乳與乳制品微生物檢驗(yàn)方法

乳與乳制品微生物檢驗(yàn)方法菌落總數(shù)的測(cè)定1、術(shù)語(yǔ)菌落是指在因體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖而形成的能被肉眼識(shí)別的生長(zhǎng)物，它是由數(shù)以萬(wàn)計(jì)的相同的細(xì)茵集合而成。茵落總數(shù)是指食品檢樣經(jīng)處理后，在一定條件下培養(yǎng)后(如營(yíng)養(yǎng)成分、培養(yǎng)溫度和時(shí)間、pH、需氧性質(zhì)等)所得1ml(g)檢樣中所生長(zhǎng)的細(xì)菌菌落的總數(shù)。本方法規(guī)定的培養(yǎng)條件下所得結(jié)果，只包括一群在營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)發(fā)育的嗜中溫性需氧的菌落總數(shù)。所以厭氧或微需氧茵、有特殊營(yíng)養(yǎng)要求的以及非嗜中溫的細(xì)菌，由于現(xiàn)有的生長(zhǎng)條件不能滿足其生理要求，故難以生長(zhǎng)。因此菌落總數(shù)并不能區(qū)分其中細(xì)菌的種類，所以有時(shí)被稱為雜菌數(shù)，需氧菌數(shù)。菌落總數(shù)主要作為判定食品被污染程度的標(biāo)志，也可以應(yīng)用這一方法觀察細(xì)菌在食品中繁殖動(dòng)態(tài)，以便對(duì)被檢樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)時(shí)提供依據(jù)。2、設(shè)備和材料培養(yǎng)箱：36土1℃冰箱：0?4℃恒溫水?。?6土1℃天平電爐吸管廣口瓶或三角瓶：容量為500ml玻璃珠：直徑50mm平皿：直徑約90mm試管放大鏡菌落計(jì)數(shù)器酒精燈均質(zhì)器或乳缽試管架滅菌刀或剪子滅菌鑷子培養(yǎng)基和試劑營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按中規(guī)定或按購(gòu)買的商用培養(yǎng)基配方配制。生理鹽水75%乙酵溶液檢驗(yàn)程序菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序如下：操作步驟檢樣稀釋及培養(yǎng)以無(wú)菌操作將檢樣25g（或ml）剪碎放于裝有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅玻璃瓶?jī)?nèi)，（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后，最好置均質(zhì)器中以8000?10000r/min的速度處理Imin,做成1：10的均勻稀釋液。用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)（注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液）振搖試管,混合均勻,做成1：100的稀釋液。另取1ml滅菌吸管，按上述操作順序，做10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用一支1ml滅菌吸管。根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì),選擇2—3個(gè)適宜稀釋度,分別在做10倍遞增稀釋的同時(shí),即以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋淮于滅菌平皿內(nèi)。稀釋液移入平皿后,應(yīng)及時(shí)將涼至46℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（可放置于46土1℃水浴中保溫）注入平皿約15ml,并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。同時(shí)將營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1ml稀釋液的滅菌平皿內(nèi)做空白對(duì)照。待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48土2h。菌落計(jì)數(shù)方法做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí),可用肉眼觀察,必須時(shí)用放大鏡,以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告平板菌落數(shù)的選擇選取菌落數(shù)在30?300之間的平板作為菌落總數(shù)的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)，一個(gè)稀釋度選用兩個(gè)平板，應(yīng)采用兩個(gè)平板平均數(shù)，其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí)，則不宜采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌落生長(zhǎng)的平板作為稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而另一半菌落分布又很多均勻，可計(jì)算半個(gè)平板后乘2代表全皿菌落數(shù)。