口蹄疫疫苗及免疫技術

引言口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一種急性、熱性、高度接觸傳染性，且可快速遠距離傳播的動物疫病。侵染對象是豬、牛、羊、駱駝等主要畜種及其他家養(yǎng)和野生偶蹄動物,易感動物多達70余種。發(fā)病動物的主要癥狀是精神沉郁、流涎、跛行、臥地，近查可見口、鼻、蹄和母畜乳頭等無毛部位發(fā)生水皰，水皰破損后形成潰瘍或斑痂?？谔阋叩陌l(fā)病率高，可造成巨大的經(jīng)濟損失和社會影響。該病為世界動物衛(wèi)生組織法定報告的動物傳染病，我國將其列為一類動物疫病。目前，口蹄疫仍然在世界許多地區(qū)流行，實踐證明有效的疫苗免疫能夠控制口蹄疫大范圍的暴發(fā)和流行。世界動物衛(wèi)生組織和泛美口蹄疫中心肯定滅活疫苗免疫是當前防控口蹄疫的最有效手段。20世紀50年代，歐洲大部分國家開始實施計劃免疫接種，達到了消除口蹄疫的目的。一些國家也采取這種政策，成為了OIE認可的“免疫無口蹄疫國家”。中國政府對口蹄疫的防控一直高度重視，有健全的組織機構與防控體系，長期堅持實施“預防為主、免疫和撲殺相結合”的綜合防控措施，取得了舉世公認的成效。一、口蹄疫疫苗及選用1、口蹄疫疫苗的選用

免疫預防，疫苗是關鍵。人類自從發(fā)現(xiàn)并確認了口蹄疫病毒，就開始了其疫苗的研究?？谔阋咭呙绲钠焚|和效力是免疫預防的關鍵因素?，F(xiàn)在所用的滅活疫苗是高滴度的強毒增殖之后，經(jīng)滅活處理而獲得?？谔阋咭呙缟a(chǎn)需要高標準的生物安全設施和嚴格的操作規(guī)程，為此我國政府嚴格控制口蹄疫疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)機構。中國農(nóng)業(yè)部指定中農(nóng)威特生物科技股份有限公司為生產(chǎn)全系列口蹄疫疫苗的唯一企業(yè)。中農(nóng)威特公司歷史悠久，其前身是中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所的生物制品車間，上世紀50年代，就開始了口蹄疫疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)，為我國口蹄疫的防控發(fā)揮了決定性的作用。公司已經(jīng)發(fā)展成為口蹄疫疫苗品類齊全、技術先進、服務先行的領軍企業(yè)，被行業(yè)贊譽為“我國家畜口蹄疫疫情的滅火器，口蹄疫疫苗的原創(chuàng)地，口蹄疫研究的先鋒隊”。口蹄疫病毒有7個血清型，各血清型間互不交叉免疫保護，因此防控口蹄疫相當于防控7種不同的傳染病。每個血清型又有多個亞型，亞型內各毒株間也有明顯的抗原差異，不能全部交叉保護。通常，病毒在發(fā)生變異之后，原有的口蹄疫疫苗對新流行毒株的保護力會下降或失去保護作用，因此疫苗毒株必須與流行毒株相匹配，免疫才有效果。選用口蹄疫疫苗時，不僅必須要考慮血清型的一致性、毒株的抗原匹配性，還需要考慮疫病的流行強度，流行強度越大，需要的疫苗效力應越高。

