式存在，膠原是ECM的主要成分，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原主要存在于間質(zhì)結(jié)締組織中，Ⅳ型膠原則主要存在于基底膜。ECM中的糖蛋白包括LN，F(xiàn)N，EN（內(nèi)動(dòng)蛋白）和ND（接觸蛋白）等。ECM是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的天然屏障，腫瘤從原位增殖到浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的演進(jìn)過(guò)程中必須具備降解ECM的能力。能溶解ECM的酶主要是蛋白水解酶，它們的活性均與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。44第46頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天45第47頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天四類蛋白水解酶基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）絲氨酸蛋白酶半胱氨酸蛋白酶（Caspase家族）天門冬氨酸蛋白酶幾乎能降解ECM中的所有成分，是近年腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移研究中的熱點(diǎn)。46第48頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）、基質(zhì)金屬蛋白酶（MatrixmetalloprotinaseMMP）是一組鋅離子依賴性內(nèi)肽酶（①間質(zhì)膠原酶②明膠酶③間充質(zhì)溶解素），目前已發(fā)現(xiàn)至少28個(gè)成員，幾乎能降解除多糖外的所有ECM成分。典型MMP以水溶性酶原形式分泌至胞外，需要在激活劑作用下，脫去前肽才具酶活性。新型MMP則不同，間質(zhì)溶素可直接以活性酶形式分泌至胞外。膜類MMP（membraNetypeMMPMT-MMP）則結(jié)合于胞膜上，它們的共同特征是在前肽區(qū)和催化區(qū)間有一含RXKR序列的插入?yún)^(qū)，可能與其活化有關(guān)。47第49頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

MMP的調(diào)節(jié)三個(gè)水平調(diào)控MMP的表達(dá)和活性1、受酶原合成：生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子等活性介質(zhì)(EGF,TGF-β等是酶原合成階段最主要的調(diào)節(jié)因子)，它們不僅能促進(jìn)或抑制MMPmRNA的轉(zhuǎn)錄，而且能影響其半衰期。2、酶原活化：組織金屬蛋白酶抑制劑（tissueinhibitorofmetalloproteinaseTIMP）可以通過(guò)結(jié)合MMP的鋅離子活性中心抑止其活性。

48第50頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天TissueinhibitorsofmetalloproteinasesIsoformsTargetMMPsTargetpro-MMPsTIMP-1MMP-2、9Pro-MMP-9TIMP-2MMP-2、9Pro-MMP-2TIMP-3MMP-2、9Pro-MMP-2、9TIMP-4MMP-2、9Pro-MMP-23、抑制劑抑制：49第51頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天TargetsforinhibitingMMPexpressionandactivity

50第52頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天各種MMP之間具有一定的底物特異性，但不是絕對(duì)的。同一種MMP可降解多種ECM成分，而某一種ECM成分又可以被多種MMP降解。但不同酶的降解效率可有不同。MMP的眾多調(diào)控因素構(gòu)成微妙的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，正是這種精確的調(diào)控機(jī)制保證了機(jī)體內(nèi)生理狀態(tài)下細(xì)胞遷移的ECM重構(gòu)；反之就成為腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移等病理過(guò)程發(fā)生的原因。51第53頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

MMP與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系

MMP與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系正被MMP基因轉(zhuǎn)染技術(shù)所證實(shí)，將基質(zhì)溶素和MT1-MMP完整cDNA導(dǎo)入無(wú)轉(zhuǎn)移潛能的或轉(zhuǎn)移潛能較弱的細(xì)胞后，受染細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移率大大提高。反之將MMP的反義核酸序列導(dǎo)入高侵襲轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞后，可使其侵襲轉(zhuǎn)移表型減弱。通過(guò)調(diào)節(jié)MMP抑制劑的水平，也證實(shí)了MMP在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用。52第54頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