平板內(nèi)有鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí)（菌落之間無(wú)明顯界限），若僅有一條鏈，可視為一個(gè)菌落；如果有不同來(lái)源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)。稀釋度的選擇應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30?300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見表中例1）。若有兩個(gè)稀釋度，其生長(zhǎng)的菌落數(shù)均在30?300之間，則視兩者的比值來(lái)確定。若其比值小于或等于2，應(yīng)報(bào)告平均數(shù)；若大于2則報(bào)告其中較小的數(shù)字，（見表中例2及3）。若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告（見表中例4）。若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告（見表中例5）。若所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng)，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告（見表中例6）。若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30?300之間，其中一部分大于300或小于30時(shí)，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告（見表中例7）。菌落數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)，按其實(shí)有數(shù)報(bào)告，大于100時(shí)，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面得數(shù)值，以四舍五入方法計(jì)算。為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)，也可用10的指數(shù)來(lái)表示（見表中“報(bào)告方式”欄）。稀釋度選擇及菌落數(shù)報(bào)告方式例次稀釋液及菌落數(shù)兩稀釋液之比菌落總數(shù)個(gè)/g或ml報(bào)告方式個(gè)/g或ml10-410-210-31多不可計(jì)16420 1640016000或X1042多不可計(jì)295463775038000或X1043多不可計(jì)271602710027000或X1044多不可計(jì)多不可計(jì)313 313000310000或X105527115 270270或X1026000 <1X10<107多不可計(jì)30512 3050031000或X1046操作注意事項(xiàng)培養(yǎng)基溫度應(yīng)在46土1℃,溫度守高會(huì)影響細(xì)菌生長(zhǎng)，過(guò)低瓊脂易于凝固而不能與菌液充分混合，瓊脂應(yīng)放在水浴鍋內(nèi)，溫度為46土1℃。盡量使菌細(xì)胞分散開，使每個(gè)菌細(xì)胞生成一個(gè)菌落，否則將會(huì)導(dǎo)致重大的技術(shù)誤差。36±1℃檢樣稀釋后，應(yīng)盡快按中，傾到培養(yǎng)基。一般從檢樣稀釋開始到傾到培養(yǎng)基，應(yīng)在15mm內(nèi)操作完畢。注意抑菌現(xiàn)象。由于防腐劑未被中和，往往使平板計(jì)數(shù)結(jié)果受影響，如低稀釋時(shí)菌落少而高稀釋度使菌落反而增大。對(duì)照試驗(yàn)。為了避免微小顆粒與細(xì)菌菌落發(fā)生混淆，可作一個(gè)檢樣稀釋液與瓊脂混合的平板，不經(jīng)培養(yǎng)放到4℃環(huán)境中，以便計(jì)數(shù)菌落時(shí)用作對(duì)照。培養(yǎng)濕度。培養(yǎng)箱應(yīng)保持一定的濕度，瓊脂平板培養(yǎng)48h后，培養(yǎng)基失重不應(yīng)超過(guò)15%。7菌落計(jì)數(shù)及報(bào)告注意事項(xiàng)如果稀釋度大的平板上菌落數(shù)反比稀釋小的平板上菌落數(shù)高,有兩種可能性：一是檢驗(yàn)工作中發(fā)生差錯(cuò)；二是受防腐劑影響。這二種情況不可用作檢樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù)。如果平板上出現(xiàn)鏈狀菌落，菌落之間沒有明顯的界限，這是在瓊脂與檢樣混合時(shí)，一個(gè)細(xì)胞塊被分散所造成。一條鏈作為一個(gè)菌落計(jì)，如有來(lái)源不同的幾條鏈，每條鏈應(yīng)作為一個(gè)菌落計(jì)，不要把鏈上生長(zhǎng)的各個(gè)菌落分開來(lái)數(shù)。此外，如皿內(nèi)瓊脂凝固后未及時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)而遭受昆蟲侵入，在昆蟲爬過(guò)的地方也會(huì)出現(xiàn)鏈狀菌落，也不應(yīng)分開來(lái)數(shù)。