2、常用口蹄疫疫苗

疫苗效力、安全性等方面的技術進步，為有效防控口蹄疫發(fā)揮了關鍵性的作用，也是消除直至最終消滅口蹄疫的先決條件。每一次新的疫情出現(xiàn)時，中農(nóng)威特生物科技股份有限公司在蘭州獸醫(yī)研究所、OIE/國家口蹄疫參考實驗室、家畜疫病病原生物學國家重點實驗室的強大技術力量的引領推動下，總是走在重大動物疫病防控的最前沿，都能在第一時間為口蹄疫防控一線提供針對流行毒株的最新高效疫苗。（1）豬口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗（Re-O/MYA98/JSCZ/2013株+Re-A/WH/09株）豬口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗（Re-O/MYA98/JSCZ/2013株+Re-A/WH/09株）的最大特點是，突破了傳統(tǒng)制苗毒株的篩選技術，對制苗毒株的基因進行了人工改造，打破了常規(guī)疫苗種毒自然屬性缺陷的限制，提升了疫苗種毒制備技術水平。該疫苗種毒的制備是以口蹄疫病毒的復制、抗原性和致病性等前沿技術理論為指導，利用單質?？谔阋卟《菊燃夹g系統(tǒng)（反向遺傳操作系統(tǒng)，專利號：ZL201310175324.4），定向設計和優(yōu)化改造，構建出病毒產(chǎn)量，以及抗原匹配性、抗原穩(wěn)定性等種用性能和安全性明顯優(yōu)于田間分離毒的疫苗種毒，大大地提高了制苗毒株的免疫原性，使病毒增殖能力更強，敏感性、靶向性更好。結合中農(nóng)威特公司的懸浮培養(yǎng)、抗原濃縮純化等高新技術工藝，再次提升公司內控質量標準，生產(chǎn)出世界上第一個經(jīng)過反向遺傳學技術改造的口蹄疫高效滅活疫苗，具有很高的理論和技術創(chuàng)新，與極高的生產(chǎn)價值。（2）?？谔阋逴型、A型雙價滅活疫苗2013年，口蹄疫的流行形勢又發(fā)生了變化。中農(nóng)威特公司立即啟用了牛口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗的戰(zhàn)略應急儲備技術，突破傳統(tǒng)工藝，全面提升抗原的免疫原性；采用國際先進的、擁有獨立自主知識產(chǎn)權的抗原濃縮純化技術，有效提升了疫苗效力。該疫苗具有廣譜高效、一針兩防、制苗毒株最佳、高于國家標準等特點，被許多大型養(yǎng)殖場廣泛使用，表現(xiàn)出良好的防控效果。（3）豬口蹄疫O型滅活疫苗豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/MYA98/BY/2010株）是OIE/國家口蹄疫參考實驗室和中農(nóng)威特公司,為應對2010年突發(fā)的“緬甸98毒株”疫情而研制的疫苗產(chǎn)品，可以預防O型口蹄疫，已廣泛使用于全國口蹄疫的強制免疫接種和規(guī)?；B(yǎng)殖場口蹄疫的防控。豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/MYA98/BY/2010株）對當前流行于我國的O型口蹄疫3個遺傳譜系、5個典型代表毒株都具有很好的免疫效力，是抗原性和免疫效果優(yōu)良的優(yōu)勢毒株，可以滿足我國當前和今后一段時期內O型口蹄疫防控的需要。（4）口蹄疫O型、亞洲1型、A型三價滅活疫苗（O/MYA98/BY/2010株+Asia1/JSL/ZK/06株+Re-A/WH/09株）口蹄疫O型、亞洲1型、A型三價滅活疫苗的優(yōu)點是抗原譜廣、保護性強，選用的毒株既能預防現(xiàn)行優(yōu)勢流行毒株，又能覆蓋、控制既往流行毒株。O型毒株選用2010年在廣東白云區(qū)采集分離到的與目前流行毒株最為匹配的O/MYA98/BY/2010株，是當前O型口蹄疫防控的最佳毒株。A型毒株是由親本毒（A/WH/09株）通過人工改造基因獲得，既能抵抗A/WH/09株的感染，也能抵抗A/MM/2013株的感染。Asia1毒株選用的是經(jīng)典的江蘇系毒株（Asia1/JSL/ZK/06株），該毒株為我國亞洲1型口蹄疫的防控發(fā)揮了關鍵作用，有力地阻止了亞洲1型口蹄疫在我國的蔓延。（5）其他口蹄疫疫苗中農(nóng)威特公司的疫苗已成為國家口蹄疫疫病強制免疫的主導產(chǎn)品，而且公司能夠隨著疫情形勢的變化及時推出新的疫苗。除以上具有完全自主知識產(chǎn)權的口蹄疫疫苗之外，還出品口蹄疫A型滅活疫苗，口蹄疫O型合成肽疫苗等系列產(chǎn)品。二、口蹄疫疫苗的儲運高效疫苗的生產(chǎn)供應、疫苗毒株與流行毒株的抗原匹配性、預防接種的科學管理、有效的免疫密度等，都會影響口蹄疫疫苗的免疫效果，只有關注每一要素，規(guī)范操作，才能確保成功免疫。否則，不僅直接影響免疫效果，產(chǎn)生接種應激，還有可能延誤疫病的防控，造成重大損失?？谔阋咭呙鐚λ?、堿、熱、紫外線敏感，偏酸、偏堿、過熱、凍融和曝曬，均可使疫苗的有效抗原成分降解，從而使疫苗的免疫效果降低甚至喪失。疫苗必須置于2～8℃的環(huán)境下保存，還要避光防潮、分類存放。為保證疫苗效力，疫苗儲運要有相應的冷藏設施和溫度檢測設備。疫苗運輸須確保全程冷鏈，妥善包裝，使其盡快入庫或到達目的地。疫苗出、入庫應有記錄，使用時采取“先入先用”的原則。三、口蹄疫免疫技術1、免疫前的準備

