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文檔簡介

2024/4/24關(guān)于分子發(fā)光分析2024/4/24

分子發(fā)光包括熒光,磷光,化學(xué)發(fā)光,生物發(fā)光。室溫下,大多數(shù)分子處于基態(tài)的最低振動能級,處于基態(tài)的分子吸收能量(光能、化學(xué)能、電能或熱能)后被激發(fā)為激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)不穩(wěn)定,將很快衰變到基態(tài),若返回到基態(tài)時伴隨著光子的輻射,這種現(xiàn)象稱為“發(fā)光”。第2頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24一、熒光與磷光的產(chǎn)生過程

luminescenceprocessofmolecularfluorescencephosphorescence由分子結(jié)構(gòu)理論,主要討論熒光及磷光的產(chǎn)生機理。1.分子能級與躍遷分子能級比原子能級復(fù)雜;在每個電子能級上,都存在一系列的振動、轉(zhuǎn)動能級;

用S0表示基態(tài);第一、第二、…電子激發(fā)單重態(tài)S1、S2…

表示;第一、第二、…電子激發(fā)三重態(tài)T1、T2

表示;V=0,1,2,3表示振動能級。

第3頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/242.電子激發(fā)態(tài)的多重度

電子激發(fā)態(tài)的多重度:M=2S+1

S為電子自旋量子數(shù)的代數(shù)和(0或1);平行自旋比成對自旋穩(wěn)定(洪特規(guī)則),三重態(tài)能級比相應(yīng)單重態(tài)能級低;大多數(shù)有機分子的基態(tài)處于單重態(tài);

S0→T1

禁阻躍遷;通過其他途徑進入(見能級圖);

第4頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/242.激發(fā)態(tài)→基態(tài)的能量傳遞途徑

電子處于激發(fā)態(tài)是不穩(wěn)定狀態(tài),返回基態(tài)時,通過輻射躍遷(發(fā)光)和非輻射躍遷等方式失去能量;傳遞途徑輻射躍遷熒光磷光內(nèi)轉(zhuǎn)移外轉(zhuǎn)移系間竄越振動弛豫非輻射躍遷激發(fā)態(tài)→基態(tài):多種途徑和方式(見下頁能級圖);速度最快、激發(fā)態(tài)壽命最短的途徑占優(yōu)勢;第5頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24S2S1S0T1吸收發(fā)射熒光發(fā)射磷光系間竄越內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫能量l2l1l

3

外轉(zhuǎn)換l

2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫第6頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24非輻射能量傳遞過程

振動弛豫:同一電子能級內(nèi)以熱能量交換形式由高振動能級至低相鄰振動能級間的躍遷。發(fā)生振動弛豫的時間10-12

s。系間竄越:不同多重態(tài),有重疊的轉(zhuǎn)動能級間的非輻射躍遷。改變電子的自旋狀態(tài)。如S1—T1S2S1S0T1吸收發(fā)射熒光發(fā)射磷光系間竄越內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫能量l2l1l

3

外轉(zhuǎn)換l

2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫第7頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24非輻射能量傳遞過程內(nèi)轉(zhuǎn)換:相同多重度電子能級間的無輻射躍遷過程。如S2—S1,T2—T1。在10-13~10-11s內(nèi)完成。

外轉(zhuǎn)換:激發(fā)分子與溶劑或其他分子之間產(chǎn)生相互作用而轉(zhuǎn)移能量的非輻射躍遷;外轉(zhuǎn)換使熒光或磷光減弱或“猝滅”。S2S1S0T1吸收發(fā)射熒光發(fā)射磷光系間竄越內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫能量l2l1l

3

外轉(zhuǎn)換l

2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫第8頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24輻射能量傳遞過程

熒光發(fā)射:電子由第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級→基態(tài)(多為S1→S0躍遷),發(fā)射波長為

‘2的熒光;10-7~10-9

s。

由圖可見,發(fā)射熒光的能量比分子吸收的能量小,熒光的發(fā)射波長比吸收波長要長;

‘2>

2>

1;S2S1S0T1吸收發(fā)射熒光發(fā)射磷光系間竄越內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫能量l2l1l

3

外轉(zhuǎn)換l

2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫第9頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24輻射能量傳遞過程磷光發(fā)射:電子由第一激發(fā)三重態(tài)的最低振動能級→基態(tài)(T1→S0躍遷);電子由S0進入T1的可能過程:(S0→T1禁阻躍遷)

