2.2.動(dòng)物細(xì)胞工程課件-高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修三

考點(diǎn)一

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件營養(yǎng)物質(zhì)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境<<糖類氨基酸無機(jī)鹽維生素?zé)o菌、無毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環(huán)境血清血清中含有人類未知，細(xì)胞生長增殖所必須的物質(zhì)。一般使用液體培養(yǎng)基，也稱培養(yǎng)液。如何維持無菌、無毒的環(huán)境？適宜的溫度、pH和滲透壓分別是多少？適宜的氣體環(huán)境包括？分別有什么作用？如何保持該氣體環(huán)境？環(huán)境、培養(yǎng)液、培養(yǎng)環(huán)境；定期更換培養(yǎng)液；抗生素等溫度：（36.5±0.5）℃pH7.2-7.2適宜的滲透壓95%空氣和5%CO2;培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶；1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件小結(jié)

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程用機(jī)械法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理取動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞接觸抑制懸浮生長貼壁生長(大多數(shù)）解決方法傳代培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)細(xì)胞懸液加培養(yǎng)液原代培養(yǎng)在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等細(xì)胞分裂受阻懸浮生長細(xì)胞:直接用離心法收集貼壁生長細(xì)胞:用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，用離心法收集②制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)①收集細(xì)胞原代培養(yǎng)：指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。細(xì)胞貼壁：某些細(xì)胞需要貼附于某些基質(zhì)表面

（如培養(yǎng)瓶瓶壁）才能增殖。接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互

接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象。傳代培養(yǎng)：分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。3.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

來源或存在功能、特點(diǎn)局限性胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)早期胚胎能夠分化成為動(dòng)物體內(nèi)的任何細(xì)胞，并進(jìn)一步形成組織、器官甚至生物個(gè)體成體組織或器官，如造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞和精原干細(xì)胞等體外誘導(dǎo)體細(xì)胞產(chǎn)生能分化成為具有特定功能的細(xì)胞來治療疾病。無須破壞胚胎，且避免免疫排斥反應(yīng)。具有組織特異性，能分化成特定的細(xì)胞或組織不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力需從胚胎中獲取，涉及倫理問題，限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用技術(shù)不成熟。iPS細(xì)胞：通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞，獲得了類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，簡稱iPS細(xì)胞。教材基礎(chǔ)診斷1.

用燒傷病人自體皮膚的單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)出的皮膚進(jìn)行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)。（選必3

P43從社會(huì)中來）(

)√2.

體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞一類能懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖,另一類需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖。（選必3

P44正文）(

)√3.

進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常用胃蛋白酶分散成單個(gè)細(xì)胞。（選必3

P44旁欄思考）(

)×4.

人們通常將動(dòng)物組織經(jīng)蛋白酶處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。（選必3

P45正文）(

)√

√關(guān)鍵能力·提升考向一

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程

A.

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性B.

乙過程對皮膚組織可用胃蛋白酶處理C.

丙過程為原代培養(yǎng)，遺傳物質(zhì)一定不變D.

丁過程中某些細(xì)胞可能會(huì)無限增殖D考向二

干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

B原代培養(yǎng)（遺傳物質(zhì)一般不發(fā)生改變）傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？細(xì)胞株和細(xì)胞系？遺傳物質(zhì)改變遺傳物質(zhì)有的改變洗滌、稀釋、分瓶培養(yǎng)多數(shù)細(xì)胞固定在表面生長和分裂隨細(xì)胞增多，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無限傳代思考考點(diǎn)二

動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和單克隆抗體注射到腹腔注射抗原培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞多種已免疫B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞誘導(dǎo)融合抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)用特定抗原對小鼠免疫，并從其脾中獲取能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有雜交瘤細(xì)胞才能生長。多輪次的克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測體外大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲得大量的單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體小鼠生活中還會(huì)受到其他抗原的刺激，提取的B淋巴細(xì)胞不止一種。PEG融合法電融合法滅活病毒誘導(dǎo)法原因：細(xì)胞融合是隨機(jī)的。B、瘤、BB、B瘤、瘤瘤(抗原-抗體雜交技術(shù))11陽性孔抗體檢測的原理——抗原-抗體特異性結(jié)合將雜交瘤細(xì)胞群稀釋，約每孔1個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)（克隆化培養(yǎng)）一段時(shí)間后，檢測各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體（專一抗體檢測：抗原-抗體雜交）上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔多孔細(xì)胞培養(yǎng)板抗體檢測板抗體檢測檢測呈陽性的細(xì)胞即為能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞（二選）：篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體制備過程中的相關(guān)考點(diǎn)總結(jié)1.該過程中應(yīng)用到的技術(shù)_______________________________________2.原理_______________________________________3.注射特定抗原的目的______________________________________________4.誘導(dǎo)融合的方法______________________________________動(dòng)物細(xì)胞特有的誘導(dǎo)融合方法為_______________________動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖用特定的抗原對小鼠進(jìn)行免疫，并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法滅活病毒誘導(dǎo)法5.第一次篩選的目的______________________

