艾滋病篩查實驗室規(guī)范化建設(shè)和質(zhì)量管理-課件

艾滋病篩查實驗室規(guī)范化建設(shè)和質(zhì)量管理

1ppt課件艾滋病實驗室工作開展依據(jù)《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》2004年頒布《全國艾滋病檢測工作管理辦法》2006年頒布全國艾滋病檢測工作管理辦法中華人民共和國衛(wèi)生部二○○六年六月2ppt課件1.GuidelinesforUsingHIVTestingTechnologiesinSurveillanceWHO/CDS/CSR/EDC/2001.16UNAIDS/01.22EISBN9713-92-063-7.2.RevisedrecommendationsfortheselectionanduseofHIVantibodytests.WHO/UNAIDSRevisedversion2001.3.實驗室生物安全通用要求（GB19489-2004）。4.衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》的通知（衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]第10號）5.ButcherA,SpadoroJ:UsingPCRfordetectionofHIV-1Infection.Clin

ImmNewsletter,12:73:76,1992.6.1997RevisedGuidelinesforPerformingCD4+T-CellDeterminationsinPersonsInfectedwithHumanImmunodeficiencyVirus(HIV)MMWR46(RR-2);1-29Publicationdate:01/10/1997。7.《醫(yī)務(wù)人員艾滋病病毒職業(yè)暴露防護工作指導原則（試行）》中華人民共和國衛(wèi)生部，2004年5月31日頒布，2004年6月1日起實施。8.《微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則（WS233-2002）》中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準，2002-12-03發(fā)布，2003-08-01實施。9.GuidelinesfortheSafeTransportofInfectiousSubstancesandDiagnosticSpecimens.WHO1997.10.《消毒技術(shù)規(guī)范（2002年版）》中華人民共和國衛(wèi)生部2002-11-15發(fā)布，2003-04-01起實施。11.ISO15189,MedicalLaboratories-Particularrequirementsforqualityandcompetence(formerlyQualilyManagementintheMedicalLaboratory).12.NCCLSC24-A2.StatisticalQualityControlforQuantitatireMeasurements;PrinciplesandDefinitions;ApprovedGuideline-SecondEdition.引文3ppt課件《全國艾滋病檢測工作管理辦法》第一章總則第二章艾滋病檢測實驗室的設(shè)置第三章艾滋病檢測實驗室的驗收第四章艾滋病檢測工作要求第五章艾滋病檢測工作中的生物安全第六章實驗室質(zhì)量管理第七章監(jiān)督管理第八章附則4ppt課件艾滋病參比實驗室中國CDC性艾中心艾滋病篩查中心實驗室艾滋病篩查實驗室省級CDC艾滋病確證中心實驗室艾滋病確證實驗室艾滋病檢測點市級CDC（區(qū)級CDC）醫(yī)療、衛(wèi)生、采供血機構(gòu)艾滋病檢測實驗室的設(shè)置參比確證篩查5ppt課件（1）開展艾滋病病毒抗體的篩查試驗，根據(jù)需要可開展其他艾滋病檢測工作。（2）負責將艾滋病病毒抗體篩查呈陽性反應(yīng)的樣品送當?shù)匕滩『Y查中心實驗室或艾滋病檢測確證實驗室。（3）定期匯總艾滋病檢測資料，上報當?shù)匕滩『Y查中心實驗室或者艾滋病檢測確證實驗室。（4）對自愿咨詢檢測工作提供技術(shù)支持。艾滋病篩查實驗室的職能6ppt課件（1）開展艾滋病病毒抗體的篩查試驗。（2）負責將艾滋病病毒抗體篩查呈陽性反應(yīng)的樣品送當?shù)匕滩『Y查實驗室或艾滋病篩查中心實驗室。（3）定期匯總艾滋病檢測資料，并上報當?shù)匕滩『Y查實驗室或艾滋病篩查中心實驗。（4）開展艾滋病自愿咨詢檢測工作。

不具備艾滋病檢測實驗室條件，但尚需開展艾滋病病毒抗體檢測工作單位。艾滋病檢測點的職能7ppt課件艾滋病篩查實驗室的基本條件1．人員條件至少由3名醫(yī)技人員組成，具有中級衛(wèi)生技術(shù)職稱人員至少1名。負責篩查試驗的技術(shù)人員需具有2年以上從事病毒性疾病血清學檢測工作經(jīng)驗，接受過省級或省級以上艾滋病檢測技術(shù)培訓，并獲得培訓證書。2．建筑條件實驗室或檢測區(qū)域應(yīng)分為清潔區(qū)，半污染區(qū)和污染區(qū)，應(yīng)符合二級生物安全實驗室（BSL-2）要求。3．儀器設(shè)備條件配備艾滋病抗體篩查試驗所需設(shè)備，至少包括酶標讀數(shù)儀、洗板機、加樣器（儀）、普通冰箱、低溫冰箱、離心機、溫箱或水浴箱、消毒與污物處理設(shè)備、實驗室恒溫設(shè)備、安全防護用品和生物安全柜。8ppt課件檢測設(shè)備安全設(shè)備設(shè)備條件酶標讀數(shù)儀洗板機加樣器（儀）普通冰箱低溫冰箱離心機溫箱或水浴箱實驗室恒溫設(shè)備（空調(diào)）一次性安全防護用品生物安全柜高壓滅菌器緊急洗眼裝置紫外線燈感應(yīng)水龍頭消毒劑（含已配制）醫(yī)療廢物桶（配黃色膠袋）應(yīng)急小藥箱生物危險標志（重要地方）9ppt課件

