山茱萸抵抗腦缺血再灌注損傷的作用研究

山茱萸抵抗腦缺血再灌注損傷的作用研究【摘要】目的：通過建立線栓法致大鼠腦缺血再灌注模型，來測定大鼠缺血腦的腦梗死體積與水分含量變化，探究山茱萸對(duì)腦缺血再灌注損傷的抵抗作用及其機(jī)制。方法：本研究以雄性SD大鼠為研究對(duì)象，隨機(jī)將大鼠分為六組：假手術(shù)組、模型組、陽性藥尼莫地平組（12mg/kg）、山茱萸低、中、高劑量組（1.84、3.68、7.36g/kg），每組20只，每日早上8:00灌胃給藥一次，假手術(shù)組和模型組給予等體積量的生理鹽水，連續(xù)給藥14d。末次給藥2h后采用線栓法建立大鼠腦缺血再灌注損傷模型，缺血2h后進(jìn)行再灌注；采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法評(píng)價(jià)腦梗死體積；采用稱量法測定大鼠缺血腦中的水分；ELISA法檢測缺血腦組織中白細(xì)胞介素10（IL-10）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和半胱氨酸蛋白酶3（Caspase-3）水平。結(jié)果：模型組大鼠腦梗死體積顯著高于假手術(shù)組（P<0.05）；與模型組相比，陽性藥尼莫地平組、山茱萸中、高劑量組均能顯著降低腦梗死體積（P<0.05）。與假手術(shù)組相比，模型組腦指數(shù)顯著提高（P<0.05）；與模型組相比，陽性藥尼莫地平組、山茱萸中、高劑量均能顯著降低腦指數(shù)（P<0.05）。與假手術(shù)組相比，模型組大鼠缺血腦組織中SOD與IL-10水平明顯降低，Caspase-3水平顯著提高（P<0.05）；與模型組相比，陽性藥尼莫地平組、山茱萸低、中、高劑量組均能顯著提高SOD水平和IL-10的水平，顯著降低Caspase-3水平（P<0.05）。結(jié)論：山茱萸能降低腦缺血再灌注損傷的大鼠腦梗死體積，可減少大鼠缺血腦的水分；山茱萸能抵抗腦缺血再灌注損傷，其作用機(jī)制和提高缺血腦組織中的SOD與IL-10水平，降低Caspase-3的表達(dá)有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】山茱萸水提取物；大鼠；腦缺血再灌注；白細(xì)胞介素10（IL-10）；超氧化物歧化酶（SOD）；半膀胱氨酸蛋白酶3（Capase-3）

StudyontheeffectofCornusofficinalsagainstcerebralischemiareperfusioninjury[Abstract]Objective:Todeterminethechangesofcerebralinfarctionvolumeandwatercontentinischemicbrainofratsbyestablishingamodelofcerebralischemia-reperfusioninducedbysuturemethod,andtoexploretheresistanceofCorniFructustocerebralischemia-reperfusioninjuryanditsmechanism.Methods:Inthisstudy,SDratswererandomlydividedintosixgroups:shamoperationgroup,modelgroup,positivedrugnimodipinegroup(12mg/kg),low,mediumandhighdosegroupsofCorniFructus(1.84,3.68,7.36g/kg),20ratsineachgroup.RatsweregivenintragastricadministrationofAMat8:00amdaily.Theshamoperationgroupandthemodelgroupweregiventhesamevolumeofnormalsalinefor14days.Theratmodelofcerebralischemia-reperfusioninjurywasestablishedbysuturemethod2hoursafterthelastadministration,andreperfusionwasperformed2hoursafterischemia.Thevolumeofcerebralinfarctionwasevaluatedby2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride(TTC)staining.Thewatercontentinischemicbrainofratswasdeterminedbyweighingmethod.Thelevelsofinterleukin-10(IL-10),superoxidedismutase(SOD)andcaspase-3inischemicbraintissueweredetectedbyELISA.Results:Thevolumeofcerebralinfarctioninthemodelgroupwassignificantlyhigherthanthatintheshamoperationgroup(P<0.05).Comparedwiththemodelgroup,thepositivedrugnimodipinegroup,themiddleandhighdosegroupsofCornusofficinaliscouldsignificantlyreducethevolumeofcerebralinfarction(P<0.05).Comparedwiththeshamoperationgroup,thebrainindexofthemodelgroupwassignificantlyincreased(P<0.05).Comparedwiththemodelgroup,thepositivedrugnimodipinegroup,middleandhighdosesofCorniFructuscansignificantlyreducethebrainindex(P<0.05).Comparedwiththeshamoperationgroup,thelevelsofSODandIL-10intheischemicbraintissueofthemodelgroupweresignificantlydecreased,andthelevelofcaspase-3wassignificantlyincreased(P<0.05).Comparedwiththemodelgroup,thepositivedrugnimodipinegroup,low,mediumandhighdosegroupsofCorniFructuscouldsignificantlyincreasethelevelofSODandIL-10,andsignificantlyreducethelevelofcaspase-3(P<0.05).Conclusion:CorniFructuscanreducethevolumeofcerebralinfarctioninratswithcerebralischemia-reperfusioninjuryandreducethewatercontentofischemicbraininrats.CorniFructuscanresistcerebralischemia-reperfusioninjury,anditsmechanismisrelatedtotheincreaseofSODandIL-10levelsinischemicbraintissueandthedecreaseofcaspase-3expression.[Keywords]CornuswaterextractRatCerebralischemiareperfusioninterleukin10(IL-10)Superoxidedismutase(SOD)Hemicystineprotease3(Capase-3)

