生物技術(shù)專業(yè)畢業(yè)論文-浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況的毒理學(xué)調(diào)查(任務(wù)書+開題報(bào)告+文獻(xiàn)綜述+外文翻譯)

PAGEPAGE51畢業(yè)手冊(cè)目錄（一）本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))正文………………3（二）本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))任務(wù)書…………………18（三）本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))開題報(bào)告………………20（四）本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))文獻(xiàn)綜述………………24（五）本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))外文翻譯…………30本科生畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況的毒理學(xué)調(diào)查姓名：指導(dǎo)老師：合作老師：專業(yè)：生物技術(shù)提交日期：目錄中文摘要………………5外文摘要………………6引言……………………7一、研究對(duì)象…………7二、材料和方法………………………71.材料和儀器………………………72.方法………………82.1兒童血鉛暴露水平…………82.2基因多態(tài)性…………………82.2.1兒童人體外周血DNA提取……………82.2.2基因組DNA擴(kuò)增………82.2.3PCR產(chǎn)物酶切2.2.4基因型及等位基因比例計(jì)算…………92.3尿δ-ALA……………………92.3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及樣品測(cè)定………92.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制………102.3.3樣品測(cè)定………………102.3.4計(jì)算……………………103.統(tǒng)計(jì)方法…………10三、結(jié)果………………101.兒童血鉛水平……………………102.兒童血樣標(biāo)本提取的基因組DNA擴(kuò)增和酶切的電泳結(jié)果……113.兒童基因型分布…………………114.基因多態(tài)性對(duì)兒童血鉛水平的影響……………124.1不同基因型的兒童血鉛水平比較…………124.2同一地區(qū)基因多態(tài)性與血鉛水平關(guān)系……125.尿δ-ALA檢測(cè)的效應(yīng)指標(biāo)……………………13四、討論………………13參考文獻(xiàn)………………15致謝……………………17浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況的毒理學(xué)調(diào)查摘要：目的研究浙江省部分地區(qū)兒童鉛暴露情況。方法浙江省5個(gè)地區(qū)學(xué)齡兒童作為研究對(duì)象。采集兒童外周靜脈血和晨尿，對(duì)血鉛、δ-氨基-γ-酮戊酸脫水酶基因（ALAD）多態(tài)性和尿δ-氨基-γ-酮戊酸(ALA)水平進(jìn)行分析。結(jié)果500名學(xué)齡兒童中ALAD1-1基因型有476例（95.2%），ALAD1-2基因型24例（4.8%）,未發(fā)現(xiàn)ALAD2-2基因型。等位基因ALAD-1和ALAD-2的頻率分別為97.6%和2.4%.淳安和桐鄉(xiāng)兒童血鉛水平（分別為78.217±2.95μg/L,146.994±1.55μg/L）顯著高于開化（53.555±2.29μg/L）；ALAD1-2基因型血鉛水平與ALAD1-1基因型血鉛水平無顯著性差異。路橋兒童尿中δ-ALA水平顯著高于開化，桐鄉(xiāng)兒童尿δ-ALA顯著低于開化，其它地區(qū)沒有明顯差異。結(jié)論浙江省部分地區(qū)可能存在較高的鉛污染，鉛對(duì)學(xué)齡兒童的健康影響值得引起重視。盡管本研究中ALAD1-2基因型并未表現(xiàn)高血鉛水平，但作為敏感人群仍需要有關(guān)部門進(jìn)一步做好監(jiān)測(cè)和健康教育宣傳。關(guān)鍵詞：血鉛暴露；血鉛水平；ALAD基因多態(tài)性；尿δ-ALAThetoxicologysurveyaboutleadpollutioninChildrenfrompartareasofZheJAbstract：ObjectiveTostudyleadexposurelevelsinchildrenfrompartareasofZheJiangprovince.MethodsSchool-agechildrenfrompartareasofZhejiangprovincewerechosen.Peripheralvenousbloodandmorningurineofchildrenwerecollected.Bloodlead,polymorphismofδ-amino–γ-ketoneeaciddehydrationenzymegene(ALAD)andurineδ-aminoacid-γ-ketone(ALA)levelswereanalyzed.ResultsTherewere24casesofALAD1-2genotype(4.8%)in500school-agechildren，and476caseswereALAD1-1genotypes(95.2%),whileALAD2-2genotypewasnotfound.ThefrequencyofalleleALAD-1andALAD-2are97.6%and2.4%,respectively.BloodleadlevelsinthechildrenfromChunAnandTongXiang（78.217±2.95μg/L,146.994±1.55μg/L,respectively）significantlyhigherthanthoseofKaiHua（53.555±2.29μg/L）.NosignificantdifferenceswereobservedinbloodleadlevelsbetweenALAD1-2andALAD1-1genotype.δ-ALAlevelsinurinefromLuQiaowassignificantlyhigherthanthoseofKaiHua,however,thoseofTongXiangweresignificantlylowerthanthoseofKaiHua,andnoobviousdifferenceswerefoundamongtheotherareas.ConclusionHighleadpollutionofpartareasinZheJiangprovincemayoccur.Itshouldbeenpaymoreattentiontothehealthofschool-agechildrenexposedleadpollution.AlthoughALAD1-2genotypeswithhighbloodleadlevelswerenotshowKeywords:Leadexposure;Bloodleadlevels;ALADgenepolymorphism;Urineδ–ALA引言鉛是一種具有神經(jīng)性的重金屬元素，對(duì)兒童的生長發(fā)育，智力發(fā)育等有不可逆的危害性。隨著現(xiàn)代工業(yè)和交通業(yè)的高速發(fā)展，環(huán)境污染日趨嚴(yán)重，鉛中毒已經(jīng)成為危害兒童健康的主要因素之一[1]。δ-氨基-γ-酮戊酸脫水酶(ALAD)基因遺傳多態(tài)性與鉛毒性易感性的關(guān)系是近年來研究的焦點(diǎn)。ALAD基因多態(tài)性在改變鉛在體內(nèi)代謝動(dòng)力學(xué)作用方面起重要作用，從而影響其在血鉛水平及毒理作用。國內(nèi)已有關(guān)于學(xué)齡兒童的家庭情況，居住情況，生活習(xí)慣，健康狀況及父母所處的職業(yè)等因素對(duì)血鉛暴露影響的研究[2]，發(fā)現(xiàn)居住于低樓層；有不良的生活習(xí)慣，父母長期從事鉛相關(guān)職業(yè)的兒童鉛中毒率較高。關(guān)于兒童鉛暴露、基因多態(tài)性和相關(guān)效應(yīng)在國內(nèi)也有相關(guān)的研究[3,4,5]，但在浙江省尚未見報(bào)道。為了了解浙江省兒童血鉛暴露情況，本研究從毒理學(xué)角度對(duì)浙江省部分地區(qū)兒童ALAD基因多態(tài)性、血鉛暴露水平和效應(yīng)生物標(biāo)志物尿δ-ALA進(jìn)行分析，對(duì)這些地區(qū)兒童的鉛暴露與基因易感性以及毒性效應(yīng)的相關(guān)性進(jìn)行初步的探討。一、研究對(duì)象監(jiān)測(cè)點(diǎn):浙江省5個(gè)地區(qū)，具體為：杭州淳安縣、衢州開化縣、嘉興桐鄉(xiāng)市、金華蘭溪市、臺(tái)州路橋區(qū)。由于開化地處山區(qū)，工農(nóng)業(yè)業(yè)污染比較少，因此在本研究中作為對(duì)照點(diǎn)。路橋地區(qū)電子垃圾處理工業(yè)發(fā)達(dá)，桐鄉(xiāng)皮革業(yè)發(fā)達(dá)，金華蘭溪化工醫(yī)藥業(yè)發(fā)達(dá)，淳安造酒業(yè)及旅游業(yè)發(fā)達(dá)。研究對(duì)象：4-6年級(jí)在校學(xué)生。收集外周靜脈血樣，抗凝血0.6-1mL和晨尿(中段尿)15mL。二、材料與方法1材料與儀器1.1材料DNA提取試劑盒QIAGEN公司(批號(hào)：51104)DNA擴(kuò)增試劑盒Takara生物工程（大連）有限公司（批號(hào)：DR001A）DNA酶切試劑盒Takara生物工程（大連）有限公司（批號(hào)：D1150A）瓊脂粉BIOBASICINC公司（批號(hào)：AB0013）乙酰乙酸乙酯分析純，KEYGEN凱基生物公司