MMP在人體腫瘤中表達(dá)較復(fù)雜，不同的研究結(jié)果也不盡相同，腫瘤細(xì)胞及其附近間質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)的報(bào)道。間質(zhì)細(xì)胞主要是指（成）纖維細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等。腫瘤周邊的間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生MMP，提示腫瘤細(xì)胞可以通過(guò)可溶性介質(zhì)或膜結(jié)合分子與間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行信息交換，協(xié)同產(chǎn)生和調(diào)節(jié)MMP，這在腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移機(jī)制中具有重要意義。53第55頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）組織蛋白酶Cathepsin家族是一類在大多數(shù)動(dòng)物組織中存在的細(xì)胞內(nèi)肽鍵水解酶。包括CathepsinB、D、H等，CathepsinD能降解基底膜、間質(zhì)Ⅰ、Ⅲ型膠原、蛋白聚糖、肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白、FN，從而促進(jìn)許多腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。其表達(dá)及分泌受惡性轉(zhuǎn)化、生長(zhǎng)因子和促癌劑的誘導(dǎo)。組織蛋白酶D是天冬氨酸蛋白酶。54第56頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）半胱氨酸蛋白酶Caspase家族至今已發(fā)現(xiàn)有14種Caspase，分為3組。1、Caspase-2，-8，-9，是細(xì)胞凋亡的起始Caspase，2、Caspase-3，-6，-7，執(zhí)行細(xì)胞凋亡，是效應(yīng)Caspase。這兩組Caspase在細(xì)胞凋亡中缺一不可。3、由Caspase-1，-4，-5組成，與細(xì)胞凋亡的關(guān)系不是很密切，可能與多種炎癥因子的成熟有關(guān)。55第57頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（四）絲氨酸蛋白酶（纖溶酶原激活劑，PA）

是一種單鏈絲氨酸蛋白酶，能催化纖維蛋白溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白溶酶（plasmin），后者除能引起血凝塊溶解外，還可降解ECM中的層粘蛋白（LN）、纖維連接蛋白（FN）及蛋白聚糖（PG）等，但不降解膠原和彈力蛋白。分為組織型（t-PA）和尿激酶型（u-PA）兩種。56第58頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天t-PA：促使腫瘤細(xì)胞降解ECM，腫瘤組織勻漿中t-PA的水平可作為預(yù)后判斷的指標(biāo)之一；u-PA：腫瘤細(xì)胞膜表面的uPA受體可與鄰近內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等釋放的uPA相結(jié)合，通過(guò)參與細(xì)胞分化、血管形成、細(xì)胞遷移、ECM降解和組織重建等促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。另外u-PA還可促進(jìn)細(xì)胞粘附、遷移以及整合素信號(hào)通路的傳遞等，因此在腫瘤轉(zhuǎn)移中更為重要。57第59頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天PA的特異性抑制物為PAI，主要包括PAI-1、PAI-2和PAI-3。

PAI-1分布在腫瘤細(xì)胞及鄰近組織細(xì)胞中，其高水平表達(dá)在大多數(shù)腫瘤可提示預(yù)后不佳，作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞蛋白水解酶活性及抑制凋亡相關(guān)。

PAI-2在多數(shù)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移時(shí)表達(dá)水平降低，因此其高表達(dá)往往提示預(yù)后良好。58第60頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第四節(jié)腫瘤運(yùn)動(dòng)性增強(qiáng)

