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第一章概論1.臨床檢驗儀器常用性能指標(biāo)〔可能考問答題〕1靈敏度2誤差3噪聲4最小檢測量5準(zhǔn)確度6牢靠性7重復(fù)性8區(qū)分率9測量范圍和示值范圍10線性范圍11響應(yīng)時間12頻率影響范圍靈敏度:檢驗儀器在穩(wěn)態(tài)下輸出量變化與輸入量變化之比。差異。噪音:檢測儀器在沒有參與被檢物品時,儀器輸出信號的波動或變化范圍。最小檢出量:檢驗儀器能精準(zhǔn)的反響最小物質(zhì)含量。準(zhǔn)確度:檢測值偏離真值的程度。其功能的力氣,反響儀器是否耐用的一項指標(biāo)。其次章離心機離心技術(shù):應(yīng)用離心沉降進(jìn)展物質(zhì)的分析和分別的技術(shù)離心機的工作原理:利用離心轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強大離心心機的轉(zhuǎn)數(shù)、顆粒的質(zhì)量、大小和密度。的向心力的反作用力。本身所受的重力而言,因此把這種離心力叫做相對離心力。離心機的分類:按轉(zhuǎn)數(shù)分為:低速、高速、超高速。離心機的最大容量:離心機一次可分別樣品的最大體積,m×n,一次可容納最多離心管×一個離心管容納樣品最大體積。為秒。離心機的根本構(gòu)造〔轉(zhuǎn)頭、調(diào)速器、定時器、離心套管與底座等主要部件構(gòu)成。其最大轉(zhuǎn)10000r/min15000xg以內(nèi)。高速〔冷凍〕離心機最大轉(zhuǎn)速為20230~25000r/min降速度不同,承受不同的離心速度和時間分步離心的方法。差速離心法的優(yōu)缺點:并可使用容量較大的角式轉(zhuǎn)子;分別時間短、重復(fù)性高;樣品處理量大。缺點:區(qū)分率有限、分別效果差,沉淀系數(shù)在同一個數(shù)量級活。密度梯度離心法:密度梯度離心法又稱區(qū)帶離心法,該方法度液中某些特定位置上,形成不同區(qū)帶的分別方法。密度梯度離心法的優(yōu)缺點:純的顆粒;分別范圍廣;第三章顯微鏡光學(xué)顯微鏡的工作原理:光學(xué)顯微鏡是利用光學(xué)原理,把人息的光學(xué)儀器。光學(xué)顯微鏡由兩組會聚透鏡組成光學(xué)折射系統(tǒng)。眼的明視距離處。光學(xué)顯微鏡的最小區(qū)分率是0.25um光學(xué)顯微鏡的根本構(gòu)造:光學(xué)系統(tǒng):物鏡、目鏡、聚光鏡、反光鏡。等運動夾持部件以及底座、鏡臂、鏡筒等支持部件〕光學(xué)顯微鏡放大倍數(shù)的計算顯微鏡的一半操作規(guī)程:1面移動把握旋鈕,將標(biāo)本放置在恰當(dāng)是位置,3旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器⑩樣品盡可能接近物鏡,假設(shè)有鎖死裝置需鎖死;4通過右目鏡觀看標(biāo)本,漸漸旋轉(zhuǎn)粗調(diào)使載物臺下降.,粗調(diào)聚焦后再用微調(diào)作像,5旋轉(zhuǎn)左目鏡上的屈光度調(diào)整環(huán),使樣品清楚可見,使雙眼視力差得到補償,6旋轉(zhuǎn)聚光鏡上下移動鈕將聚光鏡轉(zhuǎn)移到最高闌刻度盤使孔徑光闌調(diào)到大約為物鏡NA的80%的位置便可獲得高質(zhì)量的像,要留意更換物鏡后都要重調(diào)整孔徑光闌;7物質(zhì)鏡;8觀看并記錄。反射和透射,一局部光會被吸取,其能量以熱釋放出來。利用測含量和濃度。光的吸取定律:即郎伯-比爾定律,是比色分析的根本原理。表達(dá)了物質(zhì)對單色光吸取程度與溶液濃度和液層厚度之間的函數(shù)關(guān)系。A=-lgI/I0=lgI0/I=lg1/T=kbc郎伯-比爾定律適用條件:1入射光為單色光,2溶液濃度不能過大。檢測器、信號顯示系統(tǒng)、光源:供給入射光的裝置;光速的裝置,是分光光度計的關(guān)鍵部件;液的器件;檢測器:把光信號轉(zhuǎn)換為電信號的裝置。裝置。性;2.3.4.5.6.雜散7.基線穩(wěn)定度8.