ADR的建立及其生物學(xué)特性的相關(guān)研究的開題報(bào)告

人乳腺癌多藥耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADR’的建立及其生物學(xué)特性的相關(guān)研究的開題報(bào)告開題報(bào)告一、課題背景人乳腺癌是全球最常見的惡性腫瘤之一，在女性的死亡原因中排名第二位。對(duì)于早期乳腺癌，手術(shù)切除是主要的治療方式，但對(duì)于中晚期或轉(zhuǎn)移性乳腺癌，藥物治療是一種重要的手段。然而，隨著化療的廣泛應(yīng)用，乳腺癌患者的多藥耐藥現(xiàn)象也日益突顯。MCF-7/ADR’是一種多藥耐藥的人乳腺癌細(xì)胞株，已被廣泛應(yīng)用于乳腺癌的基礎(chǔ)和臨床研究中。然而，其具體的多藥耐藥機(jī)制以及生物學(xué)特性尚需進(jìn)一步探究。二、研究目的本項(xiàng)目旨在建立人乳腺癌多藥耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADR’，并對(duì)其進(jìn)行生物學(xué)特性的相關(guān)研究，揭示其多藥耐藥機(jī)制，為乳腺癌的治療提供新思路和方法。三、研究內(nèi)容1.構(gòu)建人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7/ADR’采用細(xì)胞耐藥的逐步選擇法，將初始的MCF-7細(xì)胞株逐步暴露于遞增濃度的阿霉素和多柿油配伍化療藥物中，篩選出耐藥的細(xì)胞株，并鑒定其抗藥性。同時(shí)，通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)、克隆形成實(shí)驗(yàn)等方法，進(jìn)行細(xì)胞株的穩(wěn)定性評(píng)價(jià)。2.多藥耐藥機(jī)制的研究采用蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)等方法對(duì)MCF-7/ADR’細(xì)胞株和其對(duì)照組（MCF-7）進(jìn)行比較分析，篩選出與多藥耐藥表型相關(guān)的差異表達(dá)基因和差異表達(dá)蛋白。進(jìn)一步探討這些基因和蛋白在多藥耐藥機(jī)制中的作用，為尋找新的靶向治療策略提供依據(jù)。3.生物學(xué)特性的研究對(duì)MCF-7/ADR’細(xì)胞株的細(xì)胞周期、凋亡、增殖以及侵襲、遷移等生物學(xué)特性進(jìn)行研究，為揭示其多藥耐藥機(jī)制提供依據(jù)。同時(shí)，對(duì)MCF-7細(xì)胞株和MCF-7/ADR’細(xì)胞株的藥物敏感性進(jìn)行比較分析，找出其敏感性差異的原因。四、研究意義1.為深入理解乳腺癌多藥耐藥機(jī)制提供了一種有代表性的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?.為尋找新的靶向治療策略提供了依據(jù)和思路。3.為優(yōu)化乳腺癌化療方案和提高預(yù)后水平提供了參考。五、預(yù)期成果1.成功建立MCF-7/ADR’細(xì)胞株，對(duì)其進(jìn)行抗藥性鑒定。2.通過多組學(xué)方法分析，篩選出與多藥耐藥表型相關(guān)的差異表達(dá)基因和差異表達(dá)蛋白。3.揭示MCF-7/ADR’細(xì)胞株的生物學(xué)特性。4.為深入探究乳腺癌多藥耐藥機(jī)制和尋找新的靶向治療策略提供依據(jù)。六、研究方案1.細(xì)胞株的構(gòu)建和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)選用MCF-7人乳腺癌細(xì)胞株作為起始材料，經(jīng)過逐步選擇法篩選出多藥耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADR’。利用細(xì)胞形態(tài)學(xué)、克隆形成實(shí)驗(yàn)等方法對(duì)細(xì)胞株進(jìn)行穩(wěn)定性評(píng)價(jià)。2.差異表達(dá)基因和差異表達(dá)蛋白的篩選和功能研究通過RNA測序和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)MCF-7/ADR’細(xì)胞株和MCF-7細(xì)胞株進(jìn)行比較分析，篩選出與多藥耐藥表型相關(guān)的差異表達(dá)基因和差異表達(dá)蛋白。進(jìn)一步探討這些基因和蛋白在多藥耐藥機(jī)制中的作用，為尋找新的靶向治療策略提供依據(jù)。3.生物學(xué)特性的研究對(duì)MCF-7/ADR’細(xì)胞株和MCF-7細(xì)胞株的生物學(xué)特性進(jìn)行比較研究，包括細(xì)胞周期、凋亡、增殖、侵襲和遷移等方面。同時(shí)，對(duì)細(xì)胞株的藥物敏感性進(jìn)行比較分析，探究多藥耐藥機(jī)制的產(chǎn)生原因。七、預(yù)期時(shí)間安排本項(xiàng)目預(yù)計(jì)完成時(shí)間為18個(gè)月。第1-4個(gè)月：細(xì)胞株的構(gòu)建和穩(wěn)定性評(píng)價(jià)；第5-12個(gè)月：差異表達(dá)基因和差異表達(dá)蛋白的篩選和功能研究；第13-18個(gè)月：生物學(xué)特性的研究和數(shù)據(jù)分析；第19-20個(gè)月：論文撰寫和答辯。八、參考文獻(xiàn)1.李曉霞.MCF-7/ADR多藥耐藥型乳腺癌細(xì)胞株靶向治療的研究[J].北京醫(yī)學(xué),2019,41(6):791-794.2.陳麗.MDR與MCF-7/ADR的分子機(jī)制分析[J].中國臨床醫(yī)學(xué),2017,24(34):7917-7920.3.ChaveyC，BacacM，EsteveD，etal.MCF-7cells,xenograftedtumorsandMCF-10Acellsmimickingductalcarcinomainsituexposedtoinvitrointermittenthypoxiareproducethemainfeaturesoftumorrefractorinessandcellulardiv