（1）接種器具準備所需要的注射器、針頭、鑷子，酒精、碘酊、脫脂棉等器械和急救藥物。按動物的大小選用相應型號的注射針頭，以確保將疫苗注入肌肉層。還要做好注射器、針頭的消毒和無菌保存。使用一次性無菌注射器時，要檢查其包裝是否完好，是否在有效期內。一次性物品用過后，應無害化處理。（2）疫苗口蹄疫等重大動物疫病疫苗全部賦二維碼出廠、上市銷售，為謹防假冒偽劣疫苗的流入，應在中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所“國家獸藥查詢”系統(tǒng)對疫苗進行“獸藥產(chǎn)品二維碼追溯查詢”。還要檢查疫苗外觀質量，不得使用疫苗瓶有裂紋、封口不嚴、無標簽，疫苗中有異物、分層、變質、過期，和未按照儲運條件存放的疫苗。（3）動物檢查免疫前要充分了解接種動物的品種、年齡、飼養(yǎng)條件、健康狀況、妊娠情況，及疫苗免疫、發(fā)病流行情況等。（4）小范圍試驗初次或大量使用疫苗的地區(qū)或養(yǎng)殖場，應先進行10～30頭的小范圍試驗，在確認安全、無不良反應后，方可擴大接種范圍。

2、免疫注意事項

（1）人員要求接種工作要求由經(jīng)過培訓的專業(yè)人員，在更換衣服、鞋、帽和消毒之后，嚴格遵守操作規(guī)程進行。接觸過病畜的人員，不應再參加安全畜群的免疫接種，以防疫病的傳播。若必須參加，則一定要通過淋浴、換衣、咳痰和隔離后，方可進行免疫操作。（2）免疫接種“四打”“四不打”為了減少應激反應，提高防疫效果，科學免疫操作倡導“四打”“四不打”。“四打”：①免疫接種僅對健康牲畜進行；②在動物處于休閑、非應激狀態(tài)下進行免疫接種；③將免疫接種安排在氣溫適宜的時間段，如在炎熱季節(jié)，應選在清晨或者傍晚進行；④經(jīng)過長途運輸后的動物，充分休息24小時以上，再進行免疫接種?！八牟淮颉保孩賱游镌谠讱⑶?0天之內不要對其進行免疫接種；②天氣突變、轉群、斷奶、換料、飽腹期間暫不要進行免疫接種；③對患病、瘦弱牲畜，及斷奶前幼畜暫不接種，待牲畜康復或恢復正常后方可免疫接種；④配種20天左右的母畜、一月內即將臨產(chǎn)母畜最好不要接種。