如果所有平板上都菌落密布，不要用多不可計(jì)報(bào)告，而應(yīng)在稀釋最大的平板上，任意數(shù)其中兩個(gè)平方厘米中的菌落數(shù)，除以2求出1cm2內(nèi)平均菌落數(shù)，乘以皿底面積cm2,再乘以其稀釋倍數(shù)，以此結(jié)果作報(bào)告，例如：10-1?10-3稀釋度的所有平板上均菌落密布，而在10-3稀釋度的平板上任意數(shù)兩個(gè)平方厘米內(nèi)的菌落數(shù)是60個(gè)，皿底直徑為9cm，則該檢樣每克（或ml）中“估計(jì)”菌落數(shù)為：60^2XX1000=X106是按皿底直徑為9cm時(shí)計(jì)算而得的面積,如所用平皿底直徑不是9cm,應(yīng)另求面積.簽于檢樣中的細(xì)菌是以單個(gè)、成雙、鏈狀或成堆的形式存在，因而在平板上出現(xiàn)的菌落可以來(lái)源于細(xì)胞塊，也可來(lái)源于單個(gè)細(xì)胞，故平板上所得需氧和兼性厭氧的菌落數(shù)應(yīng)以單位重量（g）或容量（ml）的菌落形成單位（ColonyformingunitsCFU）報(bào)告更恰當(dāng)。乳與乳制品微生物檢驗(yàn)方法食品中大腸菌群的測(cè)定群：兩個(gè)不同種的微生物之間經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些介于這兩種之間的中間類型的菌種。例如：大腸桿菌與產(chǎn)氣腸細(xì)菌兩種之間的區(qū)分是十分明顯的，但另外還有一些菌種介于這兩種之間的中間類型，就是說(shuō)，他們?cè)谟H緣關(guān)系是比較接近一些菌種。在分類上，就是大腸桿菌，產(chǎn)氣腸細(xì)菌和一些中間型的菌種合歸為一群，就是大腸菌群。大腸菌群：指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌。該菌主要來(lái)源于人畜糞便，故以此作為糞便污染指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)食品的衛(wèi)生質(zhì)量，推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。食品中大腸菌群數(shù)系以100ml(g)檢樣內(nèi)大腸菌群最可能數(shù)(MPN)表示。設(shè)備和材料溫箱：36土1℃冰箱：0—4℃恒溫水?。?6土1℃天平顯微鏡均質(zhì)器或乳缽平皿：直徑90mm試管：18X180和20X200吸管1ml和10ml廣口瓶或三角燒瓶：容量為500ml玻璃珠：直徑約5mm載玻片酒精燈試管架培養(yǎng)基和試劑乳糖膽鹽發(fā)酵管：按中規(guī)定或按購(gòu)買的商用培養(yǎng)基配方配制。伊紅美蘭瓊脂平板：按中規(guī)定或按購(gòu)買的商用培養(yǎng)基配方配制。乳糖發(fā)酵管：按中規(guī)定或按購(gòu)買的商用培養(yǎng)基配方配制。生理鹽水革蘭氏染色液：按中規(guī)定。檢驗(yàn)程序見下頁(yè)大腸菌群檢驗(yàn)程序如下：

操作步驟檢樣稀釋以無(wú)菌操作檢樣25ml（或g）放于裝有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃內(nèi)（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠）或滅菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振搖或研磨做成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣最好用均質(zhì)器，8000?10000r/min的速度處理Imin,做成1：10的均勻稀釋液。用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)，振搖試管混勻，做成1：10的稀釋液。另取1ml滅菌吸管，按上條操作依次做10倍遞增稀釋液，每遞增稀釋一次，換用一支1ml滅吸管。根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)z樣污染情況的估計(jì)，選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種3管。乳糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)將待檢樣品接種于糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，接種量在1ml以上者，用雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管，1ml及1ml以下者，用單料乳糖膽鹽發(fā)酵管。每一稀釋度接種3管，置36土1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24土2h，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報(bào)告為大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣者，則按下列程序進(jìn)行。