對(duì)二甲氨基苯甲醛SigmaAldrich95％乙醇杭州長征化學(xué)試劑化工廠1.2主要儀器Eppendorfcentrifuge5810離心機(jī)德國Eppendorf份公司XW-80A渦旋混勻器上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠WFH-101B紫外凝膠成像儀上海精科儀器有限公司PTC-200PCR儀美國生物科技有限公司7K微型離心機(jī)中國制造DK-600S37℃水浴箱BIO-RAD電泳槽美國生物科技有限公司722型分光光度計(jì)上海橫平科學(xué)儀器有限公司2方法2.1兒童血鉛暴露水平血鉛的測(cè)定本次研究選擇開化、桐鄉(xiāng)、淳安三個(gè)地區(qū)的血液標(biāo)本進(jìn)行血鉛水平檢測(cè)，方法參考《血鉛臨床檢驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》中的石墨爐院子吸收光譜法（GFAAS）。2.2基因多態(tài)性2.2.1兒童人體外周血DNA提?、?人外周血2-3mL，EDTA-K2抗凝。小心顛倒混勻，取出0.2mL，置于1.5mLEP管中。⑵.加入20μL/tubeQIAGENProtease（臨用前按kit說明配制，溶于1.2mlsocrent），蓋上cap，上下顛倒混勻2次。⑶.加入200μL，AL，vortex15seconds。⑷.56℃10min。⑸.加入200μL/tube無水乙醇，vortex15seconds。⑹.快速離心，將EP管中的液體小心轉(zhuǎn)移到minispincolumn中，6000g，2min。⑺.棄去套管中的液體，并換上清潔的套管。⑻.加入500μL/tubeBUFFERAW1.，6000g，2min。⑼.棄去套管中的液體，并換上清潔的套管。⑽.加入500μL/tubeBUFFERAW2，20000g，2min。⑾.棄去套管中的液體，并將minispincolumn置回其中。⑿.20000g，2min，以便徹底清除column中的液體。⒀.將minispincolumn置于清潔的EP管中，室溫靜置5min。⒁.加入200μL/tubeBUFFERAE，6000g，2min。⒂.收集EP管，做好標(biāo)記后，-802.2.2基因組DNA擴(kuò)增采用PCR-RFLP技術(shù)對(duì)提取的DNA進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增引物：上游：5’-AGACAGACATTAGCTCAGTA-3’下游：5’-GGCAAAGACCACGTCCATTC-3’，PCR擴(kuò)增目的基因片段長度為318bp。(1)PCR反應(yīng)體系見表1.表1PCR反應(yīng)體系成分體積10×Buffer緩沖液3μLdNTP10mMeach2.4μLPrimer110uM1μLPrimer210uM1μLTaq酶(5U/μL)0.25μL模板1μLddH2O21.35μL設(shè)立空白對(duì)照：不加DNA溶液，其它同上。將上述反應(yīng)體系混勻，并離心數(shù)秒后開始PCR擴(kuò)增。（2）擴(kuò)增條件PCR循環(huán)參數(shù)：預(yù)變性94℃10min，94℃30s，55℃30s，72℃30s，36個(gè)循環(huán)，終末延伸72℃10min，低溫保持4℃。擴(kuò)增結(jié)束后，取5μL擴(kuò)增產(chǎn)物加1μL10×上樣緩沖液，混勻后，在1.5%瓊脂糖凝膠中電泳40min（115V恒壓），同時(shí)將Marker（DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)）5μL2.2.3PCR產(chǎn)物按內(nèi)切酶的說明書對(duì)PCR擴(kuò)增的ALAD基因片段(318bp)進(jìn)行酶切。酶切體系為20μL，具體見表2表2MspI酶切反應(yīng)體系成分體積10×Buffer緩沖液2μLPCR產(chǎn)物12μL0.1%BSA2μLddH2O3μL內(nèi)切酶1μL將上述體系混勻，并離心數(shù)秒后，37℃2.2.4基因型及等位基因比例計(jì)算基因型（%）=該地區(qū)某種ALAD基因型例數(shù)/該地區(qū)總的例數(shù)。等位基因概率計(jì)算根據(jù)Hardy-Weinberg平衡（p+q）2=p2+2pq+q2=1推算式中：p、q分別代表等位基因ALAD-1和ALAD-2。2.3尿δ-ALA.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制表3為標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制體系管號(hào)012345標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液，mL00.100.300.500.071.00水，mL2.001.901.701.501.301.00δ-ALA含量，μg01.003.005.007.0010.0取6支具塞比色管按表1配置標(biāo)準(zhǔn)管向各管中加入2.0mL緩沖液、0.40mL乙酰乙酸乙酯，混勻。于沸水浴中加熱12min，取出冷卻至室溫。各加入4mL乙酸乙酯，加塞振搖100次，離心分層。分別取出2.0mL乙酸乙酯層于另外6支具塞比色管中，各加入2.0mL顯色劑混勻，靜置10min。在554nm處，用10ram比色杯，以零管為參比，測(cè)定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，δ-ALA的含量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.3.3樣品測(cè)定對(duì)每一尿樣均取2支具塞比色管，在管中各加入1.0mL尿樣、1.0mL水和2.0mL緩沖液混勻。其中一支為樣品管，另一支為空白管。向樣品管中加入0.40mL乙酰乙酸乙酯，空白管中加入0.40mL緩沖液，充分混勻。其他操作同標(biāo)準(zhǔn)管。2.3.4計(jì)算X=mk/v式中：X：尿中δ-ALA的校正濃度，mg/L；m：由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出的δ-ALA的含量，g；k：尿樣換算成標(biāo)準(zhǔn)比重下的濃度校正系數(shù)；v：分析時(shí)所取尿樣的體積，mL。3.統(tǒng)計(jì)方法采用excel軟件錄入建立數(shù)據(jù)庫，應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和秩和檢驗(yàn)。三、結(jié)果1.兒童血鉛水平本研究對(duì)開化、淳安和桐鄉(xiāng)地區(qū)的兒童血鉛水平進(jìn)行了檢測(cè)。由于血鉛水平呈偏態(tài)分布，因此在本研究中采用幾何分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。結(jié)果見表4。開化144例，血鉛水平為3.7~504.55μg/L，幾何均值為53.555±2.29μg/L；淳安117例，血鉛水平為15.3~558.4μg/L，幾何均值為78.217±2.95μg/L；桐鄉(xiāng)131例，血鉛水平為35.97~295.15μg/L，幾何均值為146.994±1.55μg/L。淳安和桐鄉(xiāng)兒童血鉛水平顯著高于開化（q檢驗(yàn)，P＜0.01），桐鄉(xiāng)兒童的血鉛水平最高。表4不同地區(qū)兒童血鉛水平采樣點(diǎn)名稱n血鉛的幾何平均值(μg/L)對(duì)應(yīng)log10值（μg/L）開化K14453.555±2.291.729±0.36淳安A11778.217±2.951.893±0.47**桐鄉(xiāng)T131146.994±1.552.167±0.19**F值53.738P值0.000注：以開化為對(duì)照組，與淳安比，**P＜0.01；與桐鄉(xiāng)比**P＜0.012.兒童血樣標(biāo)本提取的基因組DNA擴(kuò)增和酶切的電泳結(jié)果ALAD基因擴(kuò)增和酶切結(jié)果是依據(jù)電泳后DNA片段大小進(jìn)行判斷。如圖1（左）,當(dāng)出現(xiàn)318bp條帶時(shí)，即可判斷目的片段被擴(kuò)增出來，再對(duì)其進(jìn)行酶切。如圖1（右），當(dāng)結(jié)果出現(xiàn)第1-5泳道所示時(shí)即為ALAD1-1基因型，出現(xiàn)第6泳道所示即為ALAD1-2基因型。圖1擴(kuò)增ALAD片段（左）與MspI酶切結(jié)果（右）電泳圖M：100bpladdermarker注：3501、03、05、07、09、11為樣品泳道，blank為對(duì)照組泳道。318bp318bp232bp3.兒童基因型分布各監(jiān)測(cè)點(diǎn)學(xué)齡兒童ALAD基因的多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果顯示（見表5），500名兒童中ALAD1-1基因型有476例（95.2%），ALAD1-2基因型24例（4.8%）。