艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)

艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第1頁(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn):《艾滋病和艾滋病病毒感染診療標(biāo)準(zhǔn)》WS298-技術(shù)規(guī)范:《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》（年修訂版）

艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第2頁(yè)HIV抗體檢測(cè)HIV抗體檢測(cè)目標(biāo)HIV抗體檢測(cè)可用于監(jiān)測(cè)、診療、血液篩查：艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第3頁(yè)以監(jiān)測(cè)為目標(biāo)檢測(cè)是為了解不一樣人群HIV感染率及其改變趨勢(shì)，包含各類(lèi)高危人群、重點(diǎn)人群和普通人群。以診療為目標(biāo)檢測(cè)是為了確定個(gè)體HIV感染情況，包含臨床檢測(cè)、自愿咨詢(xún)檢測(cè)、術(shù)前檢測(cè)、依據(jù)特殊需要進(jìn)行體檢等。以血液篩查為目標(biāo)檢測(cè)是為了預(yù)防輸血傳輸HIV，包含獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。HIV抗體檢測(cè)目標(biāo)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第4頁(yè)1、依據(jù)目標(biāo)選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略。2、嚴(yán)格恪守試驗(yàn)室SOP。3、篩查試驗(yàn)陽(yáng)性，須作確證試驗(yàn)。4、篩查試驗(yàn)陰性，不應(yīng)做確證試驗(yàn)。5、篩查及確證試驗(yàn)陽(yáng)性均應(yīng)做好咨詢(xún)工作。HIV抗體檢測(cè)關(guān)鍵點(diǎn)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第5頁(yè)以診療為目標(biāo)檢測(cè)策略常規(guī)HIV抗體檢測(cè)分為篩查試驗(yàn)（包含初篩和復(fù)檢）和確證試驗(yàn)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第6頁(yè)篩查試劑必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)同意、在使用期內(nèi)試劑，其中酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)批批檢合格。推薦使用臨床質(zhì)量評(píng)定敏感性和特異性高試劑。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第7頁(yè)篩查樣品HIV抗體篩查可采取血清、血漿、濾紙干血斑、唾液和尿液樣品。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第8頁(yè)篩查方法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)快速檢測(cè)（RT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)

免疫滲濾試驗(yàn)免疫層析試驗(yàn)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第9頁(yè)(1)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）可使用血液、唾液、尿液樣品，ELISA多為單純HIV抗體檢測(cè)試劑。HIV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑可同時(shí)檢測(cè)血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗體。HIV抗原或抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶標(biāo)識(shí)HIV抗原或抗體，加底物顯色，用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果。有效試驗(yàn)陰性和陽(yáng)性對(duì)照必須符合試劑盒要求。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第10頁(yè)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確性高、價(jià)格低廉、判斷結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)客觀、結(jié)果便于統(tǒng)計(jì)和保留用途：流行病學(xué)監(jiān)測(cè)及臨床大量標(biāo)本檢測(cè)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第11頁(yè)(2)化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)采取發(fā)光或熒光底物，既可檢測(cè)抗體，也可聯(lián)合檢測(cè)抗原抗體。HIV抗原或抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶或熒光標(biāo)識(shí)HIV抗原或抗體，加發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測(cè)定結(jié)果。有效試驗(yàn)陰性和陽(yáng)性對(duì)照必須符合試劑盒要求。

艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第12頁(yè)(3)快速檢測(cè)（RT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)明膠顆粒凝集試驗(yàn)（PA）：是HIV血清抗體檢測(cè)一個(gè)簡(jiǎn)便方法。將HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體，與待檢樣品作用。當(dāng)待檢樣品含有HIV抗體時(shí)，明膠顆粒與抗體發(fā)生凝集反應(yīng)，依據(jù)凝集情況判讀結(jié)果。PA試劑有兩種：同時(shí)檢測(cè)HIV-1和HIV-2抗體以及分別檢測(cè)HIV-1和HIV-2抗體。有效試驗(yàn)必須有陰性和陽(yáng)性質(zhì)控。免疫滲濾試驗(yàn)：斑點(diǎn)ELISA和斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn)：均以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原點(diǎn)狀固定在膜上，加待檢樣品。陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)。反應(yīng)時(shí)間在10分鐘以?xún)?nèi)。有效試驗(yàn)質(zhì)控點(diǎn)必須顯色。免疫層析試驗(yàn)：以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原線狀固定在膜上，待檢樣品（血液或唾液）沿著固相載體遷移，陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶。有效試驗(yàn)質(zhì)控帶必須顯色。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第13頁(yè)優(yōu)點(diǎn):試驗(yàn)簡(jiǎn)便快速，不需專(zhuān)門(mén)設(shè)備和人員培訓(xùn),適合用于應(yīng)急檢測(cè)、門(mén)診急診檢測(cè)。普通可在10～30分鐘內(nèi)得出結(jié)果。缺點(diǎn):肉眼判斷較主觀、價(jià)格較貴、結(jié)果不易保留。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第14頁(yè)全血樣品加50ul樣品于樣品墊中手指血方法靜脈血方法加一滴緩沖液15分鐘內(nèi)讀取結(jié)果硒標(biāo)法圖示艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第15頁(yè)篩查程序初篩試驗(yàn)依據(jù)檢測(cè)目標(biāo)選取符合要求篩查試劑對(duì)樣品進(jìn)行初篩檢測(cè)，對(duì)呈陰性反應(yīng)樣品，可出具HIV抗體陰性（-）匯報(bào)；對(duì)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品，需要深入做復(fù)檢試驗(yàn)和確證試驗(yàn)。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第16頁(yè)篩查程序復(fù)檢試驗(yàn)對(duì)初篩呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品，應(yīng)使用原有試劑和另外一個(gè)不一樣原理（或廠家）試劑，或另外兩種不一樣原理或不一樣廠家試劑進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)。假如初篩檢測(cè)使用抗原抗體聯(lián)合試劑，則復(fù)檢必須包含一個(gè)抗原抗體聯(lián)合試劑。假如抗原抗體聯(lián)合試劑檢測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)，而抗體試劑檢測(cè)為陰性反應(yīng)，則應(yīng)考慮進(jìn)行HIV-1p24抗原或核酸檢測(cè)，必要時(shí)進(jìn)行隨訪。

艾滋病檢測(cè)篩查試驗(yàn)室復(fù)檢判定為陽(yáng)性反應(yīng)樣品，確證試驗(yàn)室能夠直接進(jìn)行確證試驗(yàn)。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第17頁(yè)樣品初篩試驗(yàn)一陰一陽(yáng)均陽(yáng)性反應(yīng)匯報(bào)陰性確證試驗(yàn)復(fù)檢試驗(yàn)匯報(bào)陰性均陰性反應(yīng)陽(yáng)性反應(yīng)原有試劑＋另一不一樣原理（或廠家）試劑或另外兩種不一樣原理（或廠家）試劑選取篩查試劑陰性反應(yīng)HIV抗體篩查檢測(cè)流程圖艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第18頁(yè)篩查程序篩查試驗(yàn)結(jié)果匯報(bào)HIV抗體初篩試驗(yàn)用附表1進(jìn)行匯報(bào)，陰性反應(yīng)匯報(bào)為“HIV抗體陰性（-）”；陽(yáng)性反應(yīng)匯報(bào)為“HIV抗體待復(fù)檢”。HIV抗體復(fù)檢試驗(yàn)用附表2進(jìn)行匯報(bào)，兩次檢測(cè)均陽(yáng)性或一陰一陽(yáng)匯報(bào)為“HIV抗體待確證”；兩次檢測(cè)均陰性匯報(bào)為“HIV抗體陰性（-）”。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第19頁(yè)篩查程序篩查試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)樣品轉(zhuǎn)送如需送上級(jí)試驗(yàn)室進(jìn)行復(fù)檢，需要查對(duì)身份，補(bǔ)充個(gè)人信息（如姓名和身份證號(hào)碼），必要時(shí)采集第二份血樣，持HIV抗體篩查匯報(bào)，送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心試驗(yàn)室，或直接送確證試驗(yàn)室復(fù)檢。HIV抗體復(fù)檢試驗(yàn)用附表2進(jìn)行匯報(bào)，兩次檢測(cè)均陽(yáng)性或一陰一陽(yáng)匯報(bào)為“HIV抗體待確證”；兩次檢測(cè)均陰性匯報(bào)為“HIV抗體陰性（-）”。HIV抗體復(fù)檢匯報(bào)需由1名檢驗(yàn)人員和1名審核人員簽字。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第20頁(yè)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第21頁(yè)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第22頁(yè)HIV抗體確證試驗(yàn)確證試劑：必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)同意、在使用期內(nèi)試劑。確證樣品：可采取血清、血漿、濾紙干血斑確證方法：包含免疫印跡試驗(yàn)(WB)、條帶免疫試驗(yàn)(LIATEKHIVⅢ)、放射免疫沉淀試驗(yàn)(RIPA)及免疫熒光試驗(yàn)(IFA)。