篩選原理_________________________________________________________________________________篩選獲得雜交瘤細(xì)胞在選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長6.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)__________________________________7.第二次篩選的目的________________________________________________如何篩選___________________________________________________選擇抗體檢測呈___性的雜交瘤細(xì)胞8.抗體檢測原理_______________________________________獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測（進(jìn)行多次篩選）抗原和抗體能夠特異性結(jié)合(分子水平的鑒定）既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體9.如何獲取單克隆抗體①體外培養(yǎng)___________________________②小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)_________________________10.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)_____________________________從培養(yǎng)液中獲取從小鼠腹水中獲取能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備陽單克隆抗體制備過程中的相關(guān)考點(diǎn)總結(jié)教材基礎(chǔ)診斷

√2.

滅活是用極端的物理或化學(xué)手段殺滅細(xì)菌或病毒，使其各種結(jié)構(gòu)都失去相應(yīng)的功能。（選必3

P48相關(guān)信息）(

)×3.

在選擇性培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞會(huì)死亡，融合的三種細(xì)胞類型（只考慮兩個(gè)細(xì)胞間融合）都能生長。（選必3

P48、P49圖2-16）(

)×

√關(guān)鍵能力·提升考向一

動(dòng)物細(xì)胞融合

B

√考點(diǎn)三

動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)與克隆動(dòng)物一、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)1.概念：將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。2.原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性4.種類：胚胎細(xì)胞核移植：體細(xì)胞核移植：細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性容易細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難3.生殖方式：無性生殖難度小難度大因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植一、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)6.過程將胚胎移入受體(代孕)母牛體內(nèi)一、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)6.過程①體積大、容易操作；②營養(yǎng)物質(zhì)豐富，為發(fā)育提供充足營養(yǎng)；③含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)。（答案）高產(chǎn)奶牛(供體)

因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。思考1.為何選用MⅡ卵母細(xì)胞?思考2.一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，為什么？采集卵母細(xì)胞，體外培養(yǎng)至MⅡ期通過顯微操作去核梯度離心紫外光短時(shí)間照射化學(xué)物質(zhì)處理沒有刺破卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使DNA變性失活，對卵母細(xì)胞傷害小。紡錘體——染色體復(fù)合物思考3.卵母細(xì)胞去核的“核”指的是什么？去核的方法是什么？方法：顯微操作法一、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)6.過程性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果，供核動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物生活的環(huán)境不會(huì)完全相同重構(gòu)胚思考4.克隆動(dòng)物是對體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？遺傳物質(zhì)：克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自于供體動(dòng)物的細(xì)胞核，但其核外線粒體的DNA主要來自受體卵母細(xì)胞。環(huán)境作用：在個(gè)體發(fā)育過程中可能發(fā)生基因突變等可遺傳的變異，產(chǎn)生供核動(dòng)物沒有的性狀。出生與供體奶牛遺傳物質(zhì)基本相同的犢牛一、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)6.過程變異角度：不是4.

（選必3

P55概念檢測）三親嬰兒的培育技術(shù)____（填“能”或“不能”）避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代，而______（填“能”或“不能”）避免母親的紅綠色盲基因傳遞給后代?！叭H嬰兒”同時(shí)擁有________________________________的部分基因。能不能自己父親、母親及卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者考點(diǎn)真題演練1.

（2022山東，15，2分）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯(cuò)誤的是(

)D

2.

（2021浙江1月選考，18，2分）如圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是(

)A.

步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行B.

步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離C.

步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D.

步驟④培養(yǎng)過程中不會(huì)發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化C3.

（2020江蘇，23，3分）不定項(xiàng)

小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞，制備流程如圖所示。下列敘述<zzd>錯(cuò)誤</zzd>的是(

)

ABC4.