基線平直度紫外—可見分光光度計的根本分析方法〔1〕定性分析〔2〕定量分析〔3〕純度鑒定:在紫外光260n280n純RNAA260/A2802.0+—0.1DNA樣品的A260/A2801.8+—0.1,無論是RNA還是DNA,A260/2302.02.4。第五章臨床血液常規(guī)檢驗儀器血細(xì)胞BC:又稱血細(xì)胞自動計數(shù)儀ABC〔AHA〕異質(zhì)性進(jìn)展自動分析的常規(guī)檢驗儀器。其主要功能是血細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞分類、血紅蛋白測定、先關(guān)參數(shù)計算等。血細(xì)胞的細(xì)胞計數(shù)原理電阻抗型血細(xì)胞的細(xì)胞計數(shù)原理:血細(xì)胞與等滲相關(guān)參數(shù)。聯(lián)合檢測型血細(xì)胞的細(xì)胞計數(shù)原理:以流式技通道,將重疊限制到最低濃度。網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)分析根本原理:承受激光流式細(xì)胞分析技術(shù)與細(xì)胞化 學(xué)熒光染色技術(shù)聯(lián)合對網(wǎng)織紅進(jìn)展分析,利用網(wǎng)織紅中殘存的嗜堿性物質(zhì)—RN在活體狀態(tài)下與特別熒光料〔亞甲藍(lán)等〕結(jié)合,激光激發(fā)產(chǎn)生熒光,熒光強度與RNA正比用流式細(xì)胞技術(shù)檢測單個的網(wǎng)織紅的大小和細(xì)胞內(nèi)出網(wǎng)織紅技術(shù)及其他參數(shù)。血細(xì)胞測定Hb的原理:除干式離心分層型、無創(chuàng)型外,各種BCA對Hb測定都承受光電比色原理。血細(xì)胞懸RBCHb,后者與溶血劑中有關(guān)成分形成HbHb測試系統(tǒng)。在特定波長〔多為與不同型號BCA配套的溶血劑不同,形成Hb衍生物也不同,學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會〔ICSH〕推舉的氰化高鐵〔HiCN〕法的最大吸取540nmHbHiCN值為標(biāo)準(zhǔn)。血液凝固的凝固法是通過檢測血漿在凝血激活劑〔光、電、超聲、機械運動等〕的變化,再由計算機分析所的數(shù)據(jù)并將之換算成最終結(jié)果的方法。血液凝固檢測原理:血凝儀使用的主要檢測技術(shù)方栓/止血試驗中最根本、最常用的方法。半自動血凝儀以凝固法檢測為主,全自動血凝儀還可使用底物顯色發(fā)和免疫學(xué)法等。凝固法是通過檢測血漿在凝血激活劑作用下一系列物理、電、超聲、機械運動等〕的變化,再由計算機分析所得數(shù)據(jù)并將之換算成最終結(jié)果的方法,故也稱生物物理法。 按測量原理可分為電流法、超聲分析法、光學(xué)法、磁珠。第六章臨床血液流變學(xué)檢驗儀器粘度計。紅細(xì)胞電泳的通用指標(biāo),其結(jié)果對很多疾病的活動、復(fù)發(fā)、進(jìn)展有監(jiān)測作用。紅外線障礙法或激光光源掃描微量全血進(jìn)展檢測。影響紅細(xì)胞沉降的因素:1.紅細(xì)胞的大小和形態(tài);2.紅細(xì)胞的變形性;3.紅細(xì)胞聚攏性和相互作用;4紅細(xì)胞的壓積,5血漿介質(zhì)的上升流淌;6.沉降管的傾斜度。理系統(tǒng)。懸浮期線狀形成的聚攏期快速沉降期積壓的緩慢沉降期。尿液分析:是臨床診斷泌尿系統(tǒng)疾病的重要措施之一,〔包括藥物結(jié)晶〕等。這些檢查動化檢查供給了牢靠的手段?!部赡芸即箢}〕把試劑帶浸入反射光量值越?。悍粗?,反射率越大。由于顏色的深淺與光的反濃度。尿液的試劑帶構(gòu)造:單項試劑帶以濾紙為載體,將化pHEhrlich理或重氮反響原理⑧尿亞硝酸鹽測定:尿亞硝酸鹽試驗.了消退在測試過程中因每次測定試劑塊的位置不同而產(chǎn)生的測噪比?!材猃埬ぁ⒔q制層、吸水層、塑料底層〕。量把握、檢測后的質(zhì)量把握。流式全自動尿有形成分工作原理:流式全自動尿有豎直〕軸線,在這里每個尿液細(xì)胞被氬激光光束照耀。每〔如細(xì)胞膜、核膜、線粒體和核酸〕、前〔電〕。