GB-T《水稻中轉(zhuǎn)基因成分測(cè)定 膜芯片法》

ICS

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中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/TXXXXX—XXXX

水稻中轉(zhuǎn)基因成分測(cè)定－膜芯片法

DetectionofGeneticallyModifiedComponentsinRice

Membrane-basedGene-chipMethod

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征求意見(jiàn)稿

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實(shí)施

GB/TXXXXX—XXXX

水稻中轉(zhuǎn)基因成分測(cè)定－膜芯片法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水稻及水稻加工產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分的檢測(cè)方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于轉(zhuǎn)BAR基因耐除草劑水稻和轉(zhuǎn)Bt基因（Cry1Ab/Cry1Ac）抗蟲水稻中轉(zhuǎn)基因成分的定性

檢測(cè)，也適用于水稻加工產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分的定性檢測(cè)，本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的轉(zhuǎn)基因成分最低檢測(cè)限量是0.5%。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T19495.1轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)通用要求和定義

GB/T19495.2轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求

GB/T19495.3轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸提取純化方法

GB/T19495.4轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定性PCR檢測(cè)方法

GB/T19495.5轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸定量PCR檢測(cè)方法

GB/T19495.6轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)基因芯片檢測(cè)方法

GB/T19495.7轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)抽樣和制樣方法

GB/T19495.8轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)蛋白質(zhì)檢測(cè)方法

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

SN/T1204植物及其加工產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分實(shí)時(shí)熒光PCR定性檢驗(yàn)方法

SN/T2584水稻及其產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法

3術(shù)語(yǔ)、定義和縮略語(yǔ)

3.1術(shù)語(yǔ)和定義

GB/T19495.1、GB/T19495.6確定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

3.2縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

3.2.1

DNA：deoxyribonucleicacid

脫氧核糖核酸。

3.2.2

dNTP：deoxyribonucleosidetriphosphate

1

GB/TXXXXX—XXXX

脫氧核苷酸三磷酸。

3.2.3

dATP：deoxyadenosinetriphosphate

脫氧腺苷三磷酸。

3.2.4

dCTP：deoxycytidinetriphosphate

脫氧胞苷三磷酸。

3.2.5

dGTP：deoxyguanosinetriphosphate

脫氧鳥(niǎo)苷三磷酸。

3.2.6

dTTP：deoxythymidinetriphosphate

脫氧胸苷三磷酸。

3.2.7

dUTP：deoxyuridinetriphosphate

脫氧尿苷三磷酸。

3.2.8

Bp：basepair

堿基對(duì)

3.2.9

BAR：phosphinothricinacetylatransferasegene

來(lái)源于桿菌Bacillusamyloliquefaciens草丁膦乙酰轉(zhuǎn)移酶基因

3.2.10

Cry1Ab：bacillusthuringiensisInsecticidaltoxinCryIAbgene

蘇云金芽孢桿菌殺蟲毒蛋白cryIA(b)基因

3.2.11

Cry1Ac：bacillusthuringiensisInsecticidaltoxinCryIAcgene

蘇云金芽孢桿菌殺蟲毒蛋白cryIA(c)基因

3.2.12

2

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CaMV35S-P：Promoterfromcauliflowermosaicvirus

來(lái)自于花椰菜花葉病毒的35S啟動(dòng)子。

3.2.13

NOS-3’：Terminationsequenceofthenopalinesynthasegene

胭脂堿合成酶基因終止子。

3.2.14

CaMV35S-T：Terminationsequencefromcauliflowermosaicvirus

來(lái)自于花椰菜花葉病毒的35S啟動(dòng)子。

3.2.15

GOS9：Oryzasativa(rice)GOS9gene

水稻GOS9基因。

3.2.16

PC：Positivecontrol

陽(yáng)性對(duì)照

3.2.17

NC：Negativecontrol

陰性對(duì)照

4防污染措施

檢測(cè)過(guò)程中防止交叉污染的措施應(yīng)按照GB/T19495.2的規(guī)定執(zhí)行。

5抽樣與制樣

抽樣與制樣方法應(yīng)符合GB/T19495.7的相關(guān)規(guī)定。

6原理

待檢樣品經(jīng)抽樣記錄后，提取DNA模板，核酸進(jìn)行定量。針對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻中常見(jiàn)外源基因片段設(shè)計(jì)

