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文檔簡介

犐犆犛65.020.20

犅05

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

犇犅32/犜3519—2019

芋頭脫毒快繁技術(shù)規(guī)程

犜犲犮犺狀犻犮犪犾狉犲犵狌犾犪狋犻狅狀狅犳狉犪狆犻犱狆狉狅狆犪犵犪狋犻狅狀犳狅狉狏犻狉狌狊犳狉犲犲狋犪狉狅

20190112發(fā)布20190130實施

江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

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芋頭脫毒快繁技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了芋頭脫毒組培苗培育、脫毒種芋繁殖體系的大田管理和種芋采收、預(yù)處理、貯存等采

后環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制技術(shù)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于江蘇省地方特色芋頭品種的脫毒種芋繁殖工作。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則

NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則

NY/T5010無公害食品種植業(yè)產(chǎn)地環(huán)境條件

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

脫毒原原種芋狏犻狉狌狊犳狉犲犲犫狉犲犲犱犲狉狊犲犲犱狋犪狉狅

用組織培養(yǎng)方法對芋頭進行脫毒,獲得無病毒組培苗后,在防蟲條件下種植獲得的種芋。

3.2

脫毒原種芋狏犻狉狌狊犳狉犲犲犳狅狌狀犱犪狋犻狅狀狊犲犲犱狋犪狉狅

由脫毒原原種芋在防蟲條件下種植獲得的種芋。

3.3

脫毒種芋狏犻狉狌狊犳狉犲犲狊犲犲犱狋犪狉狅

由脫毒原種芋在符合條件產(chǎn)地種植獲得的種芋。

4生產(chǎn)基礎(chǔ)條件要求

4.1環(huán)境要求

符合NY/T5010規(guī)定。

4.2生產(chǎn)主體要求

符合《中華人民共和國種子法》和《農(nóng)作物種子生產(chǎn)經(jīng)營許可管理辦法》規(guī)定的經(jīng)營主體。

4.3脫毒組培苗擴繁基地要求

組培室組成包括準(zhǔn)備室、接種室、培養(yǎng)室。培養(yǎng)室規(guī)模應(yīng)與脫毒核心種芋繁殖圃面積相匹配,按照

每萬株脫毒組培苗20m2建設(shè)。脫毒種芋按照“三級擴繁”體系建設(shè),脫毒原原種芋繁殖圃、脫毒原種芋

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繁殖田、脫毒種芋繁殖田面積比為1∶12∶200。

4.4脫毒原原種芋繁殖基地要求

4.4.1繁殖基地經(jīng)營主體要求

需在專業(yè)化種芋生產(chǎn)單位進行,應(yīng)具有防蟲網(wǎng)棚內(nèi)種植條件,由專業(yè)技術(shù)人員負(fù)責(zé)田間管理和去雜

除劣操作等。

4.4.2防蟲網(wǎng)棚建設(shè)

防蟲網(wǎng)選用40目~60目優(yōu)質(zhì)尼龍紗網(wǎng),棚內(nèi)空間大(棚高2m以上,寬6m~8m),結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,利

于田間作業(yè),具有較強的抗風(fēng)性。

4.4.3繁殖田塊要求

靠近水源,排灌方便;選擇土層深厚、土壤肥沃的偏沙性壤土;未種植芋頭及甘薯、馬鈴薯、山藥等地

下根莖類作物1年以上;田間灌排溝系配套,水利設(shè)施齊全,達到“旱能灌,澇能排”。

4.5脫毒原種芋繁殖基地要求

4.5.1繁殖基地經(jīng)營主體要求

見4.4.1。

4.5.2防蟲網(wǎng)棚建設(shè)

