植物藥用成分的提取

關(guān)于植物藥用成分的提取第一節(jié)概述植物的化學(xué)成分共有：普遍存在，沒什么生物活性，不起醫(yī)療作用，稱為“無效成分”。某些植物特有：有明顯生物活性并有醫(yī)療作用，通常稱為“有效成分”。但是，有效與無效只是相對的。第2頁,共94頁，2024年2月25日，星期天一、溶劑提取法1.溶劑提取法的原理

溶劑提取法是根據(jù)天然植物中各種成分在溶劑中的溶解性質(zhì)，選用對活性成分溶解度大，對不需要溶出成分溶解度小的溶劑，而將有效成分從藥材組織內(nèi)溶解出來的方法。第3頁,共94頁，2024年2月25日，星期天

選擇溶劑要注意以下問題：①溶劑對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度?。虎谌軇┎荒芘c有效成分起化學(xué)反應(yīng)；③溶劑要經(jīng)濟、易得、使用安全等。第4頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.溶劑的選擇（1）水中草藥中親水性的成分，如：無機鹽、糖類、分子不太大的多糖類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機酸鹽、生物堿類、苷類都能被水溶出。（2）親水性有機溶劑一般是指能與水混溶的有機溶劑，如：乙醇、甲醇、丙酮等。（3）親脂性有機溶劑一般不能與水混溶的有機溶劑，如：石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。第5頁,共94頁，2024年2月25日，星期天3.提取方法（1）浸漬法熱水浸冷浸熱有機溶劑浸第6頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（2）滲漉法第7頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（3）煎煮法水煎煮第8頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（4）回流提取法（5）連續(xù)提取法第9頁,共94頁，2024年2月25日，星期天索氏提取器第10頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（6）超臨界流體萃取用超臨界流體為萃取劑，從液體或固體中萃取出植物天然藥用成分，并進行分離的一種技術(shù)。CO2因其本身無毒、無腐蝕、臨界條件適中等特點，成為超臨界流體萃取法中最為常用的超臨界流體。（7）酶法提取用纖維素酶、果膠酶、蛋白酶等，破壞植物細胞壁，以有利于有效成分最大限度的溶出。第11頁,共94頁，2024年2月25日，星期天4.影響提取效率的因素（1）原料的粒度（2）提取的溫度（3）提取的時間（4）料液配比第12頁,共94頁，2024年2月25日，星期天二、其他提取法1.水蒸氣蒸餾法2.升華法3.壓榨法第13頁,共94頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)銀杏黃酮黃酮類化合物：以黃酮（2-苯基色原酮）為母核而衍生的一類黃色色素。其中包括黃酮的同分異構(gòu)體及其氫化的還原產(chǎn)物，也即以C6-C3-C6為基本碳架的一系列化合物。

第14頁,共94頁，2024年2月25日，星期天黃酮類化合物生理活性多種多樣，主要表現(xiàn)在：①對心血管系統(tǒng)的作用；②抗肝臟毒作用；③抗炎作用；④雌性激素樣作用；⑤抗菌及抗病毒作用；⑥瀉下作用；⑦解痙作用。第15頁,共94頁，2024年2月25日，星期天

一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

銀杏中黃酮類化合物含量較高，特別是葉中，根據(jù)分析測定，銀杏葉提取物浸膏中含有160多種成分，主要是黃酮苷及銀杏內(nèi)酯、白果內(nèi)酯等。其中黃酮類化合物就有44種，到目前為止，已從中分離出20多個黃酮類化合物。第16頁,共94頁，2024年2月25日，星期天R黃酮和黃酮醇是黃酮化合物中的第一類，也是銀杏黃酮中的主要表現(xiàn)形式。第17頁,共94頁，2024年2月25日，星期天芹菜素木犀草素山奈素槲皮素第18頁,共94頁，2024年2月25日，星期天銀杏雙黃酮，銀杏黃素。黃色結(jié)晶。熔點347～349℃(分解)。鹽酸-鎂粉反應(yīng)呈橙紅色，三氯化鐵反應(yīng)呈綠色，濃硫酸中呈黃色(無熒光)，氫氧化鈉中呈黃色。存在于銀杏科植物銀杏的葉、外種皮中。有擴張血管作用，用于治療心絞痛。