（一）移動(dòng)素（Motogen）可以刺激腫瘤細(xì)胞移動(dòng)性的不同方面，包括：遷移、趨化性、化學(xué)激動(dòng)作用、吞噬動(dòng)力學(xué)等。59第61頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天移動(dòng)素分為三大類1、刺激腫瘤細(xì)胞移動(dòng)與浸潤(rùn)的因子，如移動(dòng)刺激因子、單核細(xì)胞源性分散因子、膠原性移動(dòng)因子和自分泌移動(dòng)因子（AMF）。2、刺激生長(zhǎng)與移動(dòng)的因子，如肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）、分散因子、內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（EGF）和IL-1，3，6。3、刺激移動(dòng)但抑制生長(zhǎng)的因子，如轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）和干擾素（INF）。60第62頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天自分泌移動(dòng)因子（AMFs）AMFs是一類由多種腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白因子，各自有特異的糖蛋白受體，信號(hào)傳導(dǎo)受G蛋白調(diào)節(jié)，最近發(fā)現(xiàn)AMFs還可以旁分泌方式作用，此時(shí)稱之為旁分泌移動(dòng)因子（PMF），調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)及移動(dòng)。新成員：autotaxin（ATX）61第63頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第五節(jié)腫瘤新生血管是轉(zhuǎn)移阻力最小的通道

腫瘤長(zhǎng)到1-2mm3時(shí)，為保證快速增殖必須新生血管支持。由腫瘤誘導(dǎo)產(chǎn)生的血管，其基底膜薄而且易斷裂，腫瘤細(xì)胞很容易進(jìn)入這種血管。所以新生血管的形成十分有利于腫瘤的轉(zhuǎn)移，而一切有利于腫瘤新生血管形成的細(xì)胞因子也均有利于腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。這些細(xì)胞因子包括酸性或堿性纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子（aFGF、bFGF）、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）又叫血管通透因子（VPF）、表皮生長(zhǎng)因子/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（EGF/TGF）。除此之外IL-8、GM/M-GSF、IGF-1、IFN2、促血管素（angiotropin）、P物質(zhì)等能促進(jìn)腫瘤新生血管形成。62第64頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天腫瘤血管生成因子（TAF）是一種能促進(jìn)宿主毛細(xì)血管和小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分裂并刺激毛細(xì)血管生長(zhǎng)，胃腫瘤的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移提供有利條件。主要由宿主細(xì)胞和瘤細(xì)胞本身分泌的可溶性物質(zhì)。血管生長(zhǎng)素（Angiogenin）具有強(qiáng)烈的誘發(fā)血管生成的作用。63第65頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天與正常組織相比,腫瘤內(nèi)的毛細(xì)血管往往處于持續(xù)生長(zhǎng)狀態(tài).這些血管極少分化成熟,且形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)出很大差異,如結(jié)構(gòu)粗糙,走行紊亂,常呈不規(guī)則的狹窄,擴(kuò)張及扭曲.多數(shù)血管壁薄,僅有一層內(nèi)皮細(xì)胞,細(xì)胞間裂隙較大,基底膜不完整或缺如.這些異常的結(jié)構(gòu)非常有利于腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血管腔,進(jìn)而向遠(yuǎn)處播散.腫瘤的血管生成受到來(lái)自宿主細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞本身產(chǎn)生分泌的血管生成刺激因子和抑制因子的調(diào)節(jié).目前明確的有調(diào)節(jié)血管生成作用的內(nèi)源性因子主要包括：血管生成刺激因子：aFGF,bFGF,angiogenin,IL-8,TGF-a,TGF-b,TNF-a,前列腺素E1,E2,血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子VEGF等。血管生成抑制因子：angiostatin,IFNa,IFNb,TIMPs,肝素酶,血小板因子4,血小板反應(yīng)蛋白等。64第66頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天UchidaS等研究顯示VEGF表達(dá)與食管癌的浸潤(rùn)程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。VEGF促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制除了與它參與腫瘤新生血管形成，使血管通透性增加外，還與它能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞金屬蛋白酶和間質(zhì)膠原酶的產(chǎn)生有關(guān)。

研究表明腫瘤微血管數(shù)目和微血管密度直接與腫瘤浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有關(guān)，誘發(fā)腫瘤血管生成是具有轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細(xì)胞特性之一。65第67頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第六節(jié)腫瘤逃避免疫系統(tǒng)的識(shí)別與破壞

