血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

第第頁(yè)血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

氨基酸和生物資源

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AminoAcidsBioticResources1998,20(2):24～26

血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

劉惠敏姜秋芬戴尚飛李興發(fā)

(河北醫(yī)科高?；A(chǔ)所石家莊050017)

Ξ

摘要建立了用毛細(xì)管氣相色譜法分析血漿中游離脂肪酸(FFA)的方法。測(cè)定了20例正常人和16例糖尿病人血漿中游離脂肪酸的含量。測(cè)定結(jié)果說(shuō)明,糖尿病人的C16∶1等三種脂肪酸與正常人相比有明顯差異。就脂肪酸類(lèi)與疾病的關(guān)系作了爭(zhēng)論。

關(guān)鍵詞血漿游離脂肪酸氣相色譜法

脂類(lèi)物質(zhì)是細(xì)胞膜的主要組成,具有多

種重要的生物學(xué)功能。通過(guò)檢測(cè)血漿中脂肪酸水平,肪酸的關(guān)系。,,的濃度,。所以我們建立了用毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定血漿中游離脂肪酸的方法,并就其在臨床上的意義加以爭(zhēng)論。

1材料和方法1.1測(cè)試對(duì)象

正常人組:20名(男10,女10),年齡18～43歲,平均年齡28.96歲。系本校1995級(jí)體檢正常的同學(xué),部分來(lái)自血站體檢合格的獻(xiàn)血者。

病人組:16名(男8,女8),年齡44歲～70歲,平均年齡60.7歲。均系型糖尿病人,病史5～15年。1.2主要儀器和試劑

日立663-50氣相色譜儀,裝有氫焰離子化檢測(cè)器(FID)有毛細(xì)管裝置。

C16∶0等十種脂肪酸標(biāo)品為Alltech公司

Ξ收稿日期:1997-08-15;

、、甲醇均。.:OV-101玻璃毛細(xì)管柱,0.25mm18m,液膜厚度為0.25Λm(日立公司產(chǎn)品)。檢測(cè)器:FID。柱溫起始溫度170℃,保持3min,以3℃min速率升溫至220℃,保持5min。檢測(cè)器溫度250℃,進(jìn)樣器溫度230℃。載氣為氫氣,70mlmin。分流式進(jìn)樣,分流比為100∶1。1.4提取與酯化

提取:取2ml空腹血漿,加6ml甲醇,12ml氯仿,充分振搖,2500r

min離心10min,吸去上層水相,濾去蛋白,用0.5ml氯仿洗濾紙一次,濾液在60℃下N2吹趕至0.5ml。

酯化:提取液中加入2ml無(wú)水甲醇和1ml三氟化硼一乙醚液,加入內(nèi)標(biāo)C17∶0,緩緩加溫至沸,煮沸30min。放置室溫,加入2ml二次蒸餾水,用二氯甲烷萃取3次,在40℃下N2吹趕至100Λl,進(jìn)樣1Λl。2結(jié)果

2.120例正常人和16例糖尿病(DM)患

者,血漿中FFA的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1,經(jīng)統(tǒng)計(jì)t

血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

劉惠敏等血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

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檢驗(yàn),顯著差異的有C16∶1、C18∶1、C18∶0。各種脂肪酸的重復(fù)性測(cè)定變異系數(shù)在9%以?xún)?nèi),見(jiàn)表2。不飽和脂肪酸以C18∶2為代表,飽和脂肪酸以C20∶0為代表,回收率分別為82.75%和96.70%。

2.2糖尿病患者狀況比較繁復(fù),病人往往有

各式各樣的合并癥,血漿中游離脂肪酸的濃度也就不同。不飽和脂肪酸C16∶1和C18∶1均低于正常人(P0.05),而飽和脂肪酸C18∶0高于正常人(P0.01)。3臨床意義3.1關(guān)于必需脂肪酸