引物，對(duì)提取DNA模板進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物與固定有目標(biāo)基因特異性探針的膜芯片進(jìn)行反向斑

點(diǎn)雜交，檢測(cè)結(jié)果可以用肉眼直接判斷，或用芯片識(shí)讀儀對(duì)雜交芯片進(jìn)行掃描并判定結(jié)果。

7試劑與標(biāo)準(zhǔn)品

7.1試劑

3

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除非另有規(guī)定，本方法中所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的三級(jí)水。

7.1.1試劑組分

水稻轉(zhuǎn)基因檢測(cè)膜芯片法試劑組分應(yīng)符合表1和7.1.2～7.1.21的規(guī)定。

表1.膜芯片法試劑組分

序號(hào)名稱規(guī)格數(shù)量存放條件

1多重PCR即用型預(yù)混液1250μL1管-20℃

2多重PCR引物預(yù)混液250μL1管-20℃

3無(wú)核酸酶滅菌水1mL2管-20℃

4轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)品基因組DNA（50ng/μL）200μL1管-20℃

5陽(yáng)性寡核苷酸單鏈DNA50μL1管-20℃

6DDDDDDDNA(Po去si活ti化ve液-Oligo,10μM)60mL1瓶室溫

7去活化清洗液60mL1瓶室溫

8雜交液60mL1瓶室溫

9雜交清洗液60mL2瓶室溫

10酶孵育液60mL1瓶室溫

11堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈霉親和素25μL1管4℃

12孵育清洗液160mL2瓶室溫

13孵育清洗液260mL2瓶室溫

14BCIP/NBT顯色底物25mL1瓶4℃

15膜芯片/50片室溫

7.1.2引物

PCR反應(yīng)使用的引物序列應(yīng)符合表2的規(guī)定。

表2.PCR反應(yīng)使用的引物序列

目標(biāo)基因引物名稱序列擴(kuò)增片段大?。╞p）

Forward5'-CGTCTGCGGGAGCGCTATCC-3'

BAR168bp

Reverse5'-biotin-GTAGAGCGTGGAGCCCAGTC-3'

Forward5'-GACATGAACAGCGCCTTGAC-3'

Cry1Ab164bp

Reverse5'-biotin-TTGATGGTTGCAGCATCGAA-3'

Forward5'-GTTAGACTCAACAGCAGTGGA-3'

Cry1Ac161bp

Reverse5'-biotin-GAGAAGATGGATGAATTACCCCA-3'

Forward5'-GGCCATCGTTGAAGATGCCTC-3'

CaMV35S-P144bp

Reverse5'-biotin-TCATCCCTTACGTCAGTGGA-3'

Forward5'-TGCATGACGTTATTTATGAGATGGGTTT-3'

NOS-3’113bp

Reverse5'-biotin-GCGCGCGATAATTTATCCTAGTTT-3'

CaMV35S-TForward5'-CCAGATAAGGGAATTAGGGTTC-3'132bp

4

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Reverse5'-biotin-ACTGGATTTTGGTTTTAGGAATTAGA-3'

Forward5'-GACGATCCGTAGTGGAGC-3'

GOS9117bp

Reverse5'-biotin-GTAATCGTAGTTGGATTTCCACC-3'

7.1.3探針

膜芯片表面包被的目標(biāo)基因探針序列應(yīng)符合表3的規(guī)定。

表3.目標(biāo)基因探針序列

名稱序列修飾基團(tuán)

