食品中藥物殘留的色譜檢測(cè)技術(shù)

食品中藥物殘留的色譜檢測(cè)技術(shù)儀器方法的檢測(cè)流程樣品采集提取凈化索氏提取、液－液、固－液、微波、超聲、柱層析等儀器分析根據(jù)目標(biāo)物的性質(zhì)選擇不同方法第2頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天儀器檢測(cè)技術(shù)毛細(xì)管電泳—質(zhì)譜（CE-MS）氣相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS/MS)色譜—質(zhì)譜聯(lián)用高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）高效液相色譜—質(zhì)譜（LC-MS）氣相色譜—質(zhì)譜（GC-MS）色譜液相色譜氣相色譜第3頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天俄國(guó)植物學(xué)家Tswett于1901年發(fā)現(xiàn)：利用吸附原理分離植物色素。1906年Tswett創(chuàng)立“chromatography”—“色譜法”新名詞；1907年在德國(guó)生物會(huì)議上第一次向世界公開(kāi)展示顯現(xiàn)彩色環(huán)帶的柱管；1930年R.Kuhn用色譜柱分離出胡蘿卜素。色譜分析法的歷史第4頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天1935年AdamsandHolmes發(fā)明了苯酚-甲醛型離子交換樹(shù)脂，進(jìn)一步發(fā)明了離子色譜1938年Izmailov發(fā)明薄層色譜1941年Martin&Synge發(fā)明了液-液分配色譜1944年Consden,Gordon&Martin發(fā)明紙色譜1952年Martin&Synge發(fā)明氣-液色譜1953年Janak發(fā)明氣-固色譜1954年Ray發(fā)明熱導(dǎo)檢測(cè)器1955年世界第一臺(tái)商品化氣相色譜儀1957年Martin&Golay發(fā)明毛細(xì)管色譜1959年P(guān)orath&Flodin發(fā)明凝膠色譜1960年液相色譜技術(shù)完善第5頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天高選擇性分離單組份定性定量高效能高靈敏度檢出限量低至10-1lg的物質(zhì)，適于微量和痕量分析。色譜法的特點(diǎn)第6頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天氣相色譜分析系統(tǒng)構(gòu)成氣路系統(tǒng)，進(jìn)樣系統(tǒng)，分離系統(tǒng)，檢測(cè)系統(tǒng)工作原理樣品高溫瞬間汽化-色譜柱分離-檢測(cè)適用易揮發(fā)的小分子有機(jī)物難揮發(fā)性成分經(jīng)衍生化檢測(cè)第7頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天氣相色譜-分離系統(tǒng)色譜柱填充柱，毛細(xì)管柱色譜柱選擇：按樣品極性

弱極性樣品，可選OV-1，SE-30，OV-101，SE-52，

SE-54

中極性樣品，可選OV-17，OV-1701，XE-60，OV-225，

OV-210

極性樣品，可選PEG-20M,FFAP,OV-275,DEGS

第8頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天氣相色譜-檢測(cè)系統(tǒng)氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）：破壞型含碳的有機(jī)物電子捕獲檢測(cè)器（ECD）：非破壞型，選擇性

電負(fù)性強(qiáng)的化合物火焰光度檢測(cè)器（FPD）：破壞型，選擇性含硫磷的化合物熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD）：非破壞型，選擇性

永久性氣體

第9頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天氣相色譜在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用反式脂肪酸的檢測(cè)（衍生，F(xiàn)ID)苯，氯苯，氯酚類（直接進(jìn)樣，F(xiàn)ID）有機(jī)氯農(nóng)藥（ECD)有機(jī)磷農(nóng)藥（FPD)第10頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天氣相色譜分離與質(zhì)譜定性定量結(jié)合1.對(duì)食品中殘留物進(jìn)行分析