其中淳安7例，蘭溪和開化各3例，桐鄉(xiāng)9例，路橋2例，未發(fā)現(xiàn)ALAD2-2基因型。各個(gè)地區(qū)ALAD基因型分布構(gòu)成比例未見顯著性差異（卡方分析，P>0.05）。表5各監(jiān)測(cè)點(diǎn)位學(xué)齡兒童ALAD基因的多態(tài)性檢測(cè)結(jié)果監(jiān)測(cè)點(diǎn)nALAD1-1ALAD1-2ALAD2-2開化1009730淳安1009370蘭溪1009730路橋1009820桐鄉(xiāng)1009190合計(jì)500476244.基因多態(tài)性對(duì)兒童血鉛水平的影響4.1不同基因型的兒童血鉛水平比較為了解血鉛水平與基因型的關(guān)系，本研究對(duì)開化、淳安、桐鄉(xiāng)三地區(qū)兒童的樣本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了分析（見表6）。三地共279例標(biāo)本，其中ALAD1-2基因型19例，ALAD1-1基因型260例，ALAD1-2基因型血鉛平均水平略高于ALAD1-1基因型，但兩者比較，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異無顯著性（方差分析，P>0.05）。表6不同基因型的兒童血鉛水平基因型n血鉛幾何平均值（μg/L）對(duì)應(yīng)log10值（μg/L）ALAD1-1ALAD1-22601988.838±2.511.948±0.4094.929±2.511.977±0.40F值0.090P值0.7644.2同一地區(qū)基因多態(tài)性與血鉛水平關(guān)系為了解同一地區(qū)血鉛水平與基因型的關(guān)系，本研究對(duì)開化、淳安、桐鄉(xiāng)三地區(qū)兒童的樣本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了分析（見表7）。開化ALAD1-1基因型兒童血鉛水平（幾何均數(shù)），與ALAD1-2基因型的血鉛水平無顯著性差異。淳安和桐鄉(xiāng)的不同基因型間兒童血鉛水平差異也無顯著性（P＞0.05）表7同一地區(qū)不同基因型的兒童血鉛水平采樣點(diǎn)名N1N2ALAD1-1（μg/L）ALAD1-2（μg/L）F值p值開化K97357.770±2.40（1.762±0.38）26.503±4.37（1.423±0.06）0.0000.992淳安A93784.664±3.02（1.928±0.48）84.275±3.02（1.926±0.48）2.3660.128桐鄉(xiāng)T919147.333±1.48（2.168±0.17）159.294±1.35（2.20±0.13）0.3320.566注：N1為ALAD1-1基因型的例數(shù)，N2為ALAD1-2基因型的例數(shù)，表格括號(hào)內(nèi)為對(duì)應(yīng)的log10值。5.尿δ-ALA檢測(cè)的效應(yīng)指標(biāo)晨尿δ-氨基-γ-酮戊酸(ALA)檢測(cè)結(jié)果（見表8）顯示，路橋地區(qū)學(xué)齡兒童尿δ-ALA（μg/mL）水平顯著高于開化（q檢驗(yàn)，P＜0.05），而桐鄉(xiāng)學(xué)齡兒童尿δ-ALA（μg/mL）顯著低于開化（q檢驗(yàn)，P＜0.05），其它地區(qū)學(xué)齡兒童尿δ-ALA（μg/mL）與開化比較差異均無顯著性（q檢驗(yàn)，P＞0.05）。表8各監(jiān)測(cè)點(diǎn)位學(xué)齡兒童晨尿δ-ALA檢測(cè)結(jié)果采樣點(diǎn)名稱n尿δ-ALA（μg/mL）開化K1002.872±1.519淳安A1003.194±1.291蘭溪C1002.984±1.218路橋Z1003.635±1.380*桐鄉(xiāng)T1002.628±1.100*F值8.415P0.000注：“*”，表示P<0.05四、討論鉛是具有多臟器毒性的重金屬元素，它在人體的理想水平為零，對(duì)兒童的主要損害是影響大腦發(fā)育[6]。兒童期的神經(jīng)系統(tǒng)正處于快速生長和成熟時(shí)期，對(duì)鉛的毒性尤其敏感。長期暴露在鉛環(huán)境中對(duì)智能發(fā)育產(chǎn)生的損害將不可逆轉(zhuǎn)翻。因此準(zhǔn)確檢測(cè)兒童體內(nèi)血鉛含量。正確指導(dǎo)鉛中毒兒童驅(qū)鉛，對(duì)兒童的生長發(fā)育具有重要的意義。血鉛是反映近期鉛接觸的敏感指標(biāo)，且其水平與鉛中毒的程度密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)淳安和桐鄉(xiāng)兒童血鉛水平顯著高于開化，其中桐鄉(xiāng)兒童的血鉛水平最高。國際兒童血鉛中毒分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為：Ⅰ級(jí)，血鉛＜100ug/L，相對(duì)安全；Ⅱ級(jí)，血鉛100ug/L-199ug/L，血紅素代謝受影響，神經(jīng)傳導(dǎo)速度下降；Ⅲ級(jí)，血鉛200ug/L-499ug/L，鐵鋅鈣代謝受影響，出現(xiàn)缺鈣、缺鋅、血紅蛋白合成障礙，可有免疫力低下、學(xué)習(xí)困難、注意力不集中、智商水平下降或體格生長遲緩等癥狀；Ⅳ級(jí)，血鉛500ug/L-699ug/L，可出現(xiàn)性格多變、易激怒、多動(dòng)癥、攻擊性行為、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、視力和聽力下降、不明原因腹痛、貧血和心律失常等中毒癥狀；Ⅴ級(jí)，血鉛≥700ug/L，可導(dǎo)致腎功能損害、鉛性腦?。^痛、驚厥、昏迷等）甚至死亡。本研究對(duì)象中，開化和淳安血鉛水平處于Ⅰ級(jí)，相對(duì)安全，而桐鄉(xiāng)的血鉛水平已經(jīng)到達(dá)Ⅱ級(jí)范圍，在此暴露水平下可影響神經(jīng)傳導(dǎo)速度和認(rèn)知能力，使兒童易出現(xiàn)頭暈、煩躁、注意力渙散、多動(dòng)，這需我們引起重視。研究發(fā)現(xiàn)ALAD1-2型個(gè)體在鉛暴露時(shí)更容易發(fā)生高血鉛，是鉛毒性的易感和高危人群[7,8]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)ALAD1-2基因型血鉛水平與ALAD1-1基因型血鉛水平無顯著性差異。但有趣的是，對(duì)照地區(qū)的ALAD1-2基因型血鉛水平反而降低。與之前報(bào)道的ALAD1-2基因型血鉛水平不符[3]。可能與本研究的樣本量較少，檢測(cè)到的ALAD1-2基因型數(shù)量較少有關(guān)。另外，開化地處山區(qū)，綠化覆蓋面較大，工農(nóng)業(yè)污染較少，空氣質(zhì)量較好，因而鉛暴露水平本底值較低，ALAD1-2基因型血鉛水平低也可能是一種自然的現(xiàn)象。人體內(nèi)的鉛全部來自外界環(huán)境，外界環(huán)境包括大氣污染、家居環(huán)境中的鉛均會(huì)引起兒童鉛中毒，并主要由消化道和呼吸道進(jìn)入兒童體內(nèi)[9]。對(duì)不同監(jiān)測(cè)點(diǎn)ALAD1-2基因型血鉛水平進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，桐鄉(xiāng)和淳安地區(qū)的兒童血鉛水平顯著高于開化地區(qū)。分析原因之一可能是所處環(huán)境的差異。經(jīng)過對(duì)淳安，開化，桐鄉(xiāng)三個(gè)地區(qū)的工業(yè)情況調(diào)查發(fā)現(xiàn)，桐鄉(xiāng)以皮革業(yè)為主，產(chǎn)生大量的廢水，重金屬污染比較嚴(yán)重；開化所處地理較偏僻，綠化較多，工業(yè)污染很少，反映的是一種比較原始的狀態(tài)；淳安地區(qū)的工業(yè)主要為造酒業(yè)，近年來旅游經(jīng)濟(jì)發(fā)展迅速，由此帶來一系列副反應(yīng)令人擔(dān)憂，比如水源水污染、汽車尾氣污染等。因此本研究鉛暴露水平的結(jié)果與各個(gè)地區(qū)實(shí)際污染情況是比較吻合的。Wetmur等研究發(fā)現(xiàn)，ALAD基因第4外顯子的第177堿基發(fā)生G-C突變，這個(gè)突變改變了ALAD酶構(gòu)象，增加了AIAD2亞單位與鉛的親和力，使AIAD2亞單位與鉛的結(jié)合更為緊密，從而導(dǎo)致攜有AIAD2亞單位的個(gè)體(ALAD22型和ALAD12型)在受到鉛暴露時(shí)更容易發(fā)生高血鉛和鉛中毒[10]。本研究采用PCR-RFLP技術(shù)對(duì)ALAD基因型進(jìn)行檢測(cè)，理論上可得到三種基因型：ALAD1-1基因型、ALAD1-2基因型、ALAD2-2基因型。結(jié)果中只檢測(cè)到ALAD1-1和ALAD1-2兩種基因型，未發(fā)現(xiàn)ALAD2-2基因型，這與已有的國內(nèi)報(bào)道相似[11]。根據(jù)Hardy-Weinberg平衡（p+q）2=p2+2pq+q2=1推算出2種基因型的理論分布頻率為：等位基因ALAD-1和ALAD-2的頻率分別為97.6%和2.4%，這與先前報(bào)道的上海職業(yè)接觸工人的基因型分布頻率（等位基因ALAD-1和ALAD-2的頻率分別為97.05%和2.95%）相似[12]。ALAD基因型分布各地區(qū)之間無顯著性差異。提示浙江省兒童對(duì)鉛毒性的易感程度可能是相似的。在鉛中毒機(jī)制中，鉛會(huì)抑制ALAD和血紅素合成酶的活性。