高考生物復(fù)習(xí)第33講克隆技術(shù)全國(guó)公開課一等獎(jiǎng)百校聯(lián)賽示范課賽課特等獎(jiǎng)?wù)n件

第33講克隆技術(shù)第1頁(yè)考點(diǎn)克隆技術(shù)一、植物克隆1.植物克隆(1)技術(shù)基礎(chǔ)：

(2)理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞

——原因：植物體每個(gè)生活細(xì)胞都含有

。(3)植物細(xì)胞全能性實(shí)現(xiàn)條件：離體；適當(dāng)

(包含水、無機(jī)鹽、

、

、氨基酸等)；適宜條件(

、溫度、

、光照等)以及

物質(zhì)。(4)植物激素作用：誘導(dǎo)

形成和生長(zhǎng)；誘導(dǎo)和控制

過程。植物組織培養(yǎng)全能性完整全套遺傳物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)維生素蔗糖無菌濕度生長(zhǎng)調(diào)整愈傷組織再分化第2頁(yè)2.植物組織培養(yǎng)(1)程序：

培養(yǎng)基配制→小組織塊切取→

取得→新植株再生。(2)填寫基本操作過程圖：圖中①

，②

，A表示

，B表示

或

。半固體愈傷組織脫分化再分化愈傷組織胚狀體叢狀苗第3頁(yè)3.植物細(xì)胞培養(yǎng)和器官培養(yǎng)(1)植物細(xì)胞培養(yǎng)程序：愈傷組織→用

進(jìn)行

培養(yǎng)→單個(gè)胚性細(xì)胞→在適宜培養(yǎng)基中培養(yǎng)→細(xì)胞團(tuán)→

胚→

胚→

→完整植株。(2)器官發(fā)生和形態(tài)建成實(shí)現(xiàn)：經(jīng)過平衡

進(jìn)行調(diào)控。如適量

和

配比，可誘導(dǎo)芽分化；適量

及適當(dāng)減除其它一些激素，可誘導(dǎo)生根。搖床液體懸浮球形心形胚狀體植物激素配比生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素吲哚乙酸第4頁(yè)4.原生質(zhì)體培養(yǎng)與植物細(xì)胞工程(1)原生質(zhì)體取得方法：在0.5～0.6mol/L

溶液環(huán)境(較高滲透壓)下，用

和

混合液處理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，除去

，取得

原生質(zhì)體。(2)植物細(xì)胞工程操作過程甘露醇纖維素酶果膠酶細(xì)胞壁球形基因工程轉(zhuǎn)基因細(xì)胞第5頁(yè)5.植物克隆技術(shù)應(yīng)用(1)實(shí)現(xiàn)工廠化植物快速繁殖(2)生產(chǎn)

，恢復(fù)品種性狀(3)生產(chǎn)主要

，如藥品、色素、香料、殺蟲劑等(4)

(植物細(xì)胞工程)：轉(zhuǎn)基因作物，突變體選擇，單倍體育種脫毒苗次生代謝產(chǎn)物育種第6頁(yè)二、動(dòng)物克隆1.動(dòng)物細(xì)胞、組織培養(yǎng)(1)動(dòng)物克隆技術(shù)基礎(chǔ)是

。動(dòng)物細(xì)胞和組織培養(yǎng)第7頁(yè)(2)動(dòng)物(成纖維)細(xì)胞培養(yǎng)過程：胰酶消化原代培養(yǎng)傳化培養(yǎng)分瓶細(xì)胞系有限細(xì)胞系連續(xù)細(xì)胞系細(xì)胞株有限細(xì)胞株連續(xù)細(xì)胞株第8頁(yè)(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)必需傳代原因：細(xì)胞培養(yǎng)到一定時(shí)期，細(xì)胞會(huì)因?yàn)槊芏冗^大造成

，或者因?yàn)榇x消耗引發(fā)

，不能正常生長(zhǎng)。(4)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)含義①原代培養(yǎng)：從