MS是一個(gè)通用型檢測(cè)器，對(duì)大多數(shù)有機(jī)化合物都有比較好的響應(yīng)，根據(jù)特征離子強(qiáng)度定量多種成分的同時(shí)分析--殘留分析的趨勢(shì)之一適合大批量農(nóng)殘檢測(cè)。2.對(duì)未知物分析準(zhǔn)確測(cè)定未知組分的相對(duì)分子質(zhì)量。

氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用分析第11頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天鄰苯二甲酸酯氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用第12頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天食品中42種農(nóng)藥的氣相色譜-質(zhì)譜選擇離子測(cè)定樣品處理方法液液萃取-固相萃取聯(lián)用：樣品中農(nóng)藥經(jīng)二氯甲烷提取后，Envi-Carb柱和Sep-Pak-NH2柱雙柱凈化，凈化后直接進(jìn)樣分析

色譜條件色譜柱:HP-5MS(30m×0.125mm×0.125μm);載氣:高純氦氣,流量1ml/min;柱溫:70℃,保持2min,以25℃/min升至150℃,再以3℃/min升至200℃,再以8℃/min升至260℃,保持10min;進(jìn)樣口溫度:250℃;進(jìn)樣方式:不分流進(jìn)樣,1.15min后打開(kāi)分流閥和隔墊吹掃。

質(zhì)譜條件

離子源(EI)溫度:230℃,電子轟擊能量70ev,GC-MS接口溫度:280℃。氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例1第13頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天分析特征量

42中農(nóng)藥的線性范圍:0.001～1.0μg/mL

樣品的加標(biāo)回收率：89%-94%,RSD<10%

方法的最低檢出限：0.001～0.005mg/kg(S/N=3)

檢測(cè)農(nóng)藥種類

有機(jī)磷、擬除蟲(chóng)菊酯、有機(jī)氯、氨基甲酸酯和除草劑

檢測(cè)的樣品種類

肉類，蛋類，乳品，蔬菜和水果氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例1第14頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天加速溶劑萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定食品中指示性多氯聯(lián)苯樣品前處理

加速溶劑萃取-固相萃取聯(lián)用：加速溶劑萃取條件壓力:10Mpa(1500psi);溫度:125℃;

加熱時(shí)間:6min;穩(wěn)定時(shí)間:5min;

清洗體積:占萃取池體積的60%;吹掃時(shí)間:120s;

靜態(tài)循環(huán)次數(shù):2次。固相萃取柱：酸性硅膠柱和堿性硅膠柱聯(lián)用氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例2第15頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天色譜條件

HP-5MS毛細(xì)管色譜柱(30m×0.125mm×0.125μm);進(jìn)樣口溫度:300℃;升溫程序:初始溫度100℃保持2min,以15℃/min升溫至180℃,以3℃/min升溫至240℃,再以10℃/min升溫至285℃,保持10min;載氣:氦氣,流速1ml/min;進(jìn)樣:不分流進(jìn)樣,1μL質(zhì)譜條件

電子轟擊(EI)離子源:70eV;接口溫度:280℃;離子源溫度:250℃;四級(jí)桿溫度:100℃;定量方式:選擇離子監(jiān)測(cè)(SIM)

氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例2第16頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天分析特征量

最低檢測(cè)限：水產(chǎn)品0.1051～0.1286，肉松0.1003～0.1146μg/kg

添加回收率：86.4%～125.1%,RSD在1.1%～19.6%之間

檢測(cè)的目標(biāo)有害物質(zhì)

20種多氯聯(lián)苯

檢測(cè)的樣品種類

水產(chǎn)品，肉松氣相色譜與質(zhì)譜的聯(lián)用-分析實(shí)例2第17頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天高效液相色譜法第18頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天高效液相色譜儀的應(yīng)用

分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。蘇丹紅三聚氰胺合成色素生物毒素?cái)硵澄冯p酚A

第19頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天液質(zhì)聯(lián)用HLPC-MS以液相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜為檢測(cè)系統(tǒng)。樣品在液相色譜部分分離，經(jīng)質(zhì)譜離子化，質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開(kāi)，經(jīng)檢測(cè)器得到質(zhì)譜圖。色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢(shì)結(jié)合，應(yīng)用廣泛。