人體內(nèi)脂肪和類(lèi)脂所含有的脂肪酸,都是具有偶數(shù)碳原子的脂肪酸,都在12子以上。(C16∶1)、油酸(C18∶1)(C18∶2)、亞麻油酸(C18∶3)和花生四烯酸(C20∶4),其中含量最多的是油酸。在多不飽和脂肪酸中有幾種是體內(nèi)不能自行合成的,稱(chēng)為必需脂肪酸(EFA)。它包括亞油酸、亞麻油酸和花生四烯酸(AA)。既然人體不能合成,就必需從食物中供應(yīng)。富含必需脂肪酸的食物主要是植物性食物,如:玉米油、豆油、棉籽油、葵花子油等含有多量亞油酸。假如EFA供應(yīng)不足或過(guò)多地被氧化時(shí),會(huì)導(dǎo)致EFA缺乏癥,比如可涌現(xiàn)皮炎,脂肪肝及有關(guān)脂類(lèi)代謝障礙。一般認(rèn)為脂肪肝的病因之一是:需要脂肪酸缺乏而使磷脂合成減削所致。EFA缺乏癥,只能靠補(bǔ)充需要脂肪酸來(lái)治療。

但是,假如含多不飽和脂肪酸的植物油食入量過(guò)多,會(huì)引起脂質(zhì)過(guò)氧化增高。脂質(zhì)過(guò)氧化是衰弱、糖尿病及肝硬化等很多疾病的病理過(guò)程。而含飽和脂肪酸及膽固醇較多的動(dòng)物油可降低脂質(zhì)過(guò)氧化,卻又會(huì)引起高血脂癥,是動(dòng)脈粥樣硬化冠心病的一個(gè)危急因

[1]

素[2]。所以人們應(yīng)保持良好的飲食習(xí)慣。3.2必需脂肪酸與癌

多不飽和脂肪酸中主要是EFA具有抑制腫瘤的作用。如EFA在組織培育中能阻礙三種腹水癌的生長(zhǎng)。對(duì)6C3HED淋巴肉瘤也有抑制作用,其中以亞油酸和亞麻酸的作用較強(qiáng)。用含有EFA的飼料喂養(yǎng)已接種試驗(yàn)?zāi)[瘤的大鼠,能抑制腫瘤的生長(zhǎng)和延長(zhǎng)大鼠的生存期。因腫瘤死亡的大鼠,組織的提取物中亞麻酸的含量就顯著減削或消逝。

與多不飽和脂肪酸有關(guān)的抗癌新劑型

(139),“油酸多相脂質(zhì)體”

測(cè)定,,其主要,從“139”治療一個(gè),萎縮、變性或變形,據(jù)初步統(tǒng)計(jì)臨床有效率達(dá)66.7%(P0.05)。對(duì)晚期肺腺癌的治療后,*線透視腫塊消逝,痰檢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)陰。AA也與癌癥有親密關(guān)系,大鼠患白血病時(shí),血漿和紅細(xì)胞中AA的含量也明顯地降低。癌癥患者血漿中的AA的含量比正常人降低50%以上[3]。

表1正常人與糖尿病人血漿中的游離脂肪酸含量

S)(*

.1ThecontentsofFFAintheplasmaofTabel

healthyhumanandpatientssuffeiingfromdiabetesmelitus

脂肪酸

C16∶1C16∶0C18∶3C18∶2C18∶1C18∶0C20∶4C20∶3C20∶0

ΛmolL

正常人組(n=20)

76.123.81455.1146.3641.5162.5389.286.770.420.3421.840.1221.444.972.933.229.37.5

病人組(n=16)

47.525.031437.2232.4764.3285.8352.7143.453.727.733567.292.53240.099.9105.697.347.039.5

33P0.053P0.01

血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

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氨基酸和生物資源

表2血漿中游離脂肪酸測(cè)定的重復(fù)性

Table.2ReproducibilityofFFAdeterminationinplasmaΛmolL

脂肪酸

C16∶1C16∶0C18∶3C18∶2C18∶1C18∶0C20∶4C20∶3C20∶0

A64.151390.83523.60357.5172.01551.27218.1280.8025.25

B66.031349.32518.86342.2864.01552.50201.3099.6425.12

C69.141281.31502.84353.4865.85570.04225.6589.4626.33

D57.981373.19565.26342.8277.50558.06208.8387.3122.53

均數(shù)