ALAD受抑制后，δ-氨基-γ-酮戊酸（ALA）形成膽色素原的過程受阻，使血中ALA增加，并由尿排出。另外由于ALA合成過程，主要是ALA合成酶受血紅素的反饋調(diào)節(jié)，即鉛對(duì)血紅素合成酶的抑制會(huì)間接促進(jìn)ALA合成酶活性升高，導(dǎo)致ALA增加[13]。本研究結(jié)果顯示，路橋?qū)W齡兒童尿δ-ALA顯著高于開化，間接反映了該地可能存在鉛污染。從目前對(duì)路橋地區(qū)的了解，該地廢舊電器拆卸業(yè)發(fā)達(dá)，并且零星分布有電池制造企業(yè)，因此重金屬污染不可避免。桐鄉(xiāng)學(xué)齡兒童尿δ-ALA顯著低于開化，但血鉛水平相對(duì)較高。這一結(jié)果與目前對(duì)鉛毒性機(jī)制的解釋不相符，是不是鉛能直接抑制ALA合成酶，造成尿δ-ALA降低，或者可能采樣地存在其它的污染源，拮抗鉛的毒性作用，因此有待進(jìn)一步研究或證實(shí)。開化和淳安學(xué)齡兒童的血鉛和尿δ-ALA水平與鉛毒性機(jī)制相符。本研究采用的整群抽樣法，抽取浙江省具有代表性地區(qū)的兒童血樣和尿樣，進(jìn)行血鉛水平、鉛易感情況及相關(guān)效應(yīng)指標(biāo)的檢測(cè)，從一定程度上反映了浙江省學(xué)齡兒童鉛污染的基本情況。本研究還顯示桐鄉(xiāng)和淳安地區(qū)的兒童血鉛水平顯著高于開化地區(qū)，表明隨著浙江省經(jīng)濟(jì)的發(fā)展可能帶來一定的副作用，如兒童鉛中毒等一系列與環(huán)境污染有關(guān)健康相關(guān)問題需要引起關(guān)注。因此，浙江省作為我國經(jīng)濟(jì)相對(duì)發(fā)達(dá)的沿海省份，鉛污染對(duì)兒童健康的影響問題更值得關(guān)注。參考文獻(xiàn)[1]王倩，王潔．2141名學(xué)齡前兒童血鉛水平調(diào)查研究．中國婦幼保健，2009，24(10)：1389-1392．[2]王慧文，錢慧霞.衢州市1875名兒童血鉛水平分析.上海預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2010，22（8）：411-412．[3]王永偉,楊躍林,等.ALAD基因多態(tài)性與鉛毒性遺傳易感性關(guān)系的研究.四川大學(xué)學(xué)報(bào)，2008,39（3）：511-513．[4]吳勝虎．顫祟帷,等．ALAD基因型與兒童鉛毒性易感性研究．國外醫(yī)學(xué)兒科學(xué)分冊(cè)，1999，26(2)：85-87．[5]張文眾，冷曙光,等.基質(zhì)γ-羧基谷氨酸蛋白和氨基乙酰丙酸脫水酶基因多態(tài)性與兒童血鉛的關(guān)系.環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué),2006，23（2）：112-114．[6]于風(fēng)嶺，伊長英，王素蘭,等．2624例兒童血鉛的檢測(cè)與分析．中國婦幼保健，2004，19(11)：117-117．[7]WetmurJG,LehnerG,DesnickRJ.Theδ-aminolevulinatedehydratasepolymorphism:higherbloodleadlevelsinleadworkersandenvironmentallyexposedchildrenwiththe1-2and2-2isozymes.EnvironRes,1991,56:l09-ll9.[8]WetmurJG.Influenceofthecommonhumanα-amunolevulratedehydratasepolymorphismonleadbodyburden.EnmronhealthPellet,1994,102:215-219.[9]劉曉瀛.漫談兒童血鉛中毒.中國醫(yī)療前沿,20l0，18（5）：17-18．[10]WetmurJG,KayaAH,PlewinskaM,eta1.Molecularcharacterizationofthehumanδ-aminolevulinateaciddehydratase2(ALAD2)alleleimplicationsformolecularscreeningofindividualsforgeneticsusceptibilitytoleadpoisoning.AmJGenet,199l,49:757-763.[11]陳涵一，劉莉，等.基于不同人群的鉛暴露標(biāo)志及相關(guān)易感基因.衛(wèi)生研究雜志，2010，39（5）：643-646．[12]葉細(xì)標(biāo)，吳翠娥,等.δ-氨基-γ-酮戊酸脫水酶和維生素D受體基因多態(tài)性與鉛毒性易感關(guān)系的初步分析.中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2002，20(5)：372-374．[13]張紅輝，羅曉寧,等.37例鉛中毒者尿δ-氨基乙酰丙酸的分析報(bào)告.中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生,2009，133(5)：15-1．致謝感謝。。。。。。。本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))任務(wù)書學(xué)院專業(yè)生物技術(shù)姓名學(xué)號(hào)指導(dǎo)老師職稱合作老師職稱題目浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況的毒理學(xué)調(diào)查一、課題的內(nèi)容和任務(wù)要求1.查閱相關(guān)資料、熟悉實(shí)驗(yàn)基本操作 了解目前我國鉛水平及對(duì)人體和環(huán)境的影響，結(jié)合查閱到的資料撰寫相關(guān)綜述性文章一篇。掌握ALAD基因的多態(tài)性檢測(cè)方法的常用指標(biāo)和基本原理。2.掌握人體鉛暴露檢測(cè)的毒理學(xué)方法掌握血樣中ALAD基因提取方法，并掌握PCR技術(shù)；酶切技術(shù)及電泳技術(shù)的檢測(cè)方法操作步驟。3.實(shí)驗(yàn)資料及數(shù)據(jù)整理、統(tǒng)計(jì)及論文撰寫采用SPSS11.0軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)資料的統(tǒng)計(jì)，完成綜述、英文翻譯及浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況毒理學(xué)調(diào)查論文各一篇。二、進(jìn)度安排（起止時(shí)間：2010年7月～2011年3月）2010.7-2010.8文獻(xiàn)查閱，翻譯英文綜述，了解實(shí)驗(yàn)背景，方法，目的。2010.8-2010.9熟悉實(shí)驗(yàn)儀器如PCR儀，電泳槽等，初步嘗試實(shí)驗(yàn)操作，熟悉實(shí)驗(yàn)流程。2010.9-2010.11正式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，重復(fù)，對(duì)樣本DNA進(jìn)行擴(kuò)增、酶切及電泳最后判斷其基因型；對(duì)個(gè)地區(qū)的血鉛水平及尿δ-ALA進(jìn)行測(cè)定。2010.12-2010.1數(shù)據(jù)的處理、統(tǒng)計(jì)和分析。2010.2-2010.3論文撰寫。三、主要參考資料[1]吳勝虎，沈曉明，顏崇淮，等．應(yīng)用氨基-δ-酮戊酸脫氫酶基因型篩查兒童鉛毒性易感人群的研究．中華兒科雜志，2000,38(7)：435-438．[2]WetmurJG,LehnerG,DesnickRJ.Theδ-aminolevulinatedehydratasepolymorphism:higherbloodleadlevelsinleadworkersandenvironmentallyexposedchildrenwiththe1-2and2-2isozymes.EnvironRes,1991,56:l09-ll9.[3]WetmurJG.Influenceofthecommonhumanα-amunolevulratedehydratasepolymorphismonleadbodyburden.EnmronhealthPellet,1994,102:215-219.[4]王永偉,楊躍林,等.ALAD基因多態(tài)性與鉛毒性遺傳易感性關(guān)系的研究.四川大學(xué)學(xué)報(bào)，2008,39（3）：511-513.[5]吳勝虎．顫祟帷,等．ALAD基因型與兒童鉛毒性易感性研究．國外醫(yī)學(xué)兒科學(xué)分冊(cè)，1999，26(2)：85-87.[6]張文眾，冷曙光,等.基質(zhì)γ-羧基谷氨酸蛋白和氨基乙酰丙酸脫水酶基因多態(tài)性與兒童血鉛的關(guān)系.環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué),2006，23（2）：112-114.[7]葉細(xì)標(biāo)，吳翠娥,等.δ-氨基-γ-酮戊酸脫水酶和維生素D受體基因多態(tài)性與鉛毒性易感關(guān)系的初步分析.中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2002,20(5)：372-374.[8]張紅輝，羅曉寧,等.37例鉛中毒者尿δ-氨基乙酰丙酸的分析報(bào)告.中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生,2009,133(5):15-16.