第20頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天適用于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差的化合物的分析。適于復(fù)雜基質(zhì)樣品,特別是食品，生物樣品中的農(nóng)獸藥殘留的定性定量分析。利于多組分分析。

高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用分析第21頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天樣品前處理液液萃取-固相萃?。簶悠方?jīng)過(guò)乙腈和二氯甲烷提取后，過(guò)C18固相萃取柱凈化色譜條件色譜柱:AgilentSB-C18,211mm×10mm,1.18μm;

柱溫:50℃;進(jìn)樣量:20μL;

流動(dòng)相A:0.1%甲酸-10mmol/L乙酸銨;

流動(dòng)相B:乙腈;流速:0.13mL/min;

梯度洗脫條件:0～4min,A由99%變化至50%,4～15min,A由50%變化至40%,15～20min,A由40%變化至20%,20～25min,A由20%變化至1%,25～30min,A保持1%,30～35min,A由1%變化至99%后運(yùn)行8min高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用-分析實(shí)例1液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用對(duì)復(fù)雜食品基質(zhì)中407種多農(nóng)藥殘留量的測(cè)定第22頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天質(zhì)譜條件

電離源模式:電噴霧離子化電離源極性:正模式霧化氣:氮?dú)忪F化氣壓力:2.18×105

離子噴霧電壓:4000V干燥氣溫度:350℃

分析特征量

407種農(nóng)藥的線性范圍為0.5～500μg/L，RSD<10%檢測(cè)目標(biāo)有害物

多效唑，乙草胺等407種農(nóng)藥檢測(cè)的樣品

蘋果、蜂蜜、谷物和肉類高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用-分析實(shí)例1第23頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天

電泳技術(shù)和現(xiàn)代微柱分離相結(jié)合的分析技術(shù)高分辨率，高速度，樣品用量少，成本低非常適合水溶性或醇溶性成分的多組分分離分析

應(yīng)用領(lǐng)域化學(xué)，生命科學(xué)，臨床醫(yī)學(xué)和藥學(xué)，特別是藥物分析和分離方面得到廣泛的應(yīng)用。目前在食品中功能成分的分析和添加劑的檢測(cè)等方面有廣泛的應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳色譜第24頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天色譜條件

毛細(xì)管柱：有效長(zhǎng)度為:45cm

內(nèi)徑：50um

緩沖液：硼砂20mmolL-1,SDS5mmolL-1pH7.8

檢測(cè)波長(zhǎng)：214nm

分離電壓：15KV分析特征量

樣品添加回收率：97-102%，

RSD<5%

線性范圍：0.125mgmL-1至1mgmL-1

最低檢出限：0.05mgmL-1高效毛細(xì)管電色譜-分析實(shí)例1高效毛細(xì)管電泳法短時(shí)內(nèi)同時(shí)測(cè)定咖啡因、山梨酸、苯甲酸、糖精的含量第25頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天樣品前處理

C18固相萃柱富集凈化色譜方法

毛細(xì)管柱：熔融石英毛細(xì)管有效長(zhǎng)度75cm，內(nèi)徑75um

緩沖液：50mMNaAc/HAc+10%ACN，pH5.0

分離電壓：20KV

檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

高效毛細(xì)管電色譜-分析實(shí)例2固相萃取和毛細(xì)管區(qū)帶電泳法測(cè)定磺酰脲除草劑第26頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天分析特征量