BAR5'-CGCAACGCCTACGACTGGACGGCCGAGTCGACCGTGTACGTCTCCCCCCGCCACCAGCG-3'5'-AminolinkerC6

Cry1Ab5'-GCAGCTAATCTTCACCTCAGCGTGCTTCGAGACGTTAGCGTGTTTGGGCAAAGGTGGGG-3'5'-AminolinkerC6

Cry1Ac5'-TCTACCAGATATAGAGTTCGTGTGAGGTATGCTTCTGTGACCCCTATTCACCTCAACGT-3'5'-AminolinkerC6

CaMV35S-P5'-AGGAGCATCGTGGAAAAAGAAGACGTTCCAACCACGTCTTCAAAGCAAGTGGATTGATG-3'5'-AminolinkerC6

NOS-3’5'-TTATGATTAGAGTCCCGCAATTATACATTTAATACGCGATAGAAAACAAAATATAGCGC-3'5'-AminolinkerC6

CaMV35S-T5'-AGCATATAAGAAACCCTTAGTATGTATTTGTATTTGTAAAATACTTCTATCAATAAAAT-3'5'-AminolinkerC6

GOS95'-GCCTTTACATACGTTGGCACGGACGGGAATGAACATCTTGCAGGTCCTTGGGGTGGTGG-3'5'-AminolinkerC6

PC5'-GCATCCAGATCAGAAGCAATAATGAGCAGTGCGAGAAGAACGAGTGTCCAAAGTACCAG-3'5'-AminolinkerC6

NC5'-GGTTCCTTGAGAAATGTTTTACGGGATTACTTCCATGTTTGTTGGATGATCCTATTTTC-3'5'-AminolinkerC6

注：陽(yáng)性寡核苷酸單鏈DNA(Positive-Oligo,10μM)：核苷酸序列與陽(yáng)性對(duì)照核酸探針（PC）序列互補(bǔ)，用于

膜芯片雜交過(guò)程質(zhì)量控制，5’端帶生物素（biotin）標(biāo)記，序列如下：

5'-biotin-CTGGTACTTTGGACACTCGTTCTTCTCGCACTGCTCATTATTGCTTCTGATCTGGATGC-3'

7.1.4氫氧化鈉（NaOH）：分析純

7.1.5氯化鈉（NaCl）：分析純

7.1.6磷酸二氫鈉（NaH2PO4.H2O）：分析純

7.1.7乙二胺四乙酸二鈉（EDTA-2Na）：分析純

7.1.8十二烷基磺酸鈉（SDS）：分析純

7.1.9堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉親和素(AP-streptavidin)

7.1.10堿性磷酸酶化學(xué)顯色底物5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸和氯化硝基四氮唑蘭（NBT/BCIP）