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白果素，黃色針狀結(jié)晶,245～250℃軟化,約278℃

重新固化,最后在320℃熔化(分解)。存在于銀杏科植物銀杏的葉、羅漢果植物羅漢松的葉中。有降低血清膽固醇的作用,能使磷脂和膽固醇的比例趨于正常,用于治療心絞痛。

白果素第20頁,共94頁，2024年2月25日，星期天銀杏葉成品減壓回收乙醇真空干燥

洗脫液樹脂（二次再用）80%乙醇洗滌至無色洗滌后樹脂水洗液（棄去）上柱，水洗至無色

吸附樹脂8%樹脂吸附中性濾液鹽酸調(diào)pH為7過濾液過粗砂柱上清液濾渣（棄去）沉淀粗濾液粗濾活性炭吸附浸提液粉碎、沸水浸提3次pH為10左右，每次3h1.水提取法二、生產(chǎn)工藝第21頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.乙醇提取法3.丙酮提取法銀杏葉提取物（總黃酮）回收溶劑至干濾液20%乙醇溶液，過濾提取物回收乙醇，靜置，過濾濾液95%乙醇提取3次，過濾提取液第22頁,共94頁，2024年2月25日，星期天三、質(zhì)量檢測1.含量測定（1）基本原理銀杏葉提取物中的黃酮主要為槲皮素(Quercetin)、山奈素(Kaempferol)、異鼠李素(Isorhamnetin)與各種糖基形成的苷，而銀杏雙黃酮和黃酮苷元在銀杏提取物中含量極低，均低于千分之一。因此HPLC分析測定銀杏黃酮類化合物含量時一般通過酸水解方法，使許多復(fù)雜的黃酮苷轉(zhuǎn)化為簡單的槲皮素、山奈素和異鼠李素三種苷元，然后以槲皮素為標準品或槲皮素+山奈素+異鼠李素為標準品，用RI一HPLC法測定這三種苷元的含量。最后通過轉(zhuǎn)化系數(shù)求得黃酮類化合物的含量。第23頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（2）測定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以甲醇-0.4%磷酸溶液（50:50）為流動相，檢測波長為360nm。對照品樣品的制備：分別精密稱取五氧化二磷干燥過夜的槲皮素、山奈素、異鼠李素對照品，加甲醇制成1mL分別含0.03mg、0.03mg、0.02mg的溶液，作為對照溶液。測定時精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，測定，分別計算三種黃酮苷元的含量。第24頁,共94頁，2024年2月25日，星期天四、藥理作用與臨床應(yīng)用銀杏黃酮的藥理作用（1）GBE有防治高血脂的功效（2）改善腦循環(huán)（3）抗脂質(zhì)過氧化作用（4）其他第25頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.銀杏黃酮的臨床應(yīng)用（1）治療心腦血管疾病（2）銀杏黃酮苷治療原發(fā)性腎病綜合癥（3）治療血管性癡呆（4）眼科應(yīng)用第26頁,共94頁，2024年2月25日，星期天第三節(jié)揮發(fā)油

揮發(fā)油也稱為精油，是一類廣泛存在于植物中具有生物活性的成分，是用水蒸氣蒸餾所得的與水不混溶的揮發(fā)性油狀成分的總稱。第27頁,共94頁，2024年2月25日，星期天一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)

揮發(fā)油所含有的化學(xué)成分比較多，是一種混合物，其組成主要包括以下幾類：（1）萜類化合物主要是單萜、倍半萜及其含氧衍生物。其構(gòu)成揮發(fā)油的主要成分。含氧衍生物有醇、醛、酮、醚、酚、酯等，含量雖少但大多具有優(yōu)異芳香氣，是揮發(fā)油中的重要成分。第28頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（2）非萜類化合物①芳香族化合物主要為萜源衍生物，如麝香草酚、α-玉金烯等。有些是苯丙烷類衍生物，多具C6-C3骨架，多為苯類化合物或其酯類，如桂皮醛等；也有C6-C1骨架，如香莢蘭醛等。