腫瘤細(xì)胞即使從瘤體脫落下來(lái)，突破細(xì)胞外基質(zhì)或基底膜進(jìn)入血液循環(huán)或淋巴系統(tǒng)，也不一定能在血液或淋巴系統(tǒng)中存活下來(lái)，它可能會(huì)被免疫系統(tǒng)識(shí)別和消滅掉，所以逃避免疫系統(tǒng)的識(shí)別和破壞是腫瘤轉(zhuǎn)移形成的又一關(guān)鍵步驟。目前認(rèn)為在腫瘤轉(zhuǎn)移時(shí)MHC功能受到抑制，細(xì)胞刺激信號(hào)的作用減弱，導(dǎo)致了腫瘤細(xì)胞免疫逃逸，這是腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生的重要原因。66第68頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞的HLA抗原表達(dá)極弱或消失，分化越差的瘤細(xì)胞HLA表達(dá)也越弱。DouNall等人采用免疫組化法分析110例結(jié)腸癌活檢標(biāo)本，結(jié)果發(fā)現(xiàn)44%的結(jié)腸癌HLA表達(dá)幾乎消失，50%呈中度降低。日本學(xué)者的研究發(fā)現(xiàn)，凡攜帶HLA-DR4患者結(jié)腸癌是極易轉(zhuǎn)移，即攜帶HLA-DR4者有47.4%發(fā)生轉(zhuǎn)移，而不帶HLA-DR4者只有18./5%發(fā)生轉(zhuǎn)移。誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡67第69頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第七節(jié)轉(zhuǎn)移過(guò)程中的信號(hào)傳導(dǎo)

信號(hào)傳導(dǎo)（signaltransduction）是90年代以來(lái)生命科學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)與前沿，雖然目前尚無(wú)統(tǒng)一確切的定義，但約定俗成的基本概念是指細(xì)胞外因子通過(guò)與受體結(jié)合所引發(fā)的細(xì)胞內(nèi)的一系列生化反應(yīng)，蛋白與蛋白的相互作用，直至細(xì)胞生理反應(yīng)所需基因表達(dá)開(kāi)始的過(guò)程，即信號(hào)從細(xì)胞外通過(guò)膜到細(xì)胞核的過(guò)程。68第70頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑G蛋白途徑酪氨酸激酶途徑胞膜磷脂酰肌醇代謝途徑蛋白激酶C（PKC）途徑鈣調(diào)蛋白依賴途徑在侵襲轉(zhuǎn)移的整個(gè)過(guò)程中，包括粘附、降解、移動(dòng)都有信號(hào)傳遞參與，細(xì)胞表面受體接受刺激將信號(hào)傳入細(xì)胞內(nèi)，調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架蛋白，激發(fā)移動(dòng)，激活細(xì)胞產(chǎn)生各種蛋白降解酶類。69第71頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天蛋白酪氨酸途徑

FAK和/或Ras激活有絲分裂原活化蛋白激酶（MAPK）級(jí)鏈反應(yīng)傳遞細(xì)胞生長(zhǎng)因子信號(hào)到細(xì)胞核激活涉及細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄參與細(xì)胞的活化、增殖、分化、分泌、遷移、凋亡等

細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝途徑

聚焦粘附激酶（FAK，focaladhesionkinase，F(xiàn)AK）引起細(xì)胞膜磷脂酰肌醇代謝，將細(xì)胞外信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)到胞質(zhì)核糖體合成基因轉(zhuǎn)錄所需的蛋白質(zhì)。70第72頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天整合素經(jīng)FAK和ILK途徑信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)71第73頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天第八節(jié)腫瘤轉(zhuǎn)移的基因調(diào)控

在癌轉(zhuǎn)移這個(gè)復(fù)雜的過(guò)程中，必然有許多基因在不同層次上參與調(diào)控，包括腫瘤轉(zhuǎn)移基因的激活和轉(zhuǎn)移抑制基因的失活。許多與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)的基因表現(xiàn)為多效性（pleiotropy），同一基因在不同組織類型的腫瘤中作用有異，而同一腫瘤的不同階段又可能有不同組合的多個(gè)基因參與。