艾滋病篩查實驗室布局：

-獨立式

-混合式

-開放式（掌握原則、靈活運用、發(fā)揮資源、聯(lián)合檢測）10ppt課件實驗污染區(qū)生物安全柜半污染區(qū)清潔區(qū)公共走廊應(yīng)急門艾滋病檢測實驗室分區(qū)布局圖緊急撤離路線緊急撤離路線清潔實驗物品柜水槽高壓滅菌器污染白大衣掛放處11ppt課件生物安全柜實驗污染區(qū)半污染區(qū)清潔區(qū)公共走廊應(yīng)急門實驗室分區(qū)布局圖緊急撤離路線緊急撤離路線清潔實驗物品柜水槽高壓滅菌器污染白大衣掛放處細菌室生化實驗區(qū)域免疫實驗區(qū)域12ppt課件1.人員條件

至少由2名經(jīng)過艾滋病檢測技術(shù)培訓并獲得培訓證書的專業(yè)人員組成。2.建筑條件

需有艾滋病檢測區(qū)域或?qū)Ｓ脤嶒炁_，能開展簡便、快速檢測。3.設(shè)備條件

需配備快速試驗所必須的物品，包括普通冰箱、消毒與污物處理設(shè)備、一次性消耗品、安全防護用品。

艾滋病檢測點的基本條件13ppt課件艾滋病篩查實驗室的基本條件1.相關(guān)制度的建立實驗室管理制度檢測操作流程（方法和試劑選擇、初篩和復核、實驗原始記錄）樣本處理制度（采集處理、接收登記、陽性樣本送檢）結(jié)果報告制度（結(jié)果報告、疫情報告、咨詢、保密、隨訪）安全制度（安全防護、消毒處理、人員健康監(jiān)護、職業(yè)暴露處理程序)質(zhì)量控制制度（人員、設(shè)備、環(huán)境、外部對照質(zhì)控血清)資料管理制度（標本記錄、實驗原始記錄、陽性者資料）14ppt課件2.相關(guān)表格的設(shè)定檢測

檢測標本登記記錄、實驗原始記錄、質(zhì)控記錄、檢測差錯記錄、陽性送檢單儀器設(shè)備使用和維護酶標儀使用和維護記錄、生物安全柜使用和維護記錄、高壓滅菌器使用和維護記錄溫度監(jiān)控實驗環(huán)境溫濕度監(jiān)控記錄、冰箱溫度監(jiān)控記錄人員健康監(jiān)護記錄事故記錄實驗事故登記記錄、職業(yè)暴露個案登記表廢棄物處理記錄艾滋病篩查實驗室的基本條件15ppt課件艾滋病檢測實驗室的驗收

第七條開展艾滋病檢測工作的實驗室要經(jīng)過技術(shù)和條件驗收，未經(jīng)驗收或驗收不合格的實驗室不得開展艾滋病檢測工作。

第十條遷移艾滋病檢測實驗室或變更艾滋病檢測實驗室的類別，按本辦法上述規(guī)定重新申請驗收。16ppt課件

篩查實驗室驗收程序申報（鏈接）

區(qū)縣衛(wèi)生局初審

市衛(wèi)生行政部門（委托廣州市疾控中心）

省、市專家組現(xiàn)場評估和樣品考核

省級衛(wèi)生行政部門發(fā)批準文件省級CDC審核

地市級衛(wèi)生行政部門審核17ppt課件艾滋病檢測工作要求

第十三條艾滋病檢測實驗室技術(shù)人員需要經(jīng)過相關(guān)的業(yè)務(wù)培訓，經(jīng)考核合格者由相關(guān)機構(gòu)發(fā)給培訓證書，持證上崗。非衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)人員不得從事艾滋病檢測工作。第十五條艾滋病檢測實驗室中使用的檢測試劑必須是經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊、且符合相關(guān)要求的試劑。第十六條艾滋病檢測篩查實驗室發(fā)現(xiàn)艾滋病病毒抗體篩查呈陽性反應(yīng)的樣品必須及時送艾滋病檢測確證實驗室，不得擅自處理。第十七條艾滋病檢測確證實驗室出具的艾滋病病毒抗體確證報告應(yīng)以保密方式發(fā)送。艾滋病病毒抗體確證試驗結(jié)果應(yīng)當告知本人；本人為無行為能力人或者限制行為能力人的，應(yīng)當告知其監(jiān)護人。第二十條艾滋病檢測實驗室工作人員不得泄露艾滋病病人或感染者的姓名、住址、檢測結(jié)果等有關(guān)情況。18ppt課件實驗室質(zhì)量管理

第二十六條艾滋病檢測實驗室應(yīng)建立健全實驗室質(zhì)量保證和質(zhì)量控制體系，并有專人負責質(zhì)量體系的正常運轉(zhuǎn)。第二十七條艾滋病檢測篩查實驗室必須參加省級以上實驗室能力驗證；艾滋病檢測確證實驗室必須參加中國疾病預防控制中心組織的實驗室能力驗證。艾滋病檢測實驗室能力驗證結(jié)果由組織者定期公開發(fā)布。19ppt課件全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范第一章樣品的采集和處理第二章HIV抗體檢測第三章HIV核酸定性檢測第四章HIVRNA定量測定（病毒載量測定）第五章CD4+和CD8+T淋巴細胞檢測第六章HIV抗原檢測第七章艾滋病實驗室安全防護和職業(yè)暴露預防第八章艾滋病實驗室質(zhì)量管理