取出后馬上進(jìn)行細(xì)胞、組織培養(yǎng)過程。②傳代培養(yǎng)：將

分成若干份，接種到若干份培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長(zhǎng)、增殖。接觸抑制營(yíng)養(yǎng)枯竭機(jī)體原代培養(yǎng)細(xì)胞第9頁(yè)2.細(xì)胞系和細(xì)胞株(1)細(xì)胞系：是指可連續(xù)傳代細(xì)胞，可分為

細(xì)胞系(惡性細(xì)胞系：含有異體致瘤性；“良性”細(xì)胞系：保留接觸抑制現(xiàn)象，不致癌)和

細(xì)胞系。(2)細(xì)胞株：經(jīng)過一定選擇或純化方法,從

中取得含有

細(xì)胞?？煞譃?/p>

細(xì)胞株和

細(xì)胞株。連續(xù)有限原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系特殊性質(zhì)連續(xù)有限第10頁(yè)3.克隆培養(yǎng)法(1)概念：把

單細(xì)胞從群體中分離出來單獨(dú)培養(yǎng)，使之繁衍成一個(gè)新

技術(shù)。單抗

等都是應(yīng)用克隆培養(yǎng)法建立。(2)基本要求：必須必定所建成克隆起源于

。(3)提升細(xì)胞克隆形成率辦法有：①選擇適宜培養(yǎng)基；②添加

；③以

支持生長(zhǎng)；④

刺激；⑤使用

；⑥調(diào)整

。CO2培養(yǎng)箱一個(gè)細(xì)胞群體細(xì)胞株單個(gè)細(xì)胞血清滋養(yǎng)細(xì)胞激素pH第11頁(yè)4.動(dòng)物克隆繁殖(1)動(dòng)物難以克隆根本原因是體細(xì)胞中基因

，細(xì)胞質(zhì)中存在

。(2)細(xì)胞核移植試驗(yàn)和動(dòng)物克隆繁殖選擇性表示調(diào)整因子營(yíng)養(yǎng)限制性融合八細(xì)胞胚胎移植同期發(fā)情第12頁(yè)(3)動(dòng)物體細(xì)胞核成功克隆原因：去除了

限制?！岸嗬颉闭Q生說明：動(dòng)物

仍能表現(xiàn)全能性；胚胎和個(gè)體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)含有

作用核基因表示體細(xì)胞核調(diào)控第13頁(yè)5.單克隆抗體(1)制備過程：(2)單克隆抗體特點(diǎn)：

、

。抗原骨髓瘤細(xì)胞單克隆抗體產(chǎn)生特定抗體雜交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng)靈敏度高第14頁(yè)1.(·10月浙江選考節(jié)選)科研人員擬將已知花色基因(目標(biāo)基因)轉(zhuǎn)入矮牽牛核基因組中，培育新花色矮牽牛。請(qǐng)回答：將消毒后矮牽牛葉片剪成小片，在含有目標(biāo)基因農(nóng)桿菌溶液中浸泡后，取出并轉(zhuǎn)移至加有適當(dāng)配比生長(zhǎng)調(diào)整劑MS培養(yǎng)基(含蔗糖、瓊脂和抗生素，下同)上，使小葉先脫分化形成________。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)形成芽，芽切割后轉(zhuǎn)移至________(A.LB培養(yǎng)基B.MS培養(yǎng)基＋適宜濃度NAA