簽名欄：學(xué)生：指導(dǎo)老師：學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)：注意：1．任務(wù)書由指導(dǎo)老師填寫、院領(lǐng)導(dǎo)審核，學(xué)生、指導(dǎo)老師、院領(lǐng)導(dǎo)均應(yīng)簽字。2．此任務(wù)書要求在畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）工作開始前下達(dá)。學(xué)院專業(yè)生物技術(shù)姓名學(xué)號(hào)指導(dǎo)老師職稱合作老師職稱題目浙江省部分地區(qū)兒童鉛污染狀況的毒理學(xué)調(diào)查題目性質(zhì)實(shí)驗(yàn)研究技術(shù)開發(fā)工程設(shè)計(jì)應(yīng)用型調(diào)查型其他一、選題依據(jù)和目標(biāo)目的、意義:從毒理學(xué)角度對(duì)浙江省部分地區(qū)兒童ALAD基因多態(tài)性、血鉛暴露水平和效應(yīng)生物標(biāo)志物尿δ-ALA進(jìn)行分析，對(duì)這些地區(qū)兒童的鉛暴露與基因易感性以及毒性效應(yīng)的相關(guān)性進(jìn)行初步的探討。根據(jù)研究結(jié)果，對(duì)相應(yīng)的地區(qū)做好相關(guān)預(yù)防措施和教育宣傳。研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)：隨著全球工業(yè)化和城市化進(jìn)程的加快，現(xiàn)代工業(yè)和交通的迅猛發(fā)展，環(huán)境鉛污染逐漸成為突出的問題，已是影響兒童生長發(fā)育的重要因素。國內(nèi)鉛中毒的研究始于60年代，當(dāng)時(shí)研究的重點(diǎn)是從職業(yè)衛(wèi)生和職業(yè)病的角度出發(fā)，對(duì)該病的病因病理、臨床診斷和治療進(jìn)行探討。于60年代初始，國內(nèi)兒童鉛中毒報(bào)道的病例均系癥狀性鉛中毒，主要是由于女工的職業(yè)性鉛暴露所致的子代機(jī)體鉛負(fù)荷升高，即母源性先天性鉛中毒。而亞臨床水平的兒童鉛中毒的研究則在80年代后才開始，當(dāng)時(shí)的研究表明，不足以產(chǎn)生臨床癥狀的低水平鉛暴露即能引起兒童智力發(fā)育的損害，這比國外的類似研究大約落后10年。此后各地不斷有小規(guī)模的研究報(bào)道，證明根據(jù)國際上沿用的診斷標(biāo)準(zhǔn)，我國兒童鉛中毒的現(xiàn)狀遠(yuǎn)較我們想象的嚴(yán)重，即使在我們認(rèn)為完全正常的人群中，也有相當(dāng)驚人數(shù)目的兒童處于對(duì)發(fā)育有潛在危害的鉛暴露下。鉛污染越來越受世界各國的關(guān)注，越來越多的國家也針對(duì)環(huán)境污染狀況，逐步制定了相關(guān)的政策和措施，積極開展健康教育，進(jìn)一步完善兒童鉛中毒的初級(jí)預(yù)防措施，讓兒童遠(yuǎn)離鉛中毒。二、課題關(guān)鍵問題及難點(diǎn)1.采樣點(diǎn)的選取查閱文獻(xiàn)資料，選取引起鉛中毒具有代表性的地區(qū)作為調(diào)查對(duì)象。2.樣品保存血液是很容易凝固及DNA易變性，對(duì)于抽取的兒童外周血要及時(shí)于-40℃保存，對(duì)于提取的DNA要及時(shí)保存在-803.實(shí)驗(yàn)條件DNA提取是采用試劑盒進(jìn)行的，提取過程注意最后離心轉(zhuǎn)數(shù)的變動(dòng)。在進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)前，必須進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，摸清擴(kuò)增ALAD酶指標(biāo)測(cè)定實(shí)驗(yàn)中的最佳條件。4.結(jié)果分析采用合適的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。客觀對(duì)待實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在合理的范圍內(nèi)分析、推測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的原因。三、完成該課題研究已具備的條件本次研究?jī)?nèi)容為2010年浙江省衛(wèi)生廳科研立項(xiàng)項(xiàng)目《浙江省重點(diǎn)地區(qū)重點(diǎn)污染物毒理學(xué)調(diào)查研究》內(nèi)容，在本項(xiàng)目立項(xiàng)前，本實(shí)驗(yàn)室已開始從事這一調(diào)查工作，因此已有較好的工作基礎(chǔ)，我們目前擁有擁有紫外分光光度計(jì)、PCR儀等儀器設(shè)備，完全能滿足本次研究的需要。本次研究的經(jīng)費(fèi)主要由浙江省衛(wèi)生廳科研立項(xiàng)項(xiàng)目提供。四、研究方案1.擬采取的研究方法或試驗(yàn)方法及主要技術(shù)路線本研究采用毒理學(xué)研究學(xué)進(jìn)行調(diào)查。主要路線：DNA提取是采用生物工程研究所提供的試劑盒進(jìn)行提取。設(shè)置相應(yīng)的引物，對(duì)DNA進(jìn)行擴(kuò)展，酶切，根據(jù)ALAD基因多態(tài)性原理：ALAD基因第4外顯子的第177堿基發(fā)生G-C突變，這個(gè)突變改變了ALAD酶構(gòu)象，使其增加了AIAD2亞單位個(gè)體(ALAD22型和ALAD12型)，對(duì)電泳結(jié)果進(jìn)行判斷基因型；采用石墨爐院子吸收光譜法（GFAAS）對(duì)樣本血鉛水平進(jìn)行測(cè)定；采用比色法對(duì)尿δ-ALA水平進(jìn)行測(cè)定；最后采用excel軟件錄入建立數(shù)據(jù)庫，應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行協(xié)方差分析和秩和檢驗(yàn)，對(duì)三者進(jìn)行比較。2.研究進(jìn)度安排2010.7-2010.8文獻(xiàn)查閱，翻譯英文綜述，了解實(shí)驗(yàn)背景，方法，目的。2010.8-2010.9熟悉實(shí)驗(yàn)儀器如PCR儀，電泳槽等，初步嘗試實(shí)驗(yàn)操作，熟悉實(shí)驗(yàn)流程。2010.9-2010.11正式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，重復(fù)，對(duì)樣本DNA進(jìn)行擴(kuò)增、酶切及電泳最后判斷其基因型；對(duì)個(gè)地區(qū)的血鉛水平及尿δ-ALA進(jìn)行測(cè)定。2010.12-2010.1數(shù)據(jù)的處理、統(tǒng)計(jì)和分析。2010.2-2010.3論文撰寫。五、參考文獻(xiàn)[1]吳勝虎，沈曉明，顏崇淮，等．應(yīng)用氨基-δ-酮戊酸脫氫酶基因型篩查兒童鉛毒性易感人群的研究．中華兒科雜志，2000,38(7)：435-438．[2]WetmurJG,LehnerG,DesnickRJ.Theδ-aminolevulinatedehydratasepolymorphism:higherbloodleadlevelsinleadworkersandenvironmentallyexposedchildrenwiththe1-2and2-2isozymes.EnvironRes,1991,56:l09-ll9.[3]WetmurJG,Influenceofthecommonhumanα-amunolevulratedehydratasepolymorphismonleadbodyburden.EnmronhealthPellet,1994,102:215-219.[4]王永偉,楊躍林,等.ALAD基因多態(tài)性與鉛毒性遺傳易感性關(guān)系的研究.四川大學(xué)學(xué)報(bào)，2008,39（3）：511-513.[5]吳勝虎．顫祟帷,等．ALAD基因型與兒童鉛毒性易感性研究．國外醫(yī)學(xué)兒科學(xué)分冊(cè)，1999，26(2)：85-87.[6]張文眾，冷曙光,等.基質(zhì)γ-羧基谷氨酸蛋白和氨基乙酰丙酸脫水酶基因多態(tài)性與兒童血鉛的關(guān)系.環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué),2006，23（2）：112-114.[7]葉細(xì)標(biāo)，吳翠娥,等.δ-氨基-γ-酮戊酸脫水酶和維生素D受體基因多態(tài)性與鉛毒性易感關(guān)系的初步分析.中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志，2002,20(5)：372-374.[8]張紅輝，羅曉寧,等.37例鉛中毒者尿δ-氨基乙酰丙酸的分析報(bào)告.中國城鄉(xiāng)企業(yè)衛(wèi)生,2009,133(5):15-16.六、指導(dǎo)老師意見簽名： 年月日七、學(xué)院意見學(xué)院負(fù)責(zé)人簽名：年月日附：開題報(bào)告會(huì)情況記錄參加開題報(bào)告會(huì)的主要人員姓名職稱姓名職稱開題報(bào)告提出的主要問題及回答情況：1.樣品分析存在的問題和建議1.由于樣品的采集在基層，所以獲得樣品后不能及時(shí)送達(dá)中心大大制約了對(duì)標(biāo)本的利用率，包括細(xì)胞的分離和DNA的提取非常困難。2.