目錄1前言 [34]。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，給藥組較模型組腦梗死體積占比和腦水腫明顯減少，這對(duì)于山茱萸抵抗腦缺血再灌注損傷作用研究具有一定的研究意義。缺血性腦損傷是在缺血性腦血管疾病中死亡率和致殘率最高的疾病,在本次實(shí)驗(yàn)?zāi)X缺血再灌注模型的制備過程中致死率高達(dá)1/3，原因如下：①分離血管時(shí)戳破血管導(dǎo)致大鼠失血過多而死；②剪口太大，血管斷裂致死；③尼龍線栓前端過于鋒利而刺破血管，從而引發(fā)蛛網(wǎng)膜下腔出血致死。④插入線栓太深導(dǎo)致大鼠腦出血而死亡。⑤缺血后進(jìn)行再灌注時(shí)，拔線栓速度過快或者用力太猛，將整個(gè)線栓拔出造成出血過多而死亡。腦缺血再灌注損傷發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，上述研究說明山茱萸抵抗線栓法所致的腦缺血再灌注損傷的作用機(jī)制尚不明確，SOD、IL-10和Caspase-3與CIRI的關(guān)系有待進(jìn)一步明確，可通過借鑒其他藥物改善腦缺血的具體機(jī)制進(jìn)行深入研究。本實(shí)驗(yàn)采用線栓法建立腦缺血再灌注損傷模型，通過測定大鼠缺血腦梗死體積與水分含量變化，檢測缺血腦組織中SOD、IL-10和Caspase-3的水平，初步探討了山茱萸改善腦缺血再灌注損傷的機(jī)制，對(duì)于研究山茱萸對(duì)CIRI的機(jī)制有一定的意義，但是其發(fā)揮作用的具體作用機(jī)制還有待深入研究?？偟膩碚f，缺血性腦血管病病理機(jī)制以及藥物開發(fā)在不斷推進(jìn)中，山茱萸關(guān)于治療腦缺血疾病的研究也在不斷探究中，未來將會(huì)有更多研究成果產(chǎn)生。結(jié)論山茱萸能降低腦缺血再灌注損傷的大鼠腦梗死體積，減輕腦水腫；山茱萸能抵抗腦缺血再灌注損傷作用，其作用機(jī)制與提高缺血腦組織中SOD與IL-10水平，降低Caspase-3的表達(dá)有關(guān)。參考文獻(xiàn)張業(yè)昊,姚明江,劉建勛.缺血性腦血管病的現(xiàn)代研究進(jìn)展[J].中國藥理學(xué)通報(bào),2019,35（09）:1185-1188.《柳葉刀》子刊:腦卒中或?qū)⒊蔀槭澜缃】怠邦^號(hào)殺手”[J].上海醫(yī)藥,2021,42（21）:61.于瀟,王貴陽,侯宇東,等.中藥抗腦缺血再灌注損傷的作用及其機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中草藥,2021,52（05）:1471-1484.郎豐山,黃云霞,薛云,等.腦缺血再灌注損傷病理生理機(jī)制研究進(jìn)展[J].食品與藥品,2018,20（04）:312-316.閆安,謝云亮.當(dāng)歸多糖對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織氧化應(yīng)激水平及炎癥因子表達(dá)的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2018,24（02）:123-127.孫勇,張園,邢影.桂枝茯苓丸對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠TNF-α和ET-1水平的影響[J].中國老年學(xué)雜志,2018,38（15）:3730-3732.國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典:一部[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2020:29-30.GaoX,LiuY,AnZ,NiJ.ActiveComponentsandPharmacologicalEffectsof