（2020課標(biāo)全國Ⅰ，38，15分）為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。（1）

上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是______________________________________________。

誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞

取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液（2）

寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：_______________________________________________________________________________。（3）

為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于____________，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是________________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是____________________________。選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性（4）

若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有__________________________________________________________（答出2點(diǎn)即可）。將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)考點(diǎn)一

胚胎工程的理論基礎(chǔ)獲能雌雄原核受精的標(biāo)志:受精完成的標(biāo)志：透明帶和卵細(xì)胞膜之間觀察到兩個(gè)極體或觀察到雌雄原核。雌雄原核融合，形成合子。受精過程：MⅡ期卵細(xì)胞膜反應(yīng)透明帶反應(yīng)課P57a.雌性動(dòng)物生殖道使精子獲能；b.精子培養(yǎng)在獲能液中使其獲能。常見有效成分有肝素、Ca2+載體等。受精卵2細(xì)胞4細(xì)胞8細(xì)胞桑葚胚囊胚卵裂(細(xì)胞未分化)胚胎早期發(fā)育階段原腸胚胚胎發(fā)育早期，有一段時(shí)間在透明帶內(nèi)進(jìn)行，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體積并不增加，這種受精卵的早期分裂稱為卵裂。囊胚1.內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有全能性,可以作為胚胎干細(xì)胞的來源。

對囊胚期進(jìn)行胚胎分割要求：將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。2.滋養(yǎng)層細(xì)胞已經(jīng)分化內(nèi)細(xì)胞團(tuán)滋養(yǎng)層囊胚腔透明帶（囊胚擴(kuò)大導(dǎo)致透明帶破裂叫做孵化。）發(fā)育胎盤和胎膜發(fā)育胎兒的各種組織細(xì)胞開始出現(xiàn)分化

√2.

在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間,卵細(xì)胞膜內(nèi)的透明帶會(huì)迅速發(fā)生生理反應(yīng),阻止后來的精子進(jìn)入透明帶。（選必3

P57正文）(

)×3.

精子入卵后形成雄原核;同時(shí)卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ,排出第二極體后,形成雌原核。（選必3

P57正文）(

)√4.

胚胎發(fā)育過程中,囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂,胚胎從其中伸展出來,這一過程叫作孵化。（選必3

P58正文）(

)√5.

在胚胎工程操作中，常以觀察到兩個(gè)極體或者雌、雄原核作為受精的標(biāo)志，融合形成的受精卵中含有兩個(gè)染色體組。（選必3

P58相關(guān)信息）(

)√考向二

胚胎早期發(fā)育3.

高等哺乳動(dòng)物受精后不久，受精卵開始進(jìn)行細(xì)胞分裂。經(jīng)桑葚胚、囊胚、原腸胚和組織器官的分化，最后發(fā)育成一個(gè)完整的幼體，完成胚胎發(fā)育的全過程。如圖為該過程中的某一時(shí)期示意圖，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(

)DA.

圖中①②③依次為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B.

高等哺乳動(dòng)物的細(xì)胞分化開始于圖示時(shí)期，終止于生命結(jié)束C.

胚胎從①中伸展出來的過程叫作孵化D.

進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇圖示時(shí)期之后的胚胎進(jìn)行考點(diǎn)二

胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用(1)概念：轉(zhuǎn)基因、核移植和體外受精同種的、生理狀態(tài)相同遺傳性狀優(yōu)良、生產(chǎn)能力強(qiáng)健康的體質(zhì)和正常繁殖能力是指將通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。課P61P288

胚胎移植二、胚胎移植優(yōu)良供體母牛優(yōu)良公牛（遺傳性狀優(yōu)良，生產(chǎn)能力強(qiáng)）受體母牛具有優(yōu)良性狀的后代進(jìn)行同期發(fā)情處理超數(shù)排卵處理受體發(fā)情發(fā)情配種或人工授精移植胚胎收集胚胎并檢查對受體進(jìn)行妊娠檢查正常繁殖或兩三個(gè)月后進(jìn)行另一次移植用外源促性腺激素，誘發(fā)卵巢排出比自然情況下更多的成熟卵子。（遺傳性狀優(yōu)良，

生產(chǎn)能力強(qiáng)）2.步驟：桑葚胚或囊胚（健康體質(zhì)和正常的繁殖能力）提示使供體和受體的生理?xiàng)l件達(dá)到一致，使供體的胚胎移入受體后有相似的生理環(huán)境，保證胚胎的正常發(fā)育。實(shí)質(zhì)：早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。胚胎移入同種動(dòng)物排卵后（同期發(fā)情），不管是否妊娠，一段時(shí)間內(nèi)生殖器官的生理變化是相同的胚胎收集

早期胚胎形成后，在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立組織上的聯(lián)系，而是處于游離狀態(tài)胚胎存活受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng).