麝香草酚桂皮醛香莢蘭醛第29頁,共94頁，2024年2月25日，星期天②脂肪族化合物在揮發(fā)油中也存在某些小分子脂肪族化合物，有揮發(fā)性，廣泛存在于水果中，如正葵烷、辛醛、丁酸乙酯、魚腥草素等。③其他類化合物在藥用植物化學(xué)成分中，有些雖然不是以揮發(fā)油的形式存在，但經(jīng)過酶解后，產(chǎn)生了一些具有揮發(fā)特性的化合物，往往也被稱為揮發(fā)油。第30頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.性質(zhì)（1）性狀①顏色：大多為無色或微帶淡黃色，也有少數(shù)具有其它顏色。如：洋甘菊油——顯藍色麝香草油——顯紅色②氣味：大多數(shù)具有香氣或其它特異氣味。③形態(tài)：為透明液體，有的在冷卻時其主要成分可能結(jié)晶析出。這種析出物習稱為“腦”，如薄荷腦、樟腦等。④揮發(fā)性：指在常溫下可自行揮發(fā)而不留任何痕跡，這是揮發(fā)油與脂肪油的本質(zhì)區(qū)別。第31頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（2）溶解性脂溶性，難溶于水易溶——石油醚、乙醚、二硫化碳、油脂等（3）穩(wěn)定性揮發(fā)油對空氣、光、熱均具有敏感性，經(jīng)常與空氣接觸會逐漸氧化失去原有香味，甚至變質(zhì)（樹脂化），使揮發(fā)油密度變大、黏度增大、顏色變深、因此揮發(fā)油應(yīng)裝入棕色瓶內(nèi)低溫保存。第32頁,共94頁，2024年2月25日，星期天二、生產(chǎn)工藝（一）揮發(fā)油的提取1.水蒸氣蒸餾法將藥用植物切碎后，加水浸泡，然后采用直接蒸餾或水蒸氣蒸餾法將揮發(fā)油蒸餾出來。2.CO2超臨界流體萃取法特點：防止氧化、熱解及提高品質(zhì)；所得芳香揮發(fā)油氣味與原料相同。工藝技術(shù)要求高，設(shè)備費用投資大。第33頁,共94頁，2024年2月25日，星期天3.吸收法第34頁,共94頁，2024年2月25日，星期天第35頁,共94頁，2024年2月25日，星期天4.有機溶劑提取法溶劑——石油醚、二硫化碳、四氯化碳、苯等方法——回流浸出法、冷浸法等處理——提取后，減壓蒸去有機溶劑后即得浸膏精制——加熱乙醇溶解浸膏，放置冷卻，濾除雜質(zhì)，回收醇得凈油。（原理：利用乙醇對植物蠟等脂溶性雜質(zhì)的溶解度隨溫度下降而降低的特性）第36頁,共94頁，2024年2月25日，星期天5.壓榨法

此法適用于新鮮原料，如桔、柑、檸檬果皮含揮發(fā)油較多的原料。

搗碎→冷壓→靜置分層→粗品優(yōu)點——保持原有的新鮮香味缺點——可溶出原料中不揮發(fā)性物質(zhì)。如：檸檬油常溶出原料中的葉綠素，而使檸檬油呈綠色。第37頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（二）揮發(fā)油成分的分離1.冷凍處理將揮發(fā)油置于0℃以下使析出結(jié)晶，如無結(jié)晶析出可將溫度降至-20℃，繼續(xù)放置。取出結(jié)晶再經(jīng)重結(jié)晶可得純品。例：薄荷油制備薄荷腦第38頁,共94頁，2024年2月25日，星期天薄荷油析出粗腦油析出粗腦較純薄荷油-10℃放置12小時（第一批）（第二批）-20℃冷凍24小時加熱熔融0℃冷凍第39頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.分餾法利用成分沸點不同，氣化先后次序不同進行分離的。沸點規(guī)律：1.碳原子數(shù)：碳多→沸點↑