第九章艾滋病實驗室質(zhì)量考評辦法第十章HIV診斷試劑臨床質(zhì)量評估方案20ppt課件艾滋病病毒抗體檢測21ppt課件

樣品的采集和處理

常用樣品為血液，包括血清、血漿和全血

樣品的接收

＊核對樣品與送檢單是否相符

＊檢查樣品狀況

＊

登記樣品資料22ppt課件

試劑要求HIV-1/2混合型；經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準，批批檢合格，并在有效期內(nèi)；具有高敏感性和特異性；每年國家試劑臨床評估質(zhì)量均為優(yōu)良；備兩種以上試劑。23ppt課件方法選擇酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

第三代或第四代發(fā)光方法快速方法

明膠顆粒凝集法（PA）金標法硒標法24ppt課件樣品重復檢測陽性反應(yīng)原有試劑加另外一種篩查試劑陰性反應(yīng)均陽性反應(yīng)均陰性反應(yīng)一陰一陽報告陰性送確認實驗室確認初篩檢測篩查試劑HIV抗體檢測流程25ppt課件室內(nèi)質(zhì)控

ELISA檢測，每次實驗必須加入外部對照質(zhì)控實驗記錄＊

ELISA檢測原始記錄＊

PA檢測原始記錄＊金標法檢測原始記錄＊硒標法檢測原始記錄26ppt課件

陽性(+)或一陰一陽(±)結(jié)果發(fā)出“HIV抗體待復查”報告樣品送廣州市HIV抗體確證實驗室確證注：1、篩查檢測呈“陽性”或“一陰一陽”的結(jié)果不能出具陽性報

告，不可告知受檢者陽性結(jié)果。

2、不可將受檢者的檢測情況告知任何無關(guān)人員或單位。篩查結(jié)果的報告陰性（-）結(jié)果發(fā)出“HIV抗體陰性”報告27ppt課件標本上送要求A、重新采集受檢者的血樣，二份血樣一并上送。

B、全血容量3～5ml，血清或血漿容量0.3－0.5ml，最好上送血清或血漿。

C、上送的血樣標記病人姓名，帶蓋，保持直立，路途遠或天氣炎熱，容器內(nèi)加冰塊。

D、《廣州市HIV抗體陽性送檢單》雙面均必須填寫完整，送檢單與血樣分開放置。

E、專人送樣。

F、送樣人領(lǐng)取樣品受理單，仔細閱讀，確認無誤后方可離去。

注：艾滋病病毒抗體篩查呈陽性反應(yīng)的樣品必須及時送艾滋病檢測確證實驗室，不得擅自處理。

28ppt課件服務(wù)時間周一上午周一下午周二上午周二下午周三上午周三下午周四上午周四下午周五上午周五下午醫(yī)院送樣

領(lǐng)取HIV結(jié)果

廣州市疾病預防控制中心艾滋病咨詢門診服務(wù)時間安排29ppt課件廣

州

市

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州

市

衛(wèi)

生

檢

驗

中

心）艾滋病防制科常規(guī)樣品受理單共

頁

第

頁受理編號受檢者姓名性別年齡受檢者住址送檢單位（個人）送檢單位地址樣品類別□全血□血清樣品數(shù)量樣品狀況□正?！醍惓z測項目HIV抗體送樣人送樣日期

年

月

日收樣人收樣日期

年

月

日交費情況

□

免費□已交費□未交費結(jié)果查詢和報告情況1、結(jié)果在周二和周五下午憑受理編號和受檢者姓名電話查詢，其它時間不受理查詢。2、書面報告可在上班時間到檢測咨詢門診領(lǐng)取。

查詢電話83802426或83824103－1110

本單位地址廣州市中山三路23號備注30ppt課件報告單的領(lǐng)取＊憑受理編號和病人姓名電話查詢結(jié)果。＊憑受理單原件領(lǐng)取《HIV抗體篩查報告》或《HIV抗體確認檢測報告》。注：①已領(lǐng)取報告的單位不可再領(lǐng)取第二份報告。

②過往已確認過的病例可領(lǐng)取既往檢測查詢報告。31ppt課件檢測后咨詢隨訪

＊對初篩陰性和陽性者均做好檢測后咨詢。＊對陽性者做好個案調(diào)查、登記等工作。＊對確認結(jié)果“HIV抗體不確定”者和年齡小于18個月的HIV抗體陽性嬰幼兒做好隨訪工作。疫情報告

領(lǐng)取確認結(jié)果陽性報告后，檢驗科、預防保健科及臨床科室等有關(guān)科室要共同配合，做好疫情報告工作。檢測量月報

每月10日前將上月檢測量經(jīng)疫情網(wǎng)絡(luò)上報。32ppt課件艾滋病實驗室質(zhì)量管理33ppt課件質(zhì)量管理定義：對確定和達到質(zhì)量要求所需的職能和活動的管理。是制定和實施質(zhì)量方針的一系列管理職能，通過質(zhì)量體系來實現(xiàn)質(zhì)量管理。

實驗室質(zhì)量體系文件應(yīng)覆蓋檢測前、檢測、檢測后整個過程，包括質(zhì)量手冊、程序文件、標準操作規(guī)程（SOP）和記錄。34ppt課件質(zhì)量保證質(zhì)量控制質(zhì)量評價35ppt課件質(zhì)量保證

(QualityAssurance,QA)

定義:質(zhì)量保證是指從接收檢驗標本起，到實驗室發(fā)出報告止，為確保實驗室最終報告結(jié)果的正確性所進行的全過程，包括采取各種行政和技術(shù)上的措施和方法。

36ppt課件質(zhì)量保證(Cont.)