C.MS培養(yǎng)基＋適宜濃度BA

D.NAA/BA小于1MS培養(yǎng)基)上生根，形成完整植株。第15頁(yè)解析組培時(shí)，先將處理后外植體接種在適當(dāng)培養(yǎng)基上，先經(jīng)脫分化形成愈傷組織。再將其轉(zhuǎn)移至另一培養(yǎng)基誘導(dǎo)生芽形成叢狀苗，叢狀苗經(jīng)分離后轉(zhuǎn)移至添加適宜濃度NAAMS培養(yǎng)基上生根，形成完整植株。注意生根培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素類物質(zhì)濃度需大于細(xì)胞分裂素類。答案愈傷組織B第16頁(yè)2.(·4月浙江選考節(jié)選)兔肝細(xì)胞中基因E編碼代謝甲醛酶，擬利用基因工程技術(shù)將基因E轉(zhuǎn)入矮牽牛中，以提升矮牽牛對(duì)甲醛代謝能力，請(qǐng)回答：(1)將被侵染葉片除菌后進(jìn)行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過程正確是________(A.葉片在含適當(dāng)濃度生長(zhǎng)素培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織B.愈傷組織在含細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素配比較高培養(yǎng)基上形成芽C.再生芽在細(xì)胞分裂素含量高培養(yǎng)基上生根D.愈傷組織在含適當(dāng)濃度植物生長(zhǎng)調(diào)整劑培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株)。第17頁(yè)(2)取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片，放入含MS液體培養(yǎng)基和適量濃度甲醛且密封試管中，將試管置于________上，進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)。一段時(shí)間后測(cè)定培養(yǎng)基中甲醛含量，以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表示。培養(yǎng)過程中液體培養(yǎng)基作用：一是提供營(yíng)養(yǎng)；二是________，從而使葉片保持正常形態(tài)。第18頁(yè)解析(1)在植物組織培養(yǎng)過程中，植物激素濃度配比影響著脫分化和再分化過程，培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素配比較高時(shí)誘導(dǎo)愈傷組織生芽，培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素配比較高時(shí)誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)基中含適當(dāng)濃度配比植物激素時(shí)再分化成再生植株。(2)將轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片接種在液體培養(yǎng)基上，用揺床進(jìn)行液體懸浮培養(yǎng)可取得單細(xì)胞，若在培養(yǎng)液中加入甲醛，能夠經(jīng)過測(cè)定培養(yǎng)基中甲醛含量，以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表示。液體懸浮培養(yǎng)中用到液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基除提供營(yíng)養(yǎng)外還需要維持滲透壓，維持細(xì)胞正常形態(tài)和功效。答案(1)B

(2)搖床維持滲透壓第19頁(yè)3.(·10月浙江選考節(jié)選)某小組欲進(jìn)行煙草原生質(zhì)體分離與培養(yǎng)研究。請(qǐng)回答：(1)原生質(zhì)體分離：在無菌條件下，取煙草無菌苗葉片，放入含有0.5mol/L甘露醇(維持較高滲透壓)________混合液處理，經(jīng)過離心純化后取得原生質(zhì)體。第20頁(yè)(2)原生質(zhì)體培養(yǎng)：將原生質(zhì)體進(jìn)行培養(yǎng)，重新長(zhǎng)出細(xì)胞壁，形成胚性細(xì)胞。此時(shí)，應(yīng)該________培養(yǎng)基中甘露醇濃度，以利于胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)，然后經(jīng)兩條路徑形成再生植株。路徑一：細(xì)胞團(tuán)經(jīng)球形胚、________和胚狀體，最終發(fā)育成植株。路徑二：細(xì)胞團(tuán)增殖為愈傷組織，然后在發(fā)芽培養(yǎng)基上誘導(dǎo)出芽，切割芽經(jīng)過生根后形成完整植株。上述發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高激素是________，胚性細(xì)胞主要特點(diǎn)是：________。(A.液泡小、細(xì)胞核小B.液泡大，細(xì)胞核大C.液泡大，細(xì)胞核小D.液泡小、細(xì)胞核大)第21頁(yè)(3)為了對(duì)煙草一些性狀進(jìn)行改良，分離到兩種煙草原生質(zhì)體后，經(jīng)過________方法將他們遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)取得含有新性狀再生植株。提取再生植株DNA，采取________擴(kuò)增相關(guān)基因，來判定遺傳物質(zhì)是否成功重組。第22頁(yè)解析(1)原生質(zhì)體取得，需要在較高滲透壓甘露醇溶液中，將植物細(xì)胞用纖維素酶和果膠酶處理，去除細(xì)胞壁，從而得到原生質(zhì)體。(2)當(dāng)原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁后，應(yīng)該降低培養(yǎng)基中甘露醇濃度，不然將會(huì)影響細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)。胚性細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)形成細(xì)胞團(tuán)。然后經(jīng)球形胚、心形胚和胚狀體，最終發(fā)育成植株。發(fā)芽培養(yǎng)基中含量相對(duì)較高激素是細(xì)胞分裂素，而生長(zhǎng)素含量較低。胚性細(xì)胞主要特點(diǎn)是細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大。(3)分離到兩種煙草原生質(zhì)體后，能夠經(jīng)過原生質(zhì)體融合方法將他們遺傳物質(zhì)組合在一起，經(jīng)培養(yǎng)取得含有新性狀再生植株。在體外擴(kuò)增相關(guān)基因方法是采取PCR技術(shù)。答案(1)纖維素酶和果膠酶(2)降低心形胚細(xì)胞分裂素D