S0→激發(fā)→振動弛豫→內(nèi)轉(zhuǎn)移→系間跨越→振動弛豫→T1發(fā)光速度很慢:10-4~10s。光照停止后,可持續(xù)一段時間S2S1S0T1吸收發(fā)射熒光磷光系間竄越內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫能量l2l1l

3

外轉(zhuǎn)換l

2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫第10頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24二、激發(fā)光譜與發(fā)射光譜

excitationspectrumandfluore-scencespectrum熒光(磷光):光致發(fā)光,照射光波長如何選擇?1.熒光(磷光)的激發(fā)光譜曲線

固定測量波長(選最大發(fā)射波長),化合物發(fā)射的熒光(磷光)強度與照射光波長的關(guān)系曲線(圖中曲線I)。激發(fā)光譜曲線的最高處,處于激發(fā)態(tài)的分子最多,熒光強度最大;第11頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/242.熒光發(fā)射光譜(或磷光發(fā)射光譜)固定激發(fā)光波長(選最大激發(fā)波長),

化合物發(fā)射的熒光(或磷光強度)與發(fā)射光波長關(guān)系曲線(圖中曲線II或III)。第12頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/243.激發(fā)光譜與發(fā)射光譜的關(guān)系

a.Stokes位移

激發(fā)光譜與發(fā)射光譜之間的波長差值。發(fā)射光譜的波長比激發(fā)光譜的長,振動弛豫消耗了能量。

第13頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24b.發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長無關(guān)電子躍遷到不同激發(fā)態(tài)能級,吸收不同波長的能量(如能級圖

2,

1),產(chǎn)生不同吸收帶,但均回到第一激發(fā)單重態(tài)的最低振動能級再躍遷回到基態(tài),產(chǎn)生波長一定的熒光(如

‘2

)。

S2S1S0T1吸收發(fā)射熒光發(fā)射磷光系間竄越內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫能量l2l1l

3

外轉(zhuǎn)換l

2T2內(nèi)轉(zhuǎn)換振動弛豫第14頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24c.

鏡像規(guī)則通常熒光發(fā)射光譜與激發(fā)光譜成鏡像對稱關(guān)系。200250300350400450500熒光激發(fā)光譜熒光發(fā)射光譜nm蒽的激發(fā)光譜和熒光光譜第15頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24三、熒光的產(chǎn)生與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系

relationbetweenfluorescenceandmolecularstructure1.分子產(chǎn)生熒光必須具備的條件(1)具有合適的結(jié)構(gòu);(2)具有一定的熒光量子產(chǎn)率。熒光量子產(chǎn)率(

f):表示物質(zhì)發(fā)射熒光的能力第16頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24

熒光量子產(chǎn)率與激發(fā)態(tài)能量釋放各過程的速率常數(shù)有關(guān),可以用以下數(shù)學(xué)式表示。如外轉(zhuǎn)換過程速度快,不出現(xiàn)熒光發(fā)射;Kf-熒光發(fā)射過程的速率常數(shù)∑Ki—其他有關(guān)過程的速率常數(shù)的總和Kf主要決定于物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu),而∑Ki

則主要決定于物質(zhì)所處的化學(xué)環(huán)境。第17頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/242.化合物的結(jié)構(gòu)與熒光(1)躍遷類型:

*→的熒光效率高,系間跨越過程的速率常數(shù)小,有利于熒光的產(chǎn)生;(2)共軛效應(yīng):提高共軛度有利于增加熒光效率并產(chǎn)生紅移含→*躍遷能級的芳香族化合物的熒光最強化合物(在環(huán)己烷中)φf

λ/nm

0.07283

聯(lián)苯

0.18316對-聯(lián)三苯0.93342第18頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24(3)剛性平面結(jié)構(gòu):可降低分子振動,減少與溶劑的相互作用,故具有很強的熒光。如熒光素和酚酞有相似結(jié)構(gòu),熒光素有很強的熒光,酚酞卻沒有。第19頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24(4)取代基效應(yīng):芳環(huán)族化合物苯環(huán)上不同取代基對該化合物的熒光強度和熒光光譜有很大的影響,可歸為下列幾種類型:第一,給電子基團常常使熒光增強;第二,吸電子基團會減弱甚至破壞熒光;第三,同電子體系相互作用小的取代基和烷基對發(fā)光影響不明顯;第四,將一個高原子序數(shù)的原子引入,常常增強磷光而減弱熒光;第五,雙取代和多取代較難預(yù)測,但若能增加分子的平面性,則熒光增強,反之,則熒光減弱。第20頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24第21頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24四、影響熒光強度的環(huán)境因素