質(zhì)量保證是確保實驗結(jié)果質(zhì)量的基本條件，其實施程度直接影響試驗結(jié)果和最后報告的每個參數(shù)。質(zhì)量保證取決于良好的質(zhì)量控制程序，并經(jīng)良好的質(zhì)量評價程序加以鑒定。因此，要求所有的實驗室工作人員有責任時刻注意解決影響實驗結(jié)果的每個環(huán)節(jié)上可能出現(xiàn)的問題。

37ppt課件

行政支持

HIV篩查實驗室的質(zhì)量保證是整個艾滋病檢測工作的組成部分。1.合理的組織結(jié)構(gòu)，明確的職責分工。2.保證實驗室主要負責人和檢測人員相對穩(wěn)定。3.給予人力和物力的支持。38ppt課件實驗室規(guī)范化建設(shè)

HIV篩查實驗室和確證實驗室的設(shè)置及其建筑、設(shè)施、設(shè)備必須符合“管理辦法”要求。

篩查實驗室：

有獨立的實驗用房（或至少有專用的檢測臺），污染區(qū)和清潔區(qū)要分開。檢測器材，包括酶標讀數(shù)儀和洗板機、精確的移液器、專用的普通冰箱、低溫冰箱、離心機以及各種消毒與污物處理設(shè)施、安全防護用品和恒溫設(shè)施。

HIV檢測點:可在醫(yī)院或鄉(xiāng)鎮(zhèn)（中心）衛(wèi)生院內(nèi)，有一間實驗室或在檢驗科內(nèi)設(shè)一個專臺，并可存放試劑、試驗器材和登記本、檔案等專用物品。39ppt課件人員培訓及其評價

實驗室人員必須接受HIV抗體檢測技術(shù)班培訓并獲得合格證書才能上崗操作。各級實驗人員應(yīng)該通過定期和不定期的業(yè)務(wù)學習和在崗培訓，從不同渠道不斷地提高自己的檢驗水平。每個實驗室檢驗人員都應(yīng)對質(zhì)控的重要性、基礎(chǔ)知識和一般方法有較充分的了解，并在質(zhì)控的實際過程中不斷進行培訓提高。實驗室主管人員必須具有較高的質(zhì)量意識，領(lǐng)導整個實驗室工作人員參與質(zhì)量管理工作，并對實驗室檢驗人員定期作出評價，包括工作的準確性、工作效率、執(zhí)行安全條例和規(guī)章制度、職業(yè)道德、出勤率以及上崗資格等。40ppt課件檢測技術(shù)質(zhì)量控制和質(zhì)量管理生物安全

※生物安全知識培訓至少1次/年（以記錄為證）

※新進人員培訓（以記錄為證）培訓內(nèi)容41ppt課件對實驗室操作的要求1.標本的采集、運送和處理

標本的采集、運送和處理必須符合《技術(shù)規(guī)范》要求。2．檢測結(jié)果的判定及其程序

參見《技術(shù)規(guī)范》。3．檢驗方法、儀器和試劑盒的選擇

參見《技術(shù)規(guī)范》，各HIV檢測實驗室在使用試劑時，應(yīng)優(yōu)先選擇經(jīng)過臨床評估質(zhì)量優(yōu)良的試劑盒（），嚴格按照儀器、試劑說明書操作。42ppt課件對實驗室操作的要求4．設(shè)備維修與校準

實驗室中的設(shè)備必須定期進行維護與校準，并制定設(shè)備維護與校準的制度。主要儀器設(shè)備包括：酶標儀、洗板機、生物安全柜、移液器（加樣槍）、溫濕度計。

校準部門：廣州市計量檢測技術(shù)研究院地址：廣州市廣仁路11號電話：83303431；83362165

開發(fā)區(qū)檢測中心：82221202

南沙檢測中心：39910378

嘉禾檢測中心：3620032043ppt課件設(shè)備維護與校準

(1)（1）ELISA洗板機與酶標儀：一年至少應(yīng)該校準1次。每天：每次操作要按要求設(shè)立對照。核對酶標儀濾光片波長，檢查洗板機管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象。每周：清潔儀器表面，保護光學零件，不沾灰塵。每月：洗滌時檢查各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對位良好，負壓是否符合規(guī)定要求，這是保證各孔洗滌均衡一致的前提。每年：檢查、清洗濾光片，如果濾光片出現(xiàn)破裂或霉點則要更換，根據(jù)儀器內(nèi)具有的校準程序或使用校準板，對濾光片的所用波長光密度的精密度進行校驗，測定20次，計算精密度。精密度應(yīng)該控制在廠家說明書中所規(guī)定的范圍(建議請廠方代表校驗)。校驗結(jié)果要有記錄，保留測定原始結(jié)果。根據(jù)實際使用情況更換主要設(shè)備（如洗板機、全自動免疫分析系統(tǒng)）內(nèi)的所有液體裝置和管子(要求廠方代表維修)。44ppt課件設(shè)備維護與校準