(3)原生質(zhì)體融合PCR第23頁(yè)本題組對(duì)應(yīng)選修三P21～P37，克隆技術(shù)1.愈傷組織是由相對(duì)

活

細(xì)胞團(tuán)組成，其細(xì)胞含有細(xì)胞質(zhì)

、液泡

而細(xì)胞核

。2.因?yàn)椴灰粯臃N類植物或同種植物不一樣基因型個(gè)體之間

________差異，細(xì)胞全能性

大不相同。有如擬南芥、煙草和番茄等培養(yǎng)細(xì)胞很

再生出新植株，并能在多個(gè)世代中

細(xì)胞全能性表示；而有如小麥、玉米和水稻等一些品種或品系培養(yǎng)細(xì)胞所誘導(dǎo)出再生植株，在屢次繼代培養(yǎng)后，會(huì)

細(xì)胞全能性表示能力。沒有分化薄壁豐富小大遺傳性表示程度輕易保持喪失第24頁(yè)3.在長(zhǎng)久培養(yǎng)中，培養(yǎng)物胚胎發(fā)生和器官形成能力下降可能原因有染色體

、細(xì)胞核

或

產(chǎn)生等，而且其結(jié)果是

；細(xì)胞或組織中

平衡被打破，或細(xì)胞對(duì)外源生長(zhǎng)物質(zhì)

發(fā)生改變；伴隨時(shí)間推移，因?yàn)槠渌鞣N原因產(chǎn)生了缺乏

細(xì)胞系。4.經(jīng)過大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生主要

細(xì)胞大量克隆和產(chǎn)物工業(yè)化生產(chǎn)；經(jīng)過

培養(yǎng)，進(jìn)行單倍體克??；在培養(yǎng)基中加入不一樣濃度

或病原體

，誘發(fā)和篩選了抗鹽或抗病突變體。畸變變異非整倍體不可逆激素敏感性成胚性次生代謝產(chǎn)物花藥NaCl毒蛋白第25頁(yè)5.動(dòng)物組織經(jīng)過

或

消化，使其分散成

細(xì)胞。然后，在人工控制培養(yǎng)條件下，使這些細(xì)胞得以______，并保持生長(zhǎng)、分裂乃

和有規(guī)律衰老、死亡等生命活動(dòng)現(xiàn)象。6.理論上各種培養(yǎng)細(xì)胞都可被

，但原代培養(yǎng)細(xì)胞和有限細(xì)胞系克隆較

；相反，無限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞系克隆較

。這是因?yàn)橹挥袑?duì)培養(yǎng)環(huán)境有

和含有較強(qiáng)

能力細(xì)胞，才輕易做細(xì)胞克隆。在這方面，單細(xì)胞通常

群體細(xì)胞；原代細(xì)胞、有限細(xì)胞通常

無限細(xì)胞、轉(zhuǎn)化或腫瘤細(xì)胞。機(jī)械消化胰酶單個(gè)生存接觸抑制克隆困難輕易較大適應(yīng)范圍獨(dú)立生存不如不如第26頁(yè)7.動(dòng)物受精卵含有

_______,含有使后代細(xì)胞形成

潛能。隨胚胎發(fā)育，細(xì)胞全能表示能力下降，成為

、

直到體細(xì)胞，不再能分化為其它細(xì)胞。低等動(dòng)物細(xì)胞全能性普通比較輕易

。癌細(xì)胞

逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞。所以，不論分化還是癌化，改變都是

，基因組成完整性能夠

。動(dòng)物體細(xì)胞中基因組成是完整，但細(xì)胞分化使得基因表示發(fā)生了

，細(xì)胞中合成了

，細(xì)胞全能性難以發(fā)揮。8.體細(xì)胞羊克隆成功證實(shí)了：(1)高度分化細(xì)胞經(jīng)過一定技術(shù)處理，也能夠回復(fù)到類似