Cornusofficinalis:LiteratureReview.FrontPharmacol.2021,12:633447.應(yīng)夏麗,王曉玲,陳妍月,等.馬錢苷對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2021,28（06）:888-893.李曼玲.電針對(duì)腦缺血再灌注后細(xì)胞凋亡關(guān)鍵調(diào)控基因Caspase-3的影響[D].南方醫(yī)科大學(xué),2022.袁春華,程謨鑫,李影,等.丹參對(duì)腦缺血再灌注損傷腦組織中p-Akt?Caspase-3和HIF-1α蛋白的影響[J].中國醫(yī)藥科學(xué),2021,11（09）:23-26.尹順花,金輝,肖志博,等.右美托咪定預(yù)處理激活PI3K/mTOR/ULK1通路發(fā)揮抗氧化應(yīng)激和保護(hù)大鼠腦缺血/再灌注損傷的分子機(jī)制研究[J].腦與神經(jīng)疾病雜志,2022,30（11）:688-693.尤梅桂,田華,曾云.熊去氧膽酸對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2022,19（21）:31-35.丁小明,許嶸.三七總皂苷對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注后IL-10及TNF-α表達(dá)的影響[J].局解手術(shù)學(xué)雜志,2017,26（09）:634-637.GrangerDN,KvietysPR.Reperfusioninjuryandreactiveoxygenspecies:Theevolutionofaconcept.RedoxBiol.2015,6:524-551.YangK,ZengL,GeA,etal.Asystematicreviewoftheresearchprogressofnon-codingRNAinneuroinflammationandimmuneregulationincerebralinfarction/ischemia-reperfusioninjury.FrontImmunol.2022,13:930171.ZhangX,ZhangH,JiaoP,etal.PreparationandEvaluationofAntioxidantActivitiesofBioactivePeptidesObtainedfrom

Cornusofficinalis.Molecules.2022,27（4）:1232.何坤明,王國錠,白新鵬,等.山茱萸籽多糖分離純化?結(jié)構(gòu)表征及抗氧化活性[J].食品科學(xué),2021,42（19）:81-88.李毛,楊東東,徐江雁.莫諾苷藥理作用研究進(jìn)展[J/OL].中華中醫(yī)藥學(xué)刊:1-15.王明洋,孫爭宇,張麗,等.山茱萸環(huán)烯醚萜苷對(duì)腦缺血再灌注大鼠線粒體損傷的影響[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2020,41（03）:385-390.鄧文偉,楊廣祿,鄧萌,等.山茱萸多糖對(duì)局灶性腦缺血-再灌注損傷神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的作用[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2017,40（04）:24-25.周程艷,陽文輝.缺血性腦卒中患者各病程分期中血清超氧化物歧化酶水平的變化及意義[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)與健康研究電子雜志,2022,6（06）:8-10.楊春梅,于明懂.右美托咪定對(duì)腦缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究現(xiàn)狀[J].繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2022,36（11）:157-160.張銀仙,潘永康,王妙.血清超氧化物歧化酶和缺血修飾白蛋白在腦梗死患者中的水平變化及臨床價(jià)值[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志,2022,35（07）:995-997.趙悅琳.白樺脂酸通過SIRT1/FoxO1信號(hào)通路抑制自噬改善腦缺血再灌注損傷機(jī)制的研究[D].吉林大學(xué),2021.GarciaJM,StillingsSA,LeclercJL,etal.RoleofInte