項(xiàng)目?jī)H限于為毒理學(xué)指標(biāo)檢測(cè)，指標(biāo)之間的變化原因較難解釋，需要結(jié)合人體內(nèi)相關(guān)的污染物暴露情況進(jìn)行分析，意義可能更大。3.本項(xiàng)目檢測(cè)出一定人數(shù)的鉛暴露易感人群，但是數(shù)量相對(duì)較少，對(duì)數(shù)據(jù)的進(jìn)一步分析有一定的影響，建議擴(kuò)大樣本量。2.DNA提取注意事項(xiàng)在提取DNA時(shí)注意做好無菌措施，以防感染。在提取過程中水浴時(shí)間的控制及在水浴時(shí)要對(duì)樣品進(jìn)行震蕩混勻。加不同試劑后離心轉(zhuǎn)數(shù)有所改變，注意及時(shí)調(diào)整離心轉(zhuǎn)數(shù)。提取的DNA要及時(shí)將其放入-80℃3.ALAD多態(tài)性的原理ALAD擴(kuò)增上游引物5’-AGACAGACATTAGCTCAGTA-3’下游引物5’-GGCAAAGACCACGTCCATTC-3’，ALAD基因第4外顯子的第177堿基發(fā)生G-C突變，這個(gè)突變改變了ALAD酶構(gòu)象，增加了ALAD2亞單位與鉛的親和力，使ALAD2亞單位與鉛的結(jié)合更為緊密，從而導(dǎo)致攜有ALAD2亞單位的個(gè)體(ALAD1型和ALAD2型)記錄人：年月日本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))文獻(xiàn)綜述學(xué)院專業(yè)姓名學(xué)號(hào)指導(dǎo)老師職稱合作老師職稱題目?jī)和U中毒的研究文獻(xiàn)綜述兒童鉛中毒的研究摘要：本文對(duì)國內(nèi)外兒童鉛中毒研究現(xiàn)狀、鉛中毒的根源、鉛中毒對(duì)兒童的智能、行為發(fā)育、體格生長發(fā)育以及對(duì)機(jī)體的神經(jīng)、消化、血液、心腦血管、泌尿等多系統(tǒng)造成不可逆性的損害。關(guān)鍵詞：兒童鉛中毒，根源，機(jī)體不可逆的損害。引言隨著我國城市化，工業(yè)及交通業(yè)的迅猛發(fā)展，環(huán)境鉛污染也日益加劇。鉛對(duì)兒童的健康危害已經(jīng)成為社會(huì)關(guān)注的焦點(diǎn)。由于兒童的特殊生理和行為特征，鉛對(duì)兒童的危害是最直接，也最嚴(yán)重的。國內(nèi)外大量研究證實(shí)，鉛對(duì)兒童的生長發(fā)育、心理、智力及行為損傷是不可逆的，這種損害將是長期甚至是終生的。因此，全球?qū)和U中毒問題的研究極為重視。1.國內(nèi)外兒童鉛中毒情況1.1我國兒童鉛中毒情況根據(jù)WHO人類環(huán)境處的Pruess博士估計(jì)，全球5歲以下的城市兒童約有半數(shù)血鉛（BPb）≥100μg/L，絕大部分鉛中毒病例發(fā)生于發(fā)展中國家[1]。我國目前還是發(fā)展中國家，隨著城市化、工業(yè)化的發(fā)展，工業(yè)鉛鉛污染的排放造成的土壤，大氣及水資源的鉛含量增加，這已成為我國兒童鉛中毒的主要來源。對(duì)兒童鉛中毒流行病調(diào)查，結(jié)果顯示：我國城市鉛中毒流行率在30%~40%之間，部分城市工業(yè)污染區(qū)接近100%。在沒有明顯工業(yè)污染的普通市區(qū)，也有10%~30%的兒童鉛超標(biāo)[2]。其中廣州市和北京市[3]0~6歲的兒童平均血鉛值分別為89.23μg/L和98.8μg/L，血鉛超標(biāo)率分別達(dá)46.7%和35.7%。國家九\o"醫(yī)學(xué)百科：五科"五科技攻關(guān)項(xiàng)目[4]對(duì)9省19個(gè)城市3~5歲幼兒血鉛水平調(diào)查顯示，其中有29.91%的幼兒血鉛值超標(biāo)，平均血鉛值達(dá)到88.3μg/L。明顯高于美國等發(fā)達(dá)國家。1.2國外兒童鉛中毒狀況美國是全球經(jīng)濟(jì)最發(fā)達(dá)的國家之一，兒童鉛中毒現(xiàn)象也頗為顯著。據(jù)估計(jì)，美國每年兒童鉛中毒在20萬人以上，美國衛(wèi)生教育和福利部統(tǒng)計(jì)則估計(jì)達(dá)40萬。如果以大于40μg/dL作為兒童過量鉛吸收的擬定標(biāo)準(zhǔn)，則在歐美一些主要工業(yè)國家的城市兒童中，鉛中毒的約占30%。根據(jù)俄羅斯官方數(shù)據(jù)顯示，專業(yè)陪酒人員中的鉛中毒從1991年的9.4%上升到1995年的11.6%。因?yàn)槭褂煤U器具盛裝食物、飲料等。1997年在Bykov和Revich城市里，超過40%的兒童由于鉛中毒將會(huì)出現(xiàn)行為問題、學(xué)習(xí)困難等[5]。Jessica等對(duì)美國紐約221名鉛中毒的兒童家庭中油漆、涂料進(jìn)行調(diào)查，在發(fā)現(xiàn)血鉛高以后家中對(duì)此做了彌補(bǔ)的，兒童血鉛含量有明顯降低；同時(shí)相關(guān)結(jié)果顯示黑人兒童的血鉛含量明顯偏高，兒童比成年人更容易受到鉛中毒等[6]。根據(jù)國內(nèi)外報(bào)道的數(shù)據(jù)可以看出，兒童鉛中毒已經(jīng)成為世界關(guān)注的大問題，直接關(guān)系著兒童的發(fā)育以及智商水平。2.鉛污染來源2.1內(nèi)源性2.1.1母源性近年來母源性鉛污染的研究也引起一些學(xué)者的關(guān)注，多項(xiàng)研究結(jié)果提示，高血鉛水平的孕婦可通過胎盤將鉛\o"醫(yī)學(xué)百科：轉(zhuǎn)移"轉(zhuǎn)移給\o"醫(yī)學(xué)百科：胎兒"胎兒。郭艷芳[7]等學(xué)者歲孕婦及新生兒臍血鉛水平進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，新生兒臍血鉛水平與母親血鉛、母親孕期居住環(huán)境等因素呈顯著性\o"醫(yī)學(xué)百科：相關(guān)"相關(guān)，孕婦血鉛含量的高低直接影響胎兒、\o"醫(yī)學(xué)百科：嬰兒"嬰兒的血鉛含量。母源性鉛污染也是兒童鉛中毒的重要因素之一。2.1.2骨源性也稱內(nèi)源性鉛暴露，即沉積于骨骼（儲(chǔ)存池）中的鉛\o"醫(yī)學(xué)百科：溶解"溶解進(jìn)入\o"醫(yī)學(xué)百科：血液"血液。成人攝入體內(nèi)的鉛90%以上蓄積于骨骼中，兒童僅占66.7%左右，且兒童儲(chǔ)存池中的鉛流動(dòng)性較大，易引起內(nèi)源性鉛暴露。2.2外源性2.2.1環(huán)境鉛污染環(huán)境鉛污染是引起兒童鉛中毒的主要原因。主要包括含鉛工業(yè)，如蓄電池制造業(yè)、印刷業(yè)、\o"醫(yī)學(xué)百科：金屬"金屬冶煉業(yè)、建筑材料制造業(yè)等。其次，由于我國還是發(fā)展中國家，無鉛汽油的推廣仍受限制，再我國現(xiàn)在汽車量的增加，使大氣的鉛含量也顯著增加。1999年、2000年上海市連續(xù)2年對(duì)不同交通污染區(qū)的學(xué)齡兒童進(jìn)行血鉛水平及\o"醫(yī)學(xué)百科：智商"智商測(cè)定，初步評(píng)價(jià)了汽油無鉛化對(duì)學(xué)齡兒童的血鉛及智商影響，證明汽油無鉛化可有效降低兒童的\o"醫(yī)學(xué)百科：大氣"大氣鉛接觸及學(xué)齡兒童血鉛濃度[8]李其林[9]等通過對(duì)公路邊污染區(qū)（離公路50m以內(nèi)）和對(duì)照區(qū)（離公路100m以外）\o"醫(yī)學(xué)百科：土壤"土壤和蔬菜鉛含量的研究發(fā)現(xiàn)，在公路邊50m以內(nèi)汽車尾氣明顯增加了土壤和蔬菜的鉛含量。2.2.2學(xué)\o"醫(yī)學(xué)百科：習(xí)用品"習(xí)用品和玩具色彩艷麗的學(xué)習(xí)用品和玩具表面一般涂有鮮艷的油漆，鉻酸鉛是黃色和綠色油漆中常用的顏料，國產(chǎn)玩具和學(xué)習(xí)用品鉛含量普遍較高，幼兒常有吸吮手指和咬啃玩具的\o"醫(yī)學(xué)百科：習(xí)慣"習(xí)慣，加上有些兒童不注重洗手，通過手摸口啃直接攝入鉛。2.2.3食品的污染及不良的飲食習(xí)慣廣泛的環(huán)境污染使日常食品中常含有微量的鉛，另外不良的生活習(xí)慣也能增加鉛的攝入量，如常食含鉛高的食品（傳統(tǒng)制作的\o"醫(yī)學(xué)百科：松花"松花蛋、爆米花等）3對(duì)健康的影響[10]3.1對(duì)造血系統(tǒng)的影響鉛中毒可導(dǎo)致貧血，其發(fā)生機(jī)制與血紅蛋白合成障礙及溶血有關(guān)[11]影響血紅蛋白的合成：卟啉代謝障礙是鉛中毒機(jī)制中重要和較早的變化之一。卟啉是血紅蛋白合成過程的中問物，血紅蛋白合成過程中，受到一系列巰基酶的作用?，F(xiàn)已證實(shí)，鉛至少對(duì)δ-氨基乙酰丙酸脫水酶(δ-氨基-γ-酮戊酸脫水酶，ALAD)、糞卟啉原氧化酶和亞鐵絡(luò)合酶有抑制作用。ALAD是一種金屬酶，由8個(gè)相同的亞單位和8個(gè)鋅離子組成，鋅離子對(duì)酶的活性和穩(wěn)定性起著重要的作用。鉛能置換活動(dòng)位點(diǎn)的鋅離子，抑制ALAD的活性[12]，從而使δ-氨基乙酰丙酸(ALA)形成卟啉原受到抑制，結(jié)果血中ALA增多，由尿排出的ALA也增多；鉛抑制糞卟啉原氧化酶，阻礙糞卟啉原Ⅲ，氧化為原卟啉Ⅸ，結(jié)果使血中糞卟啉增多，尿排出糞卟啉也增多；鉛抑制亞鐵絡(luò)臺(tái)酶，使原卟啉Ⅸ不能與二價(jià)鐵結(jié)合為血紅素，紅細(xì)胞中原卟啉增多，可與紅細(xì)胞線粒體內(nèi)豐富的鋅結(jié)合，導(dǎo)致鋅原卟啉增加。所以尿中ALA、糞卟啉和血中原卟啉或鋅原卟啉測(cè)定都是鉛中毒的診斷指標(biāo)。