relationbetweenfluorescenceandmolecularstructure

影響熒光強度的外部因素1.溶劑的影響由于溶質(zhì)分子與溶劑分子間的作用,使同一種熒光物質(zhì)在不同的溶劑中的熒光光譜的位置和強度都會有顯著的不同

如8-巰基喹啉在下列四種不同極性溶劑中的情況

溶劑介電常數(shù)熒光峰λ/nm熒光效率四氯化碳2.243900.002氯仿5.23980.041丙酮21.54050.055乙38.84100.064第22頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/242.溫度的影響熒光強度對溫度變化敏感,一般來說,溶液的熒光強度隨著溫度升高而降低。3.溶液pH

帶有酸性或堿性官能團的大多數(shù)芳香族化合物的熒光一般都與溶液的pH有關(guān),因此在熒光分析中要嚴格控制溶液的pH值。如苯酚在酸性溶液中呈現(xiàn)熒光,但在堿性溶液中,無熒光再如苯胺在pH7~12溶液中有藍色熒光,而在pH小于2大于13的溶液中都不發(fā)熒光。另外金屬離子與有機試劑形成的發(fā)光螯合物也受到溶液的pH影響第23頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/244.內(nèi)濾光作用和自吸收現(xiàn)象

自吸收現(xiàn)象:化合物的熒光發(fā)射光譜的短波長端與其吸收光譜的長波長端重疊,產(chǎn)生自吸收;如蒽化合物。內(nèi)濾光作用:溶液中含有能吸收激發(fā)光或熒光物質(zhì)發(fā)射的熒光的物質(zhì),就會使熒光減弱,這種現(xiàn)象稱為“內(nèi)濾光作用”,如色胺酸中的重鉻酸鉀;第24頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/245.溶液熒光的猝滅熒光物質(zhì)分子與溶劑分子或其他溶質(zhì)分子的相互作用引起熒光強度降低的現(xiàn)象稱為熒光猝滅。能引起熒光強度降低的物質(zhì)稱為猝滅劑。(1)碰撞猝滅M+hγ—M*,M*+Q—M+熱(2)靜態(tài)猝滅M+Q—MQ非熒光(3)轉(zhuǎn)入三重態(tài)的猝滅三重態(tài)O2(4)發(fā)生電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)的猝滅M+Q—發(fā)生電子轉(zhuǎn)移(5)熒光物質(zhì)的自猝滅熒光物質(zhì)濃度較高第25頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24第四章

分子發(fā)光分析法一、儀器與結(jié)構(gòu)流程instrumentandgeneral

process

二、熒光分析法和應(yīng)用fluorescenceanalysisandapplication三、磷光分析法及應(yīng)用phosphorescenceanalysisandapplication第二節(jié)

分子熒光與磷光分析法molecularluminescence

analysis

molecularfluorescenceandphosphorescenceanalysis

第26頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24一、儀器結(jié)構(gòu)流程

測量熒光的儀器主要由四個部分組成:激發(fā)光源、樣品池、雙單色器系統(tǒng)、檢測器。

特殊點:有兩個單色器,光源與檢測器通常成直角?;玖鞒倘鐖D:單色器:選擇激發(fā)光波長的第一單色器和選擇發(fā)射光(測量)波長的第二單色器;光源:氙燈和高壓汞燈樣品池:石英檢測器:光電倍增管。第27頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24二、熒光分析方法與應(yīng)用1.特點(1)靈敏度高比紫外-可見分光光度法高2~4個數(shù)量級;檢測下限:0.1~0.001g/cm-3(2)選擇性強既可依據(jù)特征發(fā)射光譜,又可根據(jù)特征激發(fā)光譜;(3)試樣量少

缺點:應(yīng)用范圍小。第28頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/242.定量依據(jù)與方法(1)定量依據(jù)當熒光物質(zhì)濃度很小時,熒光強度If與熒光物質(zhì)濃度c之間的關(guān)系式為

If=2.3φfI0εbc式中:φf為熒光效率,I0為激發(fā)光的強度,ε熒光物質(zhì)的摩爾吸收系數(shù),b為試樣池的光程,c為熒光物質(zhì)的濃度。

在一定條件下,φf、I0、ε、b均為常數(shù),所以上式可寫成

If=Kc即熒光強度與熒光物質(zhì)的濃度c成正比。熒光強度和溶液濃度呈線性關(guān)系,只限于極稀的溶液。對于較濃溶液,會產(chǎn)生濃度猝滅現(xiàn)象。第29頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24(2)定量方法標準曲線法:

配制一系列標準濃度試樣測定熒光強度,繪制標準曲線,再在相同條件下測量未知試樣的熒光強度,在標準曲線上求出未知試樣的濃度;比較法:在線性范圍內(nèi),測定標樣和試樣的熒光強度,比較;第30頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/243.熒光分析法的應(yīng)用目前熒光分析大多用于定量分析,由于自身發(fā)射熒光的化合物不多,因此往往利用有機試劑與熒光較弱或不顯熒光的物質(zhì)結(jié)合形成發(fā)熒光的配合物來進行測定。(1)無機化合物的分析

與有機試劑形成配合物后測量;可測量約60多種元素。(2)有機化合物的分析

芳香族化合物具有共軛的不飽和結(jié)構(gòu),多能發(fā)生熒光,可以直接進行熒光測定;而脂肪族化合物的分子結(jié)構(gòu)較簡單,本身能發(fā)熒光的很少,須與某些試劑反應(yīng)后才能進行分析。第31頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24第32頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24第33頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24三、磷光分析法及應(yīng)用

與熒光相比,磷光具有兩個特點(1)磷光輻射的波長比熒光長(2)磷光的壽命比熒光長1.磷光強度與磷光物質(zhì)濃度的關(guān)系當磷光物質(zhì)濃度很小時,磷光強度Ip與磷光物質(zhì)濃度c之間的關(guān)系式為Ip=2.3φpI0εbc式中:φp為磷光效率,I0為激發(fā)光的強度,ε磷光物質(zhì)的摩爾吸收系數(shù),b為試樣池的光程。

在一定條件下,φp、I0、ε、b均為常數(shù),所以上式可寫成:

Ip=Kc

即磷光強度與磷光物質(zhì)的濃度c成正比。第34頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/242.溫度對磷光強度的影響隨著溫度的降低,磷光逐漸增強3.重原子效應(yīng)使用含有重原子的溶劑或在磷光物質(zhì)中引入重原子取代基,都可以提高磷光物質(zhì)的磷光強度,這種效應(yīng)稱作重原子效應(yīng)。4.低溫磷光用液氮作冷卻劑(77K)第35頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/245.室溫磷光由于低溫磷光需要低溫實驗裝置、溶劑選擇的限制,發(fā)展了以下幾種室溫磷光法:(1)固體表面室溫磷光法此法基于測量室溫下吸附于固體基質(zhì)(載體)上的有機化合物所發(fā)射的磷光。理想的載體是既能將分析物質(zhì)牢固地束縛在表面或基質(zhì)中以增加剛性,并減小三重態(tài)的碰撞猝滅等非輻射去活化過程,而本身又不產(chǎn)生磷光背景。第36頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24(2)膠束增穩(wěn)的溶液室溫磷光法

當向溶液中加入適量的表面活性劑,形成膠束,由于膠束的多相性,改變了磷光團的微環(huán)境和定向的約束力,從而強烈影響了磷光團的物理性質(zhì),減小了內(nèi)轉(zhuǎn)化和碰撞能量損失等非輻射去活化過程的趨勢,明顯增加了三重態(tài)的穩(wěn)定性,從而可以實現(xiàn)在溶液中測量室溫磷光。第37頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/246.磷光分析儀

和熒光分析儀器基本相似。在熒光分光光度計上配上磷光附件后,即可用于磷光測定。

(1)試樣室

將試樣放在盛液氮的石英杜瓦瓶內(nèi),即可用于低溫磷光測定。(2)磷光鏡

有些物質(zhì)同時會發(fā)生熒光和磷光,為了能在同時有熒光現(xiàn)象的體系中測定磷光,通常必須在激發(fā)光單色器和液槽之間以及在液槽和發(fā)射光單色器之間各裝一個斬波片,并由一個同步馬達帶動,這種裝置稱作磷光鏡。第38頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24第39頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/247、磷光分析法的應(yīng)用磷光分析法在無機化合物的測定中應(yīng)用較少,它主要用于測定有機化合物。(1).稠環(huán)芳烴分析采取固體表面室溫磷光分析法快速靈敏測定稠環(huán)芳烴和雜環(huán)化合物(致癌物質(zhì));見表(2).農(nóng)藥、生物堿、植物生長激素的分析(3).藥物分析見表第40頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24第41頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24第四章

分子發(fā)光分析法

一、基本原理principle

二裝置與技術(shù)instrumentandtechnology三、化學(xué)發(fā)光分析的特點characteristics第三節(jié)