(2)

（2）移液器：一年至少應(yīng)該標定或校準1次，若發(fā)現(xiàn)移液器有異常情況，應(yīng)該立即進行校準。移液器標定方法包括吸取有色溶液進行光譜分析、吸取蒸餾水稱量校準、吸取放射性同位素計數(shù)校準，以及使用配套校準盒等等。推薦在檢測過程中，每個加樣工序使用專用的移液器。

45ppt課件設(shè)備維護與校準

(3)（3）生物安全柜

1年至少校準1次。（4）溫濕度計

1年至少校準1次。46ppt課件其它儀器設(shè)備儀器使用記錄

酶標儀、洗板機、生物安全柜、高壓滅菌器每次使用后，使用人必須登記使用情況。溫度監(jiān)控

每天檢查和記錄冰箱、孵育箱溫度。47ppt課件文件和文件管理

（一）操作規(guī)程和操作手冊每個實驗都應(yīng)有操作規(guī)程或操作手冊，要準確、規(guī)范，妥善保管，每個檢驗人員都能隨時查閱。48ppt課件質(zhì)量體系綱領(lǐng)性文件指導性文件實施性文件49ppt課件廣州市疾病預防控制中心（廣州市衛(wèi)生檢驗中心）Guangzhoucenterfordiseasepreventionandcontrol(guangzhouhygienicexaminationcenter)質(zhì)量手冊Qualitymanual第3版（第0次修訂）3ndedition文件編號2006年6月1日廣州市疾病預防控制中心（廣州市衛(wèi)生檢驗中心）Guangzhoucenterfordiseasepreventionandcontrol(guangzhouhygienicexaminationcenter)程序文件Programfile第3版（第0次修訂）3ndedition2006年6月1日廣州市疾病預防控制中心（廣州市衛(wèi)生檢驗中心）作業(yè)指導書標題：艾滋病病毒操作危害風險評估文件編號：GZCDC/WDAD29版號：第1版編寫：審核：批準：年月日年月日年月日修改頁碼修改內(nèi)容修改人批準人生效日期修改記錄質(zhì)量體系的規(guī)范文件50ppt課件操作程序文件(SOP)

SOP是書面質(zhì)量體系中的一個很重要的部分。SOP是指導完成檢測工作的一整套書面操作指南，以避免或減少因不同的操作者所引起的誤差。

SOP由各崗位工作人員起草，實驗室負責人審定。每年至少修訂一次,修訂后的SOP按審批程序批準后使用。

“言其行，行其言，行必果”SOPSOPSOPSOP51ppt課件●主要工作制度①初篩實驗室工作制度

②安全工作制度

③樣品、試劑管理制度

④事故處理制度

⑤保密制度⑥儀器使用維護和校準制度⑦檢測數(shù)據(jù)的記錄和保存制度SOP52ppt課件●主要技術(shù)規(guī)范（流程）①樣品采集、處理和上送操作程序②檢測及結(jié)果報告操作程序

③質(zhì)量管理操作程序

④實驗室安全標準操作程序⑤職業(yè)暴露處理措施⑥廢棄物處理和消毒操作程序需上墻的規(guī)范：※

實驗室工作制度※

安全工作守則或制度※

初篩試驗流程圖※

職業(yè)暴露處理流程圖SOP53ppt課件安全防護情況●實驗人員個人防護：防護服；防護帽；口罩；防護手套；鞋套或?qū)嶒炗眯??！駥嶒炄藛T安全操作：有限制進入實驗室標識；實驗區(qū)域內(nèi)不可存放個人物品；進出實驗室路徑要規(guī)范；穿著過的污染防護服處理要規(guī)范；樣品運送要放置于密閉容器內(nèi)；試劑和血樣冰箱要分開。廢棄物收集處理情況●化學消毒劑有效期內(nèi)使用；廢棄物盛裝容器要符合防滲、防漏、防穿刺等安全要求?！裣咎幚矸椒ǎ簩嶒炇覂?nèi)高壓滅菌、實驗室內(nèi)化學消毒、單位集中消毒處理；消毒處理記錄。54ppt課件操作程序文件（SOP編寫格式）封面（1）標題（2）編寫、審核、批準人及相應(yīng)日期（3）修改內(nèi)容、修改日期、修改批準人正文（1）標題和編號（2）目的、應(yīng)用范圍和方法或程序（3）支持性文件（4）相應(yīng)記錄（5）附錄，包括相關(guān)的附加文件如記錄表格、設(shè)備和試劑盒說明書等。