2.雙鍵數(shù)：多→沸點↑

3.官能團：極性大→沸點↑酸>醇>酮~醛>醚

4.反式的沸點>順式第40頁,共94頁，2024年2月25日，星期天例：薄荷醇的提取分離薄荷薄荷油20~150℃150~200℃200~230℃230~300℃水蒸氣蒸餾分餾單萜烴類薄荷醇或酮倍半萜含氧物第41頁,共94頁，2024年2月25日，星期天薄荷醇和酮0℃以下放置、析腦、過濾乙醇重結(jié)晶薄荷醇結(jié)晶油純薄荷醇含大量薄荷酮和少量薄荷醇200~230℃第42頁,共94頁，2024年2月25日，星期天3.化學(xué)方法根據(jù)揮發(fā)油中各組分的結(jié)構(gòu)或官能團的不同，用化學(xué)方法處理，使各組分得到分離的方法。第43頁,共94頁，2024年2月25日，星期天第四節(jié)強心苷強心苷是存在于植物中具有強心作用的甾體苷類化合物，由強心苷元和糖縮合而產(chǎn)生的一類苷。

強心苷是治療室率過快心房顫動的首選藥和慢性心功能不全的主要藥物。第44頁,共94頁，2024年2月25日，星期天常見的含強心苷的天然藥物鈴蘭、紫花洋地黃R為鼠李糖鈴蘭毒苷洋地黃毒苷第45頁,共94頁，2024年2月25日，星期天黃花夾竹桃黃夾苷甲黃夾苷乙第46頁,共94頁，2024年2月25日，星期天羊角拗R為L－夾竹桃糖羊角拗苷第47頁,共94頁，2024年2月25日，星期天蟾蜍蟾毒靈第48頁,共94頁，2024年2月25日，星期天一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)強心苷的基本結(jié)構(gòu)是由甾醇母核和連在C17位上的不飽和內(nèi)酯環(huán)構(gòu)成苷元部分，然后通過甾醇母核C3位上的羥基和糖縮合而成。根據(jù)苷元部分C17上連接的不飽和內(nèi)酯環(huán)的類型分為甲型（蟾蜍甾烯型）和乙型（強心甾烯型）兩類。強心苷元是由甾體母核與C17取代的不飽和內(nèi)酯環(huán)組成第49頁,共94頁，2024年2月25日，星期天OOHHHORaObdrOOHHOaObdr甲型海蔥苷元20212223243β，14β-二羥基海蔥甾4,20,22-三烯

-OOOHHHORaOOOHHO3514b乙型型毛地黃毒苷元H202223213β，14β-二羥基-5β-強心甾-20（22）-烯第50頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（二）性質(zhì)1.通性強心苷多為無色結(jié)晶或無定形粉末，味苦，對粘膜有刺激性。強心苷的溶解性與所連糖的種類和數(shù)目有關(guān)，一般可溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等極性溶劑；略溶于乙酸乙酯、含醇三氯甲烷；難溶于乙醚、苯、石油醚等非極性溶劑。第51頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.脫水反應(yīng)強心苷混合強酸（3%～5%HCl）加熱水解時，苷元往往發(fā)生脫水反應(yīng)。

（1）C14-OH最易發(fā)生脫水反應(yīng)生成縮水苷元。

（2）

同時存在C14-OH和C16-OH，也易脫水，得到二縮水苷元。第52頁,共94頁，2024年2月25日，星期天3.水解反應(yīng)水解反應(yīng)是研究強心苷組成的常用方法，分化學(xué)方法和生物方法兩大類，化學(xué)方法主要有酸水解、堿水解和乙酰解；生物方法主要有酶水解。糖部分不同，其水解產(chǎn)物難易及產(chǎn)物均不同。第53頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（1）酸水解法溫和酸水解用稀酸（0.02～

0.05mol/L)的鹽酸或硫酸在含水醇中經(jīng)短時間（半小時至數(shù)小時）加熱回流，可使Ⅰ型強心苷水解成苷元和糖。（2）堿水解法NaHCO3、KHCO3主要使α-脫氧核糖的?；?，而α

-羥基糖及苷元上的?；凰?。Ca（OH）2、Ba（OH）2可以使α-脫氧核糖的、α

-羥基上的、苷元上的?；狻５?4頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（3）乙酰解法在研究強心苷時，乙酰解常用來研究糖與糖之間的連接位置，如葡萄糖之間的1,6-糖苷鍵很容易乙酰解，而1,4-糖苷鍵較難乙酰解。（4）酶水解法