7.1.11多重PCR即用型預(yù)混液（MultiplexPCRMasterMix）

7.1.12多重PCR引物預(yù)混液（MultiplexPCRPrimerMix）：每條引物2μM

7.1.1320×SSPE緩沖液：3molNaCl,200mmolNaH2PO4,20mmolEDTA,pH7.4

7.1.14去活化液：100mmolNaOH

7.1.15去活化清洗液：2xSSPE,0.1%SDS

5

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7.1.16雜交液：2xSSPE,0.1%SDS

7.1.17雜交清洗液：2xSSPE,0.5%SDS

7.1.18酶孵育液：2xSSPE,0.5%SDS

7.1.19孵育清洗液1：2xSSPE,0.5%SDS

7.1.20孵育清洗液2：2xSSPE

7.1.21底物顯色液：堿性磷酸酶化學(xué)顯色底物NBT/BCIP

7.2標(biāo)準(zhǔn)品

7.2.1LLRice62Rice轉(zhuǎn)基因水稻標(biāo)準(zhǔn)品LLRice62品系

7.2.2BT63Rice轉(zhuǎn)基因水稻標(biāo)準(zhǔn)品BT63品系

7.2.3Non-ModifiedRice非轉(zhuǎn)基因水稻標(biāo)準(zhǔn)品

8儀器與設(shè)備

8.1基因擴(kuò)增儀。

8.2超凈工作臺(tái)。

8.3消毒滅菌鍋。

8.4制冰機(jī)。

8.5核酸蛋白分析儀。

8.6冷藏冷凍冰箱。

8.7純水儀。

8.8研磨儀。

8.9分析天平。

8.10膜芯片識(shí)讀儀。

8.11臺(tái)式離心機(jī)：轉(zhuǎn)速12000rpm/min。

8.12Mini個(gè)人離心機(jī)。

8.13旋渦混合器。

8.14恒溫水浴鍋。

8.15分子雜交爐。

8.16膜芯片自動(dòng)雜交儀。

8.17微量移液器及槍頭。

6

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9試驗(yàn)方法

9.1樣品

9.1.1實(shí)驗(yàn)室樣品代表性應(yīng)符合GB/T19495.7的規(guī)定。

9.1.2標(biāo)準(zhǔn)品、實(shí)驗(yàn)室樣品及測(cè)試樣品的保存應(yīng)按照GB/T19495.1的規(guī)定執(zhí)行。

9.1.3所有測(cè)試樣品的制備操作應(yīng)按照GB/T19495.2的規(guī)定執(zhí)行，小心操作確保防止任何的污染和

樣品組分的改變。

9.2樣品制備

9.2.1DNA的提取

樣品中DNA的提取，應(yīng)按照GB/T19495.3中的規(guī)定執(zhí)行。每個(gè)測(cè)試樣品提取時(shí)應(yīng)做兩個(gè)提取重復(fù)。

9.2.2PCR擴(kuò)增

將10.2.1的核酸提取物加入到PCR反應(yīng)體系進(jìn)行擴(kuò)增。

9.2.3PCR反應(yīng)體系

按照表4配制PCR反應(yīng)體系。每次實(shí)驗(yàn)中，利用轉(zhuǎn)基因水稻標(biāo)準(zhǔn)品的基因組DNA作為陽(yáng)性質(zhì)控，

非轉(zhuǎn)基因水稻標(biāo)準(zhǔn)品的基因組DNA作為陰性質(zhì)控，核酸提取空白作為空白質(zhì)控，以對(duì)后續(xù)的PCR擴(kuò)增體系、

膜芯片雜交反應(yīng)進(jìn)行質(zhì)控。

表4.PCR反應(yīng)體系體積（50μl）

反應(yīng)液組成檢測(cè)反應(yīng)陽(yáng)性質(zhì)控陰性質(zhì)控空白質(zhì)控

MultiplexPCRMasterMix25μL25μL25μL25μL

MultiplexPCRprimerMix5μL5μL5μL5μL

檢測(cè)樣品基因組DNA200ng///

轉(zhuǎn)基因水稻標(biāo)準(zhǔn)品基因組DNA/200ng//

非轉(zhuǎn)基因水稻標(biāo)準(zhǔn)品基因組DNA//200ng/

核酸提取空白///10μL

無(wú)核酸酶滅菌水upto50μLupto50μLupto50μLupto50μL

PCR體系最終含有MgCl21.5mM,dNTP(含dUTP)0.4mM，UDG酶1U，Taq酶2U，每條引物0.2μM。

9.2.4PCR反應(yīng)循環(huán)參數(shù)

按照表5設(shè)計(jì)PCR反應(yīng)參數(shù)。

表5.PCR反應(yīng)參數(shù)

步驟溫度反應(yīng)時(shí)間

137℃10min

295℃10min

395℃30s

7

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455℃30s

572℃30s

3、4、5循環(huán)40次

672℃10min

74℃保溫

9.3膜芯片雜交

9.3.1雜交體系

按照表6配制雜交體系液。

表6.雜交體系

組份體積（μL）

雜交液（2xSSPE,0.1%SDS）979

PCR擴(kuò)增產(chǎn)物20

陽(yáng)性寡核苷酸單鏈DNA

1

(Positive-Oligo,10μM)