SOPSOPSOPSOP55ppt課件作業(yè)指導書目錄

編號標題GZCDC/WDAD01艾滋病病毒抗體酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測細則GZCDC/WDAD02艾滋病病毒抗體明膠凝集法（PA）檢測細則GZCDC/WDAD03梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測細則GZCDC/WDAD04艾滋病類樣品的管理制度GZCDC/WDAD05DENLEY-DRAGON(MK-2)全自動酶標儀操作規(guī)程GZCDC/WDAD06艾滋病類樣品采集、收檢程序GZCDC/WDAD07科室安全防護和內(nèi)務(wù)管理程序GZCDC/WDAD08艾滋病實驗室生物安全防護GZCDC/WDAD09HIV職業(yè)暴露后預防GZCDC/WDAD10艾滋病病毒抗體酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測細則（國產(chǎn)）GZCDC/WDAD11艾滋病病毒1+2型抗體免疫印跡試驗(HIV1+2WesternBlot)GZCDC/WDAD12FormaclassⅡB2生物安全柜操作規(guī)程56ppt課件廣州市疾病預防控制中心（廣州市衛(wèi)生檢驗中心）作業(yè)指導書

標題：艾滋病病毒操作危害風險評估文件編號：GZCDC/WDAD29版號：第1版編寫：審核：批準：年月日年月日年月日修改頁碼修改內(nèi)容修改人批準人生效日期修改記錄57ppt課件廣州市疾病預防控制中心作業(yè)指導書文件編號：GZCDC/WDAD29標題：艾滋病病毒操作危害風險評估版號：第1頁共2頁1.目的明確艾滋病病毒操作危害風險，避免發(fā)生生物安全事故。2.使用范圍本操作規(guī)程適用于本實驗室危害風險評估及事故處理。3.職責操作人員：按照相關(guān)危害風險評估及事故處理進行正確實驗操作。質(zhì)量監(jiān)督員：負責監(jiān)督實驗是否按危害風險評估及事故處理原則進行?？剖邑撠熑耍贺撠熅C合管理。4.危害風險評估按照《實驗室生物安全通用要求》（GB19489－2004），艾滋病病毒屬于危害等級Ⅳ病原微生物，艾滋病病毒主要通過血液傳播、性接觸傳播、母嬰傳播三種途徑傳播，一般不通過氣溶膠傳播。根據(jù)標本中艾滋病病毒含量和操作危險性評估本實驗室危害風險。4.1艾滋病血清學檢測：艾滋病病毒含量較低、操作危險性較低，在BSL－2級實驗室內(nèi)，在普通操作臺或生物安全柜內(nèi)操作，實驗人員做好個人防護。4.2HIV感染者淋巴細胞分離：艾滋病病毒含量較高、操作危險性較高，在BSL－2級實驗室內(nèi)，在生物安全柜內(nèi)操作，實驗人員做好個人防護。4.3HIV感染者CD4T淋巴細胞檢測：艾滋病病毒含量較高、操作危險性較高，在BSL－2級實驗室內(nèi)，標本前處理部分須在生物安全柜內(nèi)操作，實驗人員做好個人防護。4.4艾滋病病毒核酸提?。喊滩〔《竞枯^高、操作危險性較高，在BSL－2級實驗室內(nèi)，標本前處理部分須在生物安全柜內(nèi)操作，實驗人員做好個人防護。4.5艾滋病病毒分離：艾滋病病毒含量較高、操作危險性較高，在BSL－3級實驗室操作，實驗人員做好個人防護。4.6根據(jù)危害風險評估制定相應(yīng)實驗的操作規(guī)程。4.7實驗人員嚴格按相應(yīng)操作規(guī)程進行操作。4.8制定緊急事故處理辦法。58ppt課件廣州市疾病預防控制中心作業(yè)指導書文件編號：GZCDC/WDAD29標題：艾滋病病毒操作危害風險評估版號：第2頁共2頁5.事故處理5．1建立標本種丟失、破壞或?qū)嶒炇遗及l(fā)事故應(yīng)急處理辦法，制定相應(yīng)記錄。5．2實驗室內(nèi)備有75%酒精、高效氯等消毒劑。5．3制定事故登記表及事故上報程序。6.支持性文件6.1《科室安全防護和內(nèi)務(wù)管理程序》（文件編號：GZCDC/WDAD07）6.2《中華人民共和國傳染病防治法實施辦法》6.3《實驗室生物安全通用要求》（GB19489－2004）6.4《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》7.附錄7．1《艾滋病防制科生物危害評估表》59ppt課件艾滋病防制科生物危害評估表微生物種類

來源

傳播途徑

致病性

穩(wěn)定性

預防

治療

實驗項目生物危害評估

GZCDC/WDAD29-0160ppt課件

（1）記錄是為已完成的活動或得到的結(jié)果提供客觀證據(jù)的文件。（2）記錄有一定格式，相應(yīng)的表格經(jīng)過實踐和評審使之完善。（3）實驗室工作人員不但應(yīng)注重試驗，而且應(yīng)重視記錄。 ＊記錄實驗室溫度、試劑廠名稱和批號。 ＊詳細的記錄是分析、統(tǒng)計、總結(jié)的基礎(chǔ)。（4）資料的可追查性 ＊當報警信號發(fā)出后，可以追查原始資料和原始操作記錄。 ＊完整資料將為科研和法律訴訟提供可靠的證據(jù)。（5）更改數(shù)據(jù)或文字 ＊按規(guī)則進行（二）質(zhì)量記錄表格61ppt課件檢測