時(shí)期功效；(2)在胚胎和個(gè)體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)含有

作用。全能性完整個(gè)體多能細(xì)胞專能細(xì)胞表達(dá)仍能表現(xiàn)型保留差異化專一蛋白質(zhì)受精卵調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育第27頁(yè)9.克隆羊取得成功部分原因：重組卵細(xì)胞最初分裂時(shí)即使復(fù)制了DNA，但

并未開始；同時(shí)，供體核DNA開始丟失起源于乳腺細(xì)胞

；在重組卵細(xì)胞開始

分裂時(shí)，原乳腺細(xì)胞調(diào)整蛋白便全部被

中蛋白因子替換了，所以核DNA被重新編排，胚細(xì)胞開始

基因，進(jìn)而調(diào)控胚在代孕母親子宮中深入發(fā)育。所以，采取

技術(shù)，選擇

細(xì)胞進(jìn)行移植，并在核移植前對(duì)乳腺細(xì)胞進(jìn)行了

培養(yǎng)，有利于細(xì)胞核一系列改變和細(xì)胞融合后基因表示

開啟。基因轉(zhuǎn)錄調(diào)整蛋白第三次卵細(xì)胞質(zhì)表示自己電脈沖細(xì)胞融合分裂3次時(shí)營(yíng)養(yǎng)限制性分子開關(guān)第28頁(yè)角度1植物克隆1.下列圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良過程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤是(

)A.①過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶混合物處理B.②過程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀突變C.③過程中葉肉細(xì)胞失去了其特有結(jié)構(gòu)和功效D.④過程需用適宜配比植物激素處理第29頁(yè)解析植物細(xì)胞壁主要是由纖維素和果膠組成，常選取纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，取得含有活力原生質(zhì)體，A正確；紫外線照射誘變育種所依據(jù)原理是基因突變或染色體畸變，這種變異是不定向，B錯(cuò)誤；③過程是脫分化，指已經(jīng)分化植物器官、組織或細(xì)胞，當(dāng)受到創(chuàng)傷或進(jìn)行離體(也受到創(chuàng)傷)培養(yǎng)時(shí)，已停頓分裂細(xì)胞，又重新恢復(fù)分裂，細(xì)胞改變?cè)蟹只癄顟B(tài)，失去原有結(jié)構(gòu)和功效，成為含有未分化特征細(xì)胞。C正確；④是再分化，需用適宜配比植物激素誘導(dǎo)，D正確。答案B第30頁(yè)2.甲、乙是染色體數(shù)目相同兩種二倍體藥用植物，甲含有效成份A，乙含有效成份B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B新型藥用植物?；卮鹨韵聠栴}：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙葉片，先用________酶和________酶去除細(xì)胞壁，取得含有活力________，再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成融合細(xì)胞深入培養(yǎng)形成________組織，然后經(jīng)過________形成完整雜種植株。這種培育技術(shù)稱為________。第31頁(yè)(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指__________________。假設(shè)甲與乙有性雜交后代是不育，而上述雜種植株是可育，造成這種差異原因是___________________________________________________________。(3)這種雜種植株可經(jīng)過制作人工種子方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到________，用人工薄膜包裝后可得到人工種子。第32頁(yè)解析(1)該新型藥用植物是經(jīng)過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)取得。要取得有活力原生質(zhì)體才能進(jìn)行體細(xì)胞雜交，所以首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞壁，然后用PEG化學(xué)誘導(dǎo)劑(物理方法：離心、振動(dòng)等)誘導(dǎo)二者原生質(zhì)體融合。然后采取植物組織培養(yǎng)技術(shù)取得雜種植株，植物組織培養(yǎng)主要過程是：先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植物體，利用了植物細(xì)胞全能性。第33頁(yè)(2)假如植物甲、乙是兩個(gè)物種，二者不能經(jīng)過有性雜交產(chǎn)生可育后代，原因是甲、乙有性雜交所產(chǎn)生后代在減數(shù)分裂過程中同源染色體聯(lián)會(huì)異常，也就是存在著生殖隔離。但植物甲、乙經(jīng)過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)產(chǎn)生后代卻是可育，因?yàn)樵跍p數(shù)分裂過程中同源染色體能完成正常聯(lián)會(huì)，產(chǎn)生正常配子。因?yàn)榧?、乙都是二倍體，所以，植物體細(xì)胞雜交得到后代是異源多倍體(四倍體)。(3)人工種子生產(chǎn)不受氣候、季節(jié)和地域等原因限制，而且能夠防止后代發(fā)生性狀分離等優(yōu)點(diǎn)，所以，植物細(xì)胞工程主要應(yīng)用之一是制備人工種子，用到關(guān)鍵技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。將植物組織培養(yǎng)得到胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。第34頁(yè)答案(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(分化)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組個(gè)體在減數(shù)分裂過程中，前者染色體聯(lián)會(huì)異常，而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(3)胚狀體第35頁(yè)1.植物組織培養(yǎng)操作流程第36頁(yè)2.脫分化和再分化比較比較內(nèi)容脫分化再分化過程外植體→愈傷組織愈傷組織→幼苗形成體特點(diǎn)排列疏松、高度液泡化薄壁細(xì)胞有根、芽需要條件a.離體b.適宜營(yíng)養(yǎng)c.生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素百分比適中d.普通不需光a.離體b.適宜營(yíng)養(yǎng)c.生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素百分比高或低誘導(dǎo)生根或生芽d.光照第37頁(yè)角度2動(dòng)物克隆1.以下關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)敘述，正確是(