總體積1000

9.3.2酶孵育體系

按照表7配制酶孵育體系液，用前新鮮配制。

表7.酶孵育體系

組份體積（μL）

孵育液（2xSSPE,0.5%SDS）999.5

堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉親和素

0.5

（AP-streptavidin）

總體積1000

9.3.3雜交，酶聯(lián)及顯色

10.3.3.1手動(dòng)過(guò)程：

將膜芯片置于雜交盒內(nèi)，按表7進(jìn)行手動(dòng)雜交。雜交過(guò)程在分子雜交爐中進(jìn)行，類似儀器應(yīng)滿足實(shí)

驗(yàn)要求。

表7.膜芯片手動(dòng)雜交過(guò)程

過(guò)程名稱步驟

去活化加入去活化液，37℃，8分鐘，吸除去活化液。

去活化清洗加入去活化清洗液，60℃，5分鐘，吸除去活化清洗液。

8

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雜交加入雜交體系液，42℃，45分鐘，吸除雜交體系液。

雜交清洗(2次)加入雜交清洗液，52℃，5分鐘，吸除雜交清洗液，該過(guò)程重復(fù)2次。

酶孵育加入酶孵育體系液，42℃，30分鐘，吸除酶孵育體系液。

孵育清洗1(2次)加入孵育清洗液1，42℃，5分鐘，吸除孵育清洗液1，該過(guò)程重復(fù)2次。

孵育清洗2(2次)加入孵育清洗液2，37℃，5分鐘，吸除孵育清洗液2，該過(guò)程重復(fù)2次。

顯色加入顯色液，37℃，靜止顯色15分鐘，吸除顯色液。

顯色清洗(2次)加入去離子水，37℃，5分鐘，吸除去離子水，該過(guò)程重復(fù)2次。

結(jié)果判讀根據(jù)雜交點(diǎn)顯色情況進(jìn)行結(jié)果判讀

10.3.3.2自動(dòng)雜交儀測(cè)定過(guò)程：

按膜芯片自動(dòng)雜交儀操作說(shuō)明書開(kāi)機(jī)，預(yù)熱，之后將包裝有膜芯片的雜交盒放入自動(dòng)雜交儀中開(kāi)始

雜交過(guò)程，依次自動(dòng)完成去活化、雜交、清洗、酶孵育、顯色等步驟，自動(dòng)完成雜交過(guò)程。

具體過(guò)程如表8所示，膜芯片自動(dòng)雜交設(shè)備通用要求見(jiàn)附錄C。

表8.自動(dòng)雜交儀測(cè)定過(guò)程

程序名稱試劑名稱溫度（℃）時(shí)間（min）

去活化去活化液378

去活化清洗去活化清洗液605

雜交雜交液4245

雜交清洗雜交清洗液525

雜交清洗雜交清洗液525

酶孵育孵育液4230

孵育清洗1孵育清洗液1425

孵育清洗1孵育清洗液1425

孵育清洗2孵育清洗液2375

孵育清洗2孵育清洗液2375

顯色顯色液3715

顯色清洗去離子水375

顯色清洗去離子水375

結(jié)果判讀根據(jù)雜交點(diǎn)顯色情況進(jìn)行結(jié)果判讀

9.4膜芯片結(jié)果判讀

9.4.1目測(cè)判讀

9

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顯色后的膜芯片可以用肉眼直接判讀檢測(cè)結(jié)果。陽(yáng)性雜交信號(hào)為肉眼明顯可見(jiàn)的藍(lán)色斑點(diǎn)。如果雜