見4.4.2。

4.5.3繁殖田塊要求

見4.4.3。

4.6脫毒種芋繁殖基地要求

4.6.1繁殖基地經(jīng)營主體要求

見4.4.1。

4.6.2繁殖田塊要求

見4.4.3。

5芋頭脫毒組培苗培育

5.1外植體培養(yǎng)和處理

以芋頭莖尖為外植體。選取保存完好、無病斑的芋頭,經(jīng)質(zhì)量比0.2%的高錳酸鉀(KMnO4)滅菌處

理5min,用滅菌后的細(xì)沙覆蓋整個芋頭的2/3處,放置于光照培養(yǎng)箱中促其萌發(fā)。當(dāng)芽生長到1cm~

3cm時切取莖尖,剝除莖尖外層2層~3層葉片,流水沖洗10min,在超凈工作臺上用75%酒精浸泡

30s,用3%次氯酸鈉(NaClO)溶液消毒10min~15min,無菌水漂洗5次~7次。剝離莖尖外層葉鞘,

在解剖鏡下剝?nèi)。埃矗恚怼埃福恚泶笮∏o尖作為外植體。

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5.2愈傷組織誘導(dǎo)和組培苗芽形成

將剝?nèi)〉耐庵搀w接種在MS+2,4二氯苯氧乙酸(2,4D)2.0mg/L的培養(yǎng)基中,在溫度25±

2℃、光照強度2200lx左右的培養(yǎng)室內(nèi)無菌培養(yǎng)50d—60d,誘導(dǎo)形成愈傷組織。芋愈傷組織在上述

培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下再經(jīng)60d左右培養(yǎng),分化出芽。

5.3病毒鑒定

將組培苗芽切下,接種在MS+噻苯隆(TDZ)1.0mg/L的培養(yǎng)基中,長到兩葉以上時(20d左

右),取部分葉片利用酶聯(lián)免疫分析(ELISA)法進行芋頭花葉病毒(DMV)的檢測。保留無病毒組培苗

進行繼代培養(yǎng)。

5.4繼代培養(yǎng)

將無病毒組培苗繼續(xù)培養(yǎng)。當(dāng)植株萌發(fā)出的不定芽達2.0cm時,切下不定芽接種在MS+TDZ

1.0mg/L的培養(yǎng)基中進行繼代培養(yǎng)。一般連續(xù)繼代培養(yǎng)不超過4次。

5.5誘導(dǎo)生根

將高≥2.0cm、帶有2片葉的健壯小苗分開,轉(zhuǎn)入含0.02%活性炭的MS+萘乙酸(NAA)

0.5mg/L+6芐氨基嘌呤(6BA)0.1mg/L培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),誘導(dǎo)生根,形成脫毒試管苗。試管苗

培養(yǎng)30d—40d(根長3cm~5cm)后,移栽田間擴繁脫毒原原種芋。

6脫毒原原種芋繁殖

6.1煉苗處理

最佳栽植時間為4月下旬至5月上旬。移栽前一周將脫毒試管苗置于常溫環(huán)境中煉苗,避免陽光

直射。移栽前1d—2d打開瓶蓋煉苗。

6.2移栽種植

縱向筑畦作為苗床,畦高6cm~7cm,畦面寬1.0m,畦溝寬0.4m,每畦種2行。按行距50cm在

苗床上開寬15cm、深10cm的移栽行溝,溝內(nèi)填實酸堿度中性(pH6.8~7.3,EC1mS/cm~2mS/cm)

的常規(guī)蔬菜育苗基質(zhì),并澆透水。將煉苗后的試管苗洗凈基部培養(yǎng)基,按株距30cm栽入移栽行溝。栽

后噴水保濕,搭小拱棚并加蓋遮陽網(wǎng)。移栽后的前兩周每天早晚各澆水1次,第二周開始早上10時前

和下午4時后打開遮陽網(wǎng),第三周開始揭掉遮陽網(wǎng)。苗期保持棚內(nèi)溫度15℃~25℃,若溫度過高時上

午10時至下午4時蓋遮陽網(wǎng)降溫。注意勤澆水,保持基質(zhì)含水量80%~90%。

6.3病蟲害控制

6.3.1控制病害

每隔15d左右選擇晴天使用符合GB/T8321規(guī)定的廣譜保護性殺菌劑噴霧。

6.3.2防治害蟲

主要害蟲為蚜蟲、斜紋夜蛾和蠐螬,使用符合GB/T8321規(guī)定的適宜殺蟲劑進行化學(xué)噴霧防治。

芋頭主要害蟲適宜使用農(nóng)藥和防治方法見表1。

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表1芋頭主要害蟲適宜使用農(nóng)藥和防治方法表

害蟲適宜使用農(nóng)藥防治方法

選擇晴天下午3點左右開始灌水,保持淺水層至次日早晨,然后

蠐螬不使用農(nóng)藥晾田2d—3d

蚜蟲吡蟲啉及復(fù)配劑采用25%吡蟲啉及復(fù)配劑1000倍液均勻噴霧

采用10%氯蟲苯甲酰胺+菊酯類殺蟲劑2000液均勻噴霧,噴

斜紋夜蛾氯蟲苯甲酰胺+菊酯類殺蟲劑藥時間應(yīng)在傍晚或清晨

6.4苗床管理

6.4.1控制溫度

生長前期溫度控制在25℃以下,后期溫度控制在25℃~30℃。當(dāng)溫度≥30℃時,應(yīng)覆蓋遮陽網(wǎng)