胚胎發(fā)育供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但其遺傳特性不受任何影響胚胎移植成功的生理學(xué)基礎(chǔ)⑴理論基礎(chǔ)：早期胚胎細(xì)胞具有很強(qiáng)的分裂能力，并保持著細(xì)胞全能性。⑵物質(zhì)基礎(chǔ)：每個(gè)細(xì)胞核內(nèi)具有相同的遺傳物質(zhì)。

1.概念：采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。

2.基礎(chǔ)：3.繁殖方式：無性繁殖（克?。?.主要儀器設(shè)備：體視顯微鏡、顯微操作儀分割工具:分割針或分割刀三、胚胎分割5.注意事項(xiàng)：①選擇發(fā)育良好的、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚②分割囊胚時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割2.

精子載體法是以精子作為外源基因載體攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞，如圖表示用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列敘述正確的是(

)A.

①過程需將成熟的精子放入ATP溶液中進(jìn)行獲能處理B.

②采用體外受精技術(shù)，受精卵中的遺傳物質(zhì)來自父母雙方C.

②③過程所用培養(yǎng)液的成分相同且都加入動(dòng)物血清D.

題述過程中，需要對代孕母鼠用相關(guān)激素進(jìn)行同期發(fā)情處理√3.

（2022遼寧遼陽二模）胚胎工程中各種胚胎操作技術(shù)如圖所示。下列分析正確的是(

)

√A

回答下列問題：（1）

步驟①中需要使用的工具酶有_____________________________。步驟②和③所代表的操作分別是__________和__________。步驟④稱為__________。限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶顯微注射體外培養(yǎng)胚胎移植

性別、年齡（3）

一般來說，在同一動(dòng)物個(gè)體中，乳腺上皮細(xì)胞與膀胱上皮細(xì)胞的細(xì)胞核中染色體DNA所含的遺傳信息______（填“相同”或“不同”），原因是______________________________________________。

兩種上皮細(xì)胞都是體細(xì)胞，且來源于同一個(gè)受精卵相同（4）

從上述流程可知，制備生物反應(yīng)器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技術(shù)有____________________（答出2點(diǎn)即可）。體外受精、胚胎移植

胰蛋白酶或膠原蛋白酶血清[解析]

為獲得單細(xì)胞懸液，雞胚組織剪碎后需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加血清等天然成分，以滿足細(xì)胞對某些細(xì)胞因子的需求。

利用PCR獲取和擴(kuò)增、通過構(gòu)建基因文庫來獲取終止子

RNA聚合酶基因轉(zhuǎn)錄出mRNA[解析]

在體外可利用PCR獲取和擴(kuò)增目的基因，或通過構(gòu)建基因文庫來獲取目的基因?；虮磉_(dá)載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外，還須有啟動(dòng)子和終止子，啟動(dòng)子是

RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。

基因的選擇性表達(dá)

（5）

該實(shí)驗(yàn)流程中用到的生物技術(shù)有________________________（答出2點(diǎn)即可）?；蚬こ?、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

思考與回答：①為什么應(yīng)對供體和受體母畜進(jìn)行同期發(fā)情處理？提示使供體和受體的生理?xiàng)l件達(dá)到一致，使供體的胚胎移入受體后有相似的生理環(huán)境，保證胚胎的正常發(fā)育。②在牛的胚胎移植過程中有兩次使用激素、兩次檢查，其目的分別是什么？提示第一次用孕激素對受、供體進(jìn)行同期發(fā)情處理，第二次用促性腺激素處理使供體超數(shù)排卵。第一次是對收集的胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，第二次是對受體母畜是否妊娠進(jìn)行檢查。③胚胎移植的優(yōu)勢是什么？提示可以發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖能力。第38講