64.331348.66527.64349.0469.85557.99213.4689.3324.80

%CV7.313.375.042.198.791.254.988.71.49

脂肪酸是重要的生物資源,不僅在營(yíng)養(yǎng)衛(wèi)生方面有重要的作用,關(guān)系,的水平,息。

2,,..色譜,1995,(6):415

3陳建智,顧學(xué)裘.多不飽和脂肪酸與癌.腫瘤,1983,(6):

268

4Eder.K,etal.Gaschromatographicanalysisoffatty

acidmethylesters:avoidingdiscriminationbypro2grammedtemperaturevaporizinginjecionJournalofchromatography.1991,(588):265

血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

氨基酸和生物資源

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AminoAcidsBioticResources1998,20(2):24～26

血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

劉惠敏姜秋芬戴尚飛李興發(fā)

(河北醫(yī)科高?；A(chǔ)所石家莊050017)

Ξ

摘要建立了用毛細(xì)管氣相色譜法分析血漿中游離脂肪酸(FFA)的方法。測(cè)定了20例正常人和16例糖尿病人血漿中游離脂肪酸的含量。測(cè)定結(jié)果說(shuō)明,糖尿病人的C16∶1等三種脂肪酸與正常人相比有明顯差異。就脂肪酸類(lèi)與疾病的關(guān)系作了爭(zhēng)論。

關(guān)鍵詞血漿游離脂肪酸氣相色譜法

脂類(lèi)物質(zhì)是細(xì)胞膜的主要組成,具有多

種重要的生物學(xué)功能。通過(guò)檢測(cè)血漿中脂肪酸水平,肪酸的關(guān)系。,,的濃度,。所以我們建立了用毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定血漿中游離脂肪酸的方法,并就其在臨床上的意義加以爭(zhēng)論。

1材料和方法1.1測(cè)試對(duì)象

正常人組:20名(男10,女10),年齡18～43歲,平均年齡28.96歲。系本校1995級(jí)體檢正常的同學(xué),部分來(lái)自血站體檢合格的獻(xiàn)血者。

病人組:16名(男8,女8),年齡44歲～70歲,平均年齡60.7歲。均系型糖尿病人,病史5～15年。1.2主要儀器和試劑

日立663-50氣相色譜儀,裝有氫焰離子化檢測(cè)器(FID)有毛細(xì)管裝置。

C16∶0等十種脂肪酸標(biāo)品為Alltech公司

Ξ收稿日期:1997-08-15;

、、甲醇均。.:OV-101玻璃毛細(xì)管柱,0.25mm18m,液膜厚度為0.25Λm(日立公司產(chǎn)品)。檢測(cè)器:FID。柱溫起始溫度170℃,保持3min,以3℃min速率升溫至220℃,保持5min。檢測(cè)器溫度250℃,進(jìn)樣器溫度230℃。載氣為氫氣,70mlmin。分流式進(jìn)樣,分流比為100∶1。1.4提取與酯化

提取:取2ml空腹血漿,加6ml甲醇,12ml氯仿,充分振搖,2500r

min離心10min,吸去上層水相,濾去蛋白,用0.5ml氯仿洗濾紙一次,濾液在60℃下N2吹趕至0.5ml。

酯化:提取液中加入2ml無(wú)水甲醇和1ml三氟化硼一乙醚液,加入內(nèi)標(biāo)C17∶0,緩緩加溫至沸,煮沸30min。放置室溫,加入2ml二次蒸餾水,用二氯甲烷萃取3次,在40℃下N2吹趕至100Λl,進(jìn)樣1Λl。2結(jié)果

2.120例正常人和16例糖尿病(DM)患

者,血漿中FFA的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1,經(jīng)統(tǒng)計(jì)t

血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

劉惠敏等血漿中游離脂肪酸的測(cè)定及其臨床意義

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檢驗(yàn),顯著差異的有C16∶1、C18∶1、C18∶0。各種脂肪酸的重復(fù)性測(cè)定變異系數(shù)在9%以?xún)?nèi),見(jiàn)表2。不飽和脂肪酸以C18∶2為代表,飽和脂肪酸以C20∶0為代表,回收率分別為82.75%和96.70%。