分離培養(yǎng)將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美蘭瓊脂平板上，置36土1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)18?24h,然后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實(shí)實(shí)驗(yàn)。證實(shí)實(shí)驗(yàn)（復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)）在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1?2個(gè)進(jìn)革蘭氏染色，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置36±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24±2h,觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無(wú)芽孢桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陰性。報(bào)告根據(jù)證實(shí)為腸菌群陰性的管數(shù)查MPN檢索表，報(bào)告每100ml（g）大腸菌群的最可能數(shù)。6注意事項(xiàng)：1）初發(fā)酵和證實(shí)試驗(yàn)乳糖發(fā)酵試驗(yàn)系樣品的發(fā)酵，不是純菌的發(fā)酵試驗(yàn)，所以初發(fā)酵陽(yáng)性并不代表在大腸菌群陽(yáng)性，因此，必須作進(jìn)一步證實(shí)試驗(yàn)。在食品檢驗(yàn)上（個(gè)別除外）一般來(lái)說(shuō)，來(lái)反上有典型的較多的大腸菌群菌落，革蘭氏陽(yáng)性桿菌，即可做出判斷。如果典型菌落甚少，則應(yīng)多挑選幾個(gè)菌落做證實(shí)試驗(yàn)，只做初發(fā)酵即判斷，對(duì)某些食品來(lái)說(shuō)誤差是很大的。有數(shù)據(jù)表明，食品中大腸檢驗(yàn)步驟的符合率，初發(fā)酵與證實(shí)試驗(yàn)相差很大。因此，在實(shí)際檢測(cè)工作中，證實(shí)試驗(yàn)是必需的。2）產(chǎn)氣量與倒管試驗(yàn)表明，在腸菌群的產(chǎn)氣量與大腸菌群的檢出北呈正相關(guān)系。但也隨樣品的種類而變。大腸菌群的產(chǎn)氣量多者可充滿整個(gè)倒氣管，少者可產(chǎn)生比小米粒還小的氣泡。如果對(duì)產(chǎn)酸但未產(chǎn)氣的乳糖發(fā)酵管如有疑問(wèn)，可用手輕輕打動(dòng)試管，如有氣泡沿管壁上浮，即應(yīng)考慮可能有氣體產(chǎn)生，而應(yīng)作進(jìn)一步試驗(yàn)。另外，產(chǎn)氣量與倒氣管有一定的關(guān)系，倒氣管口不完整，有利于氣體的進(jìn)入；管口周圍有沉淀等物質(zhì)能影響氣體的進(jìn)入。3）挑選菌落在平板呈現(xiàn)紫黑色，有或無(wú)金屬光澤，檢出率最高，粉紅色、粉色檢出率最低。另外，只挑選一個(gè)菌落影響大腸菌群的檢出率，當(dāng)菌落不典型時(shí)，應(yīng)挑取2?3個(gè)菌落作證實(shí)試驗(yàn)，以免出現(xiàn)假陰性。4）抑菌劑大腸菌群檢驗(yàn)中常用的抑菌劑有膽鹽、十二烷基硫酸鈉、洗衣粉、煌綠、龍膽紫、孔雀綠等。膽鹽的主要作用是抑制其它雜菌，特別是革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)。有些抑菌劑量甚微，稱量時(shí)稍有誤差，即可對(duì)抑菌作用產(chǎn)生影響，因此抑菌劑的添加應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)方法添加。5）指示劑溴甲酚紫屬于酸堿示劑，其PH變色范圍為：黃?紫，當(dāng)料管中培養(yǎng)基（PH二土的顏色由紫色變?yōu)辄S色時(shí)，證明培養(yǎng)基中有酸性物質(zhì)產(chǎn)生,此時(shí)培養(yǎng)基的<,培養(yǎng)基呈酸性。6）MPN檢索表MPN為最大可能數(shù)的管稱，表示樣品中活菌的密度，是用概率論表推算樣品中菌數(shù)最近似的數(shù)值。MPN檢索表只給出了三個(gè)稀釋度，如果改用不同的稀釋度，則表內(nèi)數(shù)值應(yīng)相應(yīng)降低或增加10倍。乳與乳制品微生物檢驗(yàn)方法嗜冷菌檢測(cè)方法方法一：基準(zhǔn)法一6.5℃,培養(yǎng)10天（仲載法）。1范圍此方法用于原奶和巴氏殺菌奶的檢驗(yàn)。2方法提要準(zhǔn)備好倒有培養(yǎng)基和定量稀釋適當(dāng)倍數(shù)的被測(cè)樣的培養(yǎng)皿。將培養(yǎng)皿在6.5℃條件下培養(yǎng)10天。根據(jù)培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)計(jì)算出每毫升樣品中的菌落數(shù)，選擇菌落數(shù)比較恰當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)比較得當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)皿進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。3試劑稀釋液生理鹽水：%的氯化鈉水溶液,滅菌。培養(yǎng)基平板計(jì)數(shù)瓊脂23.5g+脫脂奶粉1g,溶于1000ml水中。必要時(shí)用濾紙過(guò)濾。調(diào)節(jié)PH值為土。將培養(yǎng)基分裝倒入三角瓶中，每瓶100—150ml。在121±1℃下滅菌15min，如果培養(yǎng)基馬上要用，用水浴鍋冷卻到46±1℃。如果不是，則為了不耽誤培養(yǎng)基的使用，在實(shí)驗(yàn)開始前，將培養(yǎng)基放入沸騰水浴中使其完全熔化，然后再放入水浴中冷卻到46±1℃。注：其中脫脂粉應(yīng)該不含有抑菌劑4儀器及玻璃器皿微生物實(shí)驗(yàn)室常用儀器，制備和稀釋樣品所用儀器以及：培養(yǎng)箱，可以調(diào)節(jié)并保持到±0.5℃PH計(jì)，帶溫度補(bǔ)償，精度為水浴，可以保持到46±1℃三角瓶，250—300ml，帶合適的塞子。吸管，用嘴吸的吸管要用脫脂棉或纖維素塞緊。培養(yǎng)皿，玻璃或塑料的，直徑在90—100mm乳與乳制品微生物檢驗(yàn)霉菌和酵母菌的檢驗(yàn)霉菌和酵母菌介紹：霉菌和酵母菌及其檢驗(yàn)酵母菌是真菌中的一大類，通常是單細(xì)胞，呈圓形，卵圓形、臘腸形或桿狀。霉菌也是真菌，能夠形成疏松的絨毛狀的菌絲體的真菌稱為霉菌。由于它們生長(zhǎng)緩慢和競(jìng)爭(zhēng)能力不強(qiáng)，故常常在不適于細(xì)菌生長(zhǎng)的食品中出現(xiàn)，這些食品是PH低、濕度低、含鹽和含糖高的食品、低溫貯藏的食品，含有抗菌素的食品等。由于霉菌和酵母能抵抗熱、冷凍，以及抗菌素和輻照等貯藏及保藏技術(shù)，它們能轉(zhuǎn)換某些不利于細(xì)菌的物質(zhì)，而促進(jìn)致病細(xì)菌的生長(zhǎng)；有些霉菌能夠合成有毒代謝產(chǎn)物一霉菌毒素。霉菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。例如，酵母在機(jī)關(guān)報(bào)鮮的和加工的食品中繁殖，可使食品發(fā)生難聞的異味，它還可以使液體發(fā)生混蟲，產(chǎn)生氣泡，形成薄膜，改變顏色及散發(fā)不正常的氣味等。因此霉菌和酵母也作為評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量的指示菌，并以霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)來(lái)制定食品被污染的程度。設(shè)備和材料溫箱：25?28℃振蕩器天平顯微鏡具塞三角瓶試管：15mmX150mm平皿：直徑9cm酒精燈吸管：1ml及10ml載物玻片蓋玻片廣口瓶牛皮紙袋：121℃滅菌20min金屬勺、刀等試管架接種針橡皮乳頭培養(yǎng)基和試劑在霉菌和酵母計(jì)數(shù)中，主要使用下幾種選擇性培養(yǎng)基。馬鈴薯-葡萄-瓊脂培養(yǎng)基（PDA）：霉菌和酵母菌在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。用PDA作平板計(jì)數(shù)時(shí)，必項(xiàng)加入抗菌素以抑制細(xì)菌。按中規(guī)定。孟加拉紅（虎紅）培養(yǎng)基：該培養(yǎng)基中的孟加拉紅和抗菌素肯有抑制細(xì)菌的紅色有助于霉菌和酵母菌落的計(jì)數(shù)。按中規(guī)定。高鹽察氏培養(yǎng)基：糧食和食品中常見的曲霉和青霉在該培養(yǎng)基上分離效果良好，它具有抑制細(xì)菌和減緩生長(zhǎng)速度快的毛霉科菌種的作和。按中規(guī)定。滅菌蒸餾水75%乙醇溶液檢驗(yàn)程序見下頁(yè)

6操作步驟采樣:取樣時(shí)須特別注意樣品的代表性避免采樣時(shí)的污染。首先準(zhǔn)備好滅容器和采樣工具，乳滅菌牛皮紙袋或廣口瓶，金屬刀或勺等。在衛(wèi)生學(xué)調(diào)果基礎(chǔ)上，采取有代表性的樣品。樣品采集后應(yīng)盡快檢驗(yàn)，否則應(yīng)將樣品低溫處干燥處。糧食（包括糧庫(kù)貯糧，糧店或家庭小量存糧）樣品的采集，可根據(jù)糧囤或糧垛的大小和類型，分層定點(diǎn)取樣，一般可分一層五點(diǎn)，或分層隨機(jī)采取不同點(diǎn)的樣品，從粉混勻后，取500g左右送檢。小量存糧可使用金屬小勻采取上、下、下各部位的混合樣品。海運(yùn)進(jìn)口糧的采樣：每一倉(cāng)采取表層、上層、中層及下層四個(gè)樣品，每層從五點(diǎn)取樣混合，如船倉(cāng)盛糧超過(guò)10001，則應(yīng)加采一個(gè)樣品送檢。谷物加工制品（包括熟飯、糕點(diǎn)、面包等）、發(fā)酵食品、乳與乳制品以及其他液體食品，用滅菌工具采集可凝霉變食品250g，裝入滅菌容器內(nèi)送檢。以無(wú)菌操作稱取檢驗(yàn)25g（25ml）,放入含有225ml滅菌水的玻賽三角瓶中，振搖30分鐘，即為1：10稀釋液。用滅菌吸管吸取1：10稀釋液10mL注入試管中，用帶橡皮乳頭的1ml吸管反復(fù)吹吸50次，使霉菌孢子充分散開。取1mll：10稀釋液注入含有9ml滅菌水的試管中，另?yè)Q一支1ml吸管吹吸5次，此液為1：100稀液。按上述操作