72第74頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

用突變的ras基因轉(zhuǎn)染鼠成纖維細(xì)胞NIH3T3使之獲得轉(zhuǎn)移能力。以后研究表明，至少10余種癌基因由細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)證實(shí)可誘導(dǎo)或促進(jìn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能。最近通過(guò)對(duì)以ras基因蛋白為中心的信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)的闡明，將癌基因“網(wǎng)絡(luò)化”，網(wǎng)絡(luò)上游癌基因有src、fes、erb-B2等，這些基因編碼具有酪氨酸激酶（PTK）活性的蛋白；下游基因有raf、fos、myc等；ras基因蛋白則通過(guò)GTP與GDP功能狀態(tài)的轉(zhuǎn)換,在網(wǎng)絡(luò)中起分子開(kāi)關(guān)的作用。73第75頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（一）Nm23：1988年由美國(guó)國(guó)立癌癥研究院steeg等首先在7株具有不同轉(zhuǎn)移能力的鼠K-1735黑色素瘤細(xì)胞系中，以消減雜交的方法從cDNA文庫(kù)中分離到Nm23基因（Non-metastasis非轉(zhuǎn)移性），并且是檢查到的第23個(gè)克隆基因。這是目前分離到的唯一對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移起著負(fù)調(diào)控作用的基因，它的出現(xiàn)導(dǎo)致了腫瘤轉(zhuǎn)移基因及轉(zhuǎn)移抑制基因的概念形成。74第76頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天Nm23H1基因全長(zhǎng)8.5Kb,由5個(gè)外顯子和4個(gè)內(nèi)含子組成，位于17號(hào)染色體著燃點(diǎn)附近。m23H1基因編碼152氨基酸組成的多肽，分子量約17KD，為二磷酸核苷激酶（NDPK）的A亞基。NDPK的B亞基由Nm23H2基因編碼。NDPK是一類廣泛存在的酶，已知其在正常發(fā)育和腫瘤發(fā)生發(fā)展中起一定作用。NDPK可能通過(guò)參與微管聚合或解聚來(lái)影響細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，并參與通過(guò)G蛋白介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)。近年來(lái)大量的有關(guān)Nm23基因與腫瘤轉(zhuǎn)移的報(bào)道，在一些腫瘤中，如乳腺癌、肝癌、黑色素瘤、胃癌等，其Nm23的mRNA蛋白表達(dá)與腫瘤的轉(zhuǎn)移及臨床預(yù)后不良呈反相關(guān)。

75第77頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天

Nm23基因的缺乏與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，顯示了Nm23基因作為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的特性。但在另一些腫瘤中，如結(jié)腸癌、N母細(xì)胞瘤、肺癌、前列腺癌、腎細(xì)胞癌、子宮內(nèi)膜癌、喉癌等，其Nm23基因的表達(dá)水平缺失與腫瘤是否轉(zhuǎn)移及臨床預(yù)后無(wú)關(guān)。甚至一些腫瘤如N母細(xì)胞瘤，其惡化和轉(zhuǎn)移時(shí)Nm23表達(dá)可能增高。而且對(duì)同一種腫瘤的研究結(jié)果也不盡相同，這一系列矛盾的結(jié)果使Nm23基因作為一個(gè)簡(jiǎn)單化的腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的角色受到挑戰(zhàn)，說(shuō)明人們對(duì)Nm23的全面認(rèn)識(shí)遠(yuǎn)未完成，需擴(kuò)大研究范圍并深入進(jìn)行研究。76第78頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）、KAI1／CD82KAI1基因位于11p11．2區(qū)，長(zhǎng)約80kb，其編碼的蛋白質(zhì)含277個(gè)氨基酸，相對(duì)分子質(zhì)量為29．61×1O3，與CD82結(jié)構(gòu)相同，是一種高度糖基化的細(xì)胞膜蛋白，KAI1蛋白的這種結(jié)構(gòu)與其參與調(diào)控細(xì)胞粘附、遷移、增殖、分化有關(guān)，并最終抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移。KAI1是一種通用的轉(zhuǎn)移抑制基因，在體內(nèi)分布廣泛，能抑制肝癌、直腸癌、食道癌、胰腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、宮頸癌和乳腺癌等的轉(zhuǎn)移。