2.2糖尿病患者狀況比較繁復(fù),病人往往有

各式各樣的合并癥,血漿中游離脂肪酸的濃度也就不同。不飽和脂肪酸C16∶1和C18∶1均低于正常人(P0.05),而飽和脂肪酸C18∶0高于正常人(P0.01)。3臨床意義3.1關(guān)于必需脂肪酸

人體內(nèi)脂肪和類(lèi)脂所含有的脂肪酸,都是具有偶數(shù)碳原子的脂肪酸,都在12子以上。(C16∶1)、油酸(C18∶1)(C18∶2)、亞麻油酸(C18∶3)和花生四烯酸(C20∶4),其中含量最多的是油酸。在多不飽和脂肪酸中有幾種是體內(nèi)不能自行合成的,稱(chēng)為必需脂肪酸(EFA)。它包括亞油酸、亞麻油酸和花生四烯酸(AA)。既然人體不能合成,就必需從食物中供應(yīng)。富含必需脂肪酸的食物主要是植物性食物,如:玉米油、豆油、棉籽油、葵花子油等含有多量亞油酸。假如EFA供應(yīng)不足或過(guò)多地被氧化時(shí),會(huì)導(dǎo)致EFA缺乏癥,比如可涌現(xiàn)皮炎,脂肪肝及有關(guān)脂類(lèi)代謝障礙。一般認(rèn)為脂肪肝的病因之一是:需要脂肪酸缺乏而使磷脂合成減削所致。EFA缺乏癥,只能靠補(bǔ)充需要脂肪酸來(lái)治療。

但是,假如含多不飽和脂肪酸的植物油食入量過(guò)多,會(huì)引起脂質(zhì)過(guò)氧化增高。脂質(zhì)過(guò)氧化是衰弱、糖尿病及肝硬化等很多疾病的病理過(guò)程。而含飽和脂肪酸及膽固醇較多的動(dòng)物油可降低脂質(zhì)過(guò)氧化,卻又會(huì)引起高血脂癥,是動(dòng)脈粥樣硬化冠心病的一個(gè)危急因

[1]

素[2]。所以人們應(yīng)保持良好的飲食習(xí)慣。3.2必需脂肪酸與癌

多不飽和脂肪酸中主要是EFA具有抑制腫瘤的作用。如EFA在組織培育中能阻礙三種腹水癌的生長(zhǎng)。對(duì)6C3HED淋巴肉瘤也有抑制作用,其中以亞油酸和亞麻酸的作用較強(qiáng)。用含有EFA的飼料喂養(yǎng)已接種試驗(yàn)?zāi)[瘤的大鼠,能抑制腫瘤的生長(zhǎng)和延長(zhǎng)大鼠的生存期。因腫瘤死亡的大鼠,組織的提取物中亞麻酸的含量就顯著減削或消逝。

與多不飽和脂肪酸有關(guān)的抗癌新劑型

(139),“油酸多相脂質(zhì)體”

測(cè)定,,其主要,從“139”治療一個(gè),萎縮、變性或變形,據(jù)初步統(tǒng)計(jì)臨床有效率達(dá)66.7%(P0.05)。對(duì)晚期肺腺癌的治療后,*線透視腫塊消逝,痰檢癌細(xì)胞轉(zhuǎn)陰。AA也與癌癥有親密關(guān)系,大鼠患白血病時(shí),血漿和紅細(xì)胞中AA的含量也明顯地降低。癌癥患者血漿中的AA的含量比正常人降低50%以上[3]。

表1正常人與糖尿病人血漿中的游離脂肪酸含量

S)(*

.1ThecontentsofFFAintheplasmaofTabel

healthyhumanandpatientssuffeiingfromdiabetesmelitus

脂肪酸

C16∶1C16∶0C18∶3C18∶2C18∶1C18∶0C20∶4C20∶3C20∶0

ΛmolL

正常人組(n=20)

76.123.81455.1146.3641.5162.5389.286.770.420.3421.840.1221.444.972.933.229.37.5

病人組(n=16)

47.525.031437.22