儀器將這種熒光、散射光等每個細(xì)胞并得出有關(guān)細(xì)胞的形態(tài)。樣裝置。主觀誤差,穩(wěn)定了檢驗質(zhì)量。流淌以,離心式、分立式和干化學(xué)式。算機系統(tǒng)。裝置,試劑倉,樣品和試劑取樣單元,攪拌系統(tǒng)。檢測系統(tǒng):12.分光裝置目前多用光柵。使用后分光少。3456.信號轉(zhuǎn)換與傳輸裝。。自動生化的性能指標(biāo):1系統(tǒng)打算。周密度是正確度的根底,主要取決于儀器各局部諸5.其他性能。自動生化的相關(guān)參數(shù):根本分析參數(shù)〔1〕終點分通過吸光度的檢測計算待測物濃度。該法簡便,但易受樣品、試選用一點法,如鈣、磷、鎂的測定②兩點法:常應(yīng)用于具有雙試劑的檢測工程。參與樣品后分別讀取試劑I、II度上消退樣品、試劑顏色、血清濁度及干擾物的影響。目前大多數(shù)生化檢測工程都可使用雙試劑,如血清總蛋白、白蛋白、總膽紅素、結(jié)合膽紅素、葡萄糖、總膽固醇、甘油三酯等的測定。③固定時間法:是終點分析法的一種狀況,可削減非特異性反響,指樣品和試劑混合后分別讀取延滯期后和反響確定時間后的吸光度,計算待測濃度?!?〕連續(xù)監(jiān)測法:又稱速率法,是通過光度隨時間的變化求出待測物濃度或活性的方法。〔3〕免疫投光路方向測量投射強度來測定物質(zhì)濃度,常承受終點法。雙波長或多波長37℃〔2〕雙試劑法:在反響法②雙試劑二點法③雙試劑雙波長法。第九章臨床電化學(xué)器質(zhì)的濃度轉(zhuǎn)變?yōu)殡妼W(xué)參數(shù)而進(jìn)展測量的方法血氣PCO2
電極:是一個氣敏電極,其前端有一極。PO電極:是一種Clark電極,屬于氣敏氧電極,也是極譜電2極。第十章臨床微生物檢測儀器2系統(tǒng)。自動血培育系統(tǒng)分為四類:1BioArgos系統(tǒng)、2Bact/Alert系統(tǒng)、 3、Bactec9000系列、4、Vital系統(tǒng),得到細(xì)菌名稱。濃度MIC值,并依據(jù)CLDI藥敏測試板:藥敏測試板分為常規(guī)測試板和快速熒光測試板。常規(guī)測試板原理為比濁法,如Vitek系統(tǒng),在含有抗菌藥物Sensititre光產(chǎn)生的濃度為最低抑菌濃度〔MIC〕第十一章臨床免疫檢驗儀器〔或異相〕酶免疫測定和均相酶免疫測定兩種。均相酶免疫分析法:以激素、藥物等小分子抗原或半抗原為中進(jìn)展,可直接用自動生化進(jìn)展測定。非均相酶免疫分析法:是在抗原抗體反響達(dá)平衡后,將游離測定,酶標(biāo)儀與一般光電比色計的不同之處在于,酶標(biāo)儀比色液的作分析,在各類試驗室已廣為應(yīng)用。線性測定、雙波長評估。心法,雙抗原夾心法:時間區(qū)分熒光免疫檢測原理:用鑭系三價稀土離子及其螯合到達(dá)定量分析的目的。定、熒光信號強。第十二章臨床即時檢驗儀器非重點章節(jié)即時檢驗POCT:也稱床邊檢驗,,指在患者身邊,由非檢驗專業(yè)人員利用便攜式儀器快速分析患者標(biāo)本并準(zhǔn)確獵取結(jié)內(nèi)進(jìn)展。:12值和社會意義;7儀器的檢測費用合理;8儀器試劑的應(yīng)用不應(yīng)對患者和工作人員的安康或?qū)Νh(huán)境造成不良影響。濃度呈現(xiàn)線性關(guān)系來計算血標(biāo)本中的葡萄糖濃度值。,甲狀腺激素檢測儀等。2.依據(jù)體積大小和重量分類便攜3.依據(jù)所用的一次性裝置分類卡片式裝置,單一或多墊試劑條,微制造裝置,生物傳感器裝置,其他多孔材料等多種裝置。兩大類第十三章PCRPCRDNA延長三個根本反響步驟構(gòu)成原位PCRPCR形態(tài)不被破壞,它是原位雜交與PCR技術(shù)的結(jié)合。以往手工技術(shù)PCRPCRPCRPCRPCRPCRPCRPCR用,比較經(jīng)濟(jì)。實時熒光定量PCRPCR源和檢測器。PCR擴(kuò)增儀的性能指標(biāo)〔一〕溫度把握:是打算PCR度,對PCR〔二〕熒光檢測范圍〔3〕儀器的檢測通道數(shù)量 〔三〕樣品基座容量和樣品數(shù)PCR核酸擴(kuò)增儀常見的故障的排解 熒光強度減弱或不穩(wěn)有濾光片發(fā)霉或有水氣等需工程師檢修或光源損耗,需更換光源;或需調(diào)整檢測元件靈敏度,也需工程師調(diào)試。