77第79頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天KAI1／CD82抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制不清楚，可能與以下因素有關(guān)：(1)KAI1／CD82與β1-整合素、E-鈣連素結(jié)合形成復(fù)合體，調(diào)節(jié)β1-整合素、E-鈣連素的粘附功能，從而影響腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。(2)KA11／CD82通過(guò)影響Src激酶介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑，促進(jìn)細(xì)胞之間的同質(zhì)性粘附，抑制腫瘤的轉(zhuǎn)移。(3)KAI1／CD82可與表皮生長(zhǎng)因子(epidermalgrowthfactor，EGF)相互作用，下調(diào)EGF與相應(yīng)受體的結(jié)合，致使EGF誘導(dǎo)的信號(hào)傳遞迅速衰減，上皮細(xì)胞的板狀偽足伸展和細(xì)胞遷移受抑制，從而抑制血管的形成，最終抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。

78第80頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）、Kiss

從人類胎盤中分離到的具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移作用的基因。產(chǎn)物是G蛋白結(jié)合受體的內(nèi)源性配體，能使細(xì)胞內(nèi)鈣濃度明顯增加。KISS-1能明顯抑制腫瘤細(xì)胞的化學(xué)趨化性和侵襲性，并限制腫瘤細(xì)胞的遷移功能。

利用熒光標(biāo)記技術(shù)，發(fā)現(xiàn)含Kiss1的黑色素瘤轉(zhuǎn)移細(xì)胞能到達(dá)轉(zhuǎn)移的靶器官組織，但只表現(xiàn)為單個(gè)細(xì)胞而不能形成瘤組織，表明它們?cè)谵D(zhuǎn)移點(diǎn)的生長(zhǎng)受到抑制。同時(shí)Kiss1能抑制胃癌、肝癌、鱗狀上皮食道癌、胰腺癌等的轉(zhuǎn)移。

79第81頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天(四)、轉(zhuǎn)移基因（MTSL）1989年Ebrallidze從乳腺肉瘤細(xì)胞株中分離出一種在轉(zhuǎn)移細(xì)胞中高度或中度表達(dá)，而非轉(zhuǎn)移細(xì)胞中不表達(dá)的基因，稱之為轉(zhuǎn)移基因mtsl。Mtsl基因編碼一種101氨基酸的蛋白，這種蛋白屬鈣結(jié)合蛋白家族S100鈣結(jié)合蛋白的亞族，是一種S100相關(guān)鈣結(jié)合蛋白。這種蛋白與細(xì)胞骨架成分作用調(diào)節(jié)細(xì)胞移動(dòng)性和侵襲性。目前研究表明mtsl基因表達(dá)水平與細(xì)胞移動(dòng)性以及腫瘤細(xì)胞的侵襲性明顯相關(guān)。80第82頁(yè),共91頁(yè)，2024年2月25日，星期天（五、腫瘤侵襲誘導(dǎo)基因（TIAM-1）TIAM-11994年由Habets等報(bào)道，TIAM-1位于人21號(hào)染色體q22帶上，含兩個(gè)外顯子一個(gè)內(nèi)含子，cDNA長(zhǎng)約7.3Kb,編碼1591氨基酸的蛋白。TIAM-1蛋白可能是Rac和/或Rho活性調(diào)節(jié)因子，后兩者為ras超家族。TIAM-