含強心苷的植物中，有水解葡萄糖的酶，在適宜條件下，能水解糖鏈末端的葡萄糖。但無水解α-脫氧糖的酶，所以能水解除去分子中的葡萄糖而保留α-去氧糖。蝸牛酶（一種混合酶，蝸牛腸管消化液經(jīng)處理而得）幾乎能水解所有的苷鍵，能將強心苷分子的糖逐步水解，直至獲得苷元，常用來研究強心苷的結(jié)構(gòu)。第55頁,共94頁，2024年2月25日，星期天二、生產(chǎn)工藝強心苷提起困難的原因：①強心苷含量很低，且同一種植物中常含許多結(jié)構(gòu)相近、性質(zhì)相似的強心苷，每一種苷元又有原生苷和次生苷之分。②多與糖類、皂苷、色素、鞣質(zhì)等共存，這些成分的存在可影響強心苷在溶劑中的溶解度。③在分離純化過程中強心苷易受酸、堿或共存酶的作用，發(fā)生水解、脫水和異構(gòu)化等反應(yīng)，使生理活性降低，故提取分離時應(yīng)注意控制酸堿性和抑制酶的活性。第56頁,共94頁，2024年2月25日，星期天

一般提取溶劑常用70%～80%的甲醇或乙醇，油脂或葉綠素多者要先脫脂；再用鉛鹽沉淀法或聚酰胺吸附法去除與其共存的雜質(zhì)；最后再用CHCl3和CHCl3：MeOH不同比例混合液依次萃取，將強心苷按極性大小分成幾個部分，以備進一步分離。第57頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（二）分離1.溶劑萃取法氯仿甲醇水毛花洋地黃苷A毛花洋地黃苷B毛花洋地黃苷C1:2251:5501:2000均1:20幾乎不溶第58頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.逆流分配法也是利用強心苷在兩相溶劑間分配系數(shù)不同而達到分離。第59頁,共94頁，2024年2月25日，星期天3.色譜分離法吸附色譜法一般用于分離親脂性強心苷（單糖苷或次生苷），常用中性氧化鋁（或硅膠）做吸附劑，苯、苯-氯仿、氯仿-甲醇做洗脫劑。4.液滴逆流色譜法是分離弱親脂性強心苷的一種有效方法，它是利用混合物中各組分在兩液相間的分配系數(shù)差別，由流動相形成液滴，通過作為固相的液柱而達到分離純化的目的。第60頁,共94頁，2024年2月25日，星期天毛花洋地黃粗粉粗總苷加入適量的乙醚-丙酮（2:1），攪拌成漿狀，靜置過夜，抽濾，結(jié)晶以適量乙醚：丙酮（1:1）洗滌，揮散溶劑后，100℃烘干析出晶體的濃縮液加入抽松物質(zhì)量0.04倍蒸餾水，再加入少量晶種，搖勻，靜置48h以上，待結(jié)晶濃縮液加適量甲醇，加熱回流至全融。常壓回收甲醇至剩余量為抽松量的0.3～0.4倍抽松物回收氯仿，抽松水液氯仿液殘渣（樹脂、色素）回收氯仿