或噴水降溫。

6.4.2水分管理

晴天早晚可澆水各1次,陰天根據(jù)土壤溫度、水分情況3d—4d澆水1次,保證基質(zhì)不過干或過

濕,以植株不出現(xiàn)缺水癥狀為宜。

6.4.3肥料管理

全生育期只施肥1次。于7月下旬按照凈苗床施硫酸鉀復(fù)合肥(N15P15K15)30kg/667m2,或

施用符合NY/T496規(guī)定的氮磷鉀等量的其他肥料(忌用含氯肥料)。

6.4.4保留分株

全生育期不除邊荷、不去分株。

6.5收獲保存

6.5.1適時收獲

11月上中旬收獲為宜。收獲前20d不澆水,保持土壤干爽。

6.5.2種芋處理

收獲芋盤,不掰下子孫芋,保持芋盤完整;清理芋盤上泥土,晾曬1d—2d;用25%阿米西達懸浮液

800倍液均勻噴霧,再晾曬1d—2d;用干生石灰粉均勻包裹,入庫保存。

6.5.3越冬儲存

將處理后的種芋盤擺放在倉庫內(nèi),先鋪一層稻草,然后擺一層種芋盤,再均勻撒一層生石灰干粉。

如此擺放多層,堆高不宜超過1m。庫內(nèi)溫度控制在5℃~8℃,相對濕度80%~90%,定期通風(fēng),保持

倉庫內(nèi)清潔衛(wèi)生。貯藏期間及時剔除爛芋。

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7脫毒原種芋繁殖

7.1整地作畦

冬前深耕曬垡,施入腐熟的農(nóng)家肥2000kg/667m2左右,春季再次施腐熟的農(nóng)家肥1000kg/

667m2左右。播種前做好畦,畦高6cm~7cm,畦面寬0.8m左右,畦溝寬0.4m左右。

7.2播種要求

7.2.14月上旬播種。

7.2.2每畦2行,行距40cm,株距30cm,種植密度約3400株/667m2左右。

7.2.3開溝播種,播種溝深度10cm,種芋均勻擺放于溝內(nèi),及時覆土。覆土后全田均勻噴灑96%金都

爾乳油800倍液,并及時加蓋黑地膜。黑地膜必須貼緊地面,四周用土封好。

7.3播后管理

7.3.1播種出苗期間土壤含水量在70%~80%為宜。若遇長期干旱,要及時澆水。發(fā)芽后及時破膜

引苗。

7.3.2苗期保持田間土壤含水量不低于60%。

7.3.3病蟲害控制

病害防治方法見6.3.1。

蟲害防治方法見6.3.2。

7.3.4生長期管理

a)水分管理:保持土壤含水量70%左右,干旱時及時澆水。7月份在無有效降雨情況下,每隔

5d—7d灌水1次,要“溝灌窨水,夜灌晨排”,不大水漫灌,不能長期淹水。8月上旬以后,灌

水次數(shù)可減少,土壤偏干應(yīng)及時灌水,灌水方法同7月份。

b)施肥要求:當(dāng)葉齡達到8葉~9葉時(一般在7月中旬),及時追肥。撒施菜籽餅60kg/667m2

左右+硫酸鉀復(fù)合肥(N15P15K15)30kg/667m2左右,或施用符合NY/T496《肥料合理使

用準(zhǔn)則通則》規(guī)定的相等氮磷鉀施用量的其他肥料。

c)壅根培土:7月中下旬進行壅根培土。挖取畦間溝內(nèi)泥土,培于芋頭行上,壅土高度≥10cm。

d)全生育期不要去除分株。

7.4收獲保存

見6.5。

8脫毒種芋擴繁

利用脫毒原種芋在大田進行擴繁,生產(chǎn)管理、保存方法見第7章。

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前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:殷劍美、張培通、王立、韓曉勇。

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芋頭脫毒快繁技術(shù)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了芋頭脫毒組培苗培育、脫毒種芋繁殖體系的大田管理和種芋采收、預(yù)處理、貯存等采

后環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制技術(shù)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于江蘇省地方特色芋頭品種的脫毒種芋繁殖工作。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則

NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則

NY/T5010無公害食品種植業(yè)產(chǎn)地環(huán)境條件

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

脫毒原原種芋狏犻狉狌狊犳狉犲犲犫狉犲犲犱犲狉狊犲犲犱狋犪狉狅

用組織培養(yǎng)方法對芋頭進行脫毒,獲得無病毒組培苗后,在防蟲條件下種植獲得的種芋。

3.2

脫毒原種芋狏犻狉狌狊犳狉犲犲犳狅狌狀犱犪狋犻狅狀狊犲犲犱狋犪狉狅

由脫毒原原種芋在防蟲條件下種植獲得的種芋。

3.3

脫毒種芋狏犻狉狌狊犳狉犲犲狊犲犲犱狋犪狉狅

由脫毒原種芋在符合條件產(chǎn)地種植獲得的種芋。

4生產(chǎn)基礎(chǔ)條件要求

4.1環(huán)境要求

符合NY/T5010規(guī)定。

4.2生產(chǎn)主體要求

符合《中華人民共和國種子法》和《農(nóng)作物種子生產(chǎn)經(jīng)營許可管理辦法》規(guī)定的經(jīng)營主體。

4.3脫毒組培苗擴繁基地要求

組培室組成包括準(zhǔn)備室、接種室、培養(yǎng)室。培養(yǎng)室規(guī)模應(yīng)與脫毒核心種芋繁殖圃面積相匹配,按照

每萬株脫毒組培苗20m2建設(shè)。脫毒種芋按照“三級擴繁”體系建設(shè),脫毒原原種芋繁殖圃、脫毒原種芋

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繁殖田、脫毒種芋繁殖田面積比為1∶12∶200。

4.4脫毒原原種芋繁殖基地要求

4.4.1繁殖基地經(jīng)營主體要求

需在專業(yè)化種芋生產(chǎn)單位進行,應(yīng)具有防蟲網(wǎng)棚內(nèi)種植條件,由專業(yè)技術(shù)人員負(fù)責(zé)田間管理和去雜

除劣操作等。

4.4.2防蟲網(wǎng)棚建設(shè)

防蟲網(wǎng)選用40目~60目優(yōu)質(zhì)尼龍紗網(wǎng),棚內(nèi)空間大(棚高2m以上,寬6m~8m),結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,利

于田間作業(yè),具有較強的抗風(fēng)性。

4.4.3繁殖田塊要求

靠近水源,排灌方便;選擇土層深厚、土壤肥沃的偏沙性壤土;未種植芋頭及甘薯、馬鈴薯、山藥等地

下根莖類作物1年以上;田間灌排溝系配套,水利設(shè)施齊全,達到“旱能灌,澇能排”。

4.5脫毒原種芋繁殖基地要求

4.5.1繁殖基地經(jīng)營主體要求

見4.4.1。

4.5.2防蟲網(wǎng)棚建設(shè)

見4.4.2。

4.5.3繁殖田塊要求

見4.4.3。

4.6脫毒種芋繁殖基地要求

4.6.1繁殖基地經(jīng)營主體要求

見4.4.1。

4.6.2繁殖田塊要求

見4.4.3。

5芋頭脫毒組培苗培育

5.1外植體培養(yǎng)和處理

以芋頭莖尖為外植體。選取保存完好、無病斑的芋頭,經(jīng)質(zhì)量比0.2%的高錳酸鉀(KMnO4)滅菌處

理5min,用滅菌后的細(xì)沙覆蓋整個芋頭的2/3處,放置于光照培養(yǎng)箱中促其萌發(fā)。當(dāng)芽生長到1cm~

3cm時切取莖尖,剝除莖尖外層2層~3層葉片,流水沖洗10min,在超凈工作臺上用75%酒精浸泡

30s,用3%次氯酸鈉(NaClO)溶液消毒10min~15min,無菌水漂洗5次~7次。剝離莖尖外層葉鞘,

在解剖鏡下剝?nèi)。埃矗恚怼埃福恚泶笮∏o尖作為外植體。

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5.2愈傷組織誘導(dǎo)和組培苗芽形成

將剝?nèi)〉耐庵搀w接種在MS+2,4二氯苯氧乙酸(2,4D)2.0mg/L的培養(yǎng)基中,在溫度25±

2℃、光照強度2200lx左右的培養(yǎng)室內(nèi)無菌培養(yǎng)50d—60d,誘導(dǎo)形成愈傷組織。芋愈傷組織在上述

培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下再經(jīng)60d左右培養(yǎng),分化出芽。

5.3病毒鑒定

將組培苗芽切下,接種在MS+噻苯?。ǎ裕模冢保埃恚纾痰呐囵B(yǎng)基中,長到兩葉以上時(20d左

右),取部分葉片利用酶聯(lián)免疫分析(ELISA)法進行芋頭花葉病毒(DMV)的檢測。保留無病毒組培苗

進行繼代培養(yǎng)。

5.4繼代培養(yǎng)