檢測標本登記記錄、實驗原始記錄、質(zhì)控記錄、檢測差錯記錄、陽性送檢單儀器設(shè)備使用和維護酶標儀使用和維護記錄、生物安全柜使用和維護記錄、高壓滅菌器使用和維護記錄溫度監(jiān)控實驗環(huán)境溫濕度監(jiān)控記錄、冰箱溫度監(jiān)控記錄人員健康監(jiān)護記錄事故記錄實驗事故登記記錄、職業(yè)暴露個案登記表廢棄物處理記錄表格種類（鏈接）62ppt課件

(三）存檔

1.文件和試驗記錄存檔，一般應(yīng)至少10年期限。最好同時使用計算機保存各種文件和記錄。內(nèi)含病人姓名的所有工作記錄一定要保密。

2.存檔的資料不應(yīng)隨便堆放，應(yīng)按一定方式編號，便于查詢。查詢不到的存檔資料等于沒有存檔。

3.資料的存檔制度、查詢制度、借閱制度、保密制度應(yīng)健全。

4.資料是實驗室的公有財產(chǎn)，即使是一個人做的實驗，做的記錄，不可以任意將資料帶走、借走、丟失、不歸還或更改。

5.實驗室應(yīng)有人專職或兼職任資料保管員，以便查詢。查不到的資料等于沒有做記錄，也等于沒有做前面的一切有關(guān)工作，因此，檢驗人員必須重視記錄和存檔工作。

文件管理63ppt課件質(zhì)量控制（QC）

定義質(zhì)量控制是指為確保實驗工作正常進行而在每一次實驗過程中必須采取的各種措施。

64ppt課件實驗前質(zhì)量控制

①采集標本前病人的準備；

②正確的標本采集方法；

③準確及時的運送標本；

④實驗前正確地處理和保存標本。實驗中質(zhì)量控制

①質(zhì)控品的準備；

②試劑盒的評價；

③開展Levey-Jennings質(zhì)控圖質(zhì)控（或“即刻法”質(zhì)控）。

實驗后質(zhì)量控制

①實驗后準確填寫檢驗結(jié)果；

②及時發(fā)出報告；

③正確地解釋檢驗結(jié)果的臨床意義。65ppt課件基本要求1．試劑種類必須使用經(jīng)中國藥品監(jiān)督管理局批準，經(jīng)過中國藥品生物制品檢定所批批檢定合格的國產(chǎn)或進口HIV抗體初篩和確認檢測試劑。初篩用的HIV檢測試劑必須是HIV1/2混合型。2．必須使用在有效期內(nèi)且保存條件符合要求的診斷試劑3．必須按照SOP中規(guī)定的要求進行操作包括進行檢測的實驗條件如陽性對照和陰性對照的設(shè)置、試劑、標本加樣量、孵育時間、反應(yīng)溫度、洗滌程序和次數(shù)等。4．標本質(zhì)量在實驗前必須檢查所有待檢標本的質(zhì)量，如有脂血、溶血或污染的標本原則上不能使用，必須重新采集標本。5．標本使用冰凍的標本待全部融化后必須充分搖勻。66ppt課件質(zhì)控血清

1．內(nèi)部對照質(zhì)控血清內(nèi)部對照質(zhì)控血清是指每個試劑盒內(nèi)廠方提供的一套陰性和陽性對照。

2．外部對照質(zhì)控血清外部對照質(zhì)控血清是各級實驗室為了監(jiān)控每次檢測的重復性和穩(wěn)定性以及檢驗試劑盒批間差異而設(shè)置的一套陰性和陽性對照血清。設(shè)立外部對照還可以提示標本處于臨界值狀態(tài)時的檢驗操作情況。

67ppt課件外部對照質(zhì)控血清的組成

理想的外部對照應(yīng)該包括陽性對照、弱陽性對照、臨界值對照和陰性對照。在每次實驗時應(yīng)設(shè)置一個單一濃度水平的質(zhì)控品即弱陽性對照。這個弱陽性對照的值以設(shè)定在該試劑盒臨界值

2－3倍為宜。68ppt課件外部對照質(zhì)控血清的來源和選擇1）通過向有關(guān)機構(gòu)購買獲得2）通過實驗室制備獲得(比較經(jīng)濟的方法)①混合試劑盒內(nèi)部對照血清，等量分裝。②混合HIV抗體陽性或陰性人血清，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，用0.2

m生物濾膜過濾除菌后再進行56℃30分鐘加熱滅活處理。弱陽性對照可以通過使用HIV抗體陰性的正常人血清梯度稀釋HIV抗體強陽性血清并經(jīng)標定后得到。69ppt課件外部對照質(zhì)控血清的保存

1）外部對照血清或血漿的一次制備量應(yīng)該足夠本實驗室一年使用。2）外部對照血清應(yīng)該均一、無菌。3）外部對照血清標定后應(yīng)該等量分裝，每個分裝的量應(yīng)足夠一周使用。4）外部對照應(yīng)該分類作好標記，使用不同顏色的標簽。5）外部對照血清應(yīng)該存放在－70℃，如無條件則存放在非自動除霜的－20℃冰箱。6）外部對照血清一旦融解以后應(yīng)該存放在2－8℃，一周后必須棄去，不能重新凍存。70ppt課件外部對照質(zhì)控血清的使用