加乙醇至含醇量22%，用水液量0.3倍的氯仿提取2次氯仿液水液（糖類等水溶性雜質(zhì)）冷后，用0.4倍量氯仿提取1次濃縮液減壓回收乙醇至無醇味膠狀物（葉綠素、樹脂等）上清液加碳酸鈉調(diào)pH至中性，在60℃下減壓回收乙醇至含醇量為10%～20%，于15℃下靜置析膠，過夜，次日吸取上清液醇液藥渣用5倍量的熱乙醇（60%～70%）浸漬滲漉，滲漉近完時再加2倍量的冷乙醇（70%）滲漉制備實例第61頁,共94頁，2024年2月25日，星期天粗總苷結(jié)晶（主含苷丙）母液減壓濃縮，析晶氯仿層（主要含苷乙）稀甲醇層按上述分配比例進行第二次分離粗結(jié)晶（苷丙及部分苷乙）加壓濃縮至小體積，冷卻稀甲醇層氯仿層（主要含苷甲、苷乙）先將總苷溶于甲醇，，濾過，再向濾液加氯仿和水，按總苷-甲醇-氯仿-水（1:100:500:500）的比例進行第一次分離第62頁,共94頁，2024年2月25日，星期天第五節(jié)香豆素又稱香豆精，為順勢鄰羥基桂皮酸的內(nèi)酯，具特異香氣。香豆素是具有苯駢α-吡喃酮母核的一類化合物的總稱，屬于苯丙素類衍生物，又稱鄰羥桂皮酸內(nèi)酯，具芳香氣味。其結(jié)構(gòu)母核為：12378465苯駢α-吡喃酮第63頁,共94頁，2024年2月25日，星期天

香豆素類在動植物及微生物中均有分布，如致癌成分黃曲霉素類及發(fā)光真菌中的亮菌素類均屬于香豆素類。這類成分分布得最廣的還是高等植物中，其中蕓香科和傘形科中分布最多。它們在植物體內(nèi)以游離狀態(tài)或與糖結(jié)合成苷的形式存在，苷酶解可環(huán)合成游離的內(nèi)酯狀態(tài)。第64頁,共94頁，2024年2月25日，星期天一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)1.羥基香豆素類絕大部分在苯核上有取代基，幾乎所有的C7位都帶有含氧基團。78324第65頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.呋喃香豆素香豆素核上異戊烯基常與鄰位酚羥基環(huán)合成呋喃環(huán)6、7-呋喃駢香豆素和7、8-呋喃駢香豆素。（1）線型（6、7呋喃駢香豆素型），補骨脂內(nèi)酯型補骨脂內(nèi)酯

（2）角形（7、8呋喃駢香豆素型），白芷內(nèi)酯型白芷內(nèi)酯(異補骨內(nèi)酯)第66頁,共94頁，2024年2月25日，星期天3.吡喃香豆素類香豆素母核上C6位或C8位的異戊烯基與鄰羥基環(huán)合而成2，2-二甲基-а-吡喃環(huán)結(jié)構(gòu)的香豆素類。（1）線型（6，7吡喃駢香豆素）：

（2）角型（7，8吡喃駢香豆素）：黃曲霉素第67頁,共94頁，2024年2月25日，星期天4.其他香豆素：指α-吡喃酮環(huán)上有取代基的香豆素類。C3、C4位常有苯基、羥基、異戊烯基等的取代。黃檀內(nèi)酯蟛蜞菊內(nèi)酯344第68頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（二）性質(zhì)1.性狀游離的香豆素多有完好的結(jié)晶形狀，熔點71℃，沸點301.7℃，具有新割干草的特有氣味。分子量小的有揮發(fā)性，能隨水蒸汽蒸出，具升華性。而多數(shù)香豆素苷無香氣，也不能升華。第69頁,共94頁，2024年2月25日，星期天游離香豆素不溶于冷水，溶于沸水，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚等有機溶劑。