將無病毒組培苗繼續(xù)培養(yǎng)。當(dāng)植株萌發(fā)出的不定芽達2.0cm時,切下不定芽接種在MS+TDZ

1.0mg/L的培養(yǎng)基中進行繼代培養(yǎng)。一般連續(xù)繼代培養(yǎng)不超過4次。

5.5誘導(dǎo)生根

將高≥2.0cm、帶有2片葉的健壯小苗分開,轉(zhuǎn)入含0.02%活性炭的MS+萘乙酸(NAA)

0.5mg/L+6芐氨基嘌呤(6BA)0.1mg/L培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),誘導(dǎo)生根,形成脫毒試管苗。試管苗

培養(yǎng)30d—40d(根長3cm~5cm)后,移栽田間擴繁脫毒原原種芋。

6脫毒原原種芋繁殖

6.1煉苗處理

最佳栽植時間為4月下旬至5月上旬。移栽前一周將脫毒試管苗置于常溫環(huán)境中煉苗,避免陽光

直射。移栽前1d—2d打開瓶蓋煉苗。

6.2移栽種植

縱向筑畦作為苗床,畦高6cm~7cm,畦面寬1.0m,畦溝寬0.4m,每畦種2行。按行距50cm在

苗床上開寬15cm、深10cm的移栽行溝,溝內(nèi)填實酸堿度中性(pH6.8~7.3,EC1mS/cm~2mS/cm)

的常規(guī)蔬菜育苗基質(zhì),并澆透水。將煉苗后的試管苗洗凈基部培養(yǎng)基,按株距30cm栽入移栽行溝。栽

后噴水保濕,搭小拱棚并加蓋遮陽網(wǎng)。移栽后的前兩周每天早晚各澆水1次,第二周開始早上10時前

和下午4時后打開遮陽網(wǎng),第三周開始揭掉遮陽網(wǎng)。苗期保持棚內(nèi)溫度15℃~25℃,若溫度過高時上

午10時至下午4時蓋遮陽網(wǎng)降溫。注意勤澆水,保持基質(zhì)含水量80%~90%。

6.3病蟲害控制

6.3.1控制病害

每隔15d左右選擇晴天使用符合GB/T8321規(guī)定的廣譜保護性殺菌劑噴霧。

6.3.2防治害蟲

主要害蟲為蚜蟲、斜紋夜蛾和蠐螬,使用符合GB/T8321規(guī)定的適宜殺蟲劑進行化學(xué)噴霧防治。

芋頭主要害蟲適宜使用農(nóng)藥和防治方法見表1。

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表1芋頭主要害蟲適宜使用農(nóng)藥和防治方法表

害蟲適宜使用農(nóng)藥防治方法

選擇晴天下午3點左右開始灌水,保持淺水層至次日早晨,然后

蠐螬不使用農(nóng)藥晾田2d—3d

蚜蟲吡蟲啉及復(fù)配劑采用25%吡蟲啉及復(fù)配劑1000倍液均勻噴霧

采用10%氯蟲苯甲酰胺+菊酯類殺蟲劑2000液均勻噴霧,噴

斜紋夜蛾氯蟲苯甲酰胺+菊酯類殺蟲劑藥時間應(yīng)在傍晚或清晨

6.4苗床管理

6.4.1控制溫度

生長前期溫度控制在25℃以下,后期溫度控制在25℃~30℃。當(dāng)溫度≥30℃時,應(yīng)覆蓋遮陽網(wǎng)

或噴水降溫。

6.4.2水分管理

晴天早晚可澆水各1次,陰天根據(jù)土壤溫度、水分情況3d—4d澆水1次,保證基質(zhì)不過干或過

濕,以植株不出現(xiàn)缺水癥狀為宜。

6.4.3肥料管理

全生育期只施肥1次。于7月下旬按照凈苗床施硫酸鉀復(fù)合肥(N15P15K15)30kg/667m2,或

施用符合NY/T496規(guī)定的氮磷鉀等量的其他肥料(忌用含氯肥料)。

6.4.4保留分株

全生育期不除邊荷、不去分株。

6.5收獲保存

6.5.1適時收獲

11月上中旬收獲為宜。收獲前20d不澆水,保持土壤干爽。

6.5.2種芋處理

收獲芋盤,不掰下子孫芋,保持芋盤完整;清理芋盤上泥土,晾曬1d—2d;用25%阿米西達懸浮液

800倍液均勻噴霧,再晾曬1d—2d;用干生石灰粉均勻包裹,入庫保存。

6.5.3越冬儲存

將處理后的種芋盤擺放在倉

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