KGF噬菌體活性肽構(gòu)建及防治放射性口炎的實驗研究的開題報告

KGF噬菌體活性肽構(gòu)建及防治放射性口炎的實驗研究的開題報告題目：KGF噬菌體活性肽構(gòu)建及防治放射性口炎的實驗研究研究背景及意義：放射治療是目前臨床中治療癌癥的重要方法之一，但同時也帶來了一系列不良反應(yīng)，其中放射性口炎是較為常見的一種放射反應(yīng)，主要表現(xiàn)為口腔黏膜紅腫、疼痛、潰瘍等癥狀，病情輕重不一。目前治療放射性口炎的方法較為局限，主要包括口腔清潔、口腔護(hù)理和給予治療性營養(yǎng)等。因此，開發(fā)一種有效的治療放射性口炎的方法具有重要意義。KGF（keratinocytegrowthfactor）是一種由成纖維細(xì)胞分泌的成纖維細(xì)胞生長因子，能夠刺激上皮細(xì)胞生長和修復(fù)損傷。近年來的研究表明，KGF噬菌體活性肽具有與原KGF類似的生物活性，能夠促進(jìn)上皮細(xì)胞增殖和恢復(fù)，有望成為治療放射性口炎的新方法。因此，本研究將構(gòu)建KGF噬菌體活性肽，并進(jìn)行實驗研究，探討其對放射性口炎的治療效果，為治療放射性口炎提供新的治療思路和方法。研究內(nèi)容：1.利用PCR技術(shù)從人類KGF基因中克隆KGF噬菌體活性肽基因，構(gòu)建KGF噬菌體活性肽表達(dá)質(zhì)粒。2.將表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，利用純化手段獲得純化的KGF噬菌體活性肽。3.構(gòu)建不同濃度的KGF噬菌體活性肽溶液，對放射性口炎小鼠模型進(jìn)行治療，并評估治療效果。4.利用免疫組化、免疫印跡等技術(shù)，探究KGF噬菌體活性肽在放射性口炎治療中的作用機(jī)制。研究方法：1.克隆KGF噬菌體活性肽基因。從人類KGF基因中設(shè)計特異性引物，通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。2.構(gòu)建KGF噬菌體活性肽表達(dá)質(zhì)粒。將擴(kuò)增得到的KGF噬菌體活性肽基因與表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行重組，構(gòu)建KGF噬菌體活性肽表達(dá)質(zhì)粒。3.表達(dá)和純化KGF噬菌體活性肽。將KGF噬菌體活性肽表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，并利用柱層析等純化手段獲得純化的KGF噬菌體活性肽。4.建立放射性口炎小鼠模型。將小鼠分為對照組、模型組和不同劑量KGF噬菌體活性肽組，用60Co放射線照射小鼠口腔黏膜建立放射性口炎模型。5.治療實驗和評估。對不同劑量KGF噬菌體活性肽組進(jìn)行不同濃度的KGF噬菌體活性肽溶液治療，并觀察治療效果。6.探究作用機(jī)制。使用免疫組化、免疫印跡等技術(shù)，探究KGF噬菌體活性肽對上皮細(xì)胞增殖和修復(fù)的作用機(jī)制。預(yù)期成果：1.克隆KGF噬菌體活性肽基因，構(gòu)建KGF噬菌體活性肽表達(dá)質(zhì)粒。2.利用純化手段獲得純化的KGF噬菌體活性肽。3.探究KGF噬菌體活性肽對放射性口炎的治療效果和作用機(jī)制。4.為治療放射性口炎提供新的治療思路和方法。參考文獻(xiàn)：1.KuoM.Y.,SavarajN.,IshikawaT.etal.Enhancedgeneexpressionofkeratinocytegrowthfactorinhumanpapillomavirus-immortalizedcervicalcelllinesanditsrestorationfollowingretinoicacid-induceddifferentiation.Oncogene,1997.2.RatanatharathornV.,NashM.A.,PrasadU.etal.Useofkeratinocytegrowthfactorinthepreventiono