香豆素苷溶于水、甲醇、乙醇，難溶于氯仿、乙醚。某些香豆素及其衍生物具有熒光，在堿性溶液中熒光更顯著。熒光的有無與強弱，與分子中取代基的種類和取代位置有關(guān)，如7-羥基香豆素有強烈的藍色熒光，而7，8-二羥基香豆素無熒光。第70頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.與堿作用香豆素的α-吡喃酮環(huán)具有α，β-不飽和內(nèi)酯性質(zhì)，在稀堿液中會逐漸水解生成順鄰羥基桂皮酸的鹽，而順鄰羥桂皮酸不易游離存在，其鹽的水溶液經(jīng)酸化即閉環(huán)恢復(fù)成內(nèi)酯基。這個閉合過程極易發(fā)生，即使在很弱的酸溶液中，如通入CO2也能促使其內(nèi)酯化而閉環(huán)。HCoumaricHCoumaricOH-H+O-OO-OH-H+OH-長時間加熱+OO-H+OH-長時間加熱+第71頁,共94頁，2024年2月25日，星期天3.化學(xué)反應(yīng)（1）環(huán)合反應(yīng)香豆素分子中若酚羥基的鄰位有不飽和側(cè)鏈時，常能相互作用環(huán)合成含氧的雜環(huán)結(jié)構(gòu)，生成呋喃香豆素或吡喃香豆素類。OHOOOCH3OCH3OHCOOHOO第72頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（2）加成反應(yīng)C3、C4雙鍵、吡喃環(huán)或呋喃環(huán)上的雙鍵及側(cè)鏈雙鍵等不同的存在形式。控制條件下氫化順序：側(cè)鏈不飽和鍵>吡喃環(huán)或呋喃環(huán)上的雙鍵>C3、C4雙鍵34第73頁,共94頁，2024年2月25日，星期天二、生產(chǎn)工藝由香豆素的理化性質(zhì)可知游離香豆素大多是低極性和親脂性的，與糖結(jié)合的香豆素苷則極性較高，故我們常采用系統(tǒng)溶劑法將其分為幾個部分。香豆素內(nèi)酯遇堿皂化、加酸還原的性質(zhì)及其小分子香豆素的揮發(fā)性和升華性的性質(zhì)也常用于其分離純化中。只是由于其性質(zhì)的不穩(wěn)定性，在酸、堿、熱的作用中要注意條件的控制，以免引起結(jié)構(gòu)的破壞，得到次生產(chǎn)物。第74頁,共94頁，2024年2月25日，星期天1.香豆素的提取分離方法（1）水蒸氣蒸餾法：小分子的游離香豆素因具有揮發(fā)性，可用水蒸氣蒸餾法進行提取。（2）堿溶酸沉法由于香豆素類可溶于熱堿溶液中，加酸又析出，故用0.5%氫氧化鈉水溶液加熱提取，提取液冷卻后再用乙醚除去雜質(zhì)，然后加酸調(diào)節(jié)pH值至中性，適當濃縮，再酸化，則香豆素類及其苷即可析出。第75頁,共94頁，2024年2月25日，星期天（3）系統(tǒng)溶劑法從中藥中提取香豆素類化合物時，可采用系統(tǒng)溶劑法。常用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮和甲醇順次提取。石油醚對香豆素的溶解度不大，其萃取液濃縮后即可得結(jié)晶。乙醚是多數(shù)香豆素的良好溶劑，但也能溶出其他能溶性成分，如：葉綠素、蠟質(zhì)等；其他極性較大的香豆素和香豆素苷，則溶于甲醇或水中。第76頁,共94頁，2024年2月25日，星期天

（3）系統(tǒng)溶劑法石油醚回流提取石油醚液回收至小體積濃縮液放置、析晶粗晶冷石油醚洗結(jié)晶（可能是混和物）進一步分離單體（親脂性香豆素）殘渣乙醚液乙醚回流提取回收分離單體（親脂性較弱香豆素）殘渣乙醇提取香豆素苷類藥材粗粉回收分離乙醇液第77頁,共94頁，2024年2月25日，星期天蛇床子素的提取第78頁,共94頁，2024年2月25日，星期天蛇床子素的提取抗心律失常作用抗菌、抗病毒作用抗變態(tài)反應(yīng)

蛇床子素對須發(fā)蘚菌有較強抑制作用，花椒毒酚則具有顯著的抗霉菌作用。

蛇床子總香豆素能直接擴張豚鼠器官平滑肌，對豚鼠吸入致痙劑所致的藥物性哮喘有明顯的保護作用，在體外能拮抗組織胺、慢反應(yīng)物質(zhì)引起的腸肌收縮，對小鼠被動性皮膚過敏反應(yīng)有抑制作用，同時有一定的祛痰作用?？寡鬃饔?/p>

蛇床子素具有鈣拮抗劑的作用。

蛇床子總香豆素對角叉菜膠和雞蛋清引起的大鼠足趾腫脹均有明顯的抑制作用。

生物活性第79頁,共94頁，2024年2月25日，星期天

蛇床子膏的制備工藝流程蛇床子粗粉用70%乙醇浸提3次，合并提取液，減壓回收乙醇，得稠膏。然后加稠膏3倍量的氯仿回流提取，過濾，減壓回收氯仿，得含蛇床子素的干膏。工藝流程如下：第80頁,共94頁，2024年2月25日，星期天第十一章生物技術(shù)制藥一、現(xiàn)代生物技術(shù)