交點(diǎn)部位沒(méi)有顯色，和膜芯片背景相同，則判讀為陰性雜交信號(hào)。

9.4.2膜芯片識(shí)讀儀判讀

膜芯片顯色后，使用膜芯片識(shí)讀儀進(jìn)行掃描分析，根據(jù)雜交點(diǎn)的灰度值判斷檢測(cè)結(jié)果，陽(yáng)性雜交信

號(hào)的判斷閾值是3倍背景灰度值加上3倍背景灰度值標(biāo)準(zhǔn)差。

10結(jié)果判斷

10.1質(zhì)量控制

10.1.1質(zhì)量控制原則

實(shí)驗(yàn)中設(shè)置11.1.2～11.1.4所述的質(zhì)控對(duì)照，其膜芯片雜交檢測(cè)結(jié)果應(yīng)符合以下情況。如果出現(xiàn)非

11.1.2～11.1.4中所述的雜交結(jié)果，則應(yīng)判斷實(shí)驗(yàn)不成功，需重做實(shí)驗(yàn)。

10.1.2核酸提取空白對(duì)照和多重PCR擴(kuò)增試劑空白對(duì)照

膜芯片上內(nèi)源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性，外源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性，陽(yáng)性對(duì)照探針點(diǎn)雜交信號(hào)

陽(yáng)性，陰性對(duì)照探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性。

10.1.3非轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照

膜芯片上內(nèi)源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陽(yáng)性，外源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性，陽(yáng)性對(duì)照探針點(diǎn)雜交信號(hào)

陽(yáng)性，陰性對(duì)照探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性。

10.1.4轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照

膜芯片上內(nèi)源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陽(yáng)性，外源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陽(yáng)性，陽(yáng)性對(duì)照探針點(diǎn)雜交信號(hào)

陽(yáng)性，陰性對(duì)照探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性。

10.2結(jié)果判斷

10.2.1樣本檢測(cè)結(jié)果中陽(yáng)性對(duì)照探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性，可初步判讀膜芯片雜交過(guò)程不成功，應(yīng)確認(rèn)各

雜交試劑是否過(guò)期或保存條件不當(dāng)，更換可疑試劑后重新試驗(yàn)。

10.2.2樣本檢測(cè)結(jié)果中內(nèi)源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性，表明未能從樣本中提取出適宜多重PCR擴(kuò)增的

核酸模板，需要重新進(jìn)行樣本核酸提取和多重PCR擴(kuò)增。

10.2.3樣本檢測(cè)結(jié)果中內(nèi)源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陽(yáng)性，外源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陰性，表明樣本核酸

提取、多重PCR擴(kuò)增和膜芯片雜交過(guò)程正常，判斷樣本中未檢出測(cè)定轉(zhuǎn)基因成分。

10.2.4樣本檢測(cè)結(jié)果中內(nèi)源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)陽(yáng)性，各外源基因探針點(diǎn)雜交信號(hào)部分或全部陽(yáng)性，

表明樣本核酸提取、多重PCR擴(kuò)增和膜芯片雜交過(guò)程正常，判讀樣本中存在陽(yáng)性信號(hào)點(diǎn)對(duì)應(yīng)的轉(zhuǎn)基因成

分。

11確證實(shí)驗(yàn)

轉(zhuǎn)基因成分膜芯片檢測(cè)陽(yáng)性樣本可進(jìn)一步進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)，確證實(shí)驗(yàn)方法按照SN/T1204和SN/T2584

中規(guī)定的方法執(zhí)行。

10

GB/TXXXXX—XXXX

12結(jié)果表述

12.1未檢出

未檢出XXXX基因，陰性質(zhì)控探針雜交點(diǎn)、陽(yáng)性質(zhì)控探針雜交點(diǎn)的檢測(cè)結(jié)果正常。

12.2檢出

檢出XXXX基因，未檢出XXXX基因，陰性質(zhì)控探針雜交點(diǎn)、陽(yáng)性質(zhì)控探針雜交點(diǎn)的檢測(cè)結(jié)果正常。

11

GB/TXXXXX—XXXX

附錄A

（規(guī)范性附錄）

膜芯片法檢測(cè)步驟

A.1膜芯片法檢測(cè)按照?qǐng)DA.1步驟進(jìn)行。

圖A.1

待測(cè)樣品

核酸提取

多重PCR擴(kuò)增

膜芯片雜交