原則上每一次實驗必須使用外部對照質(zhì)控血清，建立質(zhì)控圖，以便監(jiān)控實驗操作的一致性和結(jié)果的準確性。同時可以了解各批試劑盒之間的誤差(批間差異)。71ppt課件建立質(zhì)控圖參數(shù)對HIV抗體檢測(ELISA)外部對照質(zhì)控血清的評價采用多次測定的OD值的均值上下各兩個標準差的范圍，即外部對照OD值的95％可信限為x

2s。各個外部對照的標定即確定外部對照的均值和可信限，可用幾個統(tǒng)計學參數(shù)如均值(x)、標準差(s)以及變異系數(shù)(cv)來確定可信限。①算術(shù)平均值(x)代表一組OD值數(shù)的平均值。②標準差(s)③變異系數(shù)(cv)，72ppt課件次數(shù)質(zhì)控血清ODCut-off值ODS/CO值10.1800.1051.7120.1900.1051.8130.2000.1051.9040.2280.1051.8150.1370.1051.0960.2210.1052.1070.1500.1051.4380.1700.1051.6290.1800.1052.14100.1500.1051.43110.2000.1051.90120.1420.1051.35130.2100.1052.00140.2210.1051.52150.1800.1051.71160.1900.1051.81170.1600.1051.52180.2210.1052.10190.2100.1052.00200.1500.1051.43

范例：參考鄭懷競主編《免疫學檢驗室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控》，1997年出版。

73ppt課件

x

計算公式為：

Σx

x=──N

s

計算公式為：───────∑(xn-x)2

s=───────N

cv

計算公式為：

s

cv=──x100%

x

74ppt課件通過上表，計算S/CO值的均值（x），標準差（s）和變異系數(shù)（cv）

x=1.72s=0.29cv=16.9%

根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制室內(nèi)質(zhì)控框架圖,開始質(zhì)量控制次數(shù)日期質(zhì)控血清ODCut-off值

S/CO值217.40.1600.1051.52227.70.1900.1051.81237.80.2000.1051.90247.110.2280.1051.81257.120.1390.1051.10267.150.2210.1052.10277.160.1500.1051.43287.180.1700.1051.62297.190.2250.1052.1475ppt課件質(zhì)控圖(Levey-Jennings控制圖)76ppt課件質(zhì)控圖的判定和分析

如果檢驗進入質(zhì)控狀態(tài)時，質(zhì)控對照值超出

2s，則本次實驗結(jié)果不能被接受(失控)。

位移：如果幾個連續(xù)質(zhì)控對照值(3-5次)都落在均值(中心線)的一邊則稱之為位移，通常表示存在大的變化(失控)。

引起位移的原因有使用新批號的試劑盒、使用新試劑、實驗員的更換、孵育溫度的改變、儀器(移液器)故障等。

趨勢：當幾個連續(xù)質(zhì)控對照值(5-7個)幾乎按一個方向分布時稱之為趨勢(失控)，通常由參數(shù)的緩慢改變引起，如試劑失效和移液器逐漸不準確等。

發(fā)生漂移和趨勢的最常見的原因是試劑(如酶標記物)或?qū)φ盏氖А?7ppt課件質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點

a．可以先進行最佳條件下的變異測定。b．采用S/CO比值制圖要比單用OD或A值制圖的方法給出更為精確的評估，因為它將每次/每天OD值的浮動考慮在內(nèi)。從S/CO質(zhì)控圖中可以直觀地發(fā)現(xiàn)外部對照值的漂移和趨勢。c．

由專人負責建立質(zhì)控圖，每月(月末)定期召開質(zhì)量控制會，討論本月檢測的質(zhì)量控制情況。檢驗人員在每次檢驗之前，了解一下質(zhì)控圖的結(jié)果，做到心中有數(shù)。78ppt課件d．

建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒(各實驗室本身可以進行試劑盒質(zhì)量的比較)。e．

如果改用新批號試劑盒，必須重新制作室內(nèi)質(zhì)控框架圖，并建議對新舊兩批試劑盒進行平行性試驗。f．

使用新批號或使用不同廠家的試劑盒都必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。79ppt課件g．

發(fā)現(xiàn)全部對照值劇烈位移，立即報告室主管，分析原因，若是試劑盒質(zhì)量問題，立刻通知廠家。

h．

外部和內(nèi)部陰性對照質(zhì)控血清出現(xiàn)高值傾向，應(yīng)該注意試劑、技術(shù)或設(shè)備出現(xiàn)問題(如洗板機等)。i．

實驗室配制新批次的外部對照質(zhì)控血清或變動外部對照質(zhì)控血清的值時，必須重新計算均值和標準差，建立新的質(zhì)控圖。j．

操作者在測定質(zhì)控血清時，發(fā)現(xiàn)質(zhì)控血清數(shù)據(jù)違背了控制規(guī)則，應(yīng)填寫失控報告單，上交室負責人，由室負責人決定是否要發(fā)出檢驗報告。80ppt課件“即刻法”質(zhì)控1.先將測量值從小到大排列x1，x2，x3………xn2.計算x和s3.計算SI上限值和SI下限值

x最大值-x

SI上限

=S

x最小值-xSI下限

=S4.將SI上限、SI下限與SI值表中的數(shù)值比較

81ppt課件舉例：質(zhì)控品批號試劑批號日期次數(shù)OD值Cut-off值S/CO值xSSI下限SI上限質(zhì)控狀態(tài)050102A46AB7-410.2330.1961.197-720.2430.1641.487-8