我國(guó)常見(jiàn)確實(shí)證試驗(yàn)方法是WB。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第23頁(yè)確證流程

使用HIV-1/2混合型試劑進(jìn)行檢測(cè)，假如呈陰性反應(yīng)，則匯報(bào)HIV抗體陰性（－）；假如呈陽(yáng)性反應(yīng)，則匯報(bào)HIV-1抗體陽(yáng)性（＋）；假如不是陰性反應(yīng)，但又不滿(mǎn)足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，則匯報(bào)HIV抗體不確定（±）。結(jié)合流行病學(xué)資料，能夠在4周后隨訪檢測(cè)，如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)，則匯報(bào)陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，則匯報(bào)陽(yáng)性；如隨訪期間帶型有進(jìn)展，但不滿(mǎn)足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。8周后如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)則匯報(bào)陰性；滿(mǎn)足HIV抗體陽(yáng)性診療標(biāo)準(zhǔn)則匯報(bào)陽(yáng)性，不滿(mǎn)足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。隨訪期間可依據(jù)需要，檢測(cè)病毒核酸或P24抗原作為輔助診療。假如出現(xiàn)HIV-2型特異性指示條帶，依據(jù)實(shí)際情況需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2抗體確證試驗(yàn)或HIV-2核酸檢測(cè)，以深入明確HIV-2感染狀態(tài)，疑難樣品送國(guó)家艾滋病參比試驗(yàn)室深入分析。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第24頁(yè)HIV抗體確證檢測(cè)流程圖確證試劑篩查試驗(yàn)陽(yáng)性反應(yīng)樣品依據(jù)詳細(xì)情況深入檢測(cè)HIV-2匯報(bào)陰性出現(xiàn)HIV-2指示條帶陰性反應(yīng)不確定反應(yīng)匯報(bào)HIV-1陽(yáng)性HIV-1陽(yáng)性反應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)資料，能夠在4周后隨訪檢測(cè)，如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)，則匯報(bào)陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，則匯報(bào)陽(yáng)性；如隨訪期間帶型有進(jìn)展，但不滿(mǎn)足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。如帶型沒(méi)有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)則匯報(bào)陰性；滿(mǎn)足HIV抗體陽(yáng)性診療標(biāo)準(zhǔn)則匯報(bào)陽(yáng)性，不滿(mǎn)足陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第25頁(yè)HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果判定注：①HIV-1抗體特異帶包含：env帶：gp160/gp120、gp41；gag帶：p55、p24、p17（或p18）；pol帶：p66（或p65）、p51、p31。②HIV-2抗體特異條帶包含：env帶：gp140/gp105、gp36；gag帶：p56、p26、p16；pol帶：p68、p53、p34。（因?yàn)槭褂枚局瓴灰粯?，HIV-2env帶也可為gp125/gp80、gp36）。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第26頁(yè)HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果a強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照（HIV-1和HIV-2）b弱陽(yáng)性對(duì)照（HIV-1）c陰性對(duì)照d經(jīng)典HIV-2血清陽(yáng)性反應(yīng)abcdgp160gp120p66p55p51gp41p39p31P24p17