線性范圍：0.2-50mgL-1，最低檢測(cè)限：0.05-0.10mgL-1

樣品添加回收率：65-103％，RSD<5%檢測(cè)的目標(biāo)物

醚磺隆、醚苯磺隆、苯磺隆、噻磺隆、甲磺隆和綠磺隆檢測(cè)的樣品

飲用水

高效毛細(xì)管電色譜-分析實(shí)例2第27頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天CE與MS相結(jié)合可為復(fù)雜的生化、環(huán)境等樣品的定性、定量分析提供強(qiáng)有力的工具M(jìn).Hugener等采用CEC-ESI-MS對(duì)食品中的色素和芳香葡萄糖苷酸進(jìn)行分析Gucek等采用毛細(xì)管電色譜-電噴霧質(zhì)譜(CEC-ESI-MS)對(duì)肽的混合物進(jìn)行分析,檢測(cè)靈敏度可達(dá)到阿摩爾(attomole)級(jí)。

毛細(xì)管電色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)第28頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天全二維氣相色譜/飛行時(shí)間質(zhì)譜的應(yīng)用精油組成成分的分析Adahchour等采用頂空固相微萃取和GC×GC對(duì)大蒜揮發(fā)性香味成分進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)了大蒜中更為詳盡的具有芳香活性的組分。環(huán)境、生物和食品樣品中的應(yīng)用Liu等用GC×GC方法在4min內(nèi)完成了15種農(nóng)藥的分離，并將GC×GC用于人血清中農(nóng)殘的研究。季克良等采用GC×GC方法，醬香型白酒分出963個(gè)峰,濃香型白酒分出674個(gè)峰,清香型白酒分出484個(gè)峰。其他類串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)新技術(shù)第29頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天超高效液相色譜/飛行時(shí)間質(zhì)譜

UPLC采用了1.7μm的小粒徑色譜柱填料,與傳統(tǒng)的HPLC相比有更好的分離效率、峰容量以及靈敏度(pg～fg級(jí))。

其他類串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)新技術(shù)

高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜能夠測(cè)定化合物的精確質(zhì)量，并具有MS/MS功能，兩者聯(lián)用成為復(fù)雜體系分離分析以及化合物結(jié)構(gòu)鑒定的良好平臺(tái)。第30頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天快速檢測(cè)技術(shù)

快速檢測(cè)技術(shù)與儀器分析技術(shù)共同構(gòu)成食品安全檢測(cè)技術(shù)體系。1、以免疫檢測(cè)為主的快速檢測(cè)技術(shù)成為食品安全監(jiān)管中的主要應(yīng)用技術(shù)2、便攜式、高集成度的快速檢測(cè)裝備是食品安全快速檢測(cè)技術(shù)研發(fā)重點(diǎn)3、以芯片技術(shù)為代表的新型高通量快速檢測(cè)技術(shù)發(fā)展迅速第31頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫分析技術(shù)原理基于抗原、抗體的特異性識(shí)別和結(jié)合反應(yīng)的分析方法，通過(guò)對(duì)抗原或抗體進(jìn)行標(biāo)記(酶、熒光物質(zhì)、放射性同位素標(biāo)記等)，利用標(biāo)記物的信號(hào)放大作用,與現(xiàn)代測(cè)試技術(shù)相結(jié)合，對(duì)樣品中特定的目標(biāo)物進(jìn)行定性定量檢測(cè)。方法建立：半抗原合成人工抗原合成抗體制備方法建立樣本前處理方法方法評(píng)價(jià)

特點(diǎn)特異性強(qiáng)、靈敏度高方便快捷、分析容量大、檢測(cè)成本低可提供系列化的產(chǎn)品以及技術(shù)，產(chǎn)品可以商業(yè)化。第32頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫分析檢測(cè)技術(shù)酶聯(lián)免疫分析熒光免疫分析免疫傳感器膜載體免疫分析仿生免疫分析流動(dòng)注射免疫分析免疫-PCR技術(shù)蛋白質(zhì)芯片技術(shù)放射免疫分析免疫新技術(shù)傳統(tǒng)免疫分析技術(shù)第33頁(yè),共40頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫分析檢測(cè)技術(shù)

酶聯(lián)免疫分析技術(shù)（ELISA）抗原抗體特異識(shí)別反應(yīng)與酶的催化放大作用