由于血紅蛋白合成障礙，導(dǎo)致骨髓內(nèi)幼紅細(xì)胞代償性增生，血液中點(diǎn)彩、阿織、堿粒紅細(xì)胞增多。此三種紅細(xì)胞中的嗜堿性物質(zhì)都含有線粒體和微粒體碎片及RNA，有人認(rèn)為此三種細(xì)胞是由染色技術(shù)所造成的不同形態(tài)表現(xiàn)而巳，其原因可能是鉛抑制了紅細(xì)胞嘧啶-5-核苷酸酶，以致大量嘧啶核苷酸蓄積在細(xì)胞漿內(nèi)，并妨礙微粒體RNA的降懈。溶血：鉛中毒貧血不僅是由于血紅蛋白合成減少，也由于紅細(xì)胞壽命縮短。鉛可抑制紅細(xì)胞膜Na一K’ATP酶的活性，使紅細(xì)胞內(nèi)K’離子逸出,致細(xì)胞膜崩潰而溶血。另外，鉛與紅細(xì)胞表面的磷酸鹽結(jié)合成不溶性的磷酸鉛,使紅細(xì)胞機(jī)械脆性增加,也是溶血的原因。急性鉛中毒時(shí)溶血作用較明顯，慢性鉛中毒時(shí)以影響卟啉代謝為主，溶血作用并不重要。3.2對(duì)\o"醫(yī)學(xué)百科：神經(jīng)"神經(jīng)系統(tǒng)的影響鉛對(duì)兒童神經(jīng)\o"醫(yī)學(xué)百科：行為"行為的影響始于胎兒時(shí)期的鉛接觸。鉛很容易通過胎盤，且發(fā)育中的\o"醫(yī)學(xué)百科：內(nèi)皮"內(nèi)皮細(xì)胞不\o"醫(yī)學(xué)百科：成熟"成熟，所以鉛很容易通過\o"醫(yī)學(xué)百科：血腦屏障"血腦屏障，因而鉛對(duì)發(fā)育中的\o"醫(yī)學(xué)百科：中樞神經(jīng)系統(tǒng)"中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害尤其明顯。鉛抑制\o"醫(yī)學(xué)百科：神經(jīng)元"神經(jīng)元的增殖和分化，并蓄積于內(nèi)皮細(xì)胞，直接破壞血\o"醫(yī)學(xué)百科：腦屏障"腦屏障。鉛可選擇性地\o"醫(yī)學(xué)百科：積聚"積聚在\o"醫(yī)學(xué)百科：中樞"中樞具有學(xué)習(xí)和記憶功能的\o"醫(yī)學(xué)百科：海馬"海馬區(qū)內(nèi)，降低突觸\o"醫(yī)學(xué)百科：興奮性"興奮性持續(xù)升高幅值，影響學(xué)習(xí)，記憶和認(rèn)知功能。鉛對(duì)新生兒行為能力、神經(jīng)軟體征和肌張力評(píng)分與臍血鉛含量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。除此之外，鉛對(duì)兒童智商（IQ）的影響也很大，兒童IQ值隨血鉛含量升高而下降3.3對(duì)血液系統(tǒng)的影響鉛對(duì)血液系統(tǒng)的主要作用表現(xiàn)在2個(gè)方面，一是抑制血紅蛋白的合成，二是縮短循環(huán)中的紅細(xì)胞壽命。正常情況下，原卟啉Ⅸ在鐵絡(luò)合酶作用下與鐵形成血紅素。鉛負(fù)荷過高時(shí)，由于鉛抑制卟啉代謝中的鐵絡(luò)合酶，使原卟啉不能與鐵結(jié)合形成血紅素。早鐵缺乏時(shí)，因沒有足夠的鐵與原卟啉Ⅸ結(jié)合而影響血紅素的合成．二者在引起貧血的同時(shí)都可造成原卟啉在體內(nèi)的堆積，此時(shí)紅細(xì)胞內(nèi)含量豐富的鋅離子與堆積的原卟啉結(jié)合，導(dǎo)致紅細(xì)胞內(nèi)鋅原卟啉含量升高[13]。因此，測(cè)定兒童血中鋅原卟啉含量對(duì)診斷鉛負(fù)荷過高具有重要意義。3.4對(duì)其它\o"醫(yī)學(xué)百科：器官系統(tǒng)"器官系統(tǒng)的影響鉛對(duì)\o"醫(yī)學(xué)百科：心血"心血管、\o"醫(yī)學(xué)百科：肝臟"肝臟，\o"醫(yī)學(xué)百科：腎臟"腎臟，骨骼等器官也有一定毒性作用。長期鉛接觸可導(dǎo)致\o"醫(yī)學(xué)百科：血壓"血壓升高、\o"醫(yī)學(xué)百科：心肌炎"心肌炎和\o"醫(yī)學(xué)百科：心肌"心肌損害。鉛對(duì)胃粘膜有直接作用，可以破壞胃粘膜再生能力，使胃粘膜出現(xiàn)\o"醫(yī)學(xué)百科：炎癥"炎癥性變化。并抑制腸壁\o"醫(yī)學(xué)百科：堿性磷酸酶"堿性磷酸酶和\o"醫(yī)學(xué)百科：ATP"ATP酶的活性，使\o"醫(yī)學(xué)百科：平滑肌"平滑肌痙攣，引起腹疼。對(duì)腎臟損害主要是影響\o"醫(yī)學(xué)百科：腎小管"腎小管上皮細(xì)胞\o"醫(yī)學(xué)百科：線粒體"線粒體的功能，抑制\o"醫(yī)學(xué)百科：Na"Na+-K+ATP酶等的活性，引起腎小管功能障礙甚至損傷。4鉛污染的機(jī)制研究4.1氧化損傷方面的鉛毒機(jī)制[14]4.1.1誘導(dǎo)活性氧產(chǎn)生鉛通過干擾\o"醫(yī)學(xué)百科：卟啉"卟啉類物質(zhì)的代謝，影響血紅素的合成而誘導(dǎo)活性氧的產(chǎn)生;微量的鉛既可抑制含巰基δ-\o"醫(yī)學(xué)百科：氨基"氨基-γ-酮\o"醫(yī)學(xué)百科：戊酸"戊酸\o"醫(yī)學(xué)百科：脫水"脫水酶和血紅素合成酶，從而影響血紅素的合成。由于負(fù)\o"醫(yī)學(xué)百科：反饋"反饋?zhàn)饔?，血紅素的合成受阻會(huì)刺激δ-氨基γ-酮戊酸脫水\o"醫(yī)學(xué)百科：酶活性"酶活性，增加δ-氨基\o"醫(yī)學(xué)百科：丙酸"丙酸的合成，造成δ氨基丙酸在血液和尿中積累。δ-氨基丙酸可發(fā)生烯醇化，形成烯醇式δ-氨基丙酸，后者能和氧合\o"醫(yī)學(xué)百科：血紅蛋白"血紅蛋白偶聯(lián)產(chǎn)生超\o"醫(yī)學(xué)百科：氧自由基"氧自由基、過氧化氫和羥自由基。烯醇式δ-氨基丙酸自由基還會(huì)進(jìn)一步破壞DNA。另外，血紅素代謝受阻可以造成血液中鋅原卟啉的增加，該物質(zhì)即可導(dǎo)致其他分子的損傷，更能通過光敏\o"醫(yī)學(xué)百科：反應(yīng)"反應(yīng)把分子氧激發(fā)為超氧陰離子自由基，直接誘發(fā)脂質(zhì)過氧化，產(chǎn)生更多自由基。4.1.2影響\o"醫(yī)學(xué)百科：細(xì)胞膜"細(xì)胞膜的保護(hù)作用除了直接誘導(dǎo)活性氧產(chǎn)生外，促氧物質(zhì)也能依靠增加細(xì)胞膜的敏感性來間接誘導(dǎo)活性氧產(chǎn)生。研究發(fā)現(xiàn)，鉛處理后，\o"醫(yī)學(xué)百科：紅細(xì)胞"紅細(xì)胞膜變脆，\o"醫(yī)學(xué)百科：透性"透性增加，結(jié)合于膜上的酶和\o"醫(yī)學(xué)百科：蛋白質(zhì)組"蛋白質(zhì)組成發(fā)生改變，膜脂質(zhì)的過氧化水平增加。鉛除促進(jìn)膜脂過氧化外，還影響膜脂質(zhì)的組成，研究發(fā)現(xiàn)鉛對(duì)磷酯\o"醫(yī)學(xué)百科：酰膽堿"酰膽堿具有強(qiáng)烈的束縛作用，鉛中毒后的紅細(xì)胞膜磷酯酰\o"醫(yī)學(xué)百科：膽堿"膽堿水平大大下降:轉(zhuǎn)變的膜脂質(zhì)成分可導(dǎo)致細(xì)胞膜完整性、滲透能力的變化從而增加細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)過氧化的敏感性。4.1.3影響細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)正常功能鉛能顯著提高血紅蛋白的自動(dòng)氧化，而\o"醫(yī)學(xué)百科：超氧化物歧化酶"超氧化物歧化酶和過氧化氫酶能抑制其自動(dòng)氧化的過程，說明超氧陰離子自由基和H2O2可能參與血紅蛋白的自動(dòng)氧化過程，推測(cè)鉛離子可能依靠與氧合血紅蛋白的\o"醫(yī)學(xué)百科：相互作用"相互作用而誘導(dǎo)活性氧產(chǎn)生，并最終導(dǎo)致紅細(xì)胞膜的氧化損傷;大量研究表明，在接觸鉛的動(dòng)物和工人身上發(fā)現(xiàn)，鉛中毒會(huì)降低細(xì)胞中一些抗氧化酶的活性和細(xì)胞內(nèi)抗\o"醫(yī)學(xué)百科：氧化劑"氧化劑含量。對(duì)某些酶，鉛主要通過與酶蛋白中的巰基（這些巰基有時(shí)就是其活性中心）結(jié)合而抑制酶活性，如谷胱甘肽還原酶和\o"醫(yī)學(xué)百科：葡萄糖"葡萄糖-6-磷酸脫氫酶:鉛對(duì)\o"醫(yī)學(xué)百科：葡萄"葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（該酶含許多巰基）有極強(qiáng)的抑制作用，該酶催化葡萄糖-6-磷酸產(chǎn)生NADPH。后者為氧化型谷胱甘肽轉(zhuǎn)化成還原型谷胱甘肽所必需，故它在細(xì)胞的抗氧化中起著重要作用。鉛除了與酶中巰基結(jié)合降低酶活性外，還作為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，影響酶與葡萄糖-6-磷酸和NADPH結(jié)合，而對(duì)另一些酶，則是通過影響酶中的\o"醫(yī)學(xué)百科：微量元素"微量元素有效性發(fā)生作用的。硒是的必需成分，鐵和銅，鋅，錳分別是輔基，鉛都影響它們的\o"醫(yī)學(xué)百科：吸收"吸收。細(xì)胞中受鉛影響最大的抗\o"醫(yī)學(xué)百科：氧化物"氧化物是還原型谷胱甘肽。鉛除通過抑制葡萄糖-6-磷酸脫氫酶阻止其\o"醫(yī)學(xué)百科：再生"再生外，還可直接與其所含的\o"醫(yī)學(xué)百科：半胱氨酸"半胱氨酸的巰基結(jié)合，干擾它發(fā)揮抗氧化活性。