PCRPCR儀設(shè)計格外獨到,不同樣品槽分別擁有獨立的智能升降溫模PCR件的定量PCR10℃/s,控溫精度高。每個光激發(fā)和檢測不受外界干擾。該類儀器整合多通道光學(xué)檢測系統(tǒng),能有效區(qū)分FAM/SYBRGreeni、Tet/Cy3、Texasredcy5光信號??墒褂肨aqmanAmplifluor9獨特的扁平反響管,使用本錢較高。適合多指標(biāo)快速檢測,但目前在國內(nèi)應(yīng)用尚少。CtCtCV≤2.5%。實時熒光定量PCR技術(shù)原理:熒光實時定量PCR是在PCR整個PCR析。第十四章DNA目前DNASanger法或Maxam—GilbertDNA第十五章流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀的分析原理:將特異熒光染料染色的單細(xì)胞經(jīng)管道進(jìn)入FCM過模數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入計算機。計算機通過相應(yīng)的軟件儲存、計算、分析這些數(shù)字化信息,就可得到細(xì)胞的大小、核酸含量、酶和抗30kHz息在細(xì)胞形成液滴以前在測量區(qū)已被測定,并儲存在計算機中,分選出的細(xì)胞可以進(jìn)一步分析、培育和爭論。息。兩種信號均來自于激光光速,其波長與激光一樣。積分測量,熒光信號的寬度常用于區(qū)分雙聯(lián)體細(xì)胞。第十六章臨床電泳器所帶電荷相反的電極移動的現(xiàn)象。等電聚焦電泳、雙向電泳、毛細(xì)管電泳。電泳的根本原理:物質(zhì)分子在正常狀況下一般不帶電,即所帶正負(fù)電荷量相等,故不顯示帶電性。但是在確定的物理作用或化學(xué)反響條件下,某些物質(zhì)分子會成為帶電的離子,不同的物質(zhì),由于其帶電性質(zhì)、顆粒性狀和大小不同,他們在確定影響電泳的外界因素:電場強度、溶液的pH子強度、電滲作用、粒子的遷移率、吸附作用。是將某些蛋白組分依據(jù)其帶電荷的不同而分開,再與抗體起反響,從而使此方法更為微量化、多樣化。免疫電泳可用于的爭論:抗原和抗體的相對應(yīng)性,測定樣或抗體的程度。20-100um。第十八章色譜器色譜法的根本原理:色譜分別中的兩相是指系統(tǒng)具有一〔可以是固體或以某種方式固定了的液體〔可以是氣體或液體〕。儀和高效液相色譜儀兩大類和尺寸。溫度把握:在氣相色譜儀的使用過程中,必需使用氣態(tài)樣品〔假設(shè)是液態(tài)樣品需要經(jīng)過氣化處理〕,溫度對樣品在色譜柱上的分別過程、對很多檢測器〔如熱導(dǎo)、電子捕獲、示差折光等〕的檢測結(jié)果等都有很大影響。因此,必需對色譜柱箱、檢測器和氣化室等實行溫度把握。其關(guān)鍵在于溫度條件的穩(wěn)定性,它將直接影響色譜柱的分別效率,保存參數(shù)的重復(fù)性以及檢測器的性能。 溫度對于固定相也格外重要。操作時確定要知道所用固定相溫度的極限,把全部界溫度以下10~15°進(jìn)展這將有助于延長柱子的使用壽命和避開檢測器與其他裝置受固定相“流失”所造成的污染。。其次十一章生物安全柜生物安全柜:是防止操作者和環(huán)境暴露于試驗過程中產(chǎn)主要設(shè)備。生物安全柜的工作原理:主要是將柜內(nèi)空氣向外抽收,后再排放到大氣中以保護(hù)環(huán)境。生物安全柜的分類:目前世界上生物安全柜領(lǐng)域執(zhí)行的20235EN12469:20232023〔YY0569-2023〕于2023EN12469:2023NSF49YY0569-2023標(biāo)準(zhǔn)的實施完畢了長期以來我國在生物安全柜方面缺乏統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的局面。Ⅱ,Ⅲ級。樣品安全的通風(fēng)安全柜。全
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