化學(xué)發(fā)光分析法molecularluminescence

analysischemiluminescence

analysis第42頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24化學(xué)發(fā)光

某些物質(zhì)在進行化學(xué)反應(yīng)過程中,由于吸收了反應(yīng)產(chǎn)生的化學(xué)能而被激發(fā),從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時,發(fā)射出一定波長的光,這種吸收化學(xué)能使分子發(fā)光的過程稱為化學(xué)發(fā)光。

化學(xué)發(fā)光反應(yīng)存在于生物體(螢火蟲、海洋發(fā)光生物)中,稱生物發(fā)光(bioluminescence)?;瘜W(xué)發(fā)光分析

利用某些化學(xué)反應(yīng)所產(chǎn)生的光發(fā)射現(xiàn)象而建立的一種分析方法。第43頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24一、基本原理principle1.化學(xué)發(fā)光反應(yīng)

在化學(xué)反應(yīng)過程中,某些反應(yīng)產(chǎn)物接受化學(xué)能而被激發(fā),從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時,發(fā)射出一定波長的光。

A+B=C+D*

D*→D+h

(1)能快速地釋放出足夠的能量。能產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的物質(zhì)大多為有機化合物,芳香族化合物;化學(xué)發(fā)光反應(yīng)多為氧化還原反應(yīng),激發(fā)能與反應(yīng)能相當,E=170~300kJ/mol;發(fā)光位于可見光區(qū);(2)反應(yīng)歷程有利于激發(fā)態(tài)產(chǎn)物的形成;(3)激發(fā)態(tài)分子能夠以輻射躍遷的方式返回基態(tài);第44頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/242.化學(xué)發(fā)光效率和發(fā)光強度化學(xué)效率:發(fā)光效率:

化學(xué)效率主要取決于發(fā)光所依賴的化學(xué)反應(yīng)本身;而發(fā)光效率則取決于發(fā)光體本身的結(jié)構(gòu)和性質(zhì),也受環(huán)境的影響。第45頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24發(fā)光強度

化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的發(fā)光強度Icl是以單位時間內(nèi)發(fā)射的光子數(shù)表示,它與化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的速率有關(guān)。時刻t的化學(xué)發(fā)光強度(單位時間發(fā)射的光量子數(shù)):

如果反應(yīng)是一級動力學(xué)反應(yīng),t時刻的化學(xué)發(fā)光強度Icl與該時刻的分析物濃度c成正比,即化學(xué)發(fā)光峰值強度與分析物濃度c成線性關(guān)系。在化學(xué)發(fā)光分析中,常用已知時間內(nèi)的發(fā)光總強度來進行定量分析。第46頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/243.化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的類型(1)氣相化學(xué)發(fā)光反應(yīng)主要有O3,NO,S的化學(xué)發(fā)光反應(yīng),可用于監(jiān)測空氣中的O3,NO,NO2,H2S,SO2和CO等.a.一氧化氮與O3的發(fā)光反應(yīng)

NO+O3→NO2*+O2

NO2*→NO2+h

發(fā)射的光譜范圍:600~875nm,靈敏度1ng/cm-3;

第47頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24b.乙烯與O3的發(fā)光反應(yīng)

乙烯與O3反應(yīng),生成激發(fā)態(tài)甲醛:

CH2O*

→CH2O+h

最大發(fā)射波長:435nm;對O3的特效反應(yīng);線性響應(yīng)范圍1ng/cm-3~1g/cm-3;第48頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24(2)液相中的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)機理研究較多,在分析中應(yīng)用最多;可測痕量的H2O2、Cu、Mn、Co、V、Fe、Cr、Ce、Hg、Au、Th等。應(yīng)用最多的發(fā)光試劑:魯米諾(3-氨基苯二甲酰肼);化學(xué)發(fā)光反應(yīng)效率:0.15~0.05;魯米諾在堿性溶液中與雙氧水的反應(yīng)過程:第49頁,共56頁,2024年2月25日,星期天2024/4/24(1)該發(fā)光反應(yīng)速度慢,某些金屬離子可催化反應(yīng);利用這一現(xiàn)象可間接測定這些金屬離子??蓽y痕量的Cu2+、Mn2+、Co2+、V4+、Fe2+、Fe3+、Ni2+、Ag+、Au3+、Hg2+等(2)可檢測低至10-9mol/L的H2O2;(3)間接測定某些生物試樣

氨基酸+O2

酮酸+NH3+H2O2

氨基酸

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