4.2生化過程代謝酶的影響機(jī)制鉛對(duì)關(guān)鍵酶的影響在體外實(shí)驗(yàn)中，在二氯化銅存在的條件下，\o"醫(yī)學(xué)百科：DNA"DNA聚合酶變得非常不準(zhǔn)確，\o"醫(yī)學(xué)百科：堿基"堿基對(duì)錯(cuò)配頻率增加，不能正確\o"醫(yī)學(xué)百科：復(fù)制"復(fù)制DNA。另外，鉛對(duì)由RNA聚合酶催化的RNA合成也有影響。鉛有\(zhòng)o"醫(yī)學(xué)百科：抑制"抑制DNA聚合酶β亞基的\o"醫(yī)學(xué)百科：作用"作用。\o"醫(yī)學(xué)百科：重金屬"重金屬\o"醫(yī)學(xué)百科：離子"離子，包括鉛，能夠影響很多酶，尤其是富含巰基（SH）的，它可以替代與些酶結(jié)合的重要\o"醫(yī)學(xué)百科：元素"元素，如鎂，鈣，鐵，鉛和鋅，如前所述，幾種參與血紅素合成的酶均能被鉛抑制。另外，鉛也能抑制\o"醫(yī)學(xué)百科：兔肝"兔肝中黃嘌呤氧化酶和鳥嘌嶺\o"醫(yī)學(xué)百科：氨基水解酶"氨基水解酶的。鉑與鈣比較\o"醫(yī)學(xué)百科：相似"相似，在某些條件下，鉛能置換鈣。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，鉛可與鈣一起進(jìn)入\o"醫(yī)學(xué)百科：突觸"突觸體，鉛能激活蛋白激酶C。鉛也可抑制或激活不同的\o"醫(yī)學(xué)百科：受體"受體激活和電壓激活的離子通道。在HL-600細(xì)胞中，鉛可\o"醫(yī)學(xué)百科：刺激"刺激\o"醫(yī)學(xué)百科：磷脂"磷脂酶AZ活性提高，從而增加\o"醫(yī)學(xué)百科：溶血"溶血磷脂的活性。4.3細(xì)胞（染色體）分裂/周期影響機(jī)制4.3.1鉛對(duì)\o"醫(yī)學(xué)百科：染色體"染色體的影響在\o"醫(yī)學(xué)百科：細(xì)胞"細(xì)胞分裂時(shí)期干擾紡錘體的形成，從而造成不正常染色體數(shù)量增加，染色體畸變和姐妹染色體交換\o"醫(yī)學(xué)百科：頻率"頻率上升。4.3.2鉛對(duì)\o"醫(yī)學(xué)百科：基因表達(dá)"基因表達(dá)的影響\o"醫(yī)學(xué)百科：谷胱甘肽"谷胱甘肽\o"醫(yī)學(xué)百科：轉(zhuǎn)移酶"轉(zhuǎn)移酶（GST-P）在化學(xué)誘導(dǎo)肝癌\o"醫(yī)學(xué)百科：發(fā)生"發(fā)生的老鼠的癌\o"醫(yī)學(xué)百科：前期"前期損傷\o"醫(yī)學(xué)百科：和肝"和肝癌中表達(dá)量特別高，四離子鉛可以增加老\o"醫(yī)學(xué)百科：鼠肝"鼠肝和腎中GST-P的表達(dá)量。在人體內(nèi)，鐵、鉛等都是以離子狀態(tài)存在，由于鉛的活性遠(yuǎn)比鐵的活性高。因此，當(dāng)鉛進(jìn)入人體，就會(huì)把人體必需的鐵離子置換出去，從而使人體表現(xiàn)為缺鐵性貧血的癥狀。這也是隨著人們生活水平的提高，反倒出現(xiàn)缺鐵缺鈣增多的原因，特別對(duì)鉛中毒的兒童而言，如不采取驅(qū)鉛治療，就很難實(shí)現(xiàn)補(bǔ)鐵補(bǔ)鈣的目的。我們了解了鉛中毒的危害，在思想才能引起重視，在工作中才能積極地采取措施，對(duì)鉛中毒進(jìn)行有效控制；鉛負(fù)荷評(píng)價(jià)指標(biāo)能使我們清楚鉛中毒的程度，在治療和預(yù)防中做到心中有數(shù)；明白了鉛污染的途徑，我們就可以在日常生活中關(guān)注某些細(xì)節(jié)，改變不科學(xué)的生活習(xí)慣，遠(yuǎn)離鉛中毒的危害參考文獻(xiàn)［1］GavaghanH.鉛無安全水平.國外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)會(huì)分冊(cè),2002,29（3）:117-118.［2］傅松濤.兒童鉛中毒防治.山西科技出版社，2007,12（3）：16-17.［3］陳欣欣，滕紅紅，王風(fēng)芝，等.北京市0~6歲兒童血鉛水平與相關(guān)影響因素的研究.中華流行病學(xué)雜志，2003，10（24）:868-871.［4］戚其平，楊艷偉，姚孝元，等.中國城市兒童血鉛水平調(diào)查.中華流行病學(xué)雜志，2002，3（23）:162-166.[5]Snakin,Prisyazhnaya.LeadcontaminationoftheenvironmentinRussia.TheScienceofTheTotalEnvironment,2000,256（5）:95-101.[6]JessicaLeighton,SusanKlitzman,SlavenkaSedlar,etal.Theeffectoflead-basedpainthazardremediationonbloodleadlevealsofleadpoisonedchildreninNewYorkCity.EnvironmentalResearch,2003,92:182—190.［7］李明霞，李維城，郭艷芳等.維漢孕婦及新生兒臍血鉛水平與環(huán)境因素的相關(guān)性研究.廣東微量元素科學(xué)，2001，10（8）:19-24.［8］袁東，葉舜華，徐曉輝.無鉛汽油使用后學(xué)齡兒童血鉛、智商變化及經(jīng)濟(jì)效益初探.環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)，2004，21（2）:104-106.［9］李其林，王顯軍.汽車尾氣對(duì)土壤和蔬菜中鉛含量的影響.生態(tài)環(huán)境，2004，13（1）:7-18.［10］劉慧，李英娥，隨掛英.兒童鉛中毒的研究進(jìn)展.濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，26（1）：26-28.[11]何風(fēng)生．中華職業(yè)醫(yī)學(xué)．北京人民衛(wèi)生出版社．1999,13（2）：215-226.[12]高萬珍．氨基乙酰丙酸脫水酶與鉛中毒的關(guān)系．國外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，1997，24(6)：345-348.[13]沈曉明．鉛與兒童生長發(fā)育．國外醫(yī)學(xué)兒科分冊(cè)，1991，25（5）：77-78.［14］郭碧花，張星海.抗氧化劑對(duì)鉛毒的作用及機(jī)制探討.中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2004，17（2）:100-104.學(xué)院專業(yè)生物技術(shù)姓名學(xué)號(hào)指導(dǎo)老師職稱合作老師職稱題目用生化和同位素地球化學(xué)方法了解伊比利亞lowerGuadiana河地區(qū)鉛污染對(duì)環(huán)境和公眾健康的影響：一種淡水雙殼類研究。譯文用生化和同位素地球化學(xué)方法了解伊比利亞lowerGuadiana河地區(qū)鉛污染對(duì)環(huán)境和公眾健康的影響：一種淡水雙殼類研究。摘要：鉛是一種水生生態(tài)系統(tǒng)中未知其生物作用的一種天然的成分，劇毒。它的毒性是因?yàn)樗苣７律锏闹匾饘伲ㄟ^脂質(zhì)過氧化物（LPO）產(chǎn)生摸損傷。大多數(shù)鉛中毒的癥狀被認(rèn)為是鉛能干擾一種重要的酶-δ-氨基酮戊酸脫水酶（ALAD）的活性能被鉛嚴(yán)重抑制。本文工作的目的是研究鉛污染水平和鉛污染對(duì)生活在lowerGuadiana河（葡萄牙和西班牙）中淡水雙殼類動(dòng)物Corbiculafluminea的影響（對(duì)ALAD和過氧化反應(yīng)激生物標(biāo)志物L(fēng)PO的影響）中。LowerGuadiana河是一條主要的河流系統(tǒng)，歷史上人因?yàn)殚_采礦石和人為因素的介入而受到影響。結(jié)果表明，ALAD酶的活性與組織中鉛總濃度呈負(fù)相關(guān)，說明ALAD已成為Corbiculafluminea鉛暴露的一個(gè)重要生物標(biāo)志物。為了說明Corbiculafluminea鉛暴露的來源，高精度的206Pb/204Pb，207Pb/204Pb，208Pb/204/Pb比例確認(rèn)，歷史上在伊比利亞黃鐵礦帶的開采活動(dòng)，是lowerGuadiana河鉛污染的主要來源。同位素結(jié)果也提供了針對(duì)降雨和河流水資源管理的明顯的季節(jié)和地理差異。另外，在接近人口中心的Corbiculafluminea中檢出的鉛還來源于其它的軟體動(dòng)物，從而增加了Corbiculafluminea作為一個(gè)淡水生物監(jiān)測(cè)體的多樣性。總而言之，這項(xiàng)研究突出了自然生態(tài)系統(tǒng)用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)的價(jià)值和它們對(duì)公共健康評(píng)估和監(jiān)測(cè)的重要性。引言這項(xiàng)工作的主要目的是研究來自lowerGuadiana河，在伊比利亞南部最具有經(jīng)濟(jì)性和戰(zhàn)略性的河流的各點(diǎn)位淡水雙殼類Corbiculafluminea河中的鉛污染水平和對(duì)其生物化學(xué)的影響。雖然近期Corbiculafluminea被引入伊比利亞半島，但Corbiculafluminea已被廣泛的用作淡水及河口生態(tài)系統(tǒng)中評(píng)價(jià)金屬污染的生物指標(biāo)（Araujoetal,1993）鉛對(duì)Corbiculafluminea的生態(tài)毒理學(xué)效應(yīng)取決于δ-氨基酮戊酸脫水酶