3、免疫程序

疫苗接種要嚴格按照說明書規(guī)定的接種途徑、劑量、注意事項，以及科學的免疫程序進行。（1）推薦免疫程序免疫程序是通過大量試驗驗證后制定的，免疫程序的制定應考慮當?shù)匾咔闋顩r、動物的飼養(yǎng)管理、母源抗體水平、免疫次數(shù)、接種反應，以及疫苗抗原的免疫原性、含量等因素。因此，根據(jù)免疫效果，免疫程序需要在實踐應用中不斷調整和完善。首免時間應根據(jù)幼畜體內的母源抗體水平確定；首免之后，必須在一個月左右二次免疫；經(jīng)過一段時間動物體內抗體水平會逐漸減弱甚至消失，為使機體繼續(xù)保持對口蹄疫病毒的免疫力，根據(jù)免疫抗體檢測結果，需要間隔一段時期再加強免疫。（2）緊急免疫接種緊急情況下，如疫病暴發(fā)時，對疫區(qū)和受威脅區(qū)尚未感染的動物應該緊急免疫接種，以便盡快形成免疫隔離帶。疫苗對安全區(qū)、受威脅區(qū)及疫區(qū)牲畜均可使用。必須依序免疫接種，先接種安全區(qū)的牲畜，然后再接種受威脅區(qū)的牲畜，最后接種疫區(qū)內的牲畜。非疫區(qū)的動物，在接種后21天方可運輸。

4、免疫接種操作

免疫接種操作是影響口蹄疫疫苗免疫效果的重要因素之一。為有效減少冷刺激，保證劑量均勻、方便使用，要將疫苗回溫到20～25℃后，再進行免疫接種。使用前，應將疫苗充分搖勻，但切不可劇烈振蕩，以防氣泡產(chǎn)生。已經(jīng)吸出的疫苗不可再回注于疫苗瓶內。疫苗瓶開啟后，應在當天盡快用完。免疫接種口蹄疫疫苗時，不要同時接種其他疫苗。接種器具和注射部位應該嚴格消毒，接種時針頭要逐頭更換，保證一針一畜，以免造成交叉感染。接種部位一般選擇在頸部肌肉比較厚的部位。注射時入針深度要適中，注射劑量要準確。針頭與體表呈90°垂直注入疫苗，確保將疫苗注入肌肉內，不可注入脂肪層或者皮下。禁止以“飛針”方式注射，以免造成疫苗注射劑量不足和注射部位不準確。接種時，需有專人做好記錄，注明家畜種類、大小、性別、接種動物頭數(shù)和未接種頭數(shù)等。在安全接種后，觀察7～10日，并詳細記錄有關情況。由于口蹄疫的特殊性，接種疫苗只是預防和控制口蹄疫的重要措施之一。在免疫預防的同時，還應加強飼養(yǎng)管理，采取消毒、隔離、封鎖等其他綜合防治措施。

5、免疫副反應的觀察與預防

疫苗接種后可能會產(chǎn)生副反應。（1）正常反應免疫接種動物精神、食欲正常，注射部位無明顯變化，泌乳正常，僅體溫一過性升高，一日內恢復，無其他可見臨床體征變化。（2）一般反應注射部位腫脹、體溫升高，減食1～2日，隨著時間的延長，反應逐漸減輕，直至消失。（3）嚴重反應因品種、個體差異，少數(shù)動物可能出現(xiàn)急性過敏反應，如急躁不安、呼吸加快、肌肉震顫、鼻腔流血、口角泛白沫等，甚至因搶救不及時而死亡，少數(shù)妊娠母畜可能出現(xiàn)流產(chǎn)。對嚴重副反應動物，建議及時使用腎上腺素、地塞米松等藥物進行治療，同時采用適當?shù)妮o助治療措施，以減少損失。四、免疫效果評價免疫動物的血清抗體水平與抗強毒侵襲的免疫保護有一定的正相關性。因此，抗體監(jiān)測能夠間接反映免疫接種效果，可為制定合理免疫程序提供依據(jù)。對于已經(jīng)實施了免疫接種的畜群，必需監(jiān)測動物群體的抗體水平和免疫合格率，以評估動物群體的抗感染能力。同時，也要結合流行病學、臨床癥狀、血清學指標、預防效果等對免疫效果做出綜合性判斷。接種口蹄疫疫苗時要求應免動物100%免疫，免疫抗體效價合格率達到70%以上。若免疫合格率較低，免疫效果不理想，未達到國家規(guī)定的抗體效價合格率水平，應當分析原因、采取措施、及時進行補免，提高免疫效果。五、結束