以現(xiàn)代生命科學(xué)為基礎(chǔ),把生物體系與工程學(xué)技術(shù)有機結(jié)合在一起，按照預(yù)先的設(shè)計，定向地在不同水平上改造生物遺傳性狀或加工生物原料,產(chǎn)生對人類有用的新產(chǎn)品(或達到某種目的)之綜合性科學(xué)技術(shù)。

第81頁,共94頁，2024年2月25日，星期天二、生物技術(shù)制藥

生物藥物泛指包括生物制品在內(nèi)的生物體的初級和次級代謝產(chǎn)物及生物體的某一組成部分，甚至整個生物體用作診斷和治療疾病的醫(yī)藥品。

生物技術(shù)藥物是將一些難以規(guī)?；崛∩a(chǎn)的微量生命活動物質(zhì)，經(jīng)分離純化研究確證其結(jié)構(gòu)、功效后，利用DNA重組技術(shù)和單克隆抗體技術(shù)等方法進行規(guī)?；a(chǎn)而獲得的蛋白質(zhì)、多肽、酶、激素、疫苗、單克隆抗體和細胞生長因子等藥物。包括基因工程藥物、酶工程藥物、動植物細胞工程藥物等。第82頁,共94頁，2024年2月25日，星期天三、生物技術(shù)制藥的特點①可以大量生產(chǎn)過去難以獲得的生理活性蛋白和多肽，為臨床應(yīng)用提供有力的保障。②可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質(zhì)，以便對其生理和生化結(jié)構(gòu)進行深入研究，從而擴大這些物質(zhì)的應(yīng)用范圍。③應(yīng)用基因工程技術(shù)可發(fā)現(xiàn)、挖掘更多的內(nèi)源性生理活性物質(zhì)。④內(nèi)源性生理活性物質(zhì)在作為藥物使用時存在的不足之處，可以通過基因工程和蛋白質(zhì)工程進行改造和去除。⑤利用基因工程技術(shù)可獲得新化合物、擴大藥物篩選來源。第83頁,共94頁，2024年2月25日，星期天四、生物技術(shù)藥物的種類1.細胞因子類（1）干擾素類，如：α-干擾素（2）白細胞介素，已發(fā)現(xiàn)23種，IL-1、IL-2···IL-23（3）集落刺激因子（CSF）類，如：粒細胞CSF（4）生長因子類，如：EGF、HGF（5）趨化因子類（6）腫瘤壞死因子（TNF），如：TNF-α、TNF-β第84頁,共94頁，2024年2月25日，星期天2.激素類有胰島素、生長激素、心鈉素、人促腎上腺皮質(zhì)激素等。3.治療心血管及血液疾病的活性蛋白類（1）溶解血栓類，如：人組織纖溶酶原激活劑（tPA）（2）凝血因子類，如：凝血因子Ⅶ、凝血因子Ⅷ等。（3）生長因子類，如：促紅細胞生成素（EPO）、血小板生成素（TPO）等。（4）血液制品，如：血紅蛋白、白蛋白等。第85頁,共94頁，2024年2月25日，星期天5.可溶性細胞因子受體類，如：IL-1受體、TNF受體等。6.導(dǎo)向毒素類（1）細胞因子導(dǎo)向毒素，如：IL-1導(dǎo)向毒素、EGF導(dǎo)向毒素（2）單克隆抗體導(dǎo)向毒素，如：抗-B4-封閉的蓖麻毒蛋白7.基因工程疫苗（1）基因工程亞單位疫苗，如：乙肝疫苗（2）基因工程載體疫苗，如：麻疹疫苗（3）核酸疫苗，如：流感疫苗、單純皰疹病毒疫苗第86頁,共94頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)幾種重要的生物技術(shù)藥物簡介

一、人生長激素是腦垂體前葉分泌的一種蛋白質(zhì)類激