植物細(xì)胞工程操作水平一、細(xì)胞工程

細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)等多學(xué)科的原理和方法，通過細(xì)胞器、細(xì)胞或組織水平上的操作，有目的地獲得特定的細(xì)胞、組織、器官、個(gè)體或其產(chǎn)品的一門綜合性生物工程。應(yīng)用的原理及方法研究的目的2.分類：植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程（含胚胎工程）1.概念：細(xì)胞工程二、植物細(xì)胞工程--植物組織培養(yǎng)外植體有絲分裂無性生殖植物細(xì)胞的全能性1.概念：是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。2.生殖方式：3.分裂方式：4.原理：產(chǎn)生完整生物體分化成其他各種細(xì)胞生物體的每個(gè)細(xì)胞中都含有發(fā)育成完整個(gè)體所需的全套基因所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性選擇性地表達(dá)蜜蜂受精卵發(fā)育成工蜂、卵細(xì)胞發(fā)育成雄峰、一粒玉米種子長成一棵植物，均體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性（）×知識(shí)回顧：細(xì)胞的全能性產(chǎn)生完整生物體分化成其他各種細(xì)胞生物體的每個(gè)細(xì)胞中都含有發(fā)育成完整個(gè)體所需的全套基因所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性選擇性地表達(dá)蜜蜂受精卵發(fā)育成工蜂、卵細(xì)胞發(fā)育成雄峰、一粒玉米種子長成一棵植物，均體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性（）×知識(shí)回顧：細(xì)胞的全能性不定形的薄壁組織團(tuán)塊外植體脫分化愈傷組織再分化根、芽等試管苗移栽成活完整植株5.一般過程：二、植物細(xì)胞工程--植物組織培養(yǎng)失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，進(jìn)而形成愈傷組織。愈傷組織重新分化成芽、根等器官的過程。需要光照。5.適宜的培養(yǎng)條件⑴離體狀態(tài)⑵無菌操作①對操作環(huán)境、雙手、外植體進(jìn)行消毒；②對培養(yǎng)基和器械進(jìn)行滅菌；③接種操作必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行；⑶種類齊全、比例適合的營養(yǎng)物質(zhì)（如蔗糖等）⑷植物激素（主要是生長素和細(xì)胞分裂素）誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)⑸適宜的外界條件（溫度、pH、光照等）二、植物細(xì)胞工程--植物組織培養(yǎng)細(xì)胞分裂素生長素

芽分化愈傷組織根分化探究實(shí)踐：菊花的組織培養(yǎng)取材消毒①用

充分沖洗外植體(幼嫩的莖段)；酒精擦拭雙手和超凈工作臺(tái)；②外植體的消毒：用

，然后立即用

；再用

溶液處理30min后，立即用

；③用解剖刀將外植體切成0.5～1cm長的小段接種將外植體的1/3～1/2插入誘導(dǎo)

的培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)脫分化，長出愈傷組織流水次氯酸鈉愈傷組織轉(zhuǎn)接①將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到

培養(yǎng)基上；②長出芽后再轉(zhuǎn)接到

培養(yǎng)基上，進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗移栽將試管苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待其長壯后再移栽入土誘導(dǎo)生芽的誘導(dǎo)生根的酒精消毒30s無菌水清洗2～3次無菌水清洗2～3次避免雜菌與培養(yǎng)物競爭營養(yǎng)，且有些雜菌會(huì)危害培養(yǎng)物的生長黑暗條件、生長素/細(xì)胞分裂素比例適中光照條件知識(shí)拓展：特殊的植物組織培養(yǎng)——花藥離體培養(yǎng)花藥試管苗脫分化再分化愈傷組織單倍體：植株矮小、高度不育秋水仙素誘導(dǎo)純合品種雜種植株融合的原生質(zhì)體AB再生出細(xì)胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細(xì)胞的融合植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體A雜種細(xì)胞AB去壁去壁人工誘導(dǎo)纖維素酶和果膠酶融合完成的標(biāo)志植物細(xì)胞B物理法：震動(dòng)、離心、電擊化學(xué)法：PEG往往需要進(jìn)行篩選①植物體細(xì)胞雜交獲得的雜種植株的過程是有性生殖嗎？無性生殖②A、B為兩種二倍體植物，通過體細(xì)胞雜交獲得的雜種植株為幾倍體？③通過體細(xì)胞雜交獲得的雜種植株屬于哪種變異？異源四倍體染色體變異二、植物細(xì)胞工程--植物體細(xì)胞雜交1.過程：體細(xì)胞雜交完成的標(biāo)志二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)2.植物體細(xì)胞雜交的概念：

植物體細(xì)胞雜交是指將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。3.原理：細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性植物細(xì)胞核的全能性4.兩個(gè)標(biāo)志（1）植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志：再生出新的細(xì)胞壁（2）植物體細(xì)胞雜交完成的標(biāo)志：培育成新植物體5.實(shí)例：白菜—甘藍(lán)、普通小麥—長穗偃麥草等。6.意義：打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,培育植物新品種無性繁殖有絲分裂7.未解決的問題：目前還不能讓雜種植株完全按人們的需要去表達(dá)親本的優(yōu)良性狀。

主要原因是：生物體內(nèi)基因的表達(dá)不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，所以"番茄—馬鈴薯"雜種植株的細(xì)胞中雖然具備兩個(gè)物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物質(zhì)的表達(dá)相互干擾，它們不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達(dá)，雜種植株自然就不能地上結(jié)番茄、地下長馬鈴薯了。

"番茄—馬鈴薯"雜種植株沒有如科學(xué)家所想象的那樣，地上結(jié)番茄，地下長馬鈴薯，這是為什么?

拓展應(yīng)用植物體細(xì)胞雜交和有性雜交的辨析一、植物繁殖的新途徑⑴概念：用于快速