)A.連續(xù)細(xì)胞系細(xì)胞大多含有二倍體核型B.一些癌細(xì)胞在適當(dāng)條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C.由多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)形成細(xì)胞群為一個(gè)克隆D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)細(xì)胞系細(xì)胞含有相同性狀第38頁(yè)解析連續(xù)細(xì)胞系細(xì)胞普通都培養(yǎng)了多代，含有了連續(xù)增殖能力，二倍體核型發(fā)生了改變，大多數(shù)細(xì)胞含有異倍體核型，A錯(cuò)誤；細(xì)胞癌變是由相關(guān)基因突變引發(fā)，假如癌細(xì)胞在一定條件下發(fā)生回復(fù)性基因突變，則有可能恢復(fù)成正常細(xì)胞，B正確；細(xì)胞克隆最基本要求是，必須確定所建立克隆起源于單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；未經(jīng)克隆化培養(yǎng)細(xì)胞系含有異質(zhì)性，而克隆化培養(yǎng)成細(xì)胞株則含有相同性狀，D錯(cuò)誤。答案B第39頁(yè)2.某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果以下列圖所表示。第40頁(yè)若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)按一定百分比加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不停分泌抗A抗體雜交瘤細(xì)胞。回答以下問題。(1)制備融合所需B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠血清抗體效價(jià)需到達(dá)16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過________次免疫后才能有符合要求。到達(dá)要求后X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適適用于制備B淋巴細(xì)胞是________小鼠，理由是____________________________________________________。第41頁(yè)(2)細(xì)胞融合試驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有________________，體系中出現(xiàn)各種類型細(xì)胞原因是________________________________________。(3)雜交瘤細(xì)胞中有________個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目是________條。(4)未融合B淋巴細(xì)胞經(jīng)屢次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是________________。第42頁(yè)解析(1)據(jù)圖分析，第4次免疫后X、Y、Z小鼠血清抗體效價(jià)均到達(dá)16000以上，小鼠YB淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞本身融合產(chǎn)物，因?yàn)榧?xì)胞膜含有流動(dòng)性，且誘導(dǎo)之后細(xì)胞融合不含有特異性，故體系中會(huì)出現(xiàn)各種類型細(xì)胞。(3)雜交瘤細(xì)胞形成后，小鼠B淋巴細(xì)胞核與骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)細(xì)胞核。小鼠B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)和骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目60條)融合后，染色體可達(dá)100條。(4)未融合B淋巴細(xì)胞經(jīng)屢次傳代培養(yǎng)后，