血清對(duì)照HIV-2特異帶艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第27頁(yè)HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果判定

（1）HIV-1抗體陽(yáng)性同時(shí)符合以下2條標(biāo)準(zhǔn)可判為HIV-1抗體陽(yáng)性：①最少有2條env帶（gp41和gp160/gp120）出現(xiàn)，或最少1條env帶和p24帶同時(shí)出現(xiàn)；②符合試劑盒提供陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第28頁(yè)試劑盒提供陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)是

2條env（

Gp160/gp41＋gp120）andpol（p66、p51、p31）

orgag（p55、p24、p17）

Gp160

＋

gp120

＋

p66/p51/p31/p55/p24/p17或

Gp41

＋

gp120

＋

p66/p51/p31/p55/p24/p17

Gp160

＋

gp120

＋

p24艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第29頁(yè)HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果判定（2）HIV-2抗體陽(yáng)性出現(xiàn)HIV-2型特異性指示帶樣品：假如同時(shí)呈HIV-1抗體陽(yáng)性反應(yīng)，匯報(bào)HIV-1抗體陽(yáng)性，不推薦深入做HIV-2抗體確證試驗(yàn)；假如同時(shí)呈HIV-1抗體不確定或陰性反應(yīng)，需用HIV-2型確證試劑再做HIV-2抗體確證試驗(yàn)。同時(shí)符合以下二條標(biāo)準(zhǔn)，即出現(xiàn)最少2條env帶（gp36和gp140/gp105），和試劑盒提供陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)，可判為HIV-2抗體陽(yáng)性。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第30頁(yè)HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果判定3）HIV抗體不確定出現(xiàn)HIV抗體特異帶，但不足以判定陽(yáng)性。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第31頁(yè)（4）HIV抗體陰性無(wú)HIV抗體特異帶出現(xiàn)。HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果判定艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第32頁(yè)HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果匯報(bào)HIV抗體確證試驗(yàn)結(jié)果用附表3匯報(bào)。（1）符合HIV-1/HIV-2抗體陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，匯報(bào)“HIV-1/HIV-2抗體陽(yáng)性（＋）”，并按要求做好檢測(cè)后咨詢(xún)、保密和疫情匯報(bào)工作。（2）符合HIV抗體陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)，匯報(bào)“HIV抗體陰性（－）”。如疑似“窗口期”感染，提議深入做HIV核酸檢測(cè)，盡早明確診療。（3）符合HIV抗體不確定判斷標(biāo)準(zhǔn)，匯報(bào)“HIV抗體不確定（±）”，在備注中應(yīng)注明“4周后復(fù)檢”。艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范hiv抗體檢測(cè)第33頁(yè)發(fā)出確證匯報(bào)同時(shí)要做好檢測(cè)后咨詢(xún)。HIV抗體確證匯報(bào)由檢測(cè)者，復(fù)核人員和簽發(fā)人員簽字后，按原送檢程序反饋一式三份（確證試驗(yàn)室一份、送檢單位一份、患者一份）。如確證對(duì)象戶(hù)口不屬于本轄區(qū)，確證匯報(bào)應(yīng)同時(shí)抄送感染者戶(hù)口所在地省艾滋病確證中心試